蛙坐骨神经腓肠肌标本制备、生物电现象的观察

实验一蛙坐骨神经腓肠肌标本制备

[目的] 熟悉蛙(或蟾蜍) 的坐骨神经腓肠肌标本的制备方法，初步掌握几项基本实验操作。[原理] 蛙类的一些基本生命活动和生理功能与温血动物相类似，而其组织在离体状态下，易于控制和掌握，所以蛙类的神经一肌肉标本常用以研究兴奋性、兴奋过程、刺激的一些规律和特性。

[实验动物] 蛙(或蟾蜍)

[器材及药品] 解剖器械，锌铜弓，培养皿，烧杯，任氏液，棉花，线。[方法及步骤]

1．破坏脑脊髓：取蛙或蟾蜍一只，用蛙针从枕骨大孔垂直插入，向前伸人颅腔，捣毁脑髓；向后插入椎管，捣毁脊髓。如果蛙处于瘫痪状态，表示脑和脊髓完全破坏。然后沿两侧腹部将蛙横断为上下两半。并将前半段弃去，保留后半段备用。

2．剥离皮肤：先剪去尾椎末端及泄殖腔附近的皮肤，然后从脊柱的断端撕下皮肤，将其全部剥去，直至趾端。除去内脏，将标本放在滴有任氏液的蛙玻璃板上。将手及使用过的解剖器械洗净。

3．分离标本为两部分：沿脊柱正中线将标本匀称地剪成左右两半，一半浸入盛有任氏液的烧杯中备用，另一半作进一步剥制。

4．分离坐骨神经：在大腿背侧的半膜肌与股二头肌之间用玻璃分针分离出坐骨神经。注意：分离时要仔细用剪刀剪断坐骨神经的分支，向上分离至基部，向下分离到腘窝。保留与坐骨神经相连的一小块脊柱，将分离出来的坐骨神经搭于腓肠肌上；去除膝关节周围以上的全部大腿肌肉，刮净股骨上附着的肌肉，保留的部分就是坐骨神经及股骨。

5．分离腓肠肌：在跟键上扎一线，提起结线，剪断结线后的跟腱，腓肠肌即可分离出来。此时在膝关节下方将其他所有组织全部剪去，到此为止，带有股骨的坐骨神经腓肠肌标本制备完成。

6.标本的检验：将坐骨神经腓肠肌标本放置在蛙玻璃板上，用锌铜弓刺激坐骨神经，若腓肠肌迅速发生收缩反应，说明标本机能良好，制备成功。应及时移放入盛有任氏液的培养皿中，供实验之用。

[注意事项]

1．剥制标本时，切忌用金属器械牵拉或触碰神经干。

2. 分离肌肉时应按层次剪切。分离神经时，必须将周围的结缔组织剥离干净。

3. 制备标本过程中，应随时用任氏液浸湿神经和肌肉，防止干燥。

4. 切勿让蟾蜍的皮肤分泌物和血液等沾污神经和肌肉，也不能用水冲洗，否则会影响神经肌肉的功能。

实验二生物电现象的观察

[目的] 通过实验证明生物电现象的存在。

[原理] 电流的刺激作用于神经肌肉标本，由于产生生物电流，因而引起肌肉的收缩。而神经肌肉标本在损伤时或正在兴奋时，都有电位的改变，所以可把神经肌肉标本的神经放在组织损伤部与正常部之间，或放在正在兴奋的组织上，也能引起肌肉的收缩，从而证明损伤电位和动作电位的存在。

[实验动物] 蛙或蟾蜍

[器材及药品] 解剖器械，锌铜弓，玻璃针，任氏液

[方法与步骤]

一、实验准备操作把先作好两个神经肌肉标本用锌铜弓检查标本是否正常。

二、实验项目

1．将一个神经肌肉标本的神经的一点轻置于臀部肌肉的损伤部，另一点置于正常部，观察在接触时是否引起肌肉的收缩？

2．将甲标本的神经放在乙标本的肌肉上，再用锌铜弓刺激乙标本的神经，观察是否引起乙标本的肌肉收缩。

[注意事项] 要求神经肌肉标本保持高度的兴奋性；标本制作好后应立即进行实验。

[实验结果] 蛙坐骨神经标本用锌铜弓刺激后肌肉收缩。