呼吸道标本的培养与鉴定

呼吸道标本的培养与鉴定

人体的上呼吸道有常居的细菌群，下呼吸道是无菌的。上呼吸道常居菌主要有：草绿色链球菌、α、β链球菌、微球菌、表皮葡萄球菌、拟杆菌、梭杆菌、口腔厌氧球菌、奈瑟菌（致病菌除外）等。

1. 下呼吸道感染的病原菌种类因感染部位而有所差异。（1）.咽炎最常见的病原菌是A群链球菌；

（2）.喉炎的病原菌以流感嗜血杆菌为主；

（3）.中耳炎常见病原菌为肺炎链球菌、流感嗜血杆菌、卡他莫拉菌及口腔厌氧菌；

（4）.社区获得性下呼吸道感染的常见病原菌包括肺炎链球菌、流感嗜血杆菌、肺炎克雷伯菌、肺炎衣原体、肺炎支原体、卡他莫拉菌、化脓性链球菌、结核分枝杆菌、嗜肺军团菌、诺卡菌等，金黄色葡萄球菌可引起社区获得性、进行性、坏死性肺部病变;

(5)长期使用广谱抗菌药物及激素、粒细胞减少的患者容易受到侵袭性真菌的感染。

2.检验方法与程序

通常用鼻咽拭子采集标本。痰和支气管灌洗液用无菌痰杯留取。应由临床医生指导留取。痰标本及上呼吸道拭子标本应在2小时内送到实验室。

3.涂片检查

直接涂片、革兰染色、镜检。痰液标本每低倍视野上皮细胞应

小于10个，白细胞应大于25个。还可以初步判定是否有病原菌存在及病原菌的种类。比如，念珠菌可直接在高倍镜下检查孢子及菌丝。

4.细菌培养通常采用分区划线接种的方法进行标本的初次接种。①血平板适用于分离各类细菌，特别是β溶血性链球菌

②巧克力平板于5%co2环境下分离嗜血杆菌、脑膜炎奈瑟菌或淋病奈瑟菌

③中国蓝/麦康凯平板用于分离革兰氏阴性杆菌

④沙氏平板用于分离念珠菌及其他酵母菌或真菌

⑤厌氧血平板放厌氧环境，分离厌氧菌

⑥罗-琴培养基或米氏7H10培养基，用于结核分枝杆菌的培养。

35℃培养18-24小时，观察细菌菌落形态及特点，呼吸道标本中的常居菌群不用鉴定，培养后生长于平板第二区或第三区的中等或大量细菌，或仅在第一区生长的纯种细菌，都是需要鉴定的细菌。若无致病菌或呼吸道正常菌群生长，可能提示正常菌受抗菌药物的抑制。标本运送和处理的延迟会使培养结果为假阴性。对痰液中检出的呼吸道常居菌虽不做鉴定，但在报告时给予说明，当其为生长优势菌时（均占90%以上）可做鉴定和报告。经过鉴定确认为呼吸道重要病原菌时，应作出培养阳性的结果报告。