菌落总数检测操作规程(国标word版)

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细菌总数检查标准操作规程

细菌总数检查标准操作规程

细菌总数检查标准操作规程1目的建立规范细菌总数检查标准操作规程,确保检查操作正确。

2范围适用于本公司的细菌总数检查操作。

3职责4术语及定义无5 内容5.1实验5.1.1仪器设备:电热恒温培养箱、电动移液器、生物安全柜、电子天平、PH计。

水浴锅、研钵、玻璃珠、三角瓶。

5.1.2试剂:生理盐水、卵磷脂吐温80-营养琼脂培养基、吐温80、液体石蜡、0.5%氯化三苯四氮唑。

5.1.3耗材:10 mL刻度移液管、90mm培养皿5.2实验前准备5.2.1检查样本是否保持原有的包装状态。

容器不应有破裂,在检验前不得打开,防止样品被污染。

5.2.2接到样品后,应立即登记,编写检验序号,并按检验要求尽快检验。

5.2.3若只有一个样品而同时需做多种分析,如微生物、毒理、化学等,则宜先取出部分样品做微生物检验,再将剩余样品做其他分析。

5.2.4在检验过程中,从打开包装到全部检验操作结束,均须防止微生物的再污染和扩散,所用器皿及材料均应事先灭菌,全部操作应在符合生物安全要求的实验室中进行。

5.2.2供试品处理5.2.2.1液体样品5.2.2.1.1.水溶性的液体样品,用灭菌吸管吸取10mL 样品加到90mL 灭菌生理盐水中,混匀后,制成1:10 检液。

5.2.2.1.2油性液体样品,取样品10g,先加5mL灭菌液体石蜡混匀,再加10mL灭菌的吐温80,在40℃—44℃水浴中振荡混合10min,加入灭菌的生理盐水75mL(在40℃—44℃水浴中预温),在40℃—44℃水浴中乳化,制成1:10 的悬液。

5.2.2.2膏、霜、乳剂半固体状样品5.2.2.2.1亲水性的样品:称取10g,加到装有玻璃珠及90mL 灭菌生理盐水的三角瓶中,充分振荡混匀,静置15min。

用其上清液作为1:10 的检液。

5.2.2.2.2疏水性样品:称取10g,置于灭菌的研钵中,加10mL 灭菌液体石蜡,研磨成粘稠状,再加入10mL 灭菌吐温80,研磨待溶解后,加70mL 灭菌生理盐水,在40℃—44℃水浴中充分混合,制成1:10 检液。

国标菌落总数检测方法

国标菌落总数检测方法

国标菌落总数检测方法一、引言菌落总数是指在一定条件下,通过菌落计数方法,测定在样品中存在的微生物总数。

它是评价食品、水质和环境卫生状况的重要指标之一。

国标菌落总数检测方法是指根据国家标准规定的菌落总数检测方法进行微生物总数的测定。

本文将详细介绍国标菌落总数检测方法的原理、步骤及其应用领域。

二、原理国标菌落总数检测方法基于菌落形成的原理,通过将待测样品进行适当稀释,并在寒暖培养条件下培养一定时间,然后对形成的菌落进行计数。

根据国家标准,通常采用平板计数法和膜过滤法两种方法进行菌落总数的检测。

平板计数法是将适量的待测样品均匀涂布在含有适宜培养基的平板上,然后在适当温度下进行培养,最后对菌落进行计数。

该方法适用于微生物菌落较多的样品,如食品和水样等。

膜过滤法是将待测样品通过特定的膜过滤器,过滤到含有适宜培养基的培养皿中,然后在适当温度下进行培养,最后对膜上形成的菌落进行计数。

该方法适用于微生物菌落较少的样品,如空气和药品等。

三、步骤1. 样品制备:将待测样品按照国家标准要求进行适当稀释,以确保在培养过程中菌落呈现合适的数量。

2. 平板计数法:将稀释好的样品用无菌棉签均匀涂布在含有适宜培养基的平板上,然后倒扣放置在恰当温度下进行培养。

3. 膜过滤法:将稀释好的样品通过无菌膜过滤器过滤到含有适宜培养基的培养皿中,然后倒扣放置在恰当温度下进行培养。

4. 培养:根据国家标准要求,将培养皿或平板在适当温度下培养一定时间,以促使菌落的生长和形成。

5. 计数:在培养时间结束后,使用显微镜或菌落计数器对菌落进行计数,然后根据国家标准计算出菌落总数。

四、应用领域国标菌落总数检测方法广泛应用于食品、水质和环境卫生等领域。

在食品行业中,菌落总数的检测可以评估食品的卫生状况和微生物污染程度,有助于保障食品的安全性;在水质监测中,菌落总数的检测可以评估水质的卫生状况和微生物污染程度,有助于确保饮用水的安全性;在环境卫生监测中,菌落总数的检测可以评估环境卫生状况和微生物污染程度,有助于维护公共卫生和环境健康。

菌落总数检验操作规程

菌落总数检验操作规程

A.1月桂基硫酸盐胰蛋白胨(LST )肉汤A.1.1成分胰蛋白胨或胰酪胨20.0 g氯化钠5.0 g乳糖5.0 g磷酸氢二钾(K2HPO4)2.75 g磷酸二氢钾(KH2PO4)2.75 g月桂基硫酸钠0.1 g蒸馏水1 000 mL pH 6.8±0.2 制法将上述成分溶解于蒸馏水中,调节pH。

分装到有玻璃小倒管的试管中,每管10 mL 。

121 ℃高压灭菌15 min 。

菌落总数检验操作规程一、目的建立菌落总数检验的标准操作程序,使操作过程规范化。

二、适用范围适用于菌落总数的检验操作。

三、职责1.检验人员严格按检验操作规程进行检验。

2.QC主管监督检查执行情况。

四、程序1.范围本方法适用于食品中菌落总数(Aerobic plate count)的测定2.术语和定义菌落总数:食品检样经过处理,在一定条件下(如培养基、培养温度和培养时间等)培养后,所得每g(mL)检样中形成的微生物菌落总数。

3. 设备和材料除微生物实验室常规灭菌及培养设备外,其他设备和材料如下:3.1 恒温培养箱:36 ℃±1 ℃,30 ℃±1 ℃。

3.2冰箱:2 ℃~5 ℃。

3.3 恒温水浴箱:46 ℃±1 ℃。

3.4天平:感量为0.1 g。

3.5均质器。

3.6振荡器。

3.7无菌吸管:1 mL(具0.01 mL 刻度)、10 mL(具0.1 mL 刻度)或微量移液器及吸头。

3.8 无菌锥形瓶:容量250 mL、500 mL。

3.9无菌培养皿:直径90 mm。

3.10 pH计或pH比色管或精密pH试纸。

3.11放大镜或和菌落计数器。

4.培养基和试剂4.1 平板计数琼脂培养基:见附录A 中A.1。

4.2 磷酸盐缓冲液:见附录A中A.24.3 无菌生理盐水:见附录A中A.3。

5.检验程序菌落总数的检验程序见图1。

图1 菌落总数的检验程序6.操作步骤6.1 样品的稀释6.1.1 固体和半固体样品:称取25 g 样品置盛有225 mL 磷酸盐缓冲液或生理盐水的无菌均质杯内,8000 r/min~10000 r/min 均质 1 min~2 min,或放入盛有225 mL 稀释液的无菌均质袋中,用拍击式均质器拍打 1 min~2 min,制成1:10 的样品匀液。

菌落总数检测操作规程

菌落总数检测操作规程

微生物检测操作规范1范围本标准规定了食品中菌落总数的测定方法本标准适用于遂平克明面业有限公司方便面生产线微生物控制及验证计划。

本标准适用于遂平克明面业有限公司方便面产品菌落总数、大肠菌群检测。

2 规范性引用标准GB 4789.1-2016《食品安全国家标准食品微生物学检验总则》。

GB/T 4789.3-2003《食品安全国家标准食品微生物学检验大肠菌群计数》。

GB 4789.2-2016《食品安全国家标准食品微生物学检验菌落总数测定》。

4 设备和材料恒温培养箱:36℃±1℃。

恒温水浴箱:46℃±1℃。

天平:感量为0.1g。

无菌吸管:1ml(具有0.01ml刻度)、10ml(具有0.1ml刻度)。

无菌培养皿:直径90mm。

无菌锥形瓶:容量500ml;或225ml塑料稀释瓶(带内垫,可高温灭菌)。

灭菌试管:16mm×160mm;或10ml-20ml无菌管。

显微镜:10×-100×4 培养基和试剂平板计数琼脂培养基:GB 4789.2-2016 附录A.1。

无菌生理盐水:GB 4789.2-2016 附录A.3。

乳糖胆盐发酵管:按GB/T 4789.3-2003中4.9规定。

伊红美蓝琼脂平板:按GB/T 4789.3-2003中4.25规定。

乳糖发酵管:按GB/T 4789.3-2003中2.2规定。

EC肉汤:按GB/T 4789.28-2003中4.11规定。

格兰仕染色液:按GB/T 4789.3-2003中4.9规定。

5菌落总数检验程序实验前准备移液管、三角瓶、试管包扎、灭菌移液管:洗净烘干后在吸管粗头顶端约0.5cm处,塞上一小段棉花,后用4-5cm宽的报纸或牛皮纸将其以下图所示包扎好。

三角瓶包扎图例将包扎后的器具放入灭菌锅,121℃ 15min灭菌。

a.样品处理面饼样品经粉碎机粉碎后,称取25g粉碎样加入装有225ml无菌生理盐水的稀释瓶内,充分振摇,做成1:10的均匀稀释液。

菌落总数测试片安全操作及保养规程

菌落总数测试片安全操作及保养规程

菌落总数测试片安全操作及保养规程前言菌落总数测试片是在食品、饮料、制药等行业中广泛应用的一种实验室用品,用于检测样品中的微生物数量。

正确的操作和保养,不仅能够保证测试数据的准确性,还能延长设备的使用寿命。

本文档旨在为使用菌落总数测试片的实验室人员提供安全操作及保养规程,以便正确且有效地使用该设备。

安全操作规程1.检测前准备工作在进行菌落总数测试前,需要进行一些准备工作。

•首先,检查试剂盒是否完整、完好。

•其次,需要对实验室进行清洁,确保试样不会受到外来污染。

•最后,检查检测设备是否工作正常。

2.操作步骤具体的菌落总数测试操作步骤如下:1.将手持菌落计瓶插入加热设备中,加热到80℃左右(不要超过90℃)。

2.准备好待测样品,并使用消毒液将样品平台擦拭消毒。

待样品平台干燥后,打开试剂盒,取出测试片。

3.拿起测试片,用过滤棉球沾取少量样品,涂在测试片的圆形区域上,记得不要涂满,要注意对称,以避免对测试结果的影响。

4.将测试片放入一个透明的塑料袋里,将原袋弯角45°折叠,收紧口部,放置在加热设备中,加热时间为30min ± 1min。

5.取出加热设备中的透明袋,打开袋口,拿起测试片,将其反转在富营养液培养皿中,培养时间为48小时± 4小时。

6.在培养后的菌落数量区域,数清菌落数量,并将结果记录在实验记录簿上。

3. 注意事项在使用菌落总数测试片过程中,还需要注意以下事项:1.尽量避免使用过期的试剂盒和菌落计瓶。

2.操作过程中需要佩戴手套和口罩。

3.遵循操作规程,严禁进行任何私自操作或修改设备设置。

4.由专人负责使用和保养设备,不得擅自借用或转移使用。

5.每次操作后,要及时清洗设备以保证设备的清洁度和准确性。

保养规程菌落总数测试片是一种高精度、高灵敏度的实验室设备,因此需要进行专业的保养和维修。

1.日常保养日常保养是延长菌落总数测试片使用寿命和保证测试结果准确性不可缺少的一部分。

菌落总数测定操作规程1

菌落总数测定操作规程1

适用范围:食品检样经过处理,在一定条件下培养(如培养基成分、培养温度和时间、pH、需氧性质等),所得1m1(g)检样中所含菌落的总数。

本方法规定的培养条件下所得结果,只包括一群在营养琼脂上生长发育的嗜中温性需氧的菌落总数。

操作内容:
1、检验程序:
2、操作方法:
2.1 以无菌操作,将检样25g(ml)放于含有225ml灭菌生理盐水或其他稀释液的灭菌玻璃
瓶内(瓶内预置适当数量的玻璃珠)或灭菌乳钵内,经充分振摇或研磨做成1:10的均匀稀释液。

2.2 用1ml 灭菌吸管吸取1:10稀释液1ml,注入含有9ml 灭菌生理盐水或其他稀释液的
试管内(注意吸管尖端不要触及管内稀释液),振摇试管混均,做成1:100的稀释液。

2.3 另取1ml 灭菌吸管,按上条操作顺序,做10倍递增稀释液,如此每递增稀释一次,即
换用1支1ml灭菌吸管。

2.4 根据食品卫生标准要求或对检污染情况的估计,选择2-3个适宜稀释度,分别在做10
倍递增稀释的同时,即以吸取该稀释度的吸管移1ml稀释液于灭菌培养皿内,每个稀释度做2个培养皿。

2.5 稀释液移入培养皿后,应及时将凉至46℃营养琼脂培养基注入培养皿约15ml,并转动培
养皿使混合均匀。

同时将营养琼脂培养基倾入加有1ml稀释液灭菌培养皿内作空白对照。

2.6 待琼脂凝固后,翻转平板,置36℃±1℃温箱内培养48h±1h
3、菌落计数方法:
3.1 做平板菌落计数时,可用肉眼观察,必要时用放大镜,以防遗漏。

在记下各平板的菌落
后,求出同稀释度的各平板平均菌落总数。

菌落总数检验操作规程

菌落总数检验操作规程

菌落总数检验操作规程一、实验室准备工作1.准备培养基:根据实验需求选择适当的培养基,如营养琼脂培养基、大肠埃希氏菌选择性培养基等。

注意培养基的成分和质量。

2.准备培养基平板:测量合适的培养基量并加入培养皿中,使用无菌技术将培养基均匀倒入培养皿,标明编号和日期。

二、样品处理1.准备样品:如食品样品,需要将样品称重并加入适当的生理盐水中,用搅拌器或均质仪进行均匀悬浮。

2.稀释样品:根据实验需要,对样品进行系列稀释。

取适量的悬浮样品,依次加入尺量瓶中的生理盐水,振摇均匀。

三、接种培养1.无菌操作:在无菌工作台内进行操作,穿戴好无菌手套,将培养皿放入工作台上,注意防止污染。

2.接种样品:使用无菌移液器,取适量的稀释样品均匀滴入培养皿上。

3.均匀涂布:使用无菌匀涂棒,将样品在培养皿上均匀涂抹,注意避免混入外来微生物。

四、培养条件1.始菌箱:将接种后的培养皿置于始菌箱中,设定适当的温度和湿度(如37℃,24小时)。

2.孵化箱:将始菌箱中的培养皿转移到恒温培养箱中适当孵育时间,保持适宜温度及湿度。

五、菌落计数1.观察菌落:取出培养好的菌落总数平板,放在均匀光源下观察菌落的形态、颜色、大小等特征,标记异常菌落。

2.计数菌落:使用计数器或显微镜对菌落进行计数,记录结果,并用公式计算菌落总数。

每个菌落总数平板至少计数两遍,计算平均值。

六、数据分析与结果判定1.数据分析:对不同样品的检测结果进行归类整理,统计菌落总数的分布情况。

2.结果判定:根据相应的标准或规定,比较样品的检测结果与标准要求,判定样品是否合格。

七、清洗和消毒1.清洗:将培养皿彻底清洗干净,清除残留的培养基和菌落。

2.消毒:将使用过的器材进行高温高压消毒或化学消毒,确保无菌环境。

以上就是菌落总数检验操作规程的简要示例,实验过程中需严格遵守无菌操作规范,并根据具体实验要求进行相应的调整。

在实验过程中,及时记录实验数据,注意安全操作。

实验完成后,对结果进行统计分析和归档保存。

食品中菌落总数的检测方法-曹勇

食品中菌落总数的检测方法-曹勇
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
结果与报告
2.1 菌落数在100 以内时,按“四舍五人”原则修约,以整数报告。
2.2 大于或等于100 时,第三位数字采用“四舍五人”原则修约后,取前两位数字, 后面用0代替位数;也可用10 的指数形式来表示,按“四舍五人”原则修约后,采 用两位有效数字。
2.3 若所有平板上为蔓延菌落而无法计数,则报告菌落蔓延。
3.加入样品后薄膜轻轻放下即可,不要压盖 无纺布部分,可压紧边缘薄膜。 4.若薄膜放下时产生与空气连通的褶皱,则 重新揭开薄膜,再次盖上。保证无连通空气 的褶皱出现。 5.做空白试验。
结 束 语
1.4 若所有稀释度的平板菌落数均小于30 ,则应按稀释度最低的平均菌落数乘以 稀释倍数计算。
1.5 若所有稀释度(包括液体样品原液)平板均无菌落生长,则以小于1 乘以最低 稀释倍数计算。
1.6 若所有稀释度的平板菌落数均不在30-300 之间,其中一部分小于30 或大于 300 时,则以最接近30 或300 的平均菌落数乘以稀释倍数计算。
七、3M菌落测试片的注意事项
1.稀释度的选择,一定要选择合适的稀释度进行样品 的检测。 2. 防止菌落蔓延现象。 ①24小时判读; ②减少叠放; ③使用较大的压板; ④提高稀释度。 3.做空白试验。 4.测试片压板以外的菌落不计数。
八、陆桥测试片操作要点
1、掀开上层透明膜
2、取1mL样液缓缓加 入纤维垫上
四、培养
2.1 琼脂凝固后,将平板翻转,36 ℃±1 ℃ 培养 48h±2h 。水产品30 ℃±1 ℃ 培养72h±3h.
2.2 如果样品中可能含有在琼脂培养基表面弥漫生 长的菌落时,可在凝固后的琼脂表面覆盖一薄层 琼脂培养基(约4 mL),凝固后翻转平板,按2.1 条件进行培养。

菌落总数国标

菌落总数国标

菌落总数国标简介菌落总数是一种常见的微生物分析方法,用于评价食品、水源、空气等样品中微生物的污染情况。

通过统计菌落总数,可以了解样品中存在的细菌、真菌和其他微生物的数量,进而进行适当的卫生措施和监测。

在国际上,每个国家或地区都有自己的菌落总数标准。

本文主要介绍中国的菌落总数国标,即GB 4789.2-2016《食品安全国家标准食品微生物学检验检验菌落总数》。

GB 4789.2-2016GB 4789.2-2016是中国食品安全领域的一个国家标准,于2016年开始实施。

它规定了食品检验中菌落总数的检测方法及其评估标准。

适用范围GB 4789.2-2016适用于各类食品中菌落总数的检测,包括肉、禽、水产品、豆制品、果蔬制品等。

该标准主要用于食品生产企业的自检和卫生监督机构的抽检。

检测方法GB 4789.2-2016规定了两种菌落总数的检测方法,即总数平板法和膜过滤法。

以下是这两种方法的简要步骤:总数平板法1.准备含有适宜营养成分的琼脂平板。

2.将样品适当稀释,然后分别在琼脂平板上均匀涂布。

3.将涂布好的平板培养在适当的温度下,通常为30°C,时间为48小时。

4.统计菌落总数,并计算出菌落形成单位(CFU)。

膜过滤法1.准备含有适宜营养成分的琼脂膜。

2.将样品通过膜过滤器,将样品中的微生物过滤到琼脂膜上。

3.将琼脂膜放置在含有适宜营养成分的平板上,然后培养在适当的温度下,通常为30°C,时间为48小时。

4.统计菌落总数,并计算出菌落形成单位(CFU)。

评估标准GB 4789.2-2016根据菌落总数的大小,将食品分为三个级别:一级、二级和三级。

以下是各级别的评价标准:•一级标准:CFU/g或CFU/mL小于100。

•二级标准:CFU/g或CFU/mL介于100到100,000之间。

•三级标准:CFU/g或CFU/mL大于100,000。

根据菌落总数的级别,可以判断食品的卫生状况和微生物污染的程度。

菌落总数检测操作规程(国标word版)

菌落总数检测操作规程(国标word版)
以无菌吸管吸取25 mL样品置盛有225 mL磷酸盐缓冲液或生理盐水的无菌锥形瓶(瓶内预置适当数量的无菌玻璃珠)3中,充分混匀,制成1:
10的样品匀液。
6.
1.3用1mL无菌吸管或微量移液器吸取1:
10样品匀液1mL,沿管壁缓慢注于盛有9 mL稀释液的无菌试管中(注意吸管或吸头尖端不要触及稀释液面),振摇试管或换用1支无菌吸管反复吹打使其混合均匀,制成1:
同时,分别吸取1mL空白稀释液加入两个无菌平皿内作空白对照。
6.
1.6及时将15 mL~20mL冷却至46℃的平板计数琼脂培养基(可放置于46±1℃℃恒温水浴箱中保温)倾注平皿,并转动平皿使其混合均匀。
6.2培养
6.2.1待琼脂凝固后,将平板翻转,36℃±1℃培养48 h±2 h。
水产品30℃±1℃培养72 h±3 h。
山西梁汾醋业有限公司文件类别及编号:
LF-GC-01版次共页第页菌落总数测定标准操作规程制订人:
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菌落总数测定的标准操作规程
1.目的规范山西老陈醋菌落总数测定的操作规程,保证山西老陈醋产品的质量。
2.适用范围酿造食醋和配制食醋菌落总数的测定。
胰蛋白胨
5.0g酵母浸膏
2.5g葡萄糖
1.0g琼脂
15.0g蒸馏水1000mlPH
7.0±
0.2制法:
将上述加于蒸馏水中,煮沸溶解,调节PH。
分装试管或锥型瓶,121℃高压灭菌15min。
4.2磷酸盐缓冲液1成分:
磷酸二氢钾(KH2PO4)
34.0g蒸馏水500mlPH

微生物室细菌菌落总数测定操作规程

微生物室细菌菌落总数测定操作规程

微生物室菌落总数测定操作规程菌落总数:将一定量的待测样在营养琼脂上,有氧条件下37℃培养48h后,营养琼脂中所含菌落的总数1材料准备1.1培养基与试剂1.2营养琼脂培养基1.2.1.1成分a.蛋白胨 10gb.牛肉膏 3gc.氯化钠 5gd.琼脂 10—20ge.蒸馏水 1000mlf.生理盐水约1000ml1.1.1.2 制法将上述成分混合并加热溶解后,加入琼脂加热溶化,然后补足所需要的水分,再调整pH为7.4—7.6,然后放入三角瓶中包扎好后,在121℃条件下灭菌20min,冷却备用。

1.3仪器a.高压蒸汽灭菌器(锅)b.恒温培养箱(37℃±1℃)c.电炉d.天平e.冰箱f.放大镜g.pH计(或精密pH试纸)h.灭菌试管、平皿(φ=9cm)、刻度吸管、管塞等i.灭菌移液枪枪头j.玻璃菌落涂布器2检验步骤2.1取样并稀释2.1.1制备无菌生理盐水制取1000ml生理盐水,在121℃条件下灭菌20min冷却至室温,放置于无菌条件下备用。

2.1.2 取样稀释用灭菌注射器(或灭菌吸管)吸取一定量的待测样品注入已盛有一定量灭菌生理盐水和足够的玻璃珠的灭菌三角瓶中,扎好瓶口,在震荡器中振摇20min,制成10-1的菌悬液,再用无菌吸管(或移液枪)在10-1的菌悬液取1ml,加入另一个已盛有9ml无菌生理盐水的试管中,混匀,制成10-2的菌悬液。

按此法依次制成10-3,10-4,10-5,10-6,10-7等不同稀释度的菌悬液备用。

2.2.1制平板并涂布将灭菌后的培养皿取出,冷却。

将每个培养皿里倾注约15-35ml已溶融化并冷却到45℃左右的培养琼脂,待其完全凝固后选择3~4个合适的稀释度的菌悬液,移取0.1ml于培养基上,用灭菌的涂布器将菌悬液均匀的涂布于培养基表面,将培养皿放置于水平桌面上至少20min,使微生物完全吸附于培养基上。

每次检验时应做一平行接种,同时另用一个平皿只倾注营养琼脂培养基作空白对照(视情况可不做空白对照)。

食品菌落总数检测标准

食品菌落总数检测标准

食品菌落总数检测标准食品安全一直是人们关注的焦点,而食品中的菌落总数是评价食品卫生质量的重要指标之一。

菌落总数是指在一定条件下,菌落在寄主(通常是琼脂培养基)上生长并形成可见菌落的数量。

食品中的菌落总数一般反映了食品是否受到了污染,以及食品是否在生产、加工、储存和运输过程中得到了适当的处理和保护。

根据《食品安全国家标准食品微生物学检验菌落总数的测定 GB 4789.2-2010》,食品中的菌落总数检测应该遵循以下步骤和标准:1. 样品的准备。

在进行菌落总数检测之前,首先需要准备好样品。

样品的准备应该符合相应的标准,避免样品受到二次污染或者样品本身就存在菌落过多的情况。

2. 菌落总数的测定方法。

菌落总数的测定方法一般采用平板计数法。

具体操作包括在琼脂培养基上平铺待测样品,然后在适当的温度下培养一定时间,再进行菌落的计数。

在进行菌落总数检测时,需要注意培养基的选择、温度的控制、培养时间等因素,以保证检测结果的准确性。

3. 结果的判定。

根据国家标准,食品中的菌落总数应该符合相应的标准要求。

一般来说,菌落总数超过一定的标准值就属于不合格。

对于不同类型的食品,其菌落总数的标准值也有所不同。

因此,在进行菌落总数检测时,需要参照相应的标准进行判定。

4. 结果的记录和报告。

检测结果应该及时记录并形成检测报告。

检测报告应包括样品的信息、检测方法、检测结果以及判定结果等内容。

检测报告应该保存一定的时间,并且在需要时能够提供给相关部门或者客户查阅。

总之,食品中的菌落总数检测是保障食品安全的重要环节,严格按照国家标准进行检测是确保食品质量的关键。

只有加强对食品菌落总数的检测,才能更好地保障人们的饮食安全,促进食品行业的健康发展。

菌落总数测定操作流程

菌落总数测定操作流程

菌落总数测定操作流程一、准备工作。

咱得先把要用的东西都找齐喽。

啥东西呢?像培养皿得有吧,这就像是小房子,是给那些菌落住的。

还有移液管,这就像个小吸管,能准确地把液体吸出来。

培养基也不能少,这可是菌落生长的“食物”呢。

另外,像天平、三角瓶这些东西也都得准备好。

在开始之前呢,可一定要把手洗得干干净净的,最好再消个毒,可别把咱手上的细菌也带进去捣乱了呀。

二、样品处理。

如果是固体样品,那可得费点事儿。

咱得把它弄成小块小块的,然后放到有生理盐水或者磷酸盐缓冲液的三角瓶里。

这就像是给它洗个澡,把它表面的那些杂七杂八的东西都洗干净。

如果是液体样品呢,就简单一些啦,不过也得按照一定的比例稀释一下,就像把一杯浓果汁兑点水变得淡一点一样。

为啥要稀释呢?因为如果菌落太多,都挤在一起,咱可就数不清了。

三、接种。

现在就到了把处理好的样品接种到培养皿里的时候啦。

用移液管小心地吸取一定量的样品溶液,轻轻地滴到培养皿里。

这时候动作可得轻点儿,就像照顾小婴儿一样,别把它们给弄洒了或者溅出来。

然后呢,再把已经融化并且冷却到合适温度的培养基倒进去,把培养皿轻轻地晃一晃,让样品和培养基充分混合。

这就像是给菌落铺好了床,让它们能舒舒服服地在里面生长。

四、培养。

把接种好的培养皿放到培养箱里去。

这培养箱的温度和时间可都是有讲究的呢。

一般来说,是36℃左右,培养个48小时左右。

在这个过程中,那些小小的菌落就在培养皿里悄悄地生长起来啦。

就像小种子在合适的环境里慢慢发芽一样,可神奇了。

五、计数。

培养时间到了之后,就可以把培养皿拿出来计数啦。

这时候你就会看到培养皿里有好多小点点,那些就是菌落啦。

数菌落的时候可得仔细点儿,可别多数了或者少数了。

有时候菌落会长得密密麻麻的,这时候就更考验咱的耐心了。

可以用个小记号笔,数一个就画个小圈,这样就不容易数乱了。

如果有的菌落长得特别大,或者是看起来有点奇怪,也得算进去哦,毕竟它们都是从样品里长出来的嘛。

六、结果报告。

菌落总数检验操作规程

菌落总数检验操作规程

菌落总数检验操作规程目的:该操作规程用于规范公司产品及原料的活菌数量检验操作。

范围:该操作规程适用于公司要求检查该项的产品和原料的菌落总数检验责任人:微生物检验员,QC主管内容:1 技术依据及原理菌落总数计数采用平板菌落计数法,这是活菌计数方法之一。

该方法以在琼脂平板上,样品经过处理在一定条件下培养后,所得1ml(或1g)检样中形成菌落的总数。

测定结果只反映在规定条件下,只包括一群在平板计数琼脂生长发育的嗜中温需氧菌或兼性厌氧菌的菌落总数。

在进行本法测定时,必须严格按本法规定的条件操作,以免产生实验误差。

2 材料、仪器、试剂的准备及基本要求2.1 无菌室2.1.1 结构和要求无菌室面积不超过10m2,高度不超过2.4m,应采光良好、避免潮湿、远离厕所所及污染区,有缓冲间(2个)、操作间组成。

操作间与缓冲间之间应有样品传递窗(箱),出入操作间和缓冲间的门不应直对。

无菌室应六面光滑平整,能耐受清洗消毒。

墙与地面及墙壁、天花板连接处应呈凹弧形,无缝隙,不留死角。

操作间内不得安装下水道。

无菌室照明灯应嵌装在天花板内,室内光照分布均匀,光照度不低于300勒克斯。

缓冲间和操作间均应设置紫外线杀菌灯(2~2.5W/m3), 紫外线杀菌灯距实验台面高度不超过1 m,并定期检查其辐射强度,辐射强度不低于70µW·cm-2(1 m距离),不符合要求的紫外线杀菌灯应即使更换。

2.1.2 温度、湿度无菌室内温度和相对湿度直接影响紫外线杀菌灯的杀菌效果,故应控制温度18~26℃,相对湿度40~60%。

操作间或净化工作台的洁净空气应保持对环境形成正压,压差不低于4.9Pa。

2.1.3 操作间操作间应安装空气除菌过滤层流装置。

洁净度应不低于10000级,局部净化度100级,或放置同等级净化工作台,并准备药物天平,乙醇灯、打火机、大小橡皮乳头等。

2.1.4 缓冲间缓冲间应有洗手盆,无菌衣、帽、口罩、拖鞋等。

物体表面微生物污染检测标准操作规程

物体表面微生物污染检测标准操作规程

物体表面微生物污染检测标准操作规程一、采样方法
二、检测方法
充分震荡采样管后,取不同稀释倍数的洗脱液1.0 ml接种平皿,将冷却至40~45 ℃的熔化营养琼脂培养基每皿倾注15~20 ml,36±1 ℃恒温箱培养48小时,计数菌落数。

三、结果计算
物体表面菌落总数计算方法:
1、规则物体表面:
细菌菌落总数(CFU/ cm²):平均每皿菌落数×稀释倍数/
采样面积(cm²);
2、不规则物体表面的结果计算,用CFU/件表示。

四、判定标准
1、Ⅰ、Ⅱ类环境:洁净手术部、其他洁净场所、非洁净手术部(室)、非洁净骨髓移植病房、产房、导管室、新生儿室、器
官移植病房、烧伤病房、重症监护病房、血液病病区等,物体表
面细菌菌落总数≤5 CFU/cm²。

2、Ⅲ、Ⅳ类环境:儿科病房、母婴同室、妇产科检查室、人工流产室、治疗室、注射室、换药室、输血科、消毒供应中心检
查包装灭菌区和无菌物品存放区、血液透析中心(室)、急诊室、化验室、各类普通病室等,物体表面细菌菌落总数≤10 CFU/cm²。

五、采样中的注意事项
1、采样时机:日常常规检测时可在消毒后采样,怀疑医院感
染暴发、进行医院感染暴发调查或工作中怀疑物体表面被污染时,应随机采样。

2、常规对环境物体表面消毒效果检测时可不进行致病性微生物检测,疑似医院感染暴发、进行医院感染暴发调查或工作中怀疑物体表面被微生物污染时,应进行目标微生物的检测。

3、采样、接种中严格遵守无菌技术操作规程。

菌落总数测定操作规程

菌落总数测定操作规程

1规范性引用文件:下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。

凡是注日期的引用文件,起随后所有的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用与本标准,然而,鼓励根据本标准达成的协议的各方研究是否适用这些文件最新版本。

凡是不注日期的引用文件,其最新版本适用于本标准。

中华人民共和国药典2005版附录2 抽样方法成品同一批号的产品中至少随机抽取3包装样品,取好的样品应用无菌袋装好,检验前不得打开。

3设备和材料3.1 冰箱 0℃~4℃。

3.2 恒温培养箱:36℃±1℃和25±1℃3.3 恒温水浴锅:46℃±1℃。

3.4 电子天平:0g~500g,精确至0.01g.3.5 可调试移液枪:1ml~5ml3.6 旋涡混匀器3.7 薄膜过滤器:三联3.8 灭菌吸管:1ml(具0.01ml刻度)、10ml(0.1ml刻度)。

3.9 灭菌锥形瓶:500ml,250ml.3.10 灭菌培养皿:直径约90mm3.11 灭菌剪子、镊子、滤头、移液枪头等。

4试剂和培养基4.5 0.1%2,3,5-三苯基氯化四氮咗溶液121℃,15min灭菌备用。

4.2 磷酸24.1 营养琼脂培养基:取15.2g营养琼脂培养基溶于400ml水中,装入500ml锥形瓶121℃,15min灭菌备用。

4.2 沙氏琼脂培养基:取25.6g沙氏琼脂培养基溶于400ml水中,装入500ml锥形瓶121℃,15min灭菌备用。

4.3 洗脱液:取0.9g氯化钠溶于100水中(加入2 g山梨酸脂80),装入100ml锥形瓶,另外再取0.9%氯化钠溶液分别以9ml/支分装于试管中121℃,15min灭菌备用。

4.4 75%乙醇溶液4.5 0.1%2,3,5-三苯基氯化四氮咗溶液121℃,15min灭菌备用。

5 操作步骤5.1检样稀释及培养5.1.1以无菌操作将检样10g(ml) 放于含有100mL灭菌生理盐水灭菌玻璃瓶,经充分振摇制成1:10的均匀稀释液。

食品微生物学检验菌落总数测定国标

食品微生物学检验菌落总数测定国标

食品微生物学检验菌落总数测定国标大家好,今天咱们聊聊那个让厨房里的人又爱又恨的东西——食品安全。

说到食品安全,大家可能首先想到的是那些让人闻之色变的化学添加剂和防腐剂,但微生物问题才是真正让人提心吊胆的。

特别是那些看似无害的小东西——细菌,它们可是悄悄藏在食物里的“隐形杀手”。

说起菌落总数,这可是衡量食品中微生物污染程度的重要指标。

就像我们去超市买水果,看到那些红彤彤、黄澄澄的水果,心里是不是美滋滋的?但是,你知道吗?这些水果在采摘后,如果处理不当,就会成为细菌滋生的温床。

而菌落总数就是用来检测这些细菌数量的一个标准。

这个菌落总数到底高不高呢?简单来说,就是看那些小小的、圆圆的细菌们能不能在你的盘子上安家落户。

一般来说,菌落总数越低,说明食物中的细菌越少,吃起来也就更放心。

反之,如果菌落总数超标,那就得小心了,这可不是闹着玩的。

不过别担心,国家标准可是很严格的。

根据《食品微生物学检验菌落总数测定国标》,我们可以通过专业的设备和方法,准确地测量出食物中的菌落总数。

这样一来,无论是超市里的水果,还是街边的小摊上的小吃,都能吃得安心,吃得放心。

当然了,除了菌落总数,还有很多其他的微生物指标需要关注。

比如大肠杆菌、沙门氏菌、金黄色葡萄球菌等等。

这些都是衡量食品安全的重要指标。

只有当我们掌握了这些知识,才能更好地保护自己的健康。

说到这里,你是不是已经迫不及待想要动手做一顿饭,然后看着那些美味的食物在自己手中诞生了呢?别急,先让我来给你一些建议吧。

记得要选择新鲜的食材,并且在烹饪过程中注意卫生。

这样,你做出的每一道菜都将成为你餐桌上的美食,让你和家人享受健康的生活。

我想说,食品安全不仅仅是为了我们自己,更是为了我们的下一代。

所以,从现在开始,让我们一起努力,为创造一个更加安全、健康的饮食环境而奋斗吧!。

菌落总数操作手册

菌落总数操作手册

菌落总数操作手册一、引言菌落总数是一种常用的微生物检测方法,用于评估食品、水源和医药产品的微生物污染情况。

本操作手册旨在提供详细的步骤和技巧,帮助实验人员正确、准确地进行菌落总数测试。

二、实验室准备1. 实验室环境:确保实验室内的空气清洁,减少空气中微生物的干扰。

2. 实验室设备准备:2.1 培养基:使用适宜的培养基,如TSA(Trypticase Soy Agar)。

2.2 培养基平板:准备含有适量的培养基的平板,用于菌落生长。

2.3 微量移液器和吸头:用于取样和移液,确保无菌。

2.4 灭菌器:用于灭菌实验室工具和试剂。

2.5 培养箱:用于保存培养基平板在适宜的温度下孵育。

三、样品采集和处理1. 样品采集:根据需要采集待测样品,注意采样工具和容器的无菌处理,防止外界污染。

2. 样品处理:2.1 固体样品:将固体样品称量,加入适量的生理盐水或缓冲液中,进行均匀悬浮。

2.2 液体样品:取适量的液体样品,按照一定比例加入生理盐水或缓冲液中进行稀释。

2.3 混合样品:按照比例混合不同样品,确保样品的均匀分布。

四、菌落计数操作步骤1. 稀释处理:1.1 取适量的悬浮液,加入无菌试管中,加入适量的生理盐水或缓冲液进行一定倍数的稀释,如10^-1、10^-2、10^-3等。

1.2 使用无菌移液器,吸取适量的菌液,均匀涂布在培养基平板表面,用无菌酒精灯杀菌吸头。

1.3 等待菌液均匀渗入培养基平板后,用倒置培养后的平板。

2. 孵育:2.1 将培养基平板放置在培养箱中,设置适当的温度和时间,让菌落生长。

2.2 在孵育期间避免移动或震动培养基平板,以免影响菌落形成。

3. 菌落计数:3.1 使用显微镜观察培养基平板上的菌落,选择合适放大倍率。

3.2 通过目视法或使用计数器进行菌落计数,确保每个菌落仅计数一次。

3.3 记录每个稀释倍数对应的菌落数。

五、结果分析和报告1. 结果计算:1.1 根据需要计算出初始样品中的菌落总数,考虑稀释倍数和计数范围。

质量检验操作规程

质量检验操作规程

重庆卡顿尔食品有限公司产品质量检验操作规程部门:品控部编制:范昌勇文件编号:KDRQC018日期:2015年1月12日一、菌落总数检测操作规程检测国标:GB 食品安全国家标准食品微生物学检验菌落总数测定样品:卡顿尔蛋糕、卡曲、西点类产品产品国标:GB/T 20977-2007糕点通则;GB/T 20980-2007饼干1编制:范昌勇日期:2015-01-12产品卫生标准:GB 7099-2003糕点、面包卫生标准; GB 7100-2003饼干卫生标准菌落总数指标:糕点:热加工≤1500cfu/g,冷加工≤10000cfu/g饼干:≤750cfu/g试剂:生理盐水(约%)(磷酸盐缓冲溶液);营养琼脂培养基(或平板计数琼脂培养基);75%消毒酒精设备:电子称()、电子万用炉、灭菌锅、恒温水浴锅、超净工作台、电热恒温培养箱器具:250ml三角瓶、玻璃棒、烧杯(500ml)、试管(15*150或者18*180)、试管架、培养皿、镊子、钥匙、刻度吸量管(1ml、10ml)、移液器(100-1000ul)、酒精灯操作步骤:1.药品配制营养琼脂培养基(配比:32g+1000ml蒸馏水);生理盐水(+1000蒸馏水)(或磷酸盐缓冲溶液);75%消毒酒精(500ml95%纯酒精+133ml蒸馏水)。

2.灭菌消毒准备⑴往灭菌锅外层锅内加适量的水(水位刚好没过加热管,最好用硬度较低的水,避免结垢而缩短加热管的寿命)。

⑵培养皿成套同向整齐排列叠放,用干燥的牛皮纸(或者报纸)包裹卷紧,放入灭菌锅内套中。

⑶将准备好的试管、培养基、刻度吸量管、移液器枪头、生理盐水放入锅内,注意不要放置过于密集紧凑,以免影响蒸汽循环造成灭菌不彻底。

⑷盖好锅盖并对称地扭紧螺旋。

⑸加热使锅内产生蒸汽,当压力表指针达到时,打开排气阀,将冷空气排出,此时压力表指针下降,当指针下降至零时,即将排气阀关好。

注意冷空气必须充分排除,否则锅内温度达不到规定温度,影响灭菌效果。

国标菌落总数检测方法

国标菌落总数检测方法

国标菌落总数检测方法国标菌落总数检测方法是一种常用的微生物检测方法,用于评估给定样品中的微生物污染水平。

该方法可以应用于食品、环境、水源等多个领域,以评估样品中微生物的数量。

下面将详细介绍国标菌落总数检测方法的步骤和原理。

一、步骤1.准备培养基:根据需要进行培养的菌种不同,可以选择适当的培养基。

通常,使用含水解鱼肉膏、蛋白胨、肉汤、大豆胨等成分的富含营养物质的琼脂培养基。

2.准备样品:样品可以是食品、水样、环境表面样品等。

根据不同的样品,采取适当的方法进行取样,确保样品代表性。

3.稀释样品:为了获得适当的菌落数,通常需要对样品进行稀释。

将一定数量的样品与适量的稀释液混合均匀,得到一系列不同浓度的稀释液。

4.涂布方法:将上一步稀释好的样品涂布于琼脂培养基上。

可以采用平板涂布法或膜过滤法。

平板涂布法是将稀释好的样品倒入已凝固的琼脂平板上,用涂布棒均匀涂布。

膜过滤法是将稀释好的样品过滤到已凝固的膜上,将膜放在培养基上。

5.培养条件:根据需要培养的菌种不同,选择合适的培养温度和时间。

一般而言,大多数细菌在30-37℃下培养24-48小时。

6.菌落计数:培养一定时间后,可以观察到样品中的菌落。

使用显微镜或计数板等工具,对菌落进行计数。

7.统计和计算:根据计数结果和稀释倍数,可以计算出原始样品中的菌落总数。

二、原理微生物培养基提供了微生物生长所需的营养物质。

在适当的温度和湿度下,微生物会在培养基上生长形成菌落。

每个菌落代表一种或多种微生物。

根据菌落的形态、大小和颜色等特征,可以初步推测菌种。

计数并统计菌落总数可以评估样品中微生物的数量。

在菌落总数检测方法中,样品的稀释是为了确保菌落的数量适宜且分散均匀。

过高的菌落数量可能导致菌落过于密集,不容易准确计数。

过低的菌落数量可能导致菌落太稀疏,有些菌落容易被忽略。

选择合适的稀释倍数可以使得菌落数量适宜,方便计数并计算菌落总数。

总结起来,国标菌落总数检测方法是一种常用的微生物检测方法,通过样品的稀释、涂布、培养和计数等步骤,评估给定样品中的微生物数量。

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7.
1.5若所有稀释度(包括液体样品原液)平板均无菌落生长,则以小于1乘以最低稀释倍数计算。
7.
1.6若所有稀释度的平板菌落数均不在30 CFU~300 CFU之间,其中一部分小于30CFU或大于300CFU时,则以最接近30CFU或300 CFU的平均菌落数乘以稀释倍数计算。
7.2菌落总数的报告
7.2.1菌落数小于100 CFU时,按“四舍五入”原则修约,以整数报告。
3.仪器设备恒温培养箱,冰箱,恒温水浴箱,天平(
0.1g),均质器,振荡器;无菌吸管1ml(
0.01刻度)、10ml(
0.1ml刻度)或微量移液器及吸头;无菌锥型瓶,250ml/500ml;无菌培养皿:
直径90mm;PH计或精密PH试纸;放大镜或菌落计数器
4.培养基和试剂
4.1平板计数琼脂培养基,成分:
N =∑C/(n1 +
0.1n2 )d„„„„„„„„„„„„„(1)式中:
N——样品中菌落数;∑C——平板(含适宜范围菌落数的平板)菌落数之和;5n1——第一稀释度(低稀释倍数)平板个数;n2——第二稀释度(高稀释倍数)平板个数;d——稀释因子(第一稀释度)。
示例:
N =∑C/(n1 +
0.1n2 )d=(232+244+33+35)/[2+(
6.
3.1选取菌落数在30CFU~300CFU之间、无蔓延菌落生长的平板计数菌落总数。
低于30CFU的平板记录具体菌落数,大于300CFU的可记录为多不可计。
每个稀释度的菌落数应采用两个平板的平均数。
6.
3.2其中一个平板有较大片状菌落生长时,则不宜采用,而应以无片状菌落生长的平板作为该稀释度的菌落数;若片状菌落不到平板的一半,而其余一半中菌落分布又很均匀,即可计算半个平板后乘以2,代表一个平板菌落数。
山西梁汾醋业有限公司文件类别及编号:
LF-GC-01版次共页第页菌落总数测定标准操作规程制订人:
制订日期:
颁发部门:
审核人:
审核日期:
分发部门:
制订年份:
年批准人:
批准日期:
生效日期:
菌落总数测定的标准操作规程
1.目的规范山西老陈醋菌落总数测定的操作规程,保证山西老陈醋产品的质量。
2.适用范围酿造食醋和配制食醋菌落总数的测定。
6.
2.2如果样品中可能含有在琼脂培养基表面弥漫生长的菌落时,可在凝固后的琼脂表面覆盖一薄层琼脂培养基(约4 mL),凝固后翻转平板,按
1.4.
2.1条件进行培养。
6.3菌落计数可用肉眼观察,必要时用放大镜或菌落计数器,记录稀释倍数和相应4的菌落数量。
菌落计数以菌落形成单位(colony-forming units,CFU)表示。
以无菌吸管吸取25 mL样品置盛有225 mL磷酸盐缓冲液或生理盐水的无菌锥形瓶(瓶内预置适当数量的无菌玻璃珠)3中,充分混匀,制成1:
10的样品匀液。
6.
1.3用1mL无菌吸管或微量移液器吸取1:
10样品匀液1mL,沿管壁缓慢注于盛有9 mL稀释液的无菌试管中(注意吸管或吸头尖端不要触及稀释液面),振摇试管或换用1支无菌吸管反复吹打使其混合均匀,制成1:
7.
2.5称重取样以CFU/g为单位报告,体积取样以CFU/mL为单位报告。
7
6.
3.3当平板上出现菌落间无明显界线的链状生长时,则将每条单链作为一个菌落计数。
7结果与报告
7.1菌落总数的计算方法
7.1.1若只有一个稀释度平板上的菌落数在适宜计数范围内,计算两个平板菌落数的平均值,再将平均值乘以相应稀释倍数,作为每g(mL)样品中菌落总数结果。
7按公式(1)计算:
稀释液:
取贮存液
1.25ml,用蒸馏水稀释至1000ml,分装于适宜容器中,121摄氏度高压灭菌15分钟。
4.3无菌生理盐水成分:
氯化钠
8.5g蒸馏水1000ml制法:
8.5克氯化钠溶于100ml蒸馏水中121摄氏度高压灭菌15分钟。
5检验程序2检样25 g(mL)样品+225 mL稀释液,均质10倍系列稀释选择2-3个适宜稀释度的样品均液,各取1ml分别加入无菌培养皿内每皿中加入15ml-20ml平板计数琼脂培养基,混匀培养计数各平板菌落数计算菌落总数报告6操作步骤
7.
2.2菌落数大于或等于100CFU时,第3位数字采用“四舍五入”原则修约后,取前2位数字,后面用0代替位数;也可用10的指数6形式来表示,按“四舍五入”原则修约后,采用两位有效数字。
7.
2.3若所有平板上为蔓延菌落而无法计数,则报告菌落蔓延。
7.
2.4若空白对照上有菌落生长,则此次检测结果无效。
同时,分别吸取1mL空白稀释液加入两个无菌平皿内作空白对照。
6.
1.6及时将15 mL~20mL冷却至46℃的平板计数琼脂培养基(可放置于46±1℃℃恒温水浴箱中保温)倾注平皿,并转动平皿使其混合均匀。
6.2培养
6.2.1待琼脂凝固后,将平板翻转,36℃±1℃培养48 h±2 h。
水产品30℃±1℃培养72 h±3 h。
0.1×2)]×10-2=544/
0.022=24727上述数据按
1.6.2数字修约后,表示为25000或
2.5×
104。
7.
1.3若所有稀释度的平板上菌落数均大于300CFU,则对稀释度最高的平板进行计数,其他平板可记录为多不可计,结果按平均菌落数乘以最高稀释倍数计算。
7.
1.4若所有稀释度的平板菌落数均小于30 CFU,则应按稀释度最低的平均菌落数乘以稀释倍数计算。
6.1样品的稀释
6.1.1固体和半固体样品:
称取25 g样品置盛有225mL磷酸盐缓冲液或生理盐水的无菌均质杯内,8000r/min~100r/min均质1min~2min,或放入盛有225 mL稀释液的无菌均质袋中,用拍击式均质器拍打1 min~2 min,制成1:
10的样品匀液。
6.
1.2液体样品:
100的样品匀液。
6.
1.4按
1.4.
1.3操作程序,制备10倍系列稀释样品匀液。
每递增稀释一次,换用1次1 mL无菌吸管或吸头。
6.
1.5根据对样品污染状况的估计,选择2个~3个适宜稀释度的样品匀液(液体样品可包括原液),在进行10倍递增稀释时,吸取1mL样品匀液于无菌平皿内,每个稀释度做两个平皿。
胰蛋白胨
5.0g酵母浸膏
2.5g葡萄糖
1.0g琼脂
15.0g蒸馏水1000mlPH
7.0±
0.2制法:
将上述加于蒸馏水中,煮沸溶解,调节PH。
分装试管或锥型瓶,121℃高压灭菌15min。
4.2磷酸盐缓冲液1成分:
磷酸二氢钾(KH2PO4)
34.0g蒸馏水500mlPH
7.2制法:
贮存液:
称取
34.0g磷酸二氢钾溶于500ml蒸馏水中,用大约175ml的1mol/L氢氧化钠溶液调节PH,蒸馏水稀释至1000ml存于冰箱。
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