nikon共聚焦显微镜安全操作规程

Nikon 共聚焦显微镜安全操作规程

一、操作步骤

1、开机：大体按照：电脑→激光台（打开要用的激光按钮）→卤素灯→载物台→显微镜→控制器→软件，荧光灯需要就打开，不需要不用打开

2、拍摄流程：打开软件Nikon confocal，ok进入软件操作界面，点eye port，看目镜聚焦，然后点eye port及Interlock解锁切换到激光光路L100，根据自己实验来设置参数和探测方法（DU4），然后点scan，重调Z轴找焦面，对通道进行HV和功率优化，停止scan，点击capture，完成一次拍摄。

3、图像保存：⑴数据保存：File，save as，保存原始数据文件格式.ND2；⑵图片保存：File，Inport/Export，Export ND document，在Export ND document 窗口中Channels，TIF compatibility Options（选择第二个或第三个），保存叠加图像时，在Export ND document 窗口中Channels勾选Insert Overlaps，再点击export

4、关机：Z轴降到500以下，物镜转到空挡，最后与开机完全相反顺序进行关机。

二、注意事项：

1、放置样品时，确保样品的中心区域在物镜的正上方，且尽量要物镜在两个夹片中心区域，以免转换物镜时，撞坏物镜；

2、原则上所有的光源都非常忌讳频繁开关，会大大缩短其使用寿命。荧光灯、卤素灯：开机后不管是否使用，都最好半小时后再关闭；关机后至少等十五分钟再开机。激光：开机后不管是否使用，都最好一小时后后关闭；关机后至少等一小时再开机。

3、明场卤素灯的功率值不能超过4，否则会导致温度过高烧坏光纤，影响明场成像；

4、60倍和100倍物镜是油镜，滴油时注意只需沾一下，切勿多，滴了油，如果要转物镜，必须先将当前滴了油的物镜用石油醚清洗擦干净才能转换；

5、实验结束或者换样品转换镜头时必须按照以下程序进行操作：首先，取下样品，将物镜Z轴值降到500以下，然后，将载物台的载玻片拨至两端，最后再进行物镜的转换。