细胞冻存液氮罐使用及维护标准操作程序
实验室液氮罐冻存细胞注意事项
实验室液氮罐冻存细胞注意事项实验室液氮罐是实验室中常见的设备,用于冻存细胞和其他生物样品。
液氮罐的使用需要注意一些细节,以确保细胞的冻存和保存质量。
本文将从准备工作、冻存操作和保管管理三个方面介绍实验室液氮罐冻存细胞的注意事项。
准备工作在进行细胞冻存前,需要对实验室液氮罐进行准备工作。
首先,检查液氮罐的状态,确保罐体完好无损,没有漏氮现象。
其次,清洁液氮罐内部,避免有杂质污染细胞样品。
清洁时需要使用无水乙醇擦拭罐体,确保罐内干燥。
最后,准备好冻存盒和细胞冻存液,确保能够顺利地进行细胞冻存操作。
冻存操作进行细胞冻存时,需要注意以下几个操作步骤。
首先,加入细胞冻存液。
将已准备好的细胞样品和冻存液混合均匀,在冻存盒中加入适量的混合液。
其次,放置冻存盒。
将加有细胞冻存液的冻存盒放置于冷冻架上,等待混合液冷却至适宜的温度。
最后,进行冻存。
将冷却后的冻存盒放置于液氮罐内,进行细胞的冻存操作。
在这一步骤中,需要注意冷却速度和温度稳定性,以确保细胞能够被有效地保存。
保管管理冻存完成后,需要对液氮罐进行保管管理工作。
首先,及时记录信息。
在细胞冻存完成后,需要及时地记录细胞的名称、冻存日期和位置信息,以方便以后的查找和管理。
其次,定期检查。
定期对液氮罐进行检查,确保罐体完好,没有漏氮现象。
同时也需要检查冻存盒的状态,以确保细胞能够被有效地保存。
最后,注意安全。
在使用液氮罐时,需要严格遵守安全操作规程,确保实验室人员的安全。
总结在实验室液氮罐冻存细胞的过程中,需要注意准备工作、冻存操作和保管管理。
准备工作包括检查罐体状态、清洁罐体和准备冻存盒和冻存液。
冻存操作包括加入冻存液、放置冻存盒和进行冻存操作。
保管管理包括记录信息、定期检查和注意安全。
只有做好这些注意事项,才能够保证细胞的冻存和保存质量。
希望本文对实验室液氮罐冻存细胞的注意事项有所帮助。
液氮罐操作保养规程
液氮罐操作保养规程
前言
液氮罐是用于存储液氮的设备,广泛用于生物、医学、化学、制造业等领域。
正确的操作和保养液氮罐是确保实验和生产顺利进行的关键。
本文将为大家介绍液氮罐的操作和保养规程。
液氮罐操作规程
步骤1. 安装
将液氮罐放置在固定并且平稳的位置上,并且注意避免阳光直射。
连接罐口和压力表,并确保连接处牢固。
填充液氮前,必须先进行检查。
步骤2. 填充液氮
打开液氮罐的放气阀,等待气体完全排放。
接着,从液氮供应源处填充液氮,当液位达到规定高度时,将供应源关闭。
步骤3. 常规操作
液氮罐添加液氮后,需要在罐口上的压力计上检查压力。
压力大于1.8巴时,请把气阀打开。
如果压力低于1.8巴,请及时补充氢气以维持压力。
细胞深低温冷冻的标准操作规程
细胞深低温冷冻的标准操作规程细胞深低温冷冻标准操作规程一、引言细胞深低温冷冻是一种重要的细胞保存方法,可以在长时间的储存过程中保持细胞的活性。
为了规范细胞深低温冷冻的操作流程,确保细胞的存活率和稳定性,我们制定了本标准操作规程。
二、操作前准备1.实验室环境准备:确保实验室环境清洁,无灰尘、无污染,保持适宜的温度和湿度。
2.细胞株选择:选择需要冷冻保存的细胞株,确保其生长状态良好,无污染。
3.细胞培养液准备:选择适宜的细胞培养液,按照厂家推荐的浓度配置。
4.冷冻保护剂准备:选择适宜的冷冻保护剂,如二甲基亚砜(DMSO)等,按照推荐浓度添加到细胞培养液中。
5.冷冻容器准备:选择适宜的冷冻容器,如冻存管、冻存盒等,确保容器的密封性和耐受性。
6.标记和记录:对冷冻容器进行标记,包括细胞名称、日期、操作人等信息,并记录在实验记录本上。
三、操作步骤1.细胞收集:将需要冷冻保存的细胞从培养皿或培养瓶中收集到离心管中,用生理盐水洗涤一次,去除残留的培养液和血清。
2.细胞计数:对收集到的细胞进行计数,确定细胞的浓度和数量。
3.冷冻保护剂添加:将预先准备好的冷冻保护剂按照推荐浓度添加到细胞悬液中,轻轻混匀。
4.分装:将含有细胞的冷冻保护剂悬液分装到预先准备好的冷冻容器中,确保每个容器的细胞数量适中。
5.梯度降温:将分装好的细胞容器放入梯度降温盒中,在-80℃冰箱中进行梯度降温,确保细胞在降温过程中不会形成冰晶。
6.深低温储存:将梯度降温后的细胞容器转移到液氮罐中进行深低温储存。
确保液氮罐的密封性和液氮的充足性。
7.记录和管理:对每个冷冻保存的细胞株进行详细的记录和管理,包括细胞名称、冻存日期、复苏日期等信息。
定期检查液氮罐的状态和细胞的存活情况。
四、注意事项1.在操作过程中要保持细胞的活性,避免过度处理导致细胞死亡。
2.冷冻保护剂的浓度和使用方法要严格按照厂家推荐进行,避免对细胞造成损伤。
3.在梯度降温和深低温储存过程中要确保细胞的温度稳定下降,避免形成冰晶对细胞造成损伤。
细胞冻存液使用方法
细胞冻存液使用方法介绍如下:
1.准备工作:
o确保工作区域和操作器具的清洁与无菌。
o准备细胞冻存液,根据制备的配方和方法准备好冻存液。
2.细胞冷冻:
o从培养皿中取出细胞,并尽快将培养基抽去。
o加入适量的细胞冻存液,轻轻悬浮细胞,确保均匀混合。
o将细胞冻存液转移至冻存管中,注意不要产生气泡。
o封闭冻存管,确保密封。
3.冻存过程:
o将冻存管放置在冷冻盒中,并迅速将其放入冰箱冷冻室。
o使用冷冻梯度降温的方法,逐渐降低细胞的温度至-80°C 以下。
4.长期储存:
o将冻存管转移到液氮罐等更低温度的冷冻设备中进行长期储存。
o长期储存时,细胞应该避免暴露在温度变化和湿气中。
5.解冻和复苏:
o从液氮罐中取出冻存管,迅速放入37°C预热的水浴中进行解冻。
o解冻后,立即将细胞冻存液转移到预先准备好的培养基中。
o轻轻悬浮细胞,将细胞转移到新的培养皿中进行培养。
液氮罐在细胞培养中的使用及液氮的温度
河南天驰仪器设备有限公司 (天驰液氮罐)
2014-10-29
河南天驰仪器设备有限公司
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液氮罐在细胞培养中的使用
• 细胞培养的一般过程,主要包括准备、取材、培养和冻存复苏4步。 为保存细胞,特别是不易获得的突变型细胞或细胞株,要将细胞冻存 。冻存的温度一般用一196℃液氮温度,将细胞收集至冻存管中加入 含保护剂(一般为二甲基亚砜或gan油)的培养基,以一定的冷却速度 冻存,最终保存于液氮中。在极低的温度下,细胞保存的时间几乎是 无限的。 • 目前美国标准细胞库或细胞银行(ATCC)液氮冻存有3200个已经过鉴定 的细胞系(1992),其中包括来自正常人和各种疾病患者的皮肤成纤维 细胞系和来自不同物种的近75个杂交瘤细胞株。
2014-10-29
河南天驰仪器设备有限公司
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关于液氮温度的相关知识
• 液氮:液态的氮气。是惰性的,无色,无嗅,无腐蚀性,不可燃,温 度极低。氮构成了大气的大部分(体积比78.03%,重量比75.5%)。 氮是不活泼的,不支持燃烧。汽化时大量收热接触造成冻伤。 • • 液氮(常写为LN2),是氮气在低温下形成的液体形态。氮的沸点为196°C,在正常大气压下温度如果在这以下就会形成液氮;如果加压 ,可以在更高的温度下得到液氮。人体如果在毫无保护措施的情况之 下接触,皮肤会有严重冻伤的危险。 • • 在工业中,液态氮是由空气分馏而得。先将空气净化后,在加压、冷 却的环境下液化,借由空气中各组分之沸点不同加以分离。氦气最先 泄出(且未被液化),接着就是占空气中78.09%的氮气,再来是占 20.95%的氧气,最后是占空气中0.93%的氩气。
2014-10-29
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液氮罐流程
液氮罐的使用流程详解
液氮罐是一种常用于生物学实验的设备,采用液态氮对生物样本进行冷冻保存。
下面详细介绍液氮罐的使用流程:
1.准备工作
(1)检查液氮罐内是否有液态氮及其它杂质。
(2)将生物样本放入指定的保存针管中,确保每个针管内样本数量和质量均匀。
(3)检查每个保存针管是否完好无损,严禁使用已经损坏或破裂的针管。
2.开始运行
(1)先将液氮罐内的空隙充满液氮至两侧的打气筒之间。
(2)将装有生物样本的保存针管插入针管架内,注意每个针管的序号。
(3)将针管架放入液氮罐内,请勿过度叠放以避免瘫痪。
3.使用注意事项
(1)液氮罐内的液态氮冷却剂极易造成低温烧伤和冻伤,请务必穿戴干燥保暖的防护手套、防护口罩、安全安全鞋等个人防护用具。
(2)生物样本保存前须先加标识,标识内容必须详细且准确无误,以使后续使用更加方便。
(3)液氮罐内不能同时保存不同种类或不同生长阶段的生物样本,应分别存储以免相互干扰或污染。
(4)生物样本保存期限应严格按照实验室管理规定进行,过期的生物样本不得继续使用或保存。
以上是液氮罐的使用流程,希望能对生物学实验者们有所帮助。
液氮罐安全操作及保养规程
液氮罐安全操作及保养规程液氮罐,也叫做低温储罐,是一种用于存贮液态氮的设备。
液氮罐通常用于各种冷冻和低温实验室、医疗设备和冷冻食品行业。
本文将讨论液氮罐的操作和保养规程,以确保其安全使用。
1. 操作规程1.1. 使用前检查在使用液氮罐之前,必须进行以下检查:1.检查液氮罐是否存在任何划痕、凹洞或损坏。
2.检查液氮罐的安全保险装置是否造成阻塞或损坏。
3.检查液氮罐封口是否紧密,并确保安装在罐口处的短管只有一个。
4.检查液氮的液位是否处于合适的高度。
液位不应超过罐口顶部的1/2以上。
1.2. 填充液体液氮罐在填充液体时,必须遵循以下步骤:1.确保液氮罐的压力释放装置处于关闭状态。
2.填充罐的液位不得超过罐口以下4英寸。
当液位接近罐口时必须停止填充。
3.填充过程中应遵守液氮的安全操作规则。
任何情况下,不得从容器中倾倒液氮。
1.3. 倒出液体在倒出罐中的液体时,应该遵循以下步骤:1.确保罐的压力释放装置处于关闭状态。
2.打开液体出口阀门,只有在冷却要求下方可开启放气阀门。
3.在排液时应按照先进先出原则进行。
1.4. 废弃物处理液氮罐中的废弃物应严格按照安全规程进行处理。
废弃物应倒入特殊处理容器中,方便優等安全处理。
1.5. 运输规程液氮罐在运输时需要遵守以下规程:1.在运输液氮罐时,液体必须在罐口以下4英寸,严禁超出罐口。
2.在车辆后面标示液体运输装置,以便其他车辆和行人注意。
3.液体运输载具必须有固定液体尾部,以便放气。
2. 保养规程为了保持液氮罐的性能,必须遵守以下保养规程:2.1. 液氮罐清洗1.每次倒出液体后,建议清洗一下罐内。
2.用干净的抹布或化学纤维布小心地擦拭,可在25度C下使用棉纱球浸泡清洁剂拭招。
2.2. 避免冷凝物形成在液氮罐运作期间,可能会出现冷凝物凝结在罐的内壁上。
这些冷凝物会影响罐的性能,危及安全。
因此,应该采取以下措施:1.在使用之前,将液氮罐令温度上升到零下30度C以上,使用前将露水擦拭除去。
细胞冻存液安全操作及保养规程
细胞冻存液安全操作及保养规程细胞冻存技术在现今的细胞生物学研究中扮演着重要的角色。
细胞冻存液作为冻存细胞的载体,其制备、操作及保养都需要高度的安全保障措施,以确保实验安全和样品质量。
下面将介绍细胞冻存液的安全操作及保养规程。
1. 实验室安全措施细胞冻存液是具有高度充气性和易挥发性的化学制剂,故对其使用要高度警惕。
以下是一些实验室安全措施:1.1 操作房间通风细胞冻存液的挥发物极易引起呼吸道疾病、眼和皮肤刺激,应开启通风设施。
实验者可在操作台上设置隔板,隔离冻存液和被试样品。
1.2 禁止吸烟、饮食及进入裸露的皮肤细胞冻存液是危险化学品,禁止在实验室环境下吸烟、饮食或将其接触到裸露的皮肤上。
1.3 避免直接接触细胞冻存液对肌肉和神经危害较小,但对眼睛和皮肤会造成化学伤害。
实验者操作时要穿着实验室防护手套和衣物、护目镜和面罩。
当液体飞溅或喷溅在身体上时,应立刻用充足的流动水冲洗,并立即寻求医学帮助。
1.4 合理储存细胞冻存液应在特定的温度和湿度下储存,并与其他物质隔离开来,以避免交叉污染。
2. 细胞冻存液制备细胞冻存液制备是细胞冻存过程中的关键步骤。
以下是基础的制备步骤:2.1 选用符合要求的培养液制备细胞冻存液时,必须先选用合适的培养液。
2.2 配方制备细胞冻存液根据制备细胞冻存液的配方,将所需的物质称量,依据不同的比例混合,制备高质量的细胞冻存液。
2.3 冻存液消毒制备细胞冻存液之前,必须先消毒所使用的物品和仪器设备,避免杂质污染。
3. 细胞冻存液操作3.1 操作前准备细胞冻存液在使用前需进行适当处理:将冻存液拿到通风且干燥的环境中,以促进挥发。
液体过多时,可将其置于附加设备中,使其更加稳定。
未使用完的细胞冻存液应再次密封并储存。
3.2 细胞样品操作将细胞样品含有的冻存液加入冷冻管中,并在冻存标签上记录信息。
气泡可能会阻碍样品的冷冻过程,因此应使用中性热缩管来避免气泡产生。
3.3 细胞样品冷冻将样品冷冻到以下温度区间:-70°C或-80°C,以确保其质量的长久保存。
贮存型液氮罐安全操作及保养规程
贮存型液氮罐安全操作及保养规程液氮罐广泛应用于农林牧渔、医疗、制造业、科学研究等领域,常用于液氮的贮存与运输。
由于液氮的极低温度及高压,如果不正确操作液氮罐,可能会导致严重事故发生。
因此,在使用液氮罐时,必须要严格遵守相应的安全操作与保养规程。
安全操作规程1. 液氮罐的选择液氮罐应选择正规厂家生产的,符合国家相关标准的产品,绝不能使用过期、老旧、损坏或私自改装的液氮罐。
在选择液氮罐时,需仔细查看其标识、说明书、检验合格证等文件,并进行严格的检查。
2. 液氮罐的安装液氮罐应安装在通风、阴凉、干燥的地方,不得在易燃、易爆、腐蚀性物品周围放置。
安装时应专门配备安装工具,保证罐体垂直,稳固可靠。
安装好后,应将其放置在防滑、防震垫上,以防滑动和碰撞。
另外,要定期对液氮罐进行检查,确保其完好、有效。
3. 液氮罐使用前的准备使用液氮罐前,需要先检查液氮罐是否漏气,是否足够贮存需要的液氮量。
同时,还需根据贮存标本的需求,选择合适的操作体系、配套仪器和培养基、冷冻剂等。
在液氮罐中出取物品时,一定要先小心扶稳液氮罐,再保证罐内无复杂情况,然后进行相关操作。
4. 液氮罐的使用操作在使用液氮罐时,应根据不同的情况,选择相应的操作方式。
对于需要随时取液氮标本的应该采取气体泵抽取液氮的方式;若要保证液氮罐温度稳定,在液氮罐内加水会起到很好的缓冲作用;若要长时间存储标本,应尽量减少液氮罐内的空气流量,以减少标本被氧化的可能性。
5. 液氮罐的清洗保养使用过程中,需要定期对液氮罐进行清洗和保养。
在清洗时,要使用干净且富含氢氧根离子的水,尽可能去除罐内的污物和杂质,并对耗损的部件进行更换或维护。
同时还需要对液氮罐的闸门、排气管道、储气量等进行检查,及时进行维护。
保养规程1. 液氮贮存室通风液氮罐的贮存房间应注意通风,保证房间内的空气流通,尤其对于密闭型液氮罐的贮存,更应考虑此问题,以利于预防液氮排放量过大对房间内人员的不利影响。
2. 液氮罐的运输和搬运在运输液氮罐时,需将其放置在固定且坚实的机动装置上,并用绳索稳固好,以防液氮罐的滑动和碰撞。
贮存型液氮罐安全操作及保养规程
贮存型液氮罐安全操作及保养规程一、操作安全规程:1.穿戴个人防护装备:操作液氮罐时,必须穿戴防护手套、护目镜、防寒服等个人防护装备,以减少对液氮的直接接触和避免受冷伤害。
2.避免大面积接触液氮:在操作液氮罐的过程中,应避免大面积暴露在液氮蒸汽中,以免引起冷危害。
3.避免液氮迅速汽化:液氮罐内液氮汽化会产生大量高压气体,如果迅速释放,可能造成液氮罐的突然破裂,因此要避免封存过多液氮或突然疏通排气。
4.安全储存液氮:液氮罐应存放在通风良好、无火源和易燃物质的地点,远离人员密集的区域,以防液氮泄漏引发事故。
5.不允许注入液氮:在液氮罐内不允许注入液氮以外的物质,以免产生危险化学反应。
6.不允许超负荷使用:液氮罐具有一定的存储容量,不可超出其设计负载,以免超负荷使用导致设备损坏或事故发生。
7.定期巡视检查:定期检查液氮罐的压力表、安全阀、密封性能等,发现异常情况要及时处理或报修。
二、保养规程:1.清洁液氮罐:使用后,应及时清除罐内残留液氮和冰层,避免结冰和堵塞。
2.定期维修和保养:定期对液氮罐进行维修和保养,包括更换密封圈、清洁各种阀门和传感器等,以确保液氮罐的正常运行。
3.正确使用液氮罐:遵守液氮罐的使用规程,不得以不正当的方式进行操作,以免造成设备损坏。
4.定期检查液位:定期检查液氮罐内液氮的液位,确保液位不过高或不过低,以保证设备的安全性和正常工作。
5.定期校准仪器:校准液氮罐内的仪器,确保仪器读数的准确性。
总结起来,液氮罐的安全操作及保养规程主要包括严格遵守操作安全规程,合理使用液氮罐,注意个人防护和环境安全,以及定期维护和保养液氮罐设备。
只有加强对液氮罐的安全操作和科学保养,才能保证液氮罐的安全使用,降低事故发生的可能性。
液氮罐使用说明简介及维护方法
液氮罐使用说明简介及维护方法一、液氮罐使用前的检查液氮罐在充填液氮之前,首先要检查外壳有无凹陷,真空排气口是否完好。
若被碰坏,真空度则会降低,严重时进气不能保温,这样罐上部会结霜,液氮损耗大,失去继续使用的价值。
其次,检查罐的内部,若有异物,必须取出,以防内胆被腐蚀。
二、液氮的充填填充液氮时要小心谨慎。
对于新罐或处于干燥状态的罐一定要缓慢填充并进行预冷,以防降温太快损坏内胆,减少使用年限。
充填液氮时不要将液氮倒在真空排气口上,以免造成真空度下降。
盖塞是用绝热材料制造的,既能防止液氮蒸发,也能起到固定提筒的作用,所以开关时要尽量减少磨损,以延长使用寿命。
三、液氮罐中液氮的贮存液氮罐贮存液体介质时,请务必要关闭进/排液阀和增压阀,必须打开放空阀。
四、液氮罐中液氮的运输液氮罐运输液氮介质时,务必保证各阀门的开关状态应和贮存时的一样,并请将包装箱底座垫在容器座圈子下,用绳索将液氮罐容器可靠地固定在汽车上,使液氮罐在运输的过程中不会摇动。
五、液氮罐中液氮的输液如果您想从液氮罐内输出液氮时,请按下列程序操作:关放空阀;开增压阀;观察压力表;当压力上升到0.05MPa(0.5kg/cm2)时,打开排液阀,即可以连续输液。
六、使用液氮罐过程中的检查使用过程中要经常检查。
可以用眼观测也可以用手触摸外壳,若发现外表挂霜,应停止使用;特别是颈管内壁附霜结冰时不宜用小刀去刮,以防颈管内壁受到破坏,造成真空不佳,而是应将液氮取出,让其自然融化。
七、液氮罐使用维护1、液氮罐只用于盛装液氮,不允许盛装其他液体;2、使用前检查容器内部是否清洁干燥;3、充液氮前要用少量液氮预冷;4、用于长期贮存时,则需要定期补充液氮,补充时机一般应在液氮剩余量为总容量的三分之一为宜;5、严禁在容器盖上放置物体和密封颈口;6、放进或取出冷冻物品时,要尽量使罐口打开时间短,以减少液氮消耗,也不要把提筒完全提出来;7、严防冲击和碰撞;8、严禁用硬物敲打颈管内的冻霜,以免损伤颈管。
细胞深低温冷冻的标准操作规程
细胞深低温冷冻的标准操作规程一、引言细胞深低温冷冻技术在生物医学研究领域具有广泛的应用,尤其是用于细胞的长期保存和病理标本的保存。
为了确保冷冻过程的可行性和效果,制定一套标准操作规程是至关重要的。
本文旨在介绍细胞深低温冷冻的标准操作规程,以期为科研工作者提供具体指导。
二、材料和设备准备1. 低温细胞冷冻液(含甘油)2. 冷冻管3. 细胞培养基4. 离心机5. 无菌操作台6. 细胞计数板7. 显微镜8. 低温保存设备(例如液氮罐)9. 温度计三、细胞处理与准备1. 准备培养基:根据细胞类型选择适宜的培养基,并进行无菌过滤。
2. 处理细胞:使用标准的细胞培养技术,将细胞移植到培养皿中,在培养箱中培养至达到所需的细胞数。
四、细胞冷冻步骤1. 收集细胞:使用细胞培养器具或离心机,将细胞从培养皿中收集到离心管中。
2. 移液:将收集到的细胞悬浮液平均分配到多个冷冻管中。
3. 加入低温细胞冷冻液:将预先配制好的低温细胞冷冻液加入冷冻管中,在慢慢滴加的同时轻轻摇匀,以保证细胞均匀悬浮。
4. 低温过程:将装有细胞的冷冻管迅速放入预冷的液氮罐中,使其迅速冷却至-196℃以下。
注意不要让液氮直接接触到冷冻管口部。
5. 低温保存:将冷冻管转移到已标识好的低温保存设备中,如液氮罐,确保保存环境的温度恒定。
五、细胞复苏步骤1. 从低温保存设备中取出冷冻管,迅速放入37℃预热的水浴中,使其快速融化。
注意不要让水进入冷冻管内。
2. 快速离心:将融化的细胞悬浮液立即转移到预先准备好的培养皿中,并进行快速离心,去除水分和残留的低温细胞冷冻液。
3. 加入培养基:将适量的预热培养基加入培养皿中,轻轻摇匀,以保证细胞均匀分布。
4. 培养:将培养皿放入恒温培养箱中,在适宜的培养条件下培养细胞。
5. 观察和评估:使用显微镜观察细胞形态和生长状态,根据需要进行进一步的实验操作。
六、安全注意事项1. 在进行细胞冷冻和复苏操作时,佩戴手套和实验室护目镜,以防止低温对人体造成伤害。
细胞冻存液氮罐使用及维护标准操作程序
细胞冻存液氮罐使用及维护标准操作程序Hessen was revised in January 20211、适用的范围:适用于细胞冻存。
2、适用的人:细胞冻存液氮罐使用的有关人员。
3、目的:确保细胞冻存液氮罐使用及维护,保证细胞冻存顺利进行。
4、程序:维护频率:每两周检查一次。
液氮不够及时补充。
冻存细胞标准程序放入细胞前,查看登记本,确认冻存盒的位置和空间,备好镊子,钥匙打开锁。
负80℃冰袋护送细胞,打开液氮罐,提起拉杆,倾斜溜走液氮,注意冻伤。
快速拉起锁条,用镊子取出盒子,记住盒盖的钝角方向,放入细胞,装回盒子。
细胞放入液氮罐后,检查液氮量的多少,及时向负责人汇报。
锁上盖子,钥匙放回原处。
4, 登记细胞存放情况。
. 细胞冻存液氮罐使用标准操作程序——复苏细胞查看登记本,明确细胞的存储位置。
最好二人合作。
细胞间dish里准备好培养基。
本人在缓冲间门外等候,对方快速取出细胞盒,本人取走细胞后快速解冻。
对方把细胞盒装回液氮罐。
对方检查液氮量,及时向负责人汇报。
本人细胞房出来后,及时登记细胞的存放情况。
5. 细胞冻存液氮罐的维护注意事项总原则:操作规范、快速,细胞安全,人员安全。
常规检查液氮缸是否密封,上锁。
任何人在打开液氮罐后,均要检查液氮量,并及时向负责人汇报。
节假日前,加满液氮后再离开实验室。
达到2w的假期回来后,及时加液氮。
用可移动液氮储存设备运送细胞时,设备必须是专业的,带气阀的那种,在打开设备前打开气阀,平衡内外压,以免发生爆炸。
禁用日常使用的不锈钢保温杯。
液氮罐安全操作保养规程
液氮罐安全操作保养规程液氮罐是用于贮存液氮的设备,它具有低温、高压等危险特性,在使用过程中应严格遵循操作规程和安全保养要求,以确保人身安全和设备正常运行。
本文将介绍液氮罐的安全操作保养规程。
一、设备安装1.液氮罐应安装在通风良好、无腐蚀性气体和强电磁场干扰的场所。
2.罐体应与地面保持水平,安装时应使用水平仪进行调整。
3.安装时应选择常温下具有十分抗腐蚀性的胶水,粘结齐全,无粘接间隙,结实可靠。
二、设备运行1.液氮罐应在规定的工作压力和温度范围内运行。
2.只能使用液氮和气氮进行充装,不得使用其它气体。
3.液氮罐充装时,需使用专业工具,避免裸露皮肤直接接触液态氮。
4.禁止使用火源、尖锐物等直接刺激、碰撞液氮罐体。
如遇到异常情况,应及时处理并报告有关部门。
三、设备保养1.定期检查罐体、排气口、压力表等设备的密封情况、工作状态和温度等指标是否正常。
如发现异常,应及时进行处理。
2.定期进行罐体清洗,避免罐体内形成厚冰层,以免影响罐体的正常保温效果。
3.美观保养:每月至少对罐体外壳进行一次清洗,保持外观清洁美观。
四、设备维修1.禁止私自维修液氮罐,如发现罐体有问题,应及时联系有关部门进行处理。
2.如需进行内部维护,必须对液氮罐内部排气处理,确保工作环境安全无毒无害,并由专业人员进行维护。
3.进行任何维修、保养等工作,必须在保证个人安全的前提下,谨慎进行,严格操作。
五、注意事项1.禁止在液氮罐周围散步、游玩,禁止在罐体上摆放任何物品。
2.液氮罐存放期限一般不得超过两年,如需继续使用,需重新进行检测、保养、等。
3.在使用中如发现气体泄漏、异常。
需立即停止应用,并及时排除故障。
以上是液氮罐的安全操作保养规程,务必严格遵循,加强设备的日常维护与保养,以确保设备的正常运行,保证人身安全。
液氮罐取存细胞操作规程
液氮罐取存细胞操作规程液氮罐取存细胞的操作规程是实验室中非常关键的一部分,它直接关系到细胞的保存质量和实验结果的准确性。
以下是详细的取存细胞操作规程:一. 液氮罐存细胞操作规程1.细胞准备:●选择成功培养的.健康的细胞株,确保细胞状态良好。
●配制适当的冻存液,通常包含基础培养基.血清和冷冻保护剂(如DMSO)。
2.细胞消化与重县:●使用胰酶或其他适当的消化酶对细胞进行消化。
去除培养基,并用PBS冲洗。
●消化完全后,用完全培养液悬浮细胞,并将预冷的冻存液加入细胞中,轻轻吹打混匀。
3.分装与标记:●在每支冻存管中加入适量的细胞悬液(如1ml) , 密封后标记清楚冻存细胞的名称、代数、冻存日期等信息。
●使用专门的标签或记号笔进行标记,以方便后期追踪。
4.冻存管转移:●将装有细胞的冻存管放入预先准备好的冻存盒中,然后固定在配套冻存架上。
●将冻存架转移到液氮罐中,或者直接用棉线+纱布袋缠裹冻存管投入液氮容器中,确保细胞的稳定性与安全性。
5.液氮罐维护:●定期检查液氮余量,确保液氮量充足,一般应在液氮剩余量为总容量的三分之一时及时补充。
●检查液氨罐的密封性和安全性,确保无泄漏和损坏。
●遵循液氮罐的使用说明和安全规范。
确保操作安全。
二、液氮罐取细胞操作规程1.个人防护:,●穿戴好防护服、手衰、护目镜等个人防护装备,防止液氮直接接触皮肤或眼睛。
2.打开液氮罐:●轻轻打开液氮罐的盖子,注意避免液氮溅出。
●拿出颈塞,以垂直方向快速取出冻存架或冻存盒。
3.取细胞:●根据需要取出相应的细胞冻存管,注意保持手部稳定,避免液氨溅出。
●将取出的细胞冻存管迅速放入-80°C冰箱或放倒在吸水纸上,使渗入液氮缓慢挥发或流出,避免爆管。
4.关闭液氮罐:●将其他细胞放回液氮罐中,确保冻存架或冻存盒固定好。
●盖上颈塞和盖子,确保液氮罐密封良好。
5.细胞复苏●将取出的细胞冻存管按照细胞复苏的标准流程进行复苏操作,包括快速融化、离心、重悬等步骤。
液氮冷冻仪器操作方法
液氮冷冻仪器操作方法
液氮冷冻仪器是一种常用的冷冻设备,用于快速冷冻样品和细胞。
以下是液氮冷冻仪器的基本操作方法:
1. 准备好液氮:首先确保液氮罐中有足够的液氮,液氮的温度通常在-196C左右。
2. 打开液氮冷冻仪器:将液氮冷冻仪器的开关打开,确保它处于工作状态。
3. 放置样品:将待冷冻的样品或细胞放置在冷冻仪器的冷冻舱中。
4. 启动冷冻过程:根据液氮冷冻仪器的操作说明,启动冷冻过程,通常包括设定冷冻时间和温度等参数。
5. 加入液氮:在冷冻过程中,需要定期向冷冻仪器中加入液氮,以保持温度在适宜的范围内。
6. 完成冷冻:待冷冻时间结束后,关闭液氮冷冻仪器,并取出冷冻好的样品或细胞。
需要注意的是,操作液氮冷冻仪器时,要格外小心,避免接触液氮,以免出现冷烧伤等安全问题。
另外,要严格按照操作说明进行操作,以确保安全和冷冻效果。
细胞冻存管安全操作及保养规程
细胞冻存管安全操作及保养规程细胞冻存是一种常见的细胞保存方法,它可以有效地延长细胞的使用寿命,便于研究人员保存和交流。
而细胞冻存管作为保存细胞的主要容器,其使用、管理和保养也显得非常重要。
本文将从安全操作和保养规程两个方面介绍细胞冻存管的使用方法。
安全操作一、洁净操作环境在使用细胞冻存管时,必须要保证操作环境的洁净,防止细胞受到污染或者交叉感染。
可以在无菌操作台上进行操作,使用手术器械和消毒酒精进行清洁。
二、正确标记和识别细胞冻存管中需要保存的细胞株需要准确标记并正确识别,以便日后操作和使用。
可以在外部标注管子的储存位置、样品编号和储存时间。
三、保证细胞的清洁度保存细胞前,必须保证细胞本身的清洁度。
可采用生物安全柜等设备对细胞进行分离和提纯,并利用均质器等工具将细胞分散或切碎。
四、正确放置管子保存细胞时,需要将细胞放置在标准的细胞冻存管中,保证稳定性和保存效果。
需要注意的是,应在负温度条件下操作,通常为液氮浸泡中,防止细胞被破坏。
五、避免储存超时和退化细胞冻存管中的细胞储存时间通常不应超过半年,否则细胞结果会发生退化。
在储存细胞时,应注意对细胞进行定期更换和更新,确保细胞的储存时间和生命周期。
保养规程一、清洗和消毒为防止细菌或污染介质对材料造成影响,冻存管应在使用前进行清洗和消毒。
清洗可以使用自来水冲洗,同时应清除外部标记以防沾污;消毒可以使用 70% 过氧化氢或 75% 酒精擦拭。
二、细心细致进行操作存储细胞时,应该注意操作的细节和掌握合适的方法,以避免细胞的退化和死亡。
应注意保存期限,每六个月更换一次;还有定期更新和检查,确保细胞保存情况。
三、定期维护日常使用过程中,需要对冻存管进行定期维护,以保证冻存管及冻存设备的正常运行。
可使用吸尘器清理冰箱内部,检查冻存管,确保有效密融封口。
通过以上安全操作和保养规程,细胞冻存管可以更好地进行使用和保存细胞。
细心、认真、保养和维护是细胞冻存管使用的重要要点。
细胞制备储存设备操作规程-液氮罐
细胞储存设备液氮罐的使用、维护保养标准操作程序1、目的建立一个液氮罐的使用、维护保养标准操作程序,使操作过程标准化。
2、范围本程序适用于液氮罐的使用、维护和保养与清洁。
3、职责3.1操作人员须严格按规定程序使用、保养设备,并做好日常操作和维护记录。
3.2 使用负责人负责日常巡检,提出检修申请,培训其他操作人员岗位知识。
4、内容4.1 容器只能充装液氮。
不可装入其它低温介质。
4.2 容器应放在阴凉、干燥处,室内应有良好通风以免空气中氮气过浓而引起窒息。
不要靠近热源也不要在容器上面搁放东西。
4.3 液氮温度为-196℃,操作时应有防护措施。
如戴皮、棉手套等。
双手勿裸露。
严防液氮飞溅、碰到皮肤或眼睛引起冻伤。
4.4 严禁在液氮罐的盖塞上放置物品,要让蒸发的氮气能够自然溢出。
应使用配套的盖塞,严禁使用自制的盖塞堵紧罐口,以免液氮罐内压增大,导致罐体损坏,严重的可引起安全问题。
4.5 液氮的充装:容器首次充装液氮以及长期停用后重新充装液氮时,因内胆是常温,充装切勿过快,应先少量注入,使内胆逐渐冷却,液氮沸腾现象减弱后再加快充注速度。
否则液氮会沸腾向外飞溅,引起冻伤。
液氮不宜充装过满,切勿使液面高到与罐颈管接触,不要将液氮冲在颈管上。
4.5 温度监测:通过在线温度监测系统实时记录,每周定时对数据进行保存备份。
出现异常温度应立即检查设备情况,记录温度异常原因。
注意一般每年对低温带探头设备充电一次。
4.6 液面高度检查:4.6.1 根据每次充装液氮量和理论蒸发量计算液面高度检查时间,计算公式如下:检查日期= 充装日期+ 充装液氮量(L)/工作蒸发量(L/24h)- 安全天数(5天)4.6.2 检查操作方法:用一木尺插入容器底部中心,约10~15秒钟后取出,其结霜长度即为液面高度。
切勿用空心管检查,以防液氮从管内喷出伤人。
4.6.3 应确保维持正常使用至少3天的液氮供应量。
按上述方法测定液氮高度一般小于5cm时即应补充液氮,最晚不超过5天。
细胞冻存的操作步骤
细胞冻存的操作步骤细胞冻存是一种将细胞保存在非常低的温度下,以便长期保存和使用的方法。
它被广泛应用于细胞学、生物医学研究和生物技术领域。
下面将介绍细胞冻存的操作步骤。
1. 准备工作在进行细胞冻存之前,需要做一些准备工作。
首先,准备好培养基和冻存液。
培养基是细胞生长和繁殖所必需的营养物质,而冻存液则是用于保护细胞在极低温度下的稳定性。
同时,准备好冷冻管、离心机和冷冻盒等实验工具。
2. 细胞培养将需要冻存的细胞进行培养。
将细胞分散在含有培养基的培养皿中,放入培养箱中进行培养。
培养条件可以根据细胞类型进行调整,一般需要在恒温、恒湿的环境中进行。
3. 细胞准备当细胞达到适当的生长状态后,可以开始进行细胞冻存的准备工作。
首先,将细胞从培养皿中取出,用无菌缓冲液洗涤,去除培养基和细胞碎片等杂质。
然后,使用显微镜观察细胞的形态,确保细胞的健康和完整。
4. 细胞计数使用细胞计数仪或显微镜,对细胞进行计数。
细胞计数是为了确定细胞的浓度,以便在后续步骤中制备适当的冻存液。
确保细胞计数的准确性和可重复性,可以重复计数多次并取平均值。
5. 制备冻存液根据细胞类型和要求,制备适当的冻存液。
冻存液通常包含培养基和添加剂,如凝胶剂、血清和甘油等。
这些添加剂可以提高细胞在冻存过程中的存活率和稳定性。
根据实验要求,可以调整添加剂的浓度和比例。
6. 冻存管标记在进行细胞冻存之前,需要对冻存管进行标记,以便将来识别和使用。
在冻存管上标记细胞类型、通行日期和样品编号等信息,确保实验记录的完整和准确。
7. 冻存将冻存液和细胞按照一定比例混合均匀,然后将混合液转移到冻存管中。
注意,冻存管要留出足够的空间,以便细胞冻结时膨胀。
将冻存管放入冷冻盒中,确保冻存管垂直放置,避免液体泄漏。
8. 冷冻将冷冻盒放入预先冷却好的冷冻盒中,然后将冷冻盒放入-80°C或液氮罐中进行冷冻。
冷冻的速度对细胞的存活率和质量至关重要,应尽量快速冷冻。
在冷冻过程中,细胞会形成冰晶,需要保护细胞免受冰晶的损伤。
细胞冻存液氮罐技术
细胞冻存液氮罐技术
有时候,实验室和医院需要储存细胞,进行冷冻,延长细胞的存活时间。
要达到这种效果,需要借助液氮罐和液氮保持恒温。
细胞如何保存在液氮罐中?
冷冻细胞的步骤会影响复苏过程中细胞的活力,所以使用液氮罐保存细胞时要小心谨慎,按照步骤操作。
以下信息由天池液氮罐整理,仅供参考。
1、预先配制冻存液;
2、用胰酶对细胞进行消化:倒去培养瓶中的培养基或用枪小心吸去培养板中的培养基,pbs冲洗两次,用胰酶消化细胞(尽可能温和);
3.再次用完全培养液悬浮细胞,将预冷的冻存液加入充分消化的细胞中,用滴管轻轻吹匀。
4、在每支冻存管中加入1ml细胞液,密封后标记冻存细胞名称和冻存日期。
5、冻存步骤的细致直接关系到细胞复苏时的活力,如果有程序降温器(放在-80℃冰箱过夜,放入液氮罐)要;或者可以在4℃,2h;
再总结一句,一般细胞在-80℃存放半年左右,在液氮里可以放置更长时间。
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细胞冻存液氮罐使用及维护标准操作程序
The manuscript was revised on the evening of 2021
1、适用的范围:适用于细胞冻存。
2、适用的人:细胞冻存液氮罐使用的有关人员。
3、目的:确保细胞冻存液氮罐使用及维护,保证细胞冻存顺利进行。
4、程序:
维护频率:
每两周检查一次。
液氮不够及时补充。
冻存细胞标准程序
放入细胞前,查看登记本,确认冻存盒的位置和空间,备好镊子,钥匙打开锁。
负80℃冰袋护送细胞,打开液氮罐,提起拉杆,倾斜溜走液氮,注意冻伤。
快速拉起锁条,用镊子取出盒子,记住盒盖的钝角方向,放入细胞,装回盒子。
细胞放入液氮罐后,检查液氮量的多少,及时向负责人汇报。
锁上盖子,钥匙放回原处。
4, 登记细胞存放情况。
. 细胞冻存液氮罐使用标准操作程序——复苏细胞
查看登记本,明确细胞的存储位置。
最好二人合作。
细胞间dish里准备好培养基。
本人在缓冲间门外等候,对方快速取出细胞盒,本人取走细胞后快速解冻。
对方把细胞盒装回液氮罐。
对方检查液氮量,及时向负责人汇报。
本人细胞房出来后,及时登记细胞的存放情况。
5. 细胞冻存液氮罐的维护注意事项
总原则:操作规范、快速,细胞安全,人员安全。
常规检查液氮缸是否密封,上锁。
任何人在打开液氮罐后,均要检查液氮量,并及时向负责人汇报。
节假日前,加满液氮后再离开实验室。
达到2w的假期回来后,及时加液氮。
用可移动液氮储存设备运送细胞时,设备必须是专业的,带气阀的那种,在打开设备前打开气阀,平衡内外压,以免发生爆炸。
禁用日常使用的不锈钢保温杯。