果蝇遗传实验报告.docx

经典遗传学综合性实验

10农生1班第一组卢**

摘要通过一次杂交实验完成果蝇的单因子实脸、双因子的自由组合、三点测交及伴性遗传这4个独立杂交实验。果蝇的分类：昆虫纲，双翅目，果蝇科，果蝇属。果蝇属(Drosophila)有3000多种，我国已发现800多种，遗传学研究中常用的是黑腹果蝇（D.melanogaster)。果蝇形体小，生长迅速，繁殖率高，饲养方便，世代周期短（12天可繁殖一代），突变性状多，染色体数目少，基因组小，实验处理方便，容易重复实验，便于观察和分析,是遗传学、细胞生物学、分子生物学、发育生物学等研究中的模式动物。

关键词黑腹果蝇单因子实验双因子实验、三点测交伴性遗传

1 引言

果蝇在25℃条件下，羽化后的雌蝇一般在8小时后开始交配，两天后开始产卵。受精卵经22～24小时就可孵化成幼虫。幼虫生活4天左右即开始化蛹，化蛹前的三龄幼虫停止摄食，爬到相对干燥的表面（如培养瓶壁），起初颜色淡黄、柔软，以后逐渐硬化变成深褐色，此时即将要羽化了。刚从蛹壳中羽化出来的果蝇，虫体较肥大，呈半透明的乳白色，约1小时，蝇体即变为粗短椭圆形，双翅伸展，体色加深。遗传规律的实质：①在杂交试验中，配子形成和受精时染色体的行为跟基因的行为是一致的；②在形成配子的减数分裂过程中，凡是同源染色体及其负载的等位基因间要彼此分离，非同源染色休及其负载的非等位基因间要自由组合；③四线期伴随着同源染色休的非姊妹染色单休间片段的交换，导致连锁群的等位基因间要发生一定的重组；④位于性染色体上的基因其遗传行为与性别有关。

2材料与方法

2.1．1材料：黑腹果蝇，基本性状：

（6#）小翅、灰身、白眼、焦刚毛；

（e#）长翅、黑体、红眼、直刚毛。

2.1.2用具：显微镜、白瓷板、毛笔、麻醉瓶、培养瓶和恒温培养箱

2.1.3试剂：乙醚、无水乙醇、玉米粉、蔗糖、酵母、琼脂、丙酸。

2.2实验步骤

2．2．1果蝇培养基制备普通培养基制备。

基础培养基：A:蔗糖12.4g 、琼脂1.24g、水76mL，煮沸溶解。B：、玉米粉16.5g、水76mL，搅匀。A与B混合，加热煮至糊状，待稍冷却加入1.4g酵母和1.0 mL丙酸，搅拌均匀分装。每管培养基厚度约2.0 cm。

2. 2. 2 分离定律的验证。

亲本正反交

①正交：

父本(e)：长翅、黑体、红眼、直刚毛

母本(6)：小翅、灰身、白眼、焦刚毛；

②反交：

父本：小翅、灰身、白眼、焦刚毛；

母本：长翅、黑体、红眼、直刚毛。

注：母本均取8 h 内羽化未交配的雌蝇。

转移亲本

杂交6—7d后，F1幼虫出现，将杂交瓶中的成虫全部转移，要注意除净亲本成虫。

F1性状观察（伴性遗传）

3—4d后，出现F1成蝇，观察F1的分别统计正反交F1成蝇的性状和性别，记录在表。

2. 2. 3 自由组合的验证

F1自交

取8 h 内羽化未交配F1的成虫，在乙醚麻醉下选雌雄各5只，饲养于基础培养基中，使之随机交配。

转移亲本

杂交6—7d后，F2幼虫出现，将杂交瓶中的成虫全部转移，要注意除净亲本成虫。

观察记录F2的表现型及雌雄体的个数

2. 2. 4 三点测验计算遗传距离

F1测交

取8 h 内羽化未交配F1的雌蝇与三隐性雄果蝇(6号)各5只进行随机交配。

转移亲本

杂交6—7d后，F2幼虫出现，将杂交瓶中的成虫全部转移，要注意除净亲本成虫。

观察记录F2的表现型及雌雄体的个数。

2. 2. 5统计分析

3 数据记录

表1 F1代表现型记录

表3 F2代的表型及数目

4 数据分析

表4 F1代表现型及其数目分析

正交：

父本(e)：长翅、黑体、红眼、直刚毛

母本(6)：小翅、灰身、白眼、焦刚毛；

反交：

父本：小翅、灰身、白眼、焦刚毛；

母本：长翅、黑体、红眼、直刚毛。

从正反交的F1代表现型可以看出F1代均出现了性状的分离，符合孟德尔分离定律。从正反交的结果来看F1代表现型不一样且基本不符合雌雄比例为1:1的比例，故可以判断控制红眼、长翅、直刚毛的基因位于X染色体上，为伴性遗传。

表5 F2代的表型及数目分析

在连续校正之后，显著水准为0.75的情况下F2代中表型为红眼灰体、白眼灰体、红眼黑体、白眼黑体的个体数比例接近于9:3:3;1。这表明控制眼色与体色的基因位于不同的两条同源染色体上，由两对等位基因控制，在形成配子的减数分裂过程中，同源染色体及其负载的等位基因间要彼此分离，非同源染色休及其负载的非等位基因间要自由组合，形成四种表现型并符合孟德尔遗传规律、符合自由组合定律。

表6 测交子代表现型及数目分析

依以上数据可得，控制直刚毛的基因Sn、控制眼睛颜色的基因W和控制翅型的基因M 的基因座连锁在X染色体上。根据表6的资料可以估算各基因座的之间的重组率。

w与sn基因座之间的重组率=（24+15+5+3）/219=0.21461

sn与m基因座之间的重组率=（11+16+5+3）/219=0.15982

w与m基因座之间的重组率=（24+15+11+16+5+3+5+3）/219=0.37443

利用Kosambi作图函数计算各基因座的图距为：

w与sn=22.95;

sn与m=16.56

w与m=42.64

w sn m

22.95 16.56

42.64

图1 连锁遗传图

由果蝇X染色体连锁图可知：w m sn三个基因的相对顺序与距离，做出的理论连锁遗传图如图2

w sn m

19.5 15.1

34.6

图2 理论连锁遗传图

5 结果讨论

从正反交的F1代表现型可以看出F1代均出现了性状的分离，符合孟德尔分离定律。从正反交的结果来看F1代表现型不一样且基本不符合雌雄比例为1:1的比例，故可以判断控制红眼、长翅、直刚毛的基因位于X染色体上，为伴性遗传。