肌酸激酶同工酶——MB

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肌酸激酶mb同工酶偏高的原因

肌酸激酶mb同工酶偏高的原因

肌酸激酶mb同工酶偏高的原因肌酸激酶MB同工酶偏高啊,这原因还不少呢。

一、心脏问题。

1. 心肌梗死。

- 这就好比心脏的血管突然被堵住了,心肌细胞就像挨饿受困的小可怜。

这时候心肌细胞就会受损,肌酸激酶MB同工酶就会从受损的细胞里跑出来,跑到血液里,那血液里这个酶的含量就升高了。

就像家里的东西被打破了,碎片散落在外面一样。

2. 心肌炎。

- 可能是病毒啊,细菌啊这些坏家伙入侵了心脏,让心肌发炎了。

心肌细胞在炎症的折磨下变得脆弱、受损,然后肌酸激酶MB同工酶就偷偷溜到血液里,导致这个数值偏高了。

就像一群小虫子在咬心肌细胞这个小苹果,咬得千疮百孔,里面的东西就流出来了。

二、其他疾病影响。

1. 肌肉疾病。

- 比如说肌肉拉伤或者进行了超级剧烈的运动。

你想啊,肌肉要是被拉伤了,就像一根皮筋被扯坏了。

肌肉细胞受伤了,肌酸激酶MB同工酶也会跑出来,虽然这个酶主要来自心肌,但肌肉里也有少量的它。

就好像肌肉细胞这个小房子破了个洞,里面的住户(酶)就跑出来到大街(血液)上了。

2. 药物副作用。

- 有些药物就像调皮的小捣蛋鬼,吃了之后可能会对身体产生一些不好的影响。

它们可能会干扰细胞的正常工作,导致心肌或者肌肉细胞有点不正常,这样肌酸激酶MB同工酶就可能升高了。

就像药物这个小坏蛋在细胞里捣乱,把细胞里的正常秩序搞乱了,酶就跑出来了。

3. 甲状腺功能减退。

- 甲状腺就像身体里的一个小指挥官,如果它功能减退了,身体里的很多代谢啊、细胞功能啊就会受到影响。

心肌细胞也不例外,在这种不太正常的状态下,细胞可能会有轻微的损伤,肌酸激酶MB同工酶就会升高。

就像指挥官指挥不力,士兵(细胞)就容易出状况,里面的东西(酶)也就跑出来了。

肌酸激酶同工酶(CK-MB)为何大于总酶(CK)

肌酸激酶同工酶(CK-MB)为何大于总酶(CK)

肌酸激酶同工酶(CK-MB)为何大于总酶(CK)作者:罗光荣刘祖春来源:《家庭医学》2024年第12期在急诊心内科,用免疫抑制法检测血清肌酸激酶同工酶(CK-MB)活性,观察其活力单位及与肌酸激酶( CK)的比值关系,作为诊断急性心肌梗死的特异性指標、预测冠状动脉再通的治疗效果和观察病情变化等,已被临床广泛应用。

理论上说,CK应当等于CK-MM、CK-MB、CK-BB之和。

但在日常检测中偶尔发现临床血清标本中CK-MB大于总酶CK检测值,即出现CK-MB/CK倒置。

这种情况使检验工作者和临床医生产生疑惑,有些临床医生甚至怀疑检测结果的真实性。

为什么会出现这样的结果呢?下面我们就笔者医院实验室出现的一例CK-MB/CK倒置的原因进行简单分析。

一般情况下,检查结果中CK-MB应当小于CK。

当CK-MB大于CK时,大家首先会想到,一定是检测过程出错了。

笔者发现这个病例后,首先查看了当日质控,结果在控;要求化验室重新复查一次,结果依然是CK+MB高于CK。

把检测样本用生理盐水稀释5倍后再检测,CK-MB仍然高于CK,血清为淡黄色。

随后又进行了细致排查,排除了系统误差和偶然误差,排除了浓度超过线性范围的因素,排除了血样溶血、脂血和血清胆红素高等因素,结果仍然是CK-MB大于CK。

到底是什么原因导致的这种情况?其实,如果详细了解CK-MB的检测方法及检测原理,就可以从中找出原因。

首先,我们来复习下CK。

CK是由M和B两个亚单位组成的二聚体,共3种同工酶,分别为CKl (BB)、CK2(MB)、CK3 (MM),主要存在于胞浆中;另外,血清中还有少量的线粒体同工酶( CKm)。

人的心肌细胞中CK的活性较高(仅次于骨骼肌),其中CK-MB 占13%~22%(骨骼肌中<1%)。

因此,CK-MB作为心肌损伤的指标具有特异性。

一般实验室检测CK-MB采用的是免疫抑制法。

检测原理是用抗人M血清,抑制患者血清中M亚单位。

血清肌酸激酶MB同工酶测定

血清肌酸激酶MB同工酶测定

血清肌酸激酶MB同工酶测定1 检验目的指导本室工作人员规范操作本检测项目,确保检测结果的准确。

2 实验原理使用CK-M 多克隆抗体对肌酸激酶(CK)中CK-M同工酶的活性进行抑制后,采用德国临床化学会(DGKC)和国际临床化学会(IFCC)推荐的连续监测法测定余下的肌酸激酶(CK)活性。

其反应原理如下:⑴CK-MM 型同工酶 + CK-M抗体→ CK-MM型同工酶的活性被抑制;CK-MB 型同工酶+ CK-M 抗体→ 50%的CK-MB 型同工酶的活性被抑制;⑵剩余的50%无活性的CK-MB型同工酶 + N-乙酰半胱氨酸→有活性的CK-B型同工酶CK同工酶⑶磷酸肌酸 + ADP 肌酸 + ATP己糖激酶(HK)ATP + 葡萄糖 ADP + 葡萄糖-6-磷酸(G6P-DH)葡萄糖-6-磷酸+NADP+6-磷酸葡萄糖酸+NADPH+H+式中:ADP为二磷酸腺苷;ATP为三磷酸腺苷;NADP+为氧化型辅酶II;NADPH+H+为还原型辅酶II。

在上述反应中,NADPH+H+ 的生成速率与样本中肌酸激酶B 型同工酶(CK-B)的活性成正比。

通过在波长340nm 处监测吸光度值的上升速率,即可测得样本中肌酸激酶B 型同工酶(CK-B)的活性。

肌酸激酶B 型同工酶(CK-B)活性相当于1/2肌酸激酶MB型同工酶的活性,将所测得的肌酸激酶B型同工酶(CK-B)的活性乘以2,即为肌酸激酶MB 型同工酶(CK-MB)的活性。

3 标本:3.1 病人准备:无特殊。

3.2 类型:血清或肝素血浆。

3.3 标本存放:稳定性:-20℃保存稳定4周(避光保存)。

活性损失:2~8℃保存24小时或18~22℃保存1小时至少损失10%。

3.4 标本运输:常温条件下保存运输。

血标本应尽快送往化验室,室温下放置30―45分钟,后离心,放置时间不得超过3h.血清必须吸出,转移至有盖的试管中.3.5 标本拒收标准:细菌污染的标本。

4 实验材料4.1 试剂:上海复星长征医学科学有限公司CK-MB试剂盒(沪食药监械(准)字2014第2400166号 YZB/沪 1546-40-2014)4.1.1 试剂组成试剂1(R1):D-葡萄糖27mmol/L 咪唑缓冲液60mmol/L乙酸镁14mmol/L NADP 2.7mmol/LN-乙酰半胱氨酸27mmol/L AMP 7mmol/L试剂2(R2):磷酸肌酸 160mmol/L 6-磷酸葡萄糖脱氢酶≥20KU/LADP 11mmol/L 糖激酶≥20KU/LCK-M 抗体4.1.2 试剂准备:试剂为即用式。

肌酸激酶同工酶杂化型(MB)的应用与假性增高的原因及处理

肌酸激酶同工酶杂化型(MB)的应用与假性增高的原因及处理

肌酸激酶同工酶杂化型(MB)的应用与假性增高的原因及处理作者:白冰王鹏飞史光华来源:《健康必读(上旬刊)》2019年第08期【摘 ;要】肌酸激酶同工酶(creatine kinase isoenzymes)别名为血清肌酸激酶同工酶,是一种酶类成分,它有三种同工酶形式:肌肉型、脑型、杂化型,最为广泛使用的是杂化型的肌酸激酶同工酶简称(CK-MB),它在患者患有心肌损伤的时候是较好的血清标志物,目前广泛的检测方法是速率法,在大量的检测结果中证实此法所检测的结果中有小部分为假性增高,而CK-MB质量法采用的是单克隆抗体,具有抗原抗体反应的特异性及高度专一性,与其同工酶CK-BB及CK-MM无交叉反应,可以更好的反应指标的高低,因此本文来对CK-MB的应用及检测方法上的缺陷和优势进行比较。

结合我院目前对于此种情况的处理进行探讨。

【关键词】肌酸激酶同工酶杂化型(MB);假性增高;【中图分类号】R197;;;;;;【文献标识码】A; ;;;;【文章编号】1672-3783(2019)08-0082-021 肌酸激酶同工酶的分型及CK-MB的应用1.1分型:肌肉型(MM)、脑型(BB)、杂化型(MB).肌酸激酶分子是由脑型亚单位(B)和肌型亚单位(M)组成的二聚体,正常人体组织中常含3种同工酶,按电泳快慢顺序分别为CK-BB(CK1)、CK-MB(CK2)和CK-MM(CK3)。

CK-BB主要存在于平滑肌和脑组织中,血清中几乎没有;CK-MB主要存在于心肌组织中,占血清中CK的0~4%;CK-MM主要存在于骨骼肌中,占血清中CK的96%~ 100%。

CK-MB有自己的亚型,包括MB2(组织形式)和MB1(转化形式)。

CK-MB2从心肌释放后,羧基末端被血浆羧基肽酶N水解,去掉一个赖氨酸残基转化为血清修饰亚型CK-MB1。

CK和CK-MB是心肌组织损伤的敏感指标之一,特别是CK-MB更具特异性。

心肌损伤过程中CK的升高主要是由于CK-MB的升高引起,表现为二者的同时升高。

肌酸激酶同工酶mb质量和活力方法学比较

肌酸激酶同工酶mb质量和活力方法学比较

肌酸激酶同工酶mb质量和活力方法学比较研究背景肌酸激酶同工酶(Mb)是调节传递分子磷酸肌酸化过程中关键的调控机制,在生物体代谢过程中发挥着重要作用。

肌酸激酶同工酶在高活性状态下室温保存后可以保持数小时的稳定活性。

因此,肌酸激酶同工酶的质量和活性的评估对于研究其功能和在体内发挥作用至关重要。

肌酸激酶同工酶MB的质量和活力方法学比较肌酸激酶同工酶MB质量和活性的方法有不同,根据测定方法的不同。

对它们进行方法学比较十分有必要。

1、常见的质量分析方法肌酸激酶同工酶MB质量一般采用凝胶电泳(SDS-PAGE)、ELISA和Westernblotting 等方法。

凝胶电泳(SDS-PAGE)是一种常用的电泳分析方法,它利用SDS结合Mb蛋白质改变其中的电荷,形成的规则的凝胶电泳图表明了其精细结构特性。

ELISA是一种对酶的特定性抗体反应的分析方法,可以用来测定Mb蛋白质的数量。

Westernblotting是一种特定的蛋白质细胞膜的分析方法,可以用来确定Mb蛋白质比例和种类,从而比较它们之间的分类和功能特征。

2、常见的活性测定方法肌酸激酶同工酶MB活性通常用流式细胞仪、不对称瑞达尼聚合、紫外--可见双光谱分析仪等技术进行测定。

流式细胞仪是一种特用的细胞测定技术,可以检测Mb肽亚基活性表面抗原。

不对称瑞达尼聚合(RDPC)是一种比较灵敏的活性测定方法,可以检测几乎所有的Mb类别的重要活性表面抗原,包括Mb的beta和alpha肽亚基。

此外,紫外--可见双光谱分析仪也可以测定Mb的活性,且检测范围更广。

结论肌酸激酶同工酶MB的质量和活性的测定方法种类繁多,在实验室检测中应根据实际需要选择合适的检测方法,以保证测试的准确性和可靠性。

肌酸激酶同工酶ck-mb偏高的原因

肌酸激酶同工酶ck-mb偏高的原因

肌酸激酶同工酶CK-MB是一种存在于心肌细胞中的酶,它在心肌损伤时会释放到血液中。

检测血清中CK-MB水平的变化可以用来判断心肌损伤的程度和范围。

当CK-MB水平偏高时,可能表示患者存在心肌损伤或疾病。

在本文中,我们将探讨引起CK-MB偏高的可能原因,并探讨相关的治疗和预防措施。

一、心肌梗死心肌梗死是最常见的导致CK-MB水平升高的原因之一。

当冠状动脉发生阻塞,导致心肌血液供应不足,心肌细胞缺氧坏死时,CK-MB就会释放到血液中。

急性心肌梗死患者的CK-MB水平通常会显著升高。

二、心肌炎心肌炎是指由病毒、细菌、寄生虫或自身免疫等引起的心肌炎症。

在心肌炎患者中,由于心肌细胞受损,CK-MB水平也会升高。

在此情况下,及时的抗炎治疗非常重要,以防止心肌炎引起的心脏功能障碍。

三、心肌钙化心肌钙化是一种罕见的心脏疾病,患者的心肌细胞会出现异常的钙盐沉积,导致心肌功能减弱。

CK-MB水平的升高可以反映心肌细胞的受损程度。

四、心肌损伤除了心肌梗死和心肌炎外,其他原因导致的心肌损伤,如心脏手术、外伤等,也会导致CK-MB水平的升高。

在进行心脏手术或发生外伤后,定期检测CK-MB水平可以帮助医生及时评估心肌损伤的程度。

五、其他原因除了上述常见原因外,一些其他心脏疾病(如心肌肥厚、心肌病变等)、代谢性疾病(如甲状腺功能亢进症)、药物(如一些药物的不良反应)等都可能导致CK-MB水平的升高。

当发现患者CK-MB水平异常升高时,医生需要结合病史、临床表现和其他辅助检查综合分析,以明确引起CK-MB偏高的具体原因。

CK-MB水平升高可能是心肌损伤或疾病的表现。

通过检测CK-MB水平,可以帮助医生判断心肌损伤的程度和范围,从而指导临床治疗。

但需要注意的是,CK-MB水平的升高并不一定说明患者一定存在心肌损伤,因此在临床实践中,医生需要综合分析,排除其他可能的干扰因素,以准确判断患者的病情。

在治疗上,针对引起CK-MB水平升高的具体原因采取相应的治疗措施非常重要。

ck一mb同工酶偏高的原因

ck一mb同工酶偏高的原因

ck一mb同工酶偏高的原因
ck一mb同工酶也叫肌酸激酶同工酶,偏高的原因主要有心肌梗死、其他心肌损伤、肌肉疾病及手术原因等。

肌酸激酶同工酶是广泛存在人体横纹肌当中的一个酶系,当心肌、骨骼肌等横纹肌受到损伤时,肌酸激酶同工酶就会释放入血,检测指标就会异常升高。

1、心肌梗死:肌酸激酶同工酶对心肌梗死早期诊断的灵敏度明显高于总肌酸激酶,其阳性检出率达100%,具有高度的特异性。

肌酸激酶同工酶在起病后4小时内增高,16-24小时达高峰,3-4天恢复正常,与肌酸激酶相比,其高峰出现早,消失较快,用其诊断发病时间较长的心肌梗死有困难,但对再发心肌梗死的诊断有重要价值。

其增高的程度能较准确地反映梗死的范围,高峰出现时间是否提前有助于判断溶栓治疗是否成功。

2、其他心肌损伤:其他心肌损伤如心绞痛、心包炎、慢性心房颤动、安装起搏器等,也可引起肌酸激酶同工酶的偏高。

3、肌肉疾病及手术原因:骨骼肌疾病时肌酸激酶同工酶也增高,但常小于6%,以此可与心肌损伤鉴别。

肌酸激酶同工酶偏高的原因有很多,如若发现异常建议及时就医,以免耽误疾病的诊断及治疗。

肌酸激酶同工酶(CK—MB)质控品产品技术要求万孚

肌酸激酶同工酶(CK—MB)质控品产品技术要求万孚

2.性能指标
2.1外观检查
质控品复溶前为白色或类白色疏松饼状结构,复溶后为澄清、透明液体,无沉淀、悬浮物和絮状物。

2.2包装
包装瓶为棕色玻璃瓶,盖有橡胶瓶内塞和塑料外盖;盒贴、瓶贴、标签标识应完整、清晰。

橡胶瓶内塞与玻璃配合后应无泄漏;塑料外盖应无明显划痕、崩缺。

2.3均一性
2.3.1瓶内均一性
瓶内CV≤15%。

2.3.2瓶间均一性
瓶间CV≤15%。

2.4靶值及靶值范围
2.4.1赋值程序
每批质控品均应提供本批产品的靶值和靶值范围表,并应提供赋值方法程序文件。

2.4.2赋值的准确性
用校准后的测量程序测定该质控物,检测结果应在其靶值范围内。

肌酸激酶同工酶(CK-MB)测定标准操作规程

肌酸激酶同工酶(CK-MB)测定标准操作规程

肌酸激酶同工酶(CK-MB )测定标准操作规程1.检验原理:(免疫抑制法)用抗人CK-M 抗体与病人血清共同温育,血清中的CK-M 亚单位全部被抑制,再用测定空白扣除血清中残余的腺苷激酶(AK ),测定剩余的非M-CK 活力,即代表C-BB 和CK-MB 中的B-亚基活力。

由于健康人和心脏、肌肉疾患病人血清中CK-BB 的含量极低,一般忽略不计,此等病人的非M-CK 活力实际上代表CK-MB 中的B 亚基活力。

非M-CK 活力测定方法如下:在抑制CK-M 亚单位后,磷酸肌酸和腺苷-5-二磷酸二钠(ADP.2a N )在肌酸激酶作用下,生成肌酸和腺苷-5-三磷酸二钠(ATP.2a N )。

ATP 和葡萄糖在己糖激酶(HK )催化下,生成6-磷酸葡萄糖(G6P ).G6P 在6-磷酸葡萄糖脱氢酶作用下脱氢,同时使氧化型辅酶Ⅰ(+NAD )还原成还原型辅酶Ⅰ(NADH ),后者引起340nm 吸光度的增高。

在340nm 监测NADH 的生成量,即可计算出非M-CK 的活力。

CK-M 亚单位+抗人CK-M 抗体−→−抗体-抗原复合物 磷酸肌酸+ADP −−−→−-CKM 非肌酸+ATP ATP+葡萄糖−−−→−己糖激酶ADP+6-磷酸葡萄糖 6-磷酸葡萄糖++NAD −−−→−PDHG 66-磷酸葡萄糖酸+NADH++H 2.试剂主要组成成分3.样本要求:静脉采血后立即分离血清。

新鲜无溶血血清。

在22~25℃保存8小时,2~8℃保48小时,-20℃可保存1年。

样本不可反复冻融!4.检验方法;仪器法(详见DF-603/DI-600标准操作规程)5参考范围:6.检验结果的解释:6.1样本含量超出线性范围时,建议用0.9%(W/V)的氯化钠溶液稀释样本。

建议最大稀释不超过10倍10-6.2.单位换算:ukat/L=U/L×16.67×37.检验结果的局限性7.1结果的准确性依赖于仪器的校正和测定温度、时间的控制。

肌酸激酶mb同工酶高的原因

肌酸激酶mb同工酶高的原因

肌酸激酶同工酶临床上主要是指CK-MB,是心肌细胞损伤的血清标志物之一,检查时出现偏高现象,可能是心肌损伤、骨骼肌损伤、脑组织损伤等原因有关。

肌酸激酶同工酶主要分布于心肌及骨骼肌,其次分布在脑组织和平滑肌。

1.心肌损伤:心肌细胞受损以后,细胞内的肌酸激酶同工酶释放入血,在3至4个小时迅速升高,在24小时达到高峰,持续约3至4天,是心肌损伤重要特异性指标,常出现于心肌梗死、心肌炎等。

2.骨骼肌损伤:骨骼肌受损同样会释放肌酸激酶同工酶入血,导致肌酸激酶同工酶升高。

常见于肌肉劳损、重症肌无力、肌萎缩、进行性肌营养不良、多发性肌炎、手术、创伤等情况。

3.脑组织损伤:肌酸激酶同工酶也会存在于脑组织当中,当患有脑组织病变,比如脑炎、脑出血、脑梗死等,也有可能会导致数值升高。

如出现不适的症状,请及时就医。

血清肌酸激酶mb同工酶偏高的原因

血清肌酸激酶mb同工酶偏高的原因

血清肌酸激酶mb同工酶偏高的原因
1肌酸激酶mb同工酶偏高的原因
肌酸激酶mb同工酶是肌肉中的特殊肌酸激酶,它可以反映机体的心血管疾病和肌肉损伤情况,一般情况下,血清中肌酸激酶mb同工酶正常水平在24-170U/L之间,肌酸激酶mb同工酶偏高会引起机体一些其他疾病,那么什么原因可能会导致肌酸激酶mb同工酶偏高呢?2心肌损伤
心肌损伤是最常见的引起肌酸激酶mb同工酶偏高的原因,它可以使肌酸激酶mb同工酶大量释放到血清中,进而使其活性增加,达到偏高的程度。

常见的心肌损伤有缺血性心肌梗死和心肌炎等,心肌缺血性损伤引起的出血量较少,导致血液中的肌酸激酶mb同工酶上升的情况更为常见。

3甲状腺疾病
甲状腺激素过多会出现一些典型的甲状腺疾病,如甲状腺功能亢进症和甲状腺机能减退症,它们可以导致血清中肌酸激酶mb同工酶的水平上升,以及用于消除钙磷失衡等症状。

4肌肉损伤
肌肉损伤是引起血清中肌酸激酶mb同工酶增高的常见原因。

受伤的肌肉细胞受损,会释放出大量的肌酸激酶mb同工酶,这些肌酸激
酶会直接溶解于血清中,从而使血清中的肌酸激酶mb同工酶含量大大增加。

5肝脏疾病
肝炎、肝硬化以及肝衰竭等肝脏疾病都会导致血清中肌酸激酶mb 同工酶偏高。

当肝脏受损时,肝细胞中的肌酸激酶会随血液分泌至血清中,大量的肌酸激酶会引起血清中肌酸激酶mb同工酶的含量偏高。

6结论
以上是引起血清中肌酸激酶mb同工酶偏高的常见原因,对于发生这种情况的患者,应及时了解自身的情况,以便早日发现原因并采取一定措施以尽快恢复健康。

Daudit肌酸激酶同工酶MB(CKMB)(学习资料)

Daudit肌酸激酶同工酶MB(CKMB)(学习资料)

肌酸激酶同工酶MB (CK-MB )测定试剂盒(免疫抑制法)说明书【产品名称】通用名:肌酸激酶同工酶MB (CK-MB )测定试剂盒(免疫抑制法)英文名:Creatine Kinase Isoenzymes MB (CK-MB )Assay Kit (Immuno-inhibition Method )【包装规格】a) R1:2×50ml ,R2:2×10ml ;b) R1:3×50ml ,R2:3×10ml ;c) R1:4×60ml ,R2:4×12ml ;d) R1:2×60ml ,R2:2×12ml ;e )R1:6×21ml ,R2:2×14.6ml ;f )R1:4×60ml ,R2:4×15ml ;g )R1:4×25ml ,R2:4×5ml ;h )R1:1×50ml ,R2:1×10ml ;i )R1:12×20ml ,R2:12×4ml ;j )R1:2×200ml ,R2:2×40ml ;k )R1:1×45ml ,R2:1×9ml 。

【预期用途】本试剂盒属于体外诊断试剂,用于定量检测人血清或血浆中肌酸激酶同工酶MB (CK-MB )活性。

【检验原理】肌酸激酶(CK )同工酶根据亚单元的不同,可分为CK-MB 、CK-MM 等,用特殊的抗CK-M 的抗体使血清中CK-M 亚单位全部被抑制,但不影响B 亚单位的活性。

样本中CK 的B 亚单位可催化磷酸肌酸(CrP )转变为肌酸(Cr ),同时ADP 磷酸化为A TP ,然后进行酶偶联反应,最终使NADP +转变成NADPH ,通过监测NADPH 上升的速率,计算样品中CK-MB 的活性。

CrP + ADP−→−CK Cr + A TPA TP + 葡萄糖 −→−HK 葡萄糖-6-磷酸 + ADP葡萄糖-6-磷酸 + NADP + −−→−G6PD 6-磷酸葡萄酸 + NADPH + H + 【主要组成成份】原包装的试剂盒在2℃~8℃避光保存,有效期为18个月。

人肌酸激酶同工酶MBCK

人肌酸激酶同工酶MBCK

人肌酸激酶同工酶MB(CK-MB)酶联免疫分析试剂盒使用方法检测范围:96T1 ng/ml -40 ng/ml使用目的:本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本中肌酸激酶同工酶MB(CK-MB)含量。

实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人肌酸激酶同工酶MB(CK-MB)水平。

用纯化的人肌酸激酶同工酶MB(CK-MB)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入肌酸激酶同工酶MB(CK-MB),再与HRP标记的肌酸激酶同工酶MB(CK-MB)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。

TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。

颜色的深浅和样品中的肌酸激酶同工酶MB(CK-MB)呈正相关。

用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中人肌酸激酶同工酶MB(CK-MB)浓度。

试剂盒组成1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。

若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。

操作步骤1.标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀2.加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。

在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍)。

加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。

3.温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。

4.配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。

6.加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。

7.温育:操作同3。

肌酸激酶和肌酸激酶同工酶超高的原因

肌酸激酶和肌酸激酶同工酶超高的原因

一、概述肌酸激酶(CK)和肌酸激酶同工酶(CK-MB)是人体内一种极为重要的酶,其超高的原因可能涉及多种生理和病理因素。

肌酸激酶和肌酸激酶同工酶作为临床诊断的重要指标,其异常水平对于疾病的诊断和治疗具有重要意义。

本文将对肌酸激酶和肌酸激酶同工酶超高的原因进行分析和探讨,旨在帮助读者更好地了解这一话题。

二、肌酸激酶和肌酸激酶同工酶的基本介绍1. 肌酸激酶(CK)的功能和基本特点2. 肌酸激酶同工酶(CK-MB)的功能和基本特点3. 肌酸激酶和肌酸激酶同工酶在临床诊断中的作用三、肌酸激酶和肌酸激酶同工酶超高的原因1. 心肌损伤是导致肌酸激酶和肌酸激酶同工酶超高的重要原因之一2. 骨骼肌疾病也可能导致肌酸激酶和肌酸激酶同工酶的异常上升3. 肝功能异常与肌酸激酶和肌酸激酶同工酶的异常增高之间存在一定关系4. 药物、毒素和其他疾病也可能导致肌酸激酶和肌酸激酶同工酶超高四、肌酸激酶和肌酸激酶同工酶超高的临床意义1. 对心肌梗死的早期诊断2. 对骨骼肌炎症和损伤的诊断3. 对肝功能异常的诊断和监测4. 对其他疾病的诊断和鉴别诊断五、肌酸激酶和肌酸激酶同工酶超高的治疗和预防1. 针对肌酸激酶和肌酸激酶同工酶异常增高的疾病进行相应的治疗2. 预防药物、毒素和其他疾病对肌酸激酶和肌酸激酶同工酶的影响3. 避免运动过度和损伤肌肉六、结语肌酸激酶和肌酸激酶同工酶的异常水平可能涉及多种生理和病理因素,其超高可能给机体健康带来危害。

对于肌酸激酶和肌酸激酶同工酶超高的原因进行深入了解和分析,有助于更好地指导临床诊断和治疗工作,同时也有助于预防和降低相关疾病的发病率。

希望本文能对读者有所帮助,提高大家对于这一领域的认识和了解。

七、心肌损伤是导致肌酸激酶和肌酸激酶同工酶超高的重要原因之一心肌损伤是导致肌酸激酶和肌酸激酶同工酶超高的重要原因之一。

当心肌受损或缺血缺氧时,细胞膜通透性增加,细胞内CK和CK-MB大量释放入血液,导致它们的水平升高。

血清肌酸激酶同工酶MB的实验室诊断进展

血清肌酸激酶同工酶MB的实验室诊断进展

血清肌酸激酶同工酶MB的实验室诊断进展1 CK-MB活性检测的不足1.1 早期诊断灵敏度不高:临床上要求在AMI发病6小时内就能进行诊断和治疗,因为心肌细胞缺氧超过6小时将出现不可逆的病变。

但mair报道CK-MB 活性在发病后4小时的诊断阳性率仅为5%[3],国内报道发病后5小时的阳性率约40%[4],这意味着在发病6小时内有很大部分病例的CK-MB活性还没有升高,以致于造成该指标的漏诊率偏高。

1.2 酶易于老化:CK-MB活性的酶易于老化,主要表现为酶构象改变[5]。

其引起CK-MB活性检测降低或正常的原因可能是由于过了检测时间,以致血清中酶老化使酶的催化活性降低或丧失,从而导致酶的活化能升高所致。

1.3 易受非典型CK、巨CK-1和CK-BB的干扰:CK-MB活性检测用免疫抑制法进行,其原理是在抗M亚基选择性抑制CK-MM活性的前提下,然后测定B亚基的活性,再乘以2后换算成的活力值,以U/L报告结果[5]。

因此,从方法上决定了血液中非典型CK、巨CK-1、CK-BB和CK-MM等都会产生干扰现象,导致结果偏高。

且存在一定临床假阳性,有学者已建议摈弃此法[6]。

1.4 对微小心肌损伤(MMD)难以做出有效反应:MMD指临床上不符合WHO 诊断AMI标准,但又存在着缺血性心肌损伤,有可能出现不良后果的情况。

Keffer 和Adams的实验均证实用CK-MB活性等酶学指标难以检出MMD[7],这是因为酶的分子量较大,细胞内外的浓度差较小,在MMD时CK-MB等心肌标志物难以透过细胞膜释放入血,使得在血液中的检测灵敏度降低。

1.5 其它因素的影响:据文献报道[4],CK-MB活性还受抗体(抗M亚基)不能被完全抑制;唾液酸和硫酸脂酶之间的差别会导致异质性;组织酶进入血循环发生变性,导致酶活性降低或部分丧失,使活化能升高等多因素的影响。

鉴于CK-MB活力测定存在如此多的不足,不少学者将注意力集中在一种新的检测方法,能够克服众多因素的影响,同时对临床诊断、治疗、病情的发生发展又有极大帮助的CK-MB质量检测,已引起国内外一些实验室的关注。

肌酸激酶同工酶正常值参考范围

肌酸激酶同工酶正常值参考范围

肌酸激酶同工酶正常值参考范围
肌酸激酶同工酶(CK-MB)是一种酶,通常存在于心肌组织中。

其正常值参考范围可以根据不同的实验室和测量方法有所不同,一般来说,成人男性和女性的CK-MB正常范围在0-25单位/升之间。

然而,这个范围可能会因年龄、性别、肌肉质量、肌肉损伤程度等因素而有所不同。

在实际临床中,医生会根据具体情况来解读患者的CK-MB水平,而不仅仅依赖于参考范围。

此外,CK-MB水平也会受到其他因素的影响,比如运动、肌肉损伤、注射肌肉、心肌梗死等。

因此,在解读CK-MB的结果时,医生通常会综合考虑患者的临床症状、其他心肌损伤标志物(如肌钙蛋白)、心电图等综合情况。

总之,CK-MB的正常参考范围是0-25单位/升,但实际解读需要考虑个体差异和临床情况。

如果你有任何健康问题或需要进一步了解你自己的CK-MB水平,建议咨询专业医生以获取个性化建议。

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a-L-岩藻糖苷底物测定AFU酶活的评估
元升生物科技技术研发部
1概述
a-L-岩藻糖苷酶(a-L-Fucosidase,AFU)的分类名为a-L-岩藻糖苷酶水解酶(EC3.2.1.51),催化岩藻糖苷键水解,参与含岩藻糖的低聚糖、糖肽、糖蛋白和糖脂的分解代谢。

AFU合成于细胞内,定位于溶酶体,是一种酸性水解酶,它的本质是糖蛋白。

广泛分布于人体肝、肾、胰、脑和胎盘等组织以及血清、尿液、唾液和泪液中。

AFU在人体内呈多形性,在等电聚焦电泳中AFU 可分出5~9条区带,血清中AFU除含有PI为4.68和4.84两种主要成分以外,还可见到5个次要成分。

AFU具有3型同工酶,即AFU1、AFU2和AFU3,是由1个位于第一号染色体短臂(1p34)上基因位点的2个等位基因所表达,由于不同人所表达的同工酶类型不同,所以正常人群AFU活性也有所不同,大约有10%左右的正常人血浆AFU呈低活性。

测定a-L-岩藻糖苷酶(a-L-Fucosidase,AFU)对诊断原发性肝癌(primary hepatic carcinoma,PHC)具有重要临床意义。

它是PHC的特异性标志物,可用于PHC的早期诊断.
2 原理
底物CNP-AFU在血清样本中a-L-岩藻糖苷酶酶作用下,生成产物CPNP,而产物CPNP的生成量与样本中AFU的酶活性成正比,通过测定黄色产物在405nm波长的生成速率,即可计算出样本中AFU的活性。

3 实验方法
3.1 样本瑞安市人民医院临床新鲜血清样品。

3.2 仪器和试剂CNP-AFU元升生物科技生物科技有限公司生产,批号
1213M05QH。

进口底物购自美国sigma公司,批号1013C07QH;仪器为日立7080全自动生化分析仪、抗坏血酸、胆红素、人胎盘a-L-岩藻糖苷酶均购自sigma公司,血红蛋白标准品购自上海血液中心。

3.3 试剂配制方法按常法配制,所用原料均为分析纯。

3.4 测定方法HITACHI 7080自动分析仪参数反应类型:Rate-A法;反应温
度:37℃;波长:(主)340/(次)405nm;样本:25μl,试剂250μl,读点时间6-12点。

4 实验结果
4.1 精密度评价按NCCLS评价方案,取低、中、高三个不同浓度的AFU样本,
浓度分别为25U/L、68U/L、235U/L,上、下午双份测定,连续测定20d,再每
天测1次,共测20d,结果见表1
表1 批内和批间精密度测定结果(U/L)
4.2 线性范围评价按NCCLS的评价方案,选用购自sigma公司人胎盘a-L-岩藻糖苷酶为300U/L和20U/L的高低值酶样本2份,然后2份样本等量混合产生中间值160U/L,中间值再与高低值等量混合,产生230U/L和90U/L的5个不同梯度值样本,在仪器上以低值到高值和高值到低值分别测定,求得两次平均值,以X作为理论值,Y作为测定值进行回归分析,其方程Y=0.9986X-0.3714,r=0.9994。

表明AFU活性在300U/L范围内,线性良好。

4.3 比对实验取AFU浓度从10~200U/L的不同病人新鲜血清标本50份,分别用本公司合成底物配制的试剂与进口底物配制的试剂同时测定AFU活性,所得数据均按NCCLS文件统计,经t检验得P>0.05,y=0.9813X-0.3746;r=0.9991,表明本试剂与进口
试剂高度相关。

4.4 回收实验向250μl血清中加入50μl的生理盐水作为基础样本,测得AFU浓度为20U/L,向同体积的血清标本中分别加入50μl浓度为25U/L和80U/L的AFU酶标准品,使其终浓度分别为24.2U/L和33.3U/L的样本,每一浓度作平行管,测得其回收率为98.5%~102.4%.
4.5 干扰试验在高、低两个浓度的混合血清样本中分别加入不同浓度的胆红素、血红蛋白、抗坏血酸(VitC),然合对AFU进行测定,结果表明三酰甘油≤
5.0mmol/L、Hb≤2.5g/L、胆红素≤500μmol/L、VitC≤10g/L时经配对差异比较,均无显著干扰(P<0.05)。

而常用抗凝剂中EDTA.K2、草酸钠对检测无显著干扰,但肝素明显干扰AFU 的检测,使AFU结果出现假性偏高,其干扰机理尚不清楚。

5 结论
本公司合成的CNP-AFU底物法用于检测AFU活性较为理想,该底物在酸性条件
下,样本中的AFU将含呈色基团的底物CNP-AFU的1,4位糖苷键水解,使反应
在405nm处产生最大吸光度,通过测定吸光度的变化,即可计算出样本中AFU的
活性。

我们对公司合成的该底物用于检测AFU酶活进行其主要指标的评价,其结
果显示批内CV <2.2%,批间CV <2.4%。

三酰甘油≤5.0mmol/L、Hb≤2.5g/L、
胆红素≤500μmol/L、VitC≤10g/L时对结果无显著性干扰(P<0.05);经与进口底
物配制的试剂比对其结果高度相关,完全能满足临床检测要求。

附产品检测图(HPLC):。

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