最新马传染性贫血课件

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15、一个人炫耀什么，说明他内心缺 少什么 。。2020年8月 上午10时22分 20.8.1310:22August 13, 2020
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16、业余生活要有意义，不要越轨。2020年8月13日 星期四 10时22分31秒 10:22:3113 August 2020
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17、一个人即使已登上顶峰，也仍要 自强不 息。上 午10时22分31秒上午10时22分10:22:3120.8.13
➢ 亚急性和慢性病主要是脾、肝、肾、心脏及淋巴 结等的网状内皮细胞的增生，肝脏内见有多量吞 铁细胞。长骨的骨髓红区扩大，黄髓内有红髓增 生灶，慢性严重病例骨髓呈乳白色胶冻状。
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马传染性贫血驴白细胞活疫苗
➢用马传染性贫血病毒(EIAV)通过驴白细胞 人工驯化而制成的疫苗。为中国首创，可 刺激马、驴产生明显体液和细胞免疫应答， 保护率分别达85%以上(马)和100%(驴)。
谢谢大家
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临床症状
➢临床特征以发热(稽留热或间歇热)为主，并 有贫血、出血、黄疸、心机能紊乱、浮肿 和消瘦等症状。
➢血相变化：红细胞显著减少，血红蛋白降 低，血沉加速。白细胞减少，丙种球蛋白 增高，外周血液中出现吞铁细胞。在发热 期，嗜酸粒细胞减少或消失，退热后，淋 巴细胞增多。
➢根据临诊表现，可分为急性、亚急性、慢 性和隐性四种病型。
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➢在完成了一系列不同层面的基因对比后， 研究人员终于找到了那些缺失或突变的基 因位点，并以实验证实了马传贫疫苗的减 毒原理：这些位点中的某些突变，就是使 马传贫病毒从有毒变无毒，进而激发马体 产生免疫保护的关键所在。
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➢科学家们在HIV的基因组中引入了马传贫疫 苗株的这种突变，HIV的结构也出现了类似 马传贫疫苗株的那种变化；按照这种方法 改造的艾滋病抗原，其免疫原性也比原来 大大提高了。据此，科学家认定，把这种 马传贫疫苗的经验移植到艾滋病疫苗的设 计上是可行的。
马传染性贫血
Equine Infectious Anemia（EIA）
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马传染性贫血病简介
➢马传染性贫血，是由马传染性贫血病 毒引起马属动物的一种慢性传染病， 以病毒持续感染、反复发热和贫血为 特征，且可人畜互传，一旦发生很难 消灭。
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流行病学
➢ 病马和带毒马是本病的传染源，其血液、肝、脾、淋巴结 等均有病毒存在，发热期病马分泌物和排泄物也含有病毒。
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12、人乱于心，不宽余请。10:22:3110:22:3110:22Thursday, August 13, 2020
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13、生气是拿别人做错的事来惩罚自 己。20.8.1320.8.1310:22:3110:22:31August 13, 2020
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14、抱最大的希望，作最大的努力。2020年8月13日 星期四 上午10时22分 31秒10:22:3120.8.13
➢液体苗为微黄色澄清液体。冻干苗为微黄 色海绵状疏松团块，易与瓶壁脱离，加稀 释液后迅速溶解。按瓶签注明头份，用PBS 缓冲液稀释，马、驴、骡各皮下注射2毫升。 注苗后，马需3个月，驴、骡需2个月才能 产生免疫力，免疫持续期为2年。
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诊断制剂
➢1、马传贫琼脂扩散反应抗原 毒种：驴胎肺、真皮、胸腺二倍体细胞上培养
➢ 吸血昆虫（蚊、虻等）是主要的传播媒介，也可经消化道、 呼吸道、交配、胎盘传染，也可由被病毒污染的注射针头 和诊疗器械等散播 。
➢ 仅马属动物易感，其中以马最易感，驴、骡次之，且无品 种、年龄和性别差异。
➢ 本病主要呈地方流行或散发。一般无严格的季节性和地区 性，但在吸血昆虫较多的夏秋季节及森林、沼泽地带发病 较多。在新疫区以急性型多见，病死率较高，老疫区则以 慢性型、隐性型为多，病死率较低。
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制造要点
➢驴白细wenku.baidu.com培养：动物选择，供提取驴白细 胞的驴为2~5岁无马传贫感染的健康者。
➢无菌采取血浆并分离出白细胞，加赛氏液 （Seligmarls）与牛血清混合的营养液培 养48h。接毒按3%量接毒后，继续培养。 收获病毒再培养5~7d进行，收毒冻融二次。
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质量标准
➢对马、驴接种后免疫力的产生虽较缓慢,但 免疫持续期较长，免疫保护率较高。这是 目前国际上唯一的马传染性贫血活毒疫苗, 该成果达到国际先进水平。
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毒种选择
➢毒种：马传贫驴白细胞弱毒。（毒力弱，
免疫原性良好。）
➢应符合条件：毒种病毒液含毒量对培养的
驴白细胞≥106TCID50/ml；病毒液对驴最 小感染量与免疫量≤10-5/ml；病毒液对标 准琼扩、补体结合反应的阳性血清必须有 抗原性，与补体抗原效价应在3.0以上；接 种健康马属动物不出现马传贫症状和不引 起死亡，但具有血清学反应。
➢疫苗需无菌； ➢补体结合试验效价不低于2.0； ➢驴白细胞做毒力测定不低于105TCID50/ml； ➢原苗5ml皮下注射健康马，观察3个月，每
天测温两次，每2Od进行补体结合反应检 验；须无马传贫症状；血清阳性率需达到 2/3~3/4，苗可判为合格。
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保存与使用
➢液体苗0~4℃可保存7d ，-20℃以下可保 存一年。冻干苗0~4℃可保存6个月，20℃以下可保存两年。
➢ 病毒只在马属动物白细胞及驴胎骨髓、肺、脾、 皮肤、胞腺等细胞培养时才可复制。用马属动物 以外的其它动物人工感染和进行细胞培养均未获 成功。
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➢病毒对外界的抵抗力较强。在粪便中能生 存两个半月，将粪便堆积发酵时，经30分 钟即可死亡。2%～4%氢氧化钠液和福尔 马林液，均可在5～10分钟内将其杀死， 3%来苏儿液可在20分钟内杀死。日光照射 1～4小时死亡。在-20℃左右病毒可保存毒 力达6个月到2年。病毒对热的抵抗力较弱， 煮沸立即死亡。
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马传贫疫苗研究意义
➢马传贫疫苗的研究成功，突破了慢病毒不 能免疫的理论，对慢病毒的免疫预防提供 了战略性的理论依据，蕴含着慢病毒免疫 的巨大信息，为一系列人畜慢病毒免疫的 研究开辟了新的路线，马传贫疫苗作用机 理的阐明将为AIDS疫苗的研究提供借鉴。
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➢原来，马传贫疫苗是采用传统的细胞学方 法研制出来的，这种旨在使病毒在细胞传 代培养的过程中减低毒力的方法，不但所 用的时间较长，而且由于受到技术手段的 限制，研究者只能看到它最终的结果，却 并不能了解其中的免疫机理，无从知晓一 个原本可以使动物致死的病毒究竟何时变 成有免疫保护作用的疫苗了。如今，运用 现代分子生物学技术就能弥补传统细胞学 技术知其然、不知其所以然的缺憾。
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9、 人的价值，在招收诱惑的一瞬间被决定 。20.8.1320.8.13Thurs day, August 13, 2020
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10、低头要有勇气，抬头要有低气。10:22:3110:22:3110:228/13/2020 10:22:31 AM
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11、人总是珍惜为得到。20.8.1310:22: 3110:2 2Aug -2013-Aug -20
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病理变化
➢ 急性型呈现全身败血变化。浆膜、黏膜、淋巴结 和实质脏器有弥漫性出血点(斑)。脾急性肿大， 暗红或紫红色，红髓软化，白髓增生，切面呈颗 粒状。肝肿大，黄褐色或紫红色，肝细胞索变性 与中央静脉、窦状隙淤血交织，使肝切面形成豆 蔻状或槟榔状花纹，有“豆蔻肝”或“槟榔肝” 之称。
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病原学
➢ 马传染性贫血病毒（EIAV）为RNA病毒，属于反 转录病毒科慢病毒属。病毒粒子呈圆形，有囊膜， 以出芽方式成熟和释放。
➢ 病毒有群特异性抗原，用补体结合反应和琼脂扩 散反应可以检出，主要用于本病的诊断。另还有 型特异性抗原，是各型毒株间不同的抗原，存在 于病毒粒子表面，可用病毒-血清中和试验检出， 主要用于病毒型的鉴别。本病至少有14个型。
传代适应，抗原性良好的马传贫病毒。 毒种条件：收毒后冻融三次，无菌收集。
按1.5%沉淀物制出抗原，免疫扩散法测 定效价，扩散环直径10mm以上。
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➢制造要点： 将6月龄左右驴胎肺、皮肤、胸腺等组织 制成二倍体细胞，换入等量维持液，按 2%-5%接种，培养10-15d收毒。调pH至 5.0,4℃透析15h，离心，弃上清，沉渣以 pH8.6硼酸缓冲液稀释，再加乙醚研磨， 待乙醚挥发后重复一次处理后即为抗原。
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➢抗原检验： 用含8个单位标准阳性血清，配置成含
1%标准阳性血清的1%琼脂平板，经反应 后出现沉淀环者即为合格。
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➢2、马传贫补体结合反应抗原 ➢独到特点：应用驴白细胞或驴胎肺、骨髓
传代细胞生产抗原；把小牛血清改为大牛 血清；把乙醚处理病毒培养物改为吐温-80 （非离子型表面活性剂）和乙醚等量联合 处理，大大增加抗原生产量。 ➢3、ELISA抗原
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➢ 马传贫病毒与艾滋病病毒的主要遗传信息的基因 结构完全相同，所以，只要找到马传贫病毒基因 中的有毒部分，就可以确定HIV中带毒基因的位 置；如果将HIV的这部分基因减掉后其毒性也随 之消失的话，艾滋病致人死地的谜底就将被揭开。 因此，首当其冲的是要找到马传贫病毒中这段关 键的致病基因。此时，保存了20年的马传贫疫苗 几百代传代样本就派上了大用场——各代病毒的 毒力是怎样减下来的，免疫原性是怎样提上去的， 这些信息对于艾滋病疫苗的研制有着重要的指导 作用。