第1章：组织学绪论PPT幻灯片
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(transmission electron microscope ,TEM)
电子束穿透样品(超薄切片)。放大倍数为几万至几 十万倍，分辨率可达0.2nm。标本在荧光屏上呈 黑白反差的结构影像。被重金属浸染呈黑色的结 构，称高电子密度 (electron-dense)；反之，浅 染的部分称低电子密度 (electron-lucent)。
实验室：北实验教学楼三层东侧。
注意事项： 1.穿隔离衣 2.带实验报告册、红蓝铅笔和橡皮，绘图。
目录
• 组织学的内容和意义 • 组织学发展简史和当代组织学 • 组织学的学习方法 • 组织学技术简介
一、组织学的内容和意义
概念： 组织学(histology)：研究机体微细结构及其相
关功能的科学。以显微镜观察组织切片为基本
四、组织学技术简介
组织化学术
• ⒉ 免疫组织化学术
（immunocytochemistry)
利用组织化学技术的原理，再结合免疫学方法， 则为免疫细胞化学术。主要的检测对象为肽和 蛋白质。
四、组织学技术简介
组织化学术
• ⒊ 原位杂交术
（in situ hybridization)
为核酸（DNA和RNA）组织化学术。用带有 标记物的已知碱基顺序的核酸探针，与细胞 内待测的核酸结合（杂交），从而在原位显 示该核酸。
染料性质
光镜技术
碱性染料：具有阳电荷。含氨基（-NH2)、 二甲氨基〔-N(CH3)2〕等碱性助色团。
酸性染料：具有阴电荷。含羧基（-OOH）、 羟基（-OH）或磺基（-SO3H） 等酸性助色团。
染色原理
光镜技术
嗜碱性：细胞和组织中的酸性物质或结构与碱 性染料亲和力强，易被着色。
嗜酸性：细胞和组织中的碱性物质或结构与酸 性染料亲和力强，易被着色。
四、组织学技术简介
其它技术
• 放射自显影术 • 图像分析术 • 细胞培养术 • 组织工程
正在构建的有皮肤、软骨、骨、肌腱、骨骼肌、 血管、角膜等；其中以组织工程皮肤较为成功， 已成为商品用于治疗烧伤、皮肤静脉性溃疡等疾病
二、组织学发展简史和当代组织学
当代组织学： 20世纪后期，新仪器、新技术的发明和应用； 免疫组织化学技术、原位杂交技术将组织学 引入分子水平；组织工程学技术拓展了组织学 的临床应用前景。
三、组织学的学习方法
• 审视角度 • 平面与立体 • 形态与功能
审视角度
组织水平：层次顺序、特征性结构和细胞 细胞水平：主要细胞的分布、结构特点及
方法，又称显微解剖学 (microanatomy)
细胞(cell)：机体结构和功能的基本单位，成人 约有1x1015 个、200 余种。
组织(tissue)Baidu Nhomakorabea细胞群和细胞外基质构成。
二、组织学发展简史和当代组织学
• 发展简史： 1665年英国人Hooke首先利用显微镜发现 细胞(cell)。 随后意大利学者、荷兰学者又相继发现了精子、 红细胞、肌细胞、神经细胞等。
功能 亚细胞水平：细胞的超微结构 分子水平：主要在生物化学课程讲解
平面与立体
形态与功能
舒张状态 收缩状态
四、组织学技术简介
光镜技术
• （一）光镜技术 – 石蜡切片术：适用于大多数组织样品的制作。 主要步骤： • 取材 → 固定 → 水洗 → 脱水 → 透明 → 包埋 → 切片 → 贴片 →染色染色→ 封片 。 – 其它制片方法：适用于某些特殊样品的制作，如 涂片法、铺片法、磨片法、火棉胶包埋法等。
1831年发现了细胞核，对细胞的结构有了初 步认识。
二、组织学发展简史和当代组织学
1838年德国植物学家Schladen(施来登)、 1839年动物学家Schwann（施万）分别发现 植物和动物都是由细胞组成的，细胞是植物和 动物的结构、功能和发生的基本单位。创立了 “细胞学说”。 19世纪后叶是组织学和细胞学发展的黄金时代， 放大倍数较高的显微镜，切片机和各种染料的 应用。已能较为正确地描述细胞结构，使组织 学发展为一门独立而系统的学科。
染色方法 HE染色
苏木精
嗜碱性结构： 细胞核 粗面内质网 游离核糖体等
光镜技术
伊红
嗜酸性结构：
细胞质基质 溶酶体、线粒体 等细胞器 胶原纤维等
染色方法
光镜技术
（2）、特殊染色
• HE染色法以外的所有染色法，通常是为了 显示某些用HE染色法显示不出的细胞和结 构。如： – 苏丹法——显示脂肪 – 镀银法——显示神经细胞、嗜银颗粒 – 铁苏木素法——显示心肌闰盘 – 马氏三色法——显示胰岛细胞 – 甲苯胺蓝法——显示糖胺多糖
四、组织学技术简介
光镜技术
几种特殊显微镜的应用 – 荧光显微镜 – 相差显微镜 – 暗视野显微镜 – 倒置显微镜 – 其它：共焦激光扫描显微镜、偏光显微镜、
紫外光显微镜、隧道扫描显微镜、X-射线显 微镜等。
四、组织学技术简介
电镜技术
• （二）电镜技术
发明：1932 年德国学者卢斯卡和科诺尔
• ⒈ 透射电镜术
四、组织学技术简介
电镜技术
• ⒉ 扫描电镜术
(scanning electron microscope，SEM)
观察组织表面的立体结构。如细胞表面的突 起、微绒毛、纤毛及细胞的分泌与吞噬行 为等。
四、组织学技术简介
组织化学术
（三）组织化学术( histochemistry ) ：
通过化学或物理反应原理显示组织或细胞内化 学成分，通常是使其形成有色终末产物，以便 在镜下观察，可进行定位和定量。
四、组织学技术简介
组织化学术
• 1.一般组织化学术
– PAS反应（过碘酸希夫反应，periodic acid Schiff reaction)。形成紫红色反应产物， 反应显示糖类。
– Feulgen反应。显示DNA的传统方法，先用稀 盐酸处理，使DNA分子中脱氧核糖与嘌吟之 间的连接键打开，形成醛基，再与Schiff试 剂作用显色，故此反应显示DNA。
中性：与两种染料的亲和力均不强。
染色方法
光镜技术
（1）、苏木精和伊红染色（简称 H E 染色）
苏木精(hematoxylin)： 蓝色，碱性染料，可使细胞核和胞质内的酸性 物质或结构着蓝紫色。
伊红(eosin)： 红色，酸性染料，可使细胞质、溶酶体等大多 数细胞器，以及细胞间质内的胶原纤维等碱 性物质或结构着红色。
电子束穿透样品(超薄切片)。放大倍数为几万至几 十万倍，分辨率可达0.2nm。标本在荧光屏上呈 黑白反差的结构影像。被重金属浸染呈黑色的结 构，称高电子密度 (electron-dense)；反之，浅 染的部分称低电子密度 (electron-lucent)。
实验室：北实验教学楼三层东侧。
注意事项： 1.穿隔离衣 2.带实验报告册、红蓝铅笔和橡皮，绘图。
目录
• 组织学的内容和意义 • 组织学发展简史和当代组织学 • 组织学的学习方法 • 组织学技术简介
一、组织学的内容和意义
概念： 组织学(histology)：研究机体微细结构及其相
关功能的科学。以显微镜观察组织切片为基本
四、组织学技术简介
组织化学术
• ⒉ 免疫组织化学术
（immunocytochemistry)
利用组织化学技术的原理，再结合免疫学方法， 则为免疫细胞化学术。主要的检测对象为肽和 蛋白质。
四、组织学技术简介
组织化学术
• ⒊ 原位杂交术
（in situ hybridization)
为核酸（DNA和RNA）组织化学术。用带有 标记物的已知碱基顺序的核酸探针，与细胞 内待测的核酸结合（杂交），从而在原位显 示该核酸。
染料性质
光镜技术
碱性染料：具有阳电荷。含氨基（-NH2)、 二甲氨基〔-N(CH3)2〕等碱性助色团。
酸性染料：具有阴电荷。含羧基（-OOH）、 羟基（-OH）或磺基（-SO3H） 等酸性助色团。
染色原理
光镜技术
嗜碱性：细胞和组织中的酸性物质或结构与碱 性染料亲和力强，易被着色。
嗜酸性：细胞和组织中的碱性物质或结构与酸 性染料亲和力强，易被着色。
四、组织学技术简介
其它技术
• 放射自显影术 • 图像分析术 • 细胞培养术 • 组织工程
正在构建的有皮肤、软骨、骨、肌腱、骨骼肌、 血管、角膜等；其中以组织工程皮肤较为成功， 已成为商品用于治疗烧伤、皮肤静脉性溃疡等疾病
二、组织学发展简史和当代组织学
当代组织学： 20世纪后期，新仪器、新技术的发明和应用； 免疫组织化学技术、原位杂交技术将组织学 引入分子水平；组织工程学技术拓展了组织学 的临床应用前景。
三、组织学的学习方法
• 审视角度 • 平面与立体 • 形态与功能
审视角度
组织水平：层次顺序、特征性结构和细胞 细胞水平：主要细胞的分布、结构特点及
方法，又称显微解剖学 (microanatomy)
细胞(cell)：机体结构和功能的基本单位，成人 约有1x1015 个、200 余种。
组织(tissue)Baidu Nhomakorabea细胞群和细胞外基质构成。
二、组织学发展简史和当代组织学
• 发展简史： 1665年英国人Hooke首先利用显微镜发现 细胞(cell)。 随后意大利学者、荷兰学者又相继发现了精子、 红细胞、肌细胞、神经细胞等。
功能 亚细胞水平：细胞的超微结构 分子水平：主要在生物化学课程讲解
平面与立体
形态与功能
舒张状态 收缩状态
四、组织学技术简介
光镜技术
• （一）光镜技术 – 石蜡切片术：适用于大多数组织样品的制作。 主要步骤： • 取材 → 固定 → 水洗 → 脱水 → 透明 → 包埋 → 切片 → 贴片 →染色染色→ 封片 。 – 其它制片方法：适用于某些特殊样品的制作，如 涂片法、铺片法、磨片法、火棉胶包埋法等。
1831年发现了细胞核，对细胞的结构有了初 步认识。
二、组织学发展简史和当代组织学
1838年德国植物学家Schladen(施来登)、 1839年动物学家Schwann（施万）分别发现 植物和动物都是由细胞组成的，细胞是植物和 动物的结构、功能和发生的基本单位。创立了 “细胞学说”。 19世纪后叶是组织学和细胞学发展的黄金时代， 放大倍数较高的显微镜，切片机和各种染料的 应用。已能较为正确地描述细胞结构，使组织 学发展为一门独立而系统的学科。
染色方法 HE染色
苏木精
嗜碱性结构： 细胞核 粗面内质网 游离核糖体等
光镜技术
伊红
嗜酸性结构：
细胞质基质 溶酶体、线粒体 等细胞器 胶原纤维等
染色方法
光镜技术
（2）、特殊染色
• HE染色法以外的所有染色法，通常是为了 显示某些用HE染色法显示不出的细胞和结 构。如： – 苏丹法——显示脂肪 – 镀银法——显示神经细胞、嗜银颗粒 – 铁苏木素法——显示心肌闰盘 – 马氏三色法——显示胰岛细胞 – 甲苯胺蓝法——显示糖胺多糖
四、组织学技术简介
光镜技术
几种特殊显微镜的应用 – 荧光显微镜 – 相差显微镜 – 暗视野显微镜 – 倒置显微镜 – 其它：共焦激光扫描显微镜、偏光显微镜、
紫外光显微镜、隧道扫描显微镜、X-射线显 微镜等。
四、组织学技术简介
电镜技术
• （二）电镜技术
发明：1932 年德国学者卢斯卡和科诺尔
• ⒈ 透射电镜术
四、组织学技术简介
电镜技术
• ⒉ 扫描电镜术
(scanning electron microscope，SEM)
观察组织表面的立体结构。如细胞表面的突 起、微绒毛、纤毛及细胞的分泌与吞噬行 为等。
四、组织学技术简介
组织化学术
（三）组织化学术( histochemistry ) ：
通过化学或物理反应原理显示组织或细胞内化 学成分，通常是使其形成有色终末产物，以便 在镜下观察，可进行定位和定量。
四、组织学技术简介
组织化学术
• 1.一般组织化学术
– PAS反应（过碘酸希夫反应，periodic acid Schiff reaction)。形成紫红色反应产物， 反应显示糖类。
– Feulgen反应。显示DNA的传统方法，先用稀 盐酸处理，使DNA分子中脱氧核糖与嘌吟之 间的连接键打开，形成醛基，再与Schiff试 剂作用显色，故此反应显示DNA。
中性：与两种染料的亲和力均不强。
染色方法
光镜技术
（1）、苏木精和伊红染色（简称 H E 染色）
苏木精(hematoxylin)： 蓝色，碱性染料，可使细胞核和胞质内的酸性 物质或结构着蓝紫色。
伊红(eosin)： 红色，酸性染料，可使细胞质、溶酶体等大多 数细胞器，以及细胞间质内的胶原纤维等碱 性物质或结构着红色。