人胰高血糖素样肽1(Glp-1)定量检测试剂盒(ELISA)
胰高血糖素样肽-1受体激动剂(GLP-1RAs)——艾塞那肽在2型糖尿病中的应用现状
胰高血糖素样肽-1受体激动剂（GLP-1RAs）——艾塞那肽在2型糖尿病中的应用现状摘要】健康人体内餐后胰岛素分泌总量中约有60%～70%是肠降血糖素所致，在血糖升高时，肠降血糖素抑制胰高血糖素分泌，减少肝糖生成与输出。
GLP-1RAs在治疗T2DM（2型糖尿病）时具有独特的机制：增加胰岛素分泌；减少胰高血糖素释放；降低食欲和延迟胃排空。
据有关GLP-1RAs治疗T2DM的报告：艾塞那肽可使ALC（糖化血红蛋白）下降0.8～1.1%，体重减轻1.6～3.2kg。
本文旨在简要介绍GLP-1RAs的药物动力学，药效和安全性。
【关键词】胰高血糖素样肽-1受体激动剂；艾塞那肽；糖化血红蛋白【中图分类号】R37 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752（2016）26-0192-02早在一百多年前Bayliss和Starling二人就已发现肠管萃取物可促使胰岛素分泌降低血糖。
1930年Barre, Still合作研究发现胰岛素分泌受肠道调节。
1994年Elrick等证明口服葡萄糖比静脉注射葡萄糖更能激起胰岛素应答。
随后发现主要有二种肠降血糖素：GLP-1（胰高血糖素样肽-1）和GIP（葡萄糖依赖促胰岛素分泌肽）胰高血糖素样肽-1(GLP-1)是由回肠远端和结肠的神经内分泌L细胞分泌的30或31个氨基酸残基组成，有GLP-1(7-36)NH2和GLP-1（7-37）两种亚型，前者体内稳定性好，促胰岛素分泌作用强。
GLP-1受体存在于beta细胞内，尚存在与胃、脂肪组织、骨骼肌、心、肺、脑的细胞内。
血糖增高时胰岛素释放增加，血糖降低时胰岛素释放也相应减少，改善组织对胰岛素的敏感性，减少胰岛素抵抗，促进前体细胞转化导致beta细胞增殖/新生和抑制beta细胞凋亡，延迟胃排空使胃内容物限时速进入肠道从而减少餐后血糖漂移，刺激下丘脑释放五羟色胺抑止alpha细胞释放胰高血糖素减少肝糖输出，通过中枢作用产生饱胀感减少食欲而致体重下降目前已被批准用于治疗T2DM 的GLP-1RAS有：艾塞那肽缓释艾塞那肽等种类。
胰高血糖素样肽-1(7-36)
活性GLP-1（7-36）特异性酶免试剂盒EDI™ Active GLP-1 (7-36) Specific ELISA KitEnzyme Linked ImmunoSorbent Assay (ELISA) for the Measurement the Level ofHuman Osteocalcin (1-43) and Osteocalcin (1-49)美国Epitope Diagnostics, Inc.For Research Use Only. Not for use in diagnostic procedure KT 871活性GLP-1（7-36）特异性酶免试剂盒【预期用途】该高灵敏度ELISA（酶联免疫吸附测定）试剂盒是专门用来定量检测血清样本中的胰高血糖素样肽-1（7-36）[GLP-1（1-36）]的浓度。
哺乳动物中的GLP-1肽链的基本氨基酸序列完全相同，如：小鼠、大鼠、猪、狗、猴、人等。
该试剂盒仅适用于科学研究。
【实验原理】这个ELISA的设计，研发和生产的目的是对血浆样品中的活性GLP-1（7-36）进行定量检测。
该试剂盒是基于运用两个GLP-1(7-36)特异性抗体分别与两个位点结合的“双位点夹心”技术。
将标准品、质控品、和待测样品加入链霉亲和素包被的微孔板中。
随后，将生物素偶联的的GLP-1（7-36）特异抗体和HRP标记的GLP-1(7-36)特异抗体混合物添加到各个孔中。
经过第一个保温孵育期后，形成了“链霉亲和素-生物素抗体- GLP-1（7-36）-HRP标记抗体”的“双位点夹心”结构，该复合体被微孔板的内壁吸附住。
游离的HRP标记抗体和缓冲基质则在洗涤过程中被冲走。
微孔板加入过氧化物酶基质（3,3',5,5'-四甲基联苯胺，TMB）并经过一段时间的反应后，用酶标仪测量吸光度。
微孔板内壁的免疫复合体的酶活性与样本中的GLP-1（7-36）浓度成正比。
glp-1试剂盒说明书
人胰高血糖素样肽1（GLP-1）ELISA 定量检测试剂盒点击放大产品型号： 48T/96T产品报价：产品特点： 本试剂盒采用双抗体两步夹心酶联免疫吸附法（ELISA ），定量检测人血清、血浆及相关液体样本中胰高血糖素样肽1（GLP-1）的含量本试剂盒只能用于科学研究，不得用于医学诊断。
人胰高血糖素样肽1（GLP －－1）定量检测试剂盒（ELISA ）使用说明书【试剂盒名称】人胰高血糖素样肽1（GLP-1）定量检测试剂盒（ELISA ）【试剂盒用途】定量检测人血清、血浆及相关液体样本中胰高血糖素样肽1（GLP-1）的含量。
【检测原理】本试剂盒采用双抗体两步夹心酶联免疫吸附法（ELISA ）。
将标准品、待测样本加入到预 先包被人胰高血糖素样肽1（GLP-1）单克隆抗体透明酶标包被板中，温育足够时间后，洗涤 除去未结合的成分，再加入酶标工作液，温育足够时间后，洗涤除去未结合的成分。
依次加 入底物A 、B ，底物（TMB ）在辣根过氧化物酶（HRP ）催化下转化为蓝色产物，在酸的作 用下变成黄色，颜色的深浅与样品中人胰高血糖素样肽1（GLP-1）浓度呈正相关，450nm 波 长下测定OD 值，根据标准品和样品的OD 值，计算样本中人胰高血糖素样肽1（GLP-1）含量。
【试剂盒组成】1 酶标包被板12孔×8条7 显色剂A液6mL2 标准品0.3mL×6管8 显色剂B液6mL3 20倍浓缩洗涤液25mL 9 终止液6mL4 样本稀释液6mL 10 说明书1份5 特殊稀释液6mL 11 封板膜2张6 酶标试剂6mL 12 密封袋1个备注：标准品（1号→6号）浓度依次为：8、4、2、1、0.5、0.25pmol/L【需要而未提供的试剂和器材】1、37℃恒温箱2、标准规格酶标仪3、精密移液器及一次性吸头4、蒸馏水5、一次性试管6、吸水纸【操作步骤】1、准备：从冰箱取出试剂盒，室温复温平衡30分钟。
胰高血糖素样肽1_受体激动剂治疗代谢相关脂肪性肝病作用机制研究进展
胰高血糖素样肽1受体激动剂治疗代谢相关脂肪性肝病作用机制研究进展李秀1，2，李兴茂1，2，王婷3，李森21 潍坊医学院临床医学院，山东聊城252000；2 聊城市人民医院内分泌科3 聊城市人民医院中西医结合儿科重点实验室摘要：代谢相关脂肪性肝病（MAFLD）目前以控制生活方式及减重作为基础治疗，后续疾病加重及恶化不可控，亟需确切有效的药物遏制其向肝炎甚至肝纤维化等进展。
胰高血糖素样肽1受体激动剂（GLP-1RAs）因其独特的降糖机制被批准用于治疗2型糖尿病。
GLP-1RAs能够抑制食欲、减少食物摄入，具有一定减重效果；GLP-1RAs还具有减少肝脏脂肪堆积、增强脂质氧化和产热、减轻炎症的能力，从而发挥治疗MAFLD的作用。
然而现有的GLP-1 RAs治疗MAFLD相关动物实验成果不具有完全代表性，仍需要临床试验加以验证。
关键词：代谢相关脂肪性肝病；胰高血糖素样肽1受体激动剂；胰岛素抵抗；肝纤维化；肝脏炎症；细胞自噬doi：10.3969/j.issn.1002-266X.2023.32.021中图分类号：R575.5 文献标志码：A 文章编号：1002-266X（2023）32-0088-04代谢相关脂肪性肝病（MAFLD）是代谢性疾病的一种［1-3］，已成为全球慢性肝病的主要原因。
MAFLD是肥胖、高血糖、高脂血症及高血压等症候群的肝脏表现，其发病机制最经典的学说为“二次打击”学说，即首次打击是胰岛素抵抗导致脂肪在肝脏实质细胞内的过度聚集，二次打击是脂肪过度沉积导致活性氧诱导肝脏实质细胞炎症反应。
MAFLD 与2型糖尿病（T2DM）、心血管疾病、慢性肾脏疾病和某些类型肝外恶性肿瘤的发病密切相关［4］。
目前MAFLD的基础治疗以减重、改善生活方式为主，尚无确切、高效的治疗药物阻遏其发展或促进恢复。
胰高血糖素样肽1（GLP-1）是一种肠促胰岛素分泌分子，因具有控制胰岛素分泌、调节胃排空和肠道蠕动、减重等作用，被用于T2DM的治疗。
胰高血糖素样肽-1
胰高血糖素样肽-1胰高血糖素样肽-1（GLP-1）是回肠内分泌细胞分泌的一种脑肠肽〃目前主要作为2型糖尿病药物作用的靶点。
由于GLP-1可抑制胃排空〃减少肠蠕动〃故有助于控制摄食〃减轻体重。
在19例肥胖患者中进行的前瞻性安慰剂对照、随机、双盲、交叉试验中〃GLP-1皮下注射给药可增加患者餐后的饱腹感〃并使每餐的饮食量平均减少15%。
但由于GLP-1是多肽〃不能口服给药是其一大缺憾。
胰高血糖素样肽-1历史早在上世纪60年代〃麦金太尔（（McIntyre）和埃尔里克（Elrick）等人就发现〃口服葡萄糖对胰岛素分泌的促进作用明显高于静脉注射〃这种额外的效应被称为“肠促胰素效应”（见上图）〃而珀利（Perley）等人进一步研究证实〃这种“肠促胰素效应”所产生的胰岛素占进食后胰岛素总量的50%以上。
1986年〃瑙克（Nauck）等人发现〃2型糖尿病患者肠促胰素作用减退〃这提示〃肠促胰素系统异常可能是2型糖尿病的发病机制之一。
随着细胞和分子生物学的发展〃肠促胰素这层神秘的面纱被慢慢揭开〃研究证实〃肠促胰素是人体内一种肠源性激素〃在进食后〃该类激素可促进胰岛素分泌〃发挥葡萄糖浓度依赖性降糖作用。
肠促胰素主要由GLP-1和糖依赖性胰岛素释放肽（GIP）组成〃其中GLP-1在2型糖尿病的发生发展中起着更为重要的作用。
GLP-1由胰高血糖素原基因表达〃在胰岛α细胞中〃胰高血糖素原基因的主要表达产物是胰高血糖素〃而在肠黏膜的L细胞中〃前激素转换酶（PC1）将胰高血糖素原剪切为其羧基端的肽链序列〃即GLP-1。
GLP-1有2种生物活性形式〃分别为GLP-1（7-37）和GLP-1 （7-36）酰胺〃这两者仅有一个氨基酸序列不同〃GLP-1约80%的循环活性来自GLP-1（7-36）酰胺[1,2]。
胰高血糖素样肽-1作用编辑GLP-1生物学特性如何?怎样发挥降糖效应?研究已证实〃肠促胰素以葡萄糖浓度依赖性方式促进胰岛β细胞分泌胰岛素〃并减少胰岛α细胞分泌胰高血糖素（glucagon）〃从而降低血糖。
胰高血糖素样肽-1 对心血管系统的保护作用
２０２２年１月第１期临床研究胰高血糖素样肽-１对心血管系统的保护作用朱明艳1，张涛2*1.盘龙区人民医院内分泌科，云南 昆明 650233；2.昆明市延安医院重症医学科，云南 昆明 650000【摘要】随着社会发展及人均寿命延长，我国糖尿病患者逐年增多，心血管病发病率也呈逐年上升趋势。
据统计心血管病是全球范围内导致人类死亡的主要原因之一。
糖尿病作为独立危险因子，会影响到心血管病发病率，威胁患者生存安全。
因此在治疗糖尿病的同时因做好心血管病的相关预防工作。
胰高血糖素样肽-1(Glucagon-like peptide-1，GLP-1)是近年来治疗糖尿病的新型药物，GLP-1的相关生物学效应研究中，最先发现的是其促进胰岛素分泌的作用，且伴有葡萄糖依赖性。
在机体进食后体内的GLP-1分泌会有所增加，进而影响胰岛素的分泌，能够帮助缓解血糖情况，血糖的范围处于正常时就不会影响胰腺来促进分泌，研究GLP-1对心血管的保护作用具有研究价值。
本研究对近年来GLP-1对心血管系统的保护作用研究情况进行综述。
【关键词】胰高血糖素样肽-1；血管内皮细胞；糖尿病；心血管系统[中图分类号]R977 [文献标识码]A [文章编号]2096-5249(2022)01-0109-03 Protective effect of glucagon like peptide-1 on cardiovascular systemZHU Ming-yan1, ZHANG Tao2* (1.Department of Endocrinology, Panlong District People’s Hospital, Kunming Yunnan 650233, China;2.Department of critical medicine, Kunming Yan’an hospital, Kunming Yunnan 650000, China)[Abstract]and the incidence rate of cardiovascular diseases has been increasing year by year. According to statistics, cardiovascular disease is one of the main causes of human death worldwide. Diabetes mellitus as an independent risk factor will affect the incidence rate of cardiovascular disease and threaten the safety of patients. Therefore, in the treatment of diabetes at the same time to do a good job in cardiovascular disease prevention. Glucagon like peptide -1(Glucagon-like peptide-1, GLP-1) is a new drug for the treatment of diabetes in recent years. In the study of biological effects of GLP-1, the first discovery is its role in promoting insulin secretion, accompanied by glucose dependence. The secretion of GLP-1 in the body will increase after eating, which will affect the secretion of insulin and help alleviate blood glucose. When the range of blood glucose is normal, it will not affect the pancreas to promote secretion, It is valuable to study the protective effect of GLP-1 on cardiovascular system. This study reviews the protective effect of GLP-1 on cardiovascular system in recent years.[Key words]-1; Vascular endothelial cells; Diabetes; Cardiovascular systemGLP-1是结肠内部及远端小肠中的L细胞在食物刺激后进行分泌的肠促胰素，受体和GLP-1结合后，通过蛋白激酶A信号进行传递，从而发挥出生物学效应，如保护胰岛功能、改善血管功能及促进胰岛素分泌等[1]。
人胰高血糖素样肽1(GLP-1)说明书
2 pmol/L
3 号标准品
150μl 的 4 号标准品加入 150μl 标准品稀释液
1 pmol/L
2 号标准品
150μl 的 3 号标准品加入 150μl 标准品稀释液
0.5 pmol/L
1 号标准品
150μl 的 2 号标准品加入 150μl 标准品稀释液
2. 加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、
12 孔×8 条
9 标准品稀释液
1.5ml×1 瓶
4 样品稀释液
6ml×1 瓶
10 说明书
1份
5 显色剂 A 液
6ml×1 瓶
11 封板膜
2张
6 显色剂 B 液
6ml×1/瓶
12 密封袋
1个
标本要求
1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能
马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融
大于标准品孔第一孔的 OD 值），请先用样品稀释液稀释一定倍数（n 倍）后再测定，计 算时请最后乘以总稀释倍数（×n×5）。 5． 封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。 6．底物请避光保存。 7．严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准. 8．所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。 9．本试剂不同批号组分不得混用。 10. 如与英文说明书有异，以英文说明书为准。 保存条件及有效期 1．试剂盒保存：；2-8℃。 2．有效期：6 个月
胰高血糖素样肽 1(GLP-1)抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入
胰高血糖素样肽 1(GLP-1)，再与 HRP 标记的胰高血糖素样肽 1(GLP-1)抗体结合，形成抗体
胰高血糖素样肽-1受体激动剂(GLP-1RA)
胰高血糖素样肽-1受体激动剂（GLP-1RA）参考《胰高血糖素样肽-1受体激动剂（GLP-1RA）临床应用医药专家共识》GLP-1RA发展过程GLP-1RA属于肠促胰素类药物。
2005年，国际上第一种GLP-1RA艾塞那肽在美国上市。
此后数年间，多种GLP-1RA进入临床，直至现今每周给药1次的超长效GLP-1RA面世。
GLP-1RA的发展经历了从短效（每日2次~3次注射）到长效（每日1次注射）再到超长效（每周1次注射）的过程。
2023 GLP-1RA指南指出，目前中国已上市的GLP-1RA有8种，均为注射剂型。
周制剂包括司美格鲁肽、度拉糖肽、洛塞那肽和艾塞那肽微球，日制剂包括利拉鲁肽和利司那肽，还有每天2次注射的艾塞那肽和每天3次注射的贝那鲁肽。
尚未在中国上市的口服司美格鲁肽也显示了良好的降糖疗效和心血管安全性。
▲GLP-1RA的分类和药代动力学特点GLP-1RA的3大适应证GLP-1RA适用于成人2型糖尿病患者的血糖控制。
所有GLP-1RA均可与二甲双胍联用；部分GLP-1RA具有单药治疗的适应证（如度拉糖肽、洛塞那肽），或与磺脲类药物、基础胰岛素联用，以达到血糖控制目标。
GLP-1RA具有心血管保护作用。
一些GLP-1RA（如利拉鲁肽、度拉糖肽、司美格鲁肽）治疗伴有动脉粥样硬化性心血管疾病（ASCVD）的2型糖尿病患者，可降低其心血管事件的发生风险。
GLP-1RA具有减重作用。
利拉鲁肽3.0 mg/d和司美格鲁肽2.4 mg/周被美国FDA批准用于成人体重管理，主要适用于体重指数（BMI）≥30 kg/m2的患者，或是BMI≥27 kg/m2同时伴有并发症的患者。
2023 GLP-1RA指南指出，利拉鲁肽3.0 mg是全球第1个被美国FDA和欧洲EMA批准用于减重的GLP-1RA。
同时，目前中国尚未批准任何GLP-1RA减肥的适应证。
GLP-1RA的4大临床作用1. 降糖作用GLP-1RA具有强效的降糖作用。
类胰岛素生长因子 1（IGF-1）定量酶联免疫检测试剂盒 说明书
类胰岛素生长因子1（IGF-1）定量酶联免疫检测试剂盒货号：AC-27F1【产品名称】通用名称：类胰岛素生长因子1（IGF-1）定量酶联免疫检测试剂盒【包装规格】96人份/盒【预期用途】试剂盒是双位点免疫酶分析法用来定量检测人类血清或血浆中类胰岛素生长因子，这个方法合并一个样本预处理的步骤，以避免结合蛋白的干扰。
【简介概述】类胰岛素生长因子1 (IGF-1)是一个有70个氨基酸的生物多肽（7650道尔顿），并且是许多出现在循环中的相关类胰岛素生长因子中的一种。
其分子显示约有50%的序列与胰岛素原的相似并且与胰岛素的一些生物活性相似。
该肽高度依赖于生长激素（GH），但有越来越多的证据表明它和生长激素的分泌无关。
IGF-1对生长发育的促进有很大影响，包括促进有丝分裂和促进软骨硫酸化。
它也促进生长激素在骨骼和其他体液的作用并协调生长。
几乎所有（超过95%）的循环血清中的IGF-1都与特定的IGF结合蛋白连接，现在已经分辨出为6个种类（IGF-BPs 1-6）。
BP3被认为是与IGF-1结合的主要蛋白，与IGF-1和酸不稳定性亚单位形成一个140000道尔顿的三聚体。
血清IGF-1的测量用于有生长病变的小孩和监测和诊断肢端肥大症。
IGF-1的浓度随着年龄、营养状况、身体成份和生长激素分泌而改变。
单个基础的IGF-1项目的检测常常用于评估小孩矮身高和急性病的病人营养供应的研究。
对于诊断肢端肥大症鉴别，单一的IGF-1诊断比一个任意的GH诊断更为可靠。
【检验原理】病人的样本用试剂短暂孵育以阻止结合蛋白质，然后稀释样本以进行检测。
在OCTEIA®IGF-1试剂盒中，一个纯化的多克隆羊抗IGF-1抗体包被在聚苯乙烯微量孔的内表面（固相或抗体捕获）。
已预处理的稀释的样本和标上辣根过氧化酶的单克隆抗IGF-1抗体在已经有抗体包被的微量孔中室温下孵育2小时。
微量孔清洗并且加入单一成份的显色底物（四甲基联苯胺）产生颜色。
胰高血糖素样肽-1
胰高血糖素样肽-1在我们的身体中，存在着许多神奇的物质，它们如同精细的调控员，默默维持着身体的正常运转。
其中，胰高血糖素样肽-1（Glucagonlike peptide-1，简称 GLP-1）就是这样一位重要的“角色”。
GLP-1 是一种由肠道内分泌细胞分泌的激素。
你可能会好奇，肠道怎么还能分泌激素呢？其实，肠道可不只是负责消化和吸收食物这么简单，它在我们身体的代谢调节中发挥着至关重要的作用。
当我们进食后，肠道中的细胞会感知到食物的存在，然后开始分泌包括 GLP-1在内的多种激素，向身体的其他部位传递信号。
那么，GLP-1 具体有哪些作用呢？首先，它最重要的功能之一就是调节血糖水平。
当血糖升高时，GLP-1 会被释放出来，刺激胰腺中的胰岛β细胞分泌胰岛素。
胰岛素大家应该都比较熟悉，它就像是一把“钥匙”，能够帮助细胞摄取血液中的葡萄糖，将其转化为能量或者储存起来，从而降低血糖水平。
与此同时，GLP-1 还能抑制胰岛α细胞分泌胰高血糖素，胰高血糖素的作用与胰岛素相反，会使血糖升高。
通过这样“一促一抑”的双重作用，GLP-1 能够有效地维持血糖的稳定。
除了调节血糖，GLP-1 对我们的食欲也有着重要的影响。
它可以作用于大脑中的食欲调节中枢，传递饱腹感的信号，让我们减少进食量。
这对于控制体重和预防肥胖具有重要的意义。
想象一下，如果我们的身体能够更敏锐地感受到饱腹感，是不是就能更好地控制饮食，避免过度摄入热量呢？此外，GLP-1 还具有保护心血管的作用。
它可以通过改善血管内皮功能、降低血压、调节血脂等多种途径，降低心血管疾病的发生风险。
对于那些患有糖尿病等代谢性疾病的患者来说，这无疑是一个额外的“保护罩”。
既然 GLP-1 有这么多重要的作用，那如果它的分泌出现问题会怎么样呢？当 GLP-1 的分泌不足或者其作用受到抵抗时，就可能导致血糖调节失衡，从而引发糖尿病等疾病。
在 2 型糖尿病患者中，常常存在着 GLP-1 分泌减少或者其作用敏感性下降的情况。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
本试剂盒只能用于科学研究，不得用于医学诊断。
人胰高血糖素样肽1(Glp-1)定量检测试剂盒（ELISA）
使用说明书
【试剂盒名称】
人胰高血糖素样肽1(Glp-1)定量检测试剂盒（ELISA）
【试剂盒用途】
定量检测人血清、血浆及相关液体样本中胰高血糖素样肽1(Glp-1)的含量。
【检测原理】
本试剂盒采用双抗体两步夹心酶联免疫吸附法（ELISA）。
将标准品、待测样本加入到预先包被人胰高血糖素样肽1(Glp-1)多克隆抗体透明酶标包被板中，温育足够时间后，洗涤除去未结合的成分，再加入酶标工作液，温育足够时间后，洗涤除去未结合的成分。
依次加入底物A、B，底物（TMB）在辣根过氧化物酶（HRP）催化下转化为蓝色产物，在酸的作用下变成黄色，颜色的深浅与样品中人胰高血糖素样肽1(Glp-1)浓度呈正相关，450nm波长下测定OD值，根据标准品和样品的OD值，计算样本中人胰高血糖素样肽1(Glp-1)含量。
【试剂盒组成】
1酶标包被板12孔×8条7底物夜A6mL
2标准品：50ng/ml0.6mL8底物夜B6mL
320倍浓缩洗涤液20mL9终止液6mL
4标准品稀释液6mL10说明书1份
5样本稀释液6mL11封板膜1张
6酶标试剂6mL12密封袋1个
备注：标准品用标准品稀释液依次稀释为：50、25、12.5、6.25、3.12、1.56ng/ml
【需要而未提供的试剂和器材】
1、37℃恒温箱
2、标准规格酶标仪
3、精密移液器及一次性吸头
4、蒸馏水
5、一次性试管
6、吸水纸
【操作步骤】
1、准备：从冰箱取出试剂盒，室温复温平衡30分钟。
2、配液：用蒸馏水将20倍浓缩洗涤液稀释成原倍的洗涤液。
3、加标准品和待测样本：取足够数量的酶标包被板，固定于框架上，分别设置标准品孔、待测样本孔和空白对照孔，记录各孔位置，在标准品孔中加入标准品50μL；待测样本孔中先加入待测样本10μL，再加样本稀释液40μL（即样本稀释5倍）；空白对照孔不加。
4、温育：37℃水浴锅或恒温箱温育30min。
5、洗板：弃去液体，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液，静置1min，甩去洗涤液，吸水纸上拍干，如此重复洗板4次（也可用洗板机按说明书操作洗板）。
6、加酶标工作液：每孔加入酶标工作液50μL，空白对照孔不加。
7、温育：重复4的操作。
8、洗板：重复5的操作。
9、显色：每孔先加入显色剂A液50μL，再加入显色剂B液50μL，37℃避光显色15min。
10、终止：取出酶标板，每孔加终止液50μL，终止反应（颜色由蓝色立转黄色）。
11、测定：以空白孔调零，在终止后15分钟内，用450nm波长测量各孔的吸光值（OD值）。
12、计算：根据标准品的浓度及对应的OD值，计算出标准曲线的直线回归方程，再根据样本的OD值，在回归方程上计算出对应的样品浓度，也可以使用各种应用软件来计算。
最终浓度为实际测定浓度乘以稀释倍数。
【样本要求】
1、样本不能含叠氮钠（NaN
3），因为叠氮钠（NaN
3
）是辣根过氧化物酶（HRP）的抑制剂。
2、标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。
若不能立即试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融。
3、样本应充分离心，不得有溶血及颗粒。
【注意事项】
1、实验严格按照说明书的操作进行，实验结果判定必须以酶标仪读数为准。
2、酶标包被板开封后如未用完，应立即装入密封袋中加干燥剂保存。
3、建议所有的标准品、样本和空白对照都做双份检测，取平均值，以减小实验误差。
4、牢记样本已经稀释5倍，计算结果乘以5才是样本实际浓度。
5、本试剂盒定量范围为0.78-50ng/ml，超过此范围，为标准曲线延伸计算所得，不做为准确定量结果，请用特殊稀释液稀释后测定准确结果（0.78-50ng/ml范围内），乘以总稀释倍数即为样本最终浓度。
6、若显色过浅，可适当延长底物温育时间。
7、为避免交叉污染，标准品、样本和空白对照每加一个就要更换一次吸头；酶标工作液、样本稀释液和底物等公共组分，要悬臂加样，不得碰到微孔；不得重复使用封板膜。
8、试剂盒保质期内使用，不同批号的试剂不得混用。
9、底物B对光敏感，避免长时间暴露于光下。
【操作程序总结】
准备试剂，样品和标准品
【检测范围】
0.78-50ng/ml
【规格】
96T/盒
【贮藏】
2-8℃，避光防潮保存。
【有效期】
6个月。