发酵工业培养基设计
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不是所有微生物都必需的,只是对于某些自己不能合成 这些成分的微生物才是必不可少的营养物质。
? 如以糖质原料为碳源的谷氨酸生产菌均为生物素缺陷型, 以生物素为生长因子。
有机氮源是生长因子的重要来源,最具 代表性的是玉米浆。
? 2、前体 P47
? ※是指加到发酵培养基中,能直接被微生 物在生物合成过程中结合到产物分子中去, 而其自身的结构并没有多大变化, 但是产 物的产量却因其加入而有较大的提高的一 类化合物。
化酶①等钾)离的子激与活细剂胞;渗透压和透性有关;
4③. ②微不但是量影许元响多素基酶质的的激氧活化剂,;还影响蛋白质的合成
① ②
一Zn般、③作C为促o、碳进M、糖n氮代、源谢Cu的等农元副素产大品部天分然作原为料酶中的,辅本基身和就激含活有剂某;些微量元素,不必
另加;
Hale Waihona Puke Baidu
③ 特例:VB12的生产,由于钴是其组成成分,Co的需要量随产物的增加而增加,
节物
1. 磷酸盐
?磷是某些蛋白质和核酸的组成成分。磷酸盐在培养基中还具有缓冲作用。
2.?盐工硫,业也酸上可常镁用用磷K酸3P。O4?3H2O、K3PO4和Na 2HPO 4?12H2O、NaH 2PO4?2H2O等磷酸
① 除了组成某些细胞的叶绿素成分外,并不参与任何细胞物质的合成;
3②. 钾处于盐离子状态时,是许多重要的酶(己糖磷酸化酶,柠檬酸脱氢酶、羧
(一)、碳源
? 碳源功能: ? 为微生物菌种的生长繁殖提供能源和合
成菌体所必需的碳成分 ? 为合成目的产物提供所需的碳成分
在微生物发酵过程中,普遍以碳水化合物作为碳源。
碳源 葡萄糖 乳糖 淀粉 蔗糖
来源 纯葡萄糖,水解淀粉 纯乳糖,乳清粉 大麦,花生粉,燕麦粉,黑麦粉,大豆粉等 甜菜糖蜜,甘蔗糖蜜,粗红糖,精白糖等
? 淀粉糊精: 需经胞外酶水解后才能利用,可克 服葡萄糖代谢过快的弊端, 价格低廉,常用玉 米淀粉、小麦淀粉、甘薯淀粉
糖蜜
糖蜜:制糖工业的副产物。将提纯的 甘蔗汁或甜菜汁蒸浓至带有 晶体的糖膏,用 离心机分出结晶糖后所余的 母液,叫“ 蜜糖”。 这种第一糖蜜中还含有多量蔗糖,可重复上法而得是第二、第三 糖蜜等。最后得到一种母液,无法再蒸浓结晶,称 废糖蜜,即糖 蜜。
种子培养基
2.5 2.5-3.5
0.15 0.04 0.4 各2ppm
发酵培养基
12.5 0.5-0.8
0.15 0.06
3 各2ppm
不同的发酵产物,不同的菌种所选择的发酵培养基是不同的。
白酒 发酵:固体发酵培养基;
果酒发酵:果汁
啤酒发酵:麦芽汁
※二、发酵培养基的成分及来源 P42
? 碳源 ? 氮源 ? 无机盐和微量元素 ?水 ? 生长调节物质
? 2、油和脂肪
脂肪酶
氧气
油、脂肪
甘油+脂肪酸
CO2+H2O ATP
※供氧要充足,否则会使有机酸积累,引起 pH 下降
常用豆油、菜油、葵花籽油、猪油、鱼油、棉籽油
? 3、有机酸 ? 会使pH上升 ? CH3COONa+O2→CO2+H2O+NaOH ? 常用:乳酸、柠檬酸、乙酸
? 4、烃和醇类 ? 正烷烃(C14~18) 、乙醇
(二)、氮源
? 功能: ? 构成菌体细胞物质和含氮代谢物
氮源种类
? 1、有机氮源 ? 种类:花生饼粉、黄豆饼粉、棉籽饼粉、
玉米浆、玉米蛋白粉、蛋白胨、酵母粉、 鱼粉、蚕蛹粉、尿素、废菌丝体、酒糟等
? ※特点:菌体生长旺盛、菌丝浓度增长迅 速
花生饼粉
酒糟
玉米浆( corn steep liquor, CSL)
发现:
?最早是从青霉素的生产中被发现的。
?加入玉米浆后,青霉素单位可从 20U/ml 增加 到100U/ml ;
?玉米浆中含有苯乙胺,它能被优先合成到青霉 素分子中,从而提高青霉素 G的产量。
发酵过程中常用的一些前体物质
产物
前体
产物
青霉素G 青霉素V 金霉素 灰黄霉素 红霉素
半合成培养基
基础培养基
加富培养基
2.
根据主要成分或使用目的分:
营养不能太丰富,尤其是有机氮源;
鉴别培养基
3. 根据无用机途盐浓分度:要适量,否则会影响孢子量选和择孢培子养颜基色;
注意pH 和湿度
孢子培养基营—养—要供求制备比孢较子丰用富;和完全,氮源和维生素含量也要高一些
种子培养基——满足菌种生长;
因此在培养基中需加入氯化钴以补充钴
(四)、水
? 发酵工厂要求恒定水源
地下水
地表水
地下水中分布最广的是钾、钠、镁、钙、氯、硫酸根和碳酸氢根 7 种离子
(五)、生长调节物质
? 1、生长因子 ? 广义说,凡是微生物生长不可缺少的微量有
机物质都称为生长因子 (又称生长素 ),包括 氨基酸、嘌呤、嘧啶、维生素等;狭义说, 生长素仅指维生素。
第三章 发酵工业培养基P41
发酵工业培养基的要求 P41
? 1、单位培养基能产生最大量的目的产物 ? 2、能使目的产物的合成速率最大 ? 3、副产物合成的量最少 ? 4、质量稳定、价格低廉、易于长期获得 ? 5、尽量不影响后处理
一、培养基的类型和用途p48
天然培养基
1. 根据来源分: 合成培养基
发酵培养基——满足大生产中大量菌体生长和繁殖以及代谢产物积累
除含有菌体生长所必须的营养物外,还要有产物所需的
特定元素、前体物质和促进剂等
生理代谢 菌种筛选 种子培养
发酵培养
谷氨酸发酵种子培养基和发酵培养基配方
培养基成分 淀粉水解糖 (%)
玉米浆(% K2HPO 4(%) MgSO 4(%)
尿素 Fe2+,Mn 2+
生产疫苗时通常用牛血清蛋白、牛肉汁等蛋白质作为碳源。
酒精、简单的有机酸、烷烃等含碳物质也可作为碳源。
甲醇作为底物生产单细胞蛋白(SCP ) 用烷烃进行有机酸、维生素等的生产
? 葡萄糖:最容易利用,但过多会加快呼吸,导 致溶氧不足、 pH 下降,抑制生长与产物合成
? 糖蜜:含糖(蔗糖)、氮类化合物、无机盐、 维生素等,常用于 丙酮丁醇生产
◇ 用亚硫酸浸泡玉米而得的浸泡液 的浓缩液,也是玉米淀粉生产的副 产品
◇ 虽然主要用作氮源,但它含有丰 富的氨基酸、核酸、维生素、无机 盐等,常用作为提供生长因子的物 质。
? 2、无机氮源 ? 种类:铵盐、硝酸盐、氨水等 ? 可引起pH变化
(三)、无机盐及微量元素
? 功能: ? 生理活性物质的组成或生理活性作用的调