实验性研究的实例

实验性研究的实例

背景简介

2002 年我国居民营养与健康调查结果显示，我国儿童青少年的视黄醇当量、维生素B1、维生素B2、钙、锌和硒的摄入量普遍偏低，且城乡营养状况存在较大差距。从另一方面，儿童青少年的超重现象越来越多，种种证据表明我国儿童青少年需要全面改善饮食结构，但由于受到经济条件限制和传统饮食文化的影响，在短时期内难以实现。对于那些营养不良或营养结构不合理的少年儿童，需要合理地补充多种微量营养素，对改善营养状况，满足生长发育的需求，提高运动耐力，有一定的现实意义。本研究选用特殊营养配方添加剂，通过动物实验观察其对缓解体力疲劳和改善学习记忆力能力的作用。

研究设计

一、研究对象某品种雄性小鼠，体重14～18g、鼠龄4～5星期。

二、研究因素随机分为四组：

●对照组：仅定量喂养常规食物

●低剂量组：在定量喂养常规食品基础上加喂10mg特殊营养配方添加剂

●中剂量组：在定量喂养常规食品基础上加喂20mg特殊营养配方添加剂

●高剂量组: 在定量喂养常规食品基础上加喂30mg特殊营养配方添加剂

三、效应指标：由于本研究目标是考察特殊营养配方添加剂能否缓解体力疲劳和改

善学习记忆力能力的作用，所以对应共有两个主要效应指标，具体如下：

1. 缓解体力疲劳的有效性指标和测量方法：

负重游泳试验中的小鼠死亡时间。测量方法如下：将小鼠放入一个60 cm×60 cm×50 cm的无盖游泳箱，再服用食物1小时后，将在小鼠尾根部绑一个1g的铅条，然后置小鼠于游泳箱中游泳，水温(26±1)℃，记录每个小鼠自游泳开始至死亡的时间（s）。

2. 改善学习记忆力能力的有效性指标和测量方法：

建立为40 cm×24 cm×60 cm的电击逃避反应箱，用咖啡色绝缘板分隔成8间。

底面铺以铜栅，间距为1cm，每间4根铜栅，共24根铜栅，并且24个铜栅依次从左到右编号（1，2，…，24），12根单号铜栅（1，3，…，21，23号铜栅）并联接电源的一端，12根双号的铜栅（2，4，…，24号铜栅）并联连接电源的另一端。在不通电的情况下，将小鼠放入小鼠跳台仪铜栅上，适应2分钟，然后让铜栅接通36 v 交流电（安全电压范围，小鼠只会遭受电击，但不会电击死亡），小鼠踩到任何两个相邻的铜栅都处于电击状况。反应箱中每间右后角置一高和直径均为5 cm 的绝缘平台。当小鼠遭受电击后跳到该绝缘平台时就可以避免电击（认为正确逃避行为）；当小鼠跳到另外两个相邻的铜栅时仍将遭受电击（认为错误逃避行为）。测量小鼠的记忆能力按下列步骤进行：

1)获得正确逃避的记忆能力：

将电击逃避反应箱处于不通电的情况下，将小鼠再次放入电击逃避反应箱铜栅上，适应3分钟，然后让铜栅通36 v 交流电，小鼠受到电击后开始逃避，直至小鼠进行正确逃避为止，并且重复三次将小鼠放入电击逃避反应箱铜栅上，每次把小鼠放入逃避反应箱的间隔休息时间为2小时，并且记录每次从

放小鼠入逃避反应箱铜栅上到正确逃避电击过程中所发生错误逃避的次数，以此作为获得挫折记忆的能力。

2)记忆力消除的程度：

在对小鼠进行挫折记忆能力试验的第6天，重新把小鼠放入电击逃避反应箱

铜栅上，适应1分钟，然后让铜栅通36 v 交流电，小鼠受到电击后开始逃避，记录从通电后直至小鼠进行正确逃避为止发生错误逃避的次数作为小鼠记

忆力消除的程度评价。

四、样本量估计

1）4组的小鼠持续游泳到死亡的持续时间比较的样本量估计：

预试验结果揭示：对小鼠持续游泳到死亡的持续时间的资料取对数后，对照组的均数和标准差为6.70±0.29，低剂量组的均数和标准差为6.95±0.3,本研究的主要目的是考察喂服特殊营养配方添加剂能否缓解体力疲劳，所以最低目标

是考察低剂量组与对照组的差异，所以取分辨能力为 6.95 6.70.25∆=-=(s)，标准差估计取较大的一个标准差样本值 0.3,0.05α=，0.1β=，则

0.05/2 1.96Z =，0.1 1.28Z =，因此每组样本量为

222

2(1.96 1.28)0.3310.25

n +== 2)4组获得正确逃避的记忆能力的样本量估计

预试验结果为对照组小鼠发生错误逃避的平均次数和标准差为12±1.3，低剂量组小鼠发生错误逃避的平均次数和标准差为10.5±1.29，所以取分辨能力为1210.5 1.5∆=-=，标准差估计取较大的一个标准差样本值1.3,

0.05α=，0.1β=，则0.05/2 1.96Z =，0.1 1.28Z =，因此每组样本量为

222

2(1.96 1.28)1.3161.5

n +== 五、统计分析

1)4组的小鼠持续游泳到死亡的持续时间比较的统计分析：

由于资料明显呈偏态分布，先试采用对数变换1ln()y y =，然后作方差分析。

统计描述的结果如下

组别样本量取对数后的均数(几何均数)±取对数后的标准差

对照组31 6.592 (728.9514) ±0.272

低剂量组31 6.948 (1040.736) ±0.286

中剂量组31 7.211 (1353.673) ±0.264

高剂量组31 7.413 (1657.125) ±0.300

正态分布的资料进行统计分析。

方差分析的P<0.0001（Stata输出结果为P= 0.0000，由于计算机存在小数点的截尾误差，所以记为P<0.0001），说明4组均数比较的结果表明：差异有统计学意义，可以认为4组资料所对应的总体均数不全相同，需要进一步作两两比较，采用

α=结果如下：

Bonferroni方法进行两两比较，0.05

两两比较的结果表明：两两比较的Bonferroni的P均小于0.05，组间的差异均有统计学意义，可以推断：喂服特殊营养配方添加剂的小鼠的持续游泳到死亡的平均时间均大于未喂服特殊营养配方添加剂的小鼠，喂服高剂量的小鼠的持续游泳到死亡的平均时间最长，喂服中剂量的小鼠的持续游泳到死亡的平均时间低于喂服高剂量的小鼠，但高于喂服低剂量的小鼠，故可以认为喂服特殊营养配方添加剂的小鼠的持续游泳到死亡的时间与喂服剂量之间存在剂量效应关系。

2)4组小鼠获得正确逃避的记忆能力的比较统计分析

残差的正态性检验结果(取)

统计描述的结果如下

组别样本量均数±标准差

对照组16 11.44±1.31

低剂量组16 10.13±1.26

中剂量组16 6.31 ±1.40

高剂量组16 5.56 ±1.31

方差分析（α＝0.05）和方差齐性检验（α＝0.10）的结果如下