规范血培养及微生物标本送检
微生物标本的采集与运送
（二）血液标本
对怀疑导管相关血流感染，又需保留导管的患者:
采集2份血液标本
1份通过外周静脉采集 1份通过导管采集。
小结
细菌培养鉴定难, 标本留取是关键, 医护人员齐挑担, 合理用药百姓赞。
3.组织：经穿刺或手术活检获得标本，穿刺组 织可放入1.5ml无菌离心管中；
4.体表伤口可接收细菌培养的条件： 鳞状上皮细胞数<10个/低倍视野，并有多
形核白细胞存在
（二）送检：立即送检，建议不超过1小时送达
（一）导管头: 采用无菌性技术，获取插入患者体内最远端的
导管段约5cm，置于无菌容器送检；不能置于生理 盐水或转运培养基中运送。
采血套数与检出率
J C lin Microbiol.2007;45:3546-3548
需氧瓶
采
血
厌氧瓶
试
管
标本不够时, 先满足需氧瓶
1、 已采集的血培养标本必须立即送检， 2. 如不能立即送检，可室温放置，但不超过2小 时，不可放冰箱。
取后不能及时送, 常温放置忌冰冻。
二、尿液标本的采集
1、中段尿 2、导管尿（不能取尿袋内的尿液） 3.膀胱穿刺尿 常用：中段尿（晨尿或在膀胱内停留4h以上的尿液）
1、抗生素治疗之前
若已使用抗生素者，应在下次用药前或血药浓度
最低时采集标本。 2、患者寒战时
发热要做血培养, 双侧双瓶少漏网；
何时采血要记清, 寒战前后菌量深；
3.发热初期或高峰时
超过发热峰值后，病原菌会逐渐被机体免疫系统 清除，从而减低检出率。
特别提示:
采集前非常关键的一步:
皮肤和瓶子的消毒
医院感染临床微生物检查标本采集与送检规范
测。 • 有腹部痉挛的患者在发病6h内采集到的血便或液状便的效果最好
。 • 疑似致病性大肠埃希菌，气单胞菌，邻单胞菌，弧菌，小肠结肠
炎耶尔森菌感染的病人，需要培养时，须另外提出申请。
的，如果送检时间超过1小时，则会影响结果，在结果报告时， 在备注处注明此情况。
• • 如不能及时送检，可使用血培养瓶（怀疑脑膜炎奈瑟菌和淋病 奈瑟菌感染时，请勿使用血培养瓶）
•
穿刺液标本采集与运送
穿刺液标本的采集方法
• • 由临床医生进行。 • • 胆汁的采集方法有三种：十二指肠引流法（以“B”管—来自胆
最有价值的细菌学检测项目
• • 血液培养 • • 脑脊液培养 • • 胆汁培养 • • 胸腹水培养 • • 关节液 • • 其他无菌体液或分泌液
我国血培养现状—阳性检出率低<10%（国外约为 15％）
• 原因何在？？？ • ? ? 血流中含菌量低 • ? ? 血液中抗菌物质 • ? ? 抗生素的应用 • ? ? 培养条件限制
• • 3标本 采集时机不合适，未抓住菌血症时期，或在刚使用抗生 素不久。采血最好在：体温升高前半小时，使用抗生素前，或停 用抗生素24小时。
• • 4 标本消毒时 消毒酒精未完全挥发。
痰液标本采集存在的问题
• • 1、随机标本采集多而非晨痰 • • 2、痰培养送检的往往不是病人深部的咳痰，而是
唾沫居多。
• 标本接种后轻轻上下颠倒混匀防止血液凝固 • 切勿冷藏
•
血培养标本采集与运送
•
血培养的指征是什么? ? ? ?
血培养的指征是什么? 答 案
血培养标本采集运送与报告标准操作规程
如果对病原学诊断不重视，会导致抗菌药物使用的泛滥和耐药菌的。
二、采血时机一旦怀疑有血流感染可能，应立即采血做血培养，最好在抗菌治疗前或停用抗菌药物24h后（或下一次抗菌药物应用前），以寒战或发热前一小时采集为宜。
三、采血流程1、准备：做好手卫生；检验血培养瓶有无破损与有效期。
2、消毒：用消毒液消毒培养瓶橡皮塞待干燥后使用；皮肤消毒用消毒液从穿刺点向外画圈消毒，至消毒区域直径达5cm以上，待消毒液挥发干燥后(常需30s以上)穿刺采血。
3、静脉穿刺和培养瓶接种：无菌穿刺取血后，排尽针头内空气直接注入血培养瓶，勿换针头（如果行第二次穿刺或用头皮针取血时，应换针头），先注入厌养培养瓶，然后注入需养培养瓶，避免注入空气，轻轻混匀以防凝固。
近年来临床普遍采用负压血培养瓶，将血从患者静脉直接吸入血培养瓶，减少污染环节。
(三)注意事项1、采血部位通常为肘静脉，疑为细菌性心内膜炎时以肘动脉或股动脉采血为宜，切忌在静滴抗菌药物的静脉处采血。
除非怀疑有导管相关的血流感染，否则不应从留置静脉或动脉导管取血，因为导管易被皮肤正常菌群污染。
2、采血次数：对于成年患者，应该同时分别在两个部位采集血标本，在两个不同部位分离到同样菌种才能确定是病原菌。
只采单一的血培养是不允许的。
在采取血培养后的2至5天内，无需重复采集血培养。
3、细菌性心内膜炎：在24h内取血3次，每次间隔不少于30min；必要时次日再做血培养2次。
4、采血量:成人每次每培养瓶采血不少于10ml，婴幼儿每次每培养瓶采血不少于2ml。
采血量过少会明显降低阳性率。
同时采集多种血样时应先注入血培养。
最好在5分钟内采集从不同部位获得2-3套血培养(40-60ml血液)5、未用的培养瓶需保存在15～25℃室温即可。
三、运送要求所有标本采集后都应立即送往实验室，最好在2h内。
如果不能与时送检，宜置于室温环境。
血培养瓶送到检验科放入培养箱前，不应暂存于冰箱内。
注明采样时间和送检时间。
规范血培养及微生物标本送检
+ 采血量不足时应优先保证需氧瓶，因临床 90%的感染为和严格的需氧菌（如假单胞杆菌和嗜 麦芽窄食单胞菌）几乎全部只能从需氧瓶 中分离到。
+ 同时采集需氧瓶和厌氧瓶的血培养标本时， 应先注入厌氧瓶，因为有些厌氧菌对氧极度 敏感，在空气中很短时间内即死亡。
血培养对CAP、HAP的检出率
+ CAP菌血症发生率： + 住院患者：4%～14% + 重症患者：18% + 大多数CAP的指南推荐住院的患者进行血培
养 + HAP菌血症发生率：10%～30% + 所有怀疑VAP的患者均应进行血培养
+
关于采血时机
+ 研究表明：细菌通常在寒战和发热前1小时 入血，此时为采集血标本进行病原菌培养 的最佳时机；
+ 可疑的亚急性心内膜炎患者每间隔30分钟 至1小时采集1套，连续采集3套标本。如果
关于皮肤和培养瓶消毒
+ 皮肤消毒程序： + 用75%酒精棉签消毒皮肤，待干30秒； + 再用碘伏（10%碘伏60秒）或碘酊（2%碘
酊30秒）消毒皮肤； + 最后使用75%酒精脱碘 + 洗必泰时间和碘酊一样（但不能用于小于2
+ 采血应尽可能在抗菌药物之前进行。 + 若患者已接受抗菌药物治疗，则应选用含
抗菌药物吸附剂的培养瓶进行血培养。
关于采血套数
+ CLSI（美国临床实验室标准化协会）建议 （2007）
+ 对于每位需要血培养的患者需要采取2至3 套
微生物检验标本采集运送程序
标本的采集和运送具有重要意义，其质量直接影响到微生物实验室检测结果的可靠性。标本的采集和处理方式不当将导致病原体分离失败，或无法确定真正致病的微生物，给医院感染的病原学诊断造成困难，因此必须规范微生物检验标本的采集、运送，保证实验检测前标本质量。
标本
类型
采集
时间
温度
转运
报告时间
2、液体粪便取1～3ml
无菌
容器
常温
≤2h
住院超过3d或入院诊断不是胃肠炎的病人，不做常规粪便培养
直肠拭子
1、小心插入拭子超越肛门括约肌，轻轻旋转拭子，在肛门隐窝取样
2、用于检测病原的拭子应能见到粪便
无菌
试管
褥疮溃疡
1、一般不选择拭子标本
2、无菌盐水清洗表面
3、如得不到活检标本或抽吸物，则用拭子用力采集损伤底部
由于褥疮溃疡拭子提供不了什么临床信息，一般选择组织活检或针头抽吸标本
1/d#表示一天中仅需送检1次，无需多次重复送检相同标本
涂
片
抗
酸
染
色
痰
量多为宜
无菌容器
无
1h出报告
至少连续送3d，每日1次
尿（24h尿沉淀或12h全夜尿沉淀）
10ml
无菌管
留取24h尿或12h全夜尿于洁净容器中，必须静止2h后，弃上清液，收集沉渣约10ml于无菌容器送检
血培养瓶有两种规格，采血量不一样。
成人瓶：
8～10ml/瓶
小儿瓶：
1～3ml/瓶
≤2h
常温
禁止冷藏
阴性：5d
阳性：随时报告危急值，最终报告及时发出
建议从不同部位各采1瓶，共2瓶同时送检。
1、采集部位通常为肘静脉，疑为细菌性心内膜炎时以肘动脉或股动脉为宜。
临床微生物标本规范化采集和送检
四)标签及申请单
每份标本都应贴上标签并标明必要信息，在检验申请单上填写足够的有关 临床资料。包括病人情况（病区、病人姓名、住院号）、标本情况（标本类 型、检验目的、采集部位、采集方法、采集时间等）和病人用药等信息。
五)标本运输
标本应在室温下15分钟内送到检验科。如果超过2小时送达，冷藏保存。
六)实验室拒收标准
烧伤患者的创面、组织活检、血培养等的细菌学检测结果对临床医生进行烧伤感染的诊断和治 疗十分重要。创面的拭子标本或组织活检标本都可以进行细菌定量培养。出现全身感染症状时，应 同时采集血培养标本。在采集表面拭子或组织活检标本之前，应对创面彻底清洁，且未局部应用抗 菌药物。
一)临床采样指征：
由于烧伤的早期创面无菌，烧伤后12小时勿采集标本。当患者出现发热、创面恶化时， 考虑采样。
二)采样要求 1.病原体培养应在抗菌药物应用前或停药一周后采集标本。 2.生殖器是开放性器官，标本采集过程中应遵循无菌操作以减少杂菌 污染。 3.阴道内有大量正常菌群存在，采取宫颈标本应避免触及阴道壁。 4.沙眼衣原体在宿主细胞内繁殖，采集时尽可能多的取上皮细胞。
尿道分泌物
三）采集方法
（1）男性：取样前至少1小时内不要小便。 用无菌生理盐水清洗尿道口，用灭菌纱布 或棉球擦干，用男性拭子采取从尿道口溢 出的脓性分泌物或将男性拭子插入尿道内 2～4厘米取分泌物，置无菌试管中。如无 脓液溢出，可从阴茎的腹面向龟头方向按 摩，促使分泌物溢出。
应尽量送检无菌部位的标本，尤其是血培养。有菌部位标本应避免“正常菌群导致 标本的污染”。人体很多部位，如下呼吸道（痰液标本）、鼻窦、皮肤伤口等处的正常 菌群极易污染标本。因此，从这些部位采集标本，要尽可能降低这些部位正常菌群或定 植细菌对标本污染的可能性。有菌部位的标本不是最理想的微生物标本。
微生物标本采集与送检
微生物标本的采集与送检一、血液培养1、血液培养的送检指征：⑴症状指征：发热（≥38℃）、皮疹、肝脾肿大、关节疼痛、神志不清、昏迷或休克。
⑵疾病指征：化脓性病灶或损害、粘膜损伤性疾病、肝脏疾病、糖尿病、血液疾病及恶性肿瘤、艾滋病、呼吸道感染或呼吸衰竭、长期输液或导管介入疾病、血液透析患者。
2、采集流程：⑴培养瓶消毒程序：75%酒精擦拭橡皮塞，作用60秒后，用无菌棉签清除橡皮塞表面残余酒精；⑵皮肤消毒程序：75%酒精擦拭静脉穿刺部位，从穿刺点向外花圈消毒，至消毒区域直径3cm以上，作用60秒，待酒精挥发干燥后采血；⑵静脉穿刺和培养瓶接种程序：用注射器无菌穿刺取血（成人：5-10ml，婴幼儿1-2ml），直接注入血培养瓶后，轻轻颠倒混匀并立即送检。
3、注意事项：⑴血培养采血最好不要和其他检验项目采血同时进行，否则应先采血培养标本；⑵切忌在静滴抗菌药物的静脉处采血；⑶不宜从静脉导管或静脉留置口取血；⑷建议在患者出现寒战、体温升高前采血。
如患者有明显的发热前期症状，在患者寒战前或寒战后1h内采血可提高阳性率；⑸应同时在不同部位或在不同时间段内采集2次以上标本，只采集一瓶的血培养标本是不允许的，因为一瓶血培养标本的培养结果很难解释是致病菌还是污染菌。
⑹一般情况下（怀疑为持续性菌血症者除外），在采血后的2-5天内，无需重复采血培养标本。
二、脑脊液培养1、脑脊液培养的送检指征：⑴症状指征：发热等感染性全身性症状、颅内压升高症状、脑膜刺激症状等。
⑵疾病指征：化脓性、非化脓性脑膜炎。
2、采集方法：检查和细胞计数、⑵经脑室导管采集：无菌操作采集脑部脓肿或活检标本的抽吸物，立即送检。
3、注意事项：⑴如果只采集了一管脑脊液，应首先送到细菌室；⑵做脑脊液培养的同时，建议同时做血培养。
三、胸腹水培养1、胸水培养的送检指征：⑴症状指征：多伴有胸痛、发热、胸腔积液。
⑵疾病指征:细菌性肺炎引起的胸膜炎、真菌感染引起的胸腔积液。
2、腹水培养的送检指征：⑴症状指征：腹部有积液伴腹痛、呕吐、肌紧张、肠鸣音弱或消失等。
血培养的规范化操作流程
血培养的规范化操作流程血培养是临床实验室常见的一种微生物学检查方法，用于检测人体内是否存在细菌、真菌或其他微生物的感染。
在进行血培养时，需要遵循一系列规范化的操作步骤，以确保结果的准确性和可靠性。
以下是血培养的规范化操作流程。
1.检测前准备：-检测人员应佩戴个人防护装备，如实验服、手套、口罩等，以防止交叉感染。
-准备好所需的试剂和设备，包括培养基、血培养瓶、离心机、恒温箱等。
-检查培养基是否过期、封装是否完好，并进行质量检验。
2.标本采集：-根据临床需要，在合适的部位采集血液标本，并确保采集时的无菌操作。
-选择适当的采样器官，如使用灌注式血培养瓶，可选择适合的瓶颈部位。
-采集标本后应立即将其送至实验室进行处理。
3.标本处理：-将血液标本倒入血培养瓶中，通常一组采用两瓶血培养瓶，以增加检测的灵敏度。
-标本处理前应在标本瓶上标记样本信息，如患者姓名、标本号码、采样时间等。
-轻轻摇晃血培养瓶，以混匀血液和培养基，避免凝块的形成。
4.培养条件：-将血培养瓶放入恒温箱中，设置适当的温度和湿度条件（通常为35-37摄氏度和5-10%CO2）。
-检测周期根据临床需要而定，通常为24小时和48小时，有时可能需要更长的时间。
-定期检查恒温箱中血培养瓶的状态，确保温度和湿度的稳定。
5.细菌培养和观察：-在设定的培养周期后，检查血培养瓶中是否有细菌的生长。
-若瓶内产生了混浊或沉淀，则可能存在细菌生长，应进行下一步鉴定和分离。
-借助显微镜观察瓶内的液体或沉淀物，观察细菌形态、染色性质、运动性等特征。
6.细菌鉴定和药敏试验：-对生长的细菌进行鉴定，可以通过生物化学试验、分子生物学方法和免疫学方法等。
-鉴定完成后，可进行药敏试验，以确定对不同抗生素的敏感性和耐药性。
-鉴定和药敏试验的结果应记录在实验记录表中，并向临床医生提供及时的检测报告。
7.结果解读和报告：-根据细菌鉴定和药敏试验的结果，对病原体是否存在感染、感染的种类以及抗生素的选择等进行解读。
51_病原学标本送检及采集规范
病原学标本送检及采集规范科室：主讲人：目录12345总则血培养标本呼吸道标本尿液标本其他标本01总则微生物标本采集的基本原则1 2 3 4在抗菌药物使用前采集标本应尽量送检无菌部位的标本，如血培养有菌部位应避免“正常菌群导致的标本污染”标本的标签和申请单的信息要填写完整严格无菌操作送检标本的种类与临床意义血脑脊液、胸腹水、无菌体液 尿脓、伤口分泌物痰、咽拭子（HI、SP除外）粪便、肛拭子微生物标本运送的基本原则1 2尽快送检，多数标本两小时内到达保证必要的运送条件不合格的生物标本标本采集至实验室接收过程间隔过长，或无标本采集时间，或保存温度不当。
标本运送条件不正确：如厌氧培养标本却在有氧条件下送检。
容器不规范：如容器有裂缝或被打破导致标本泄露、容器非无菌等。
未贴标签或贴错标签：标本与检验目的不符合，如痰培养送检尿标本患者信息与标本不符，如女性患者送检前列腺标本。
标本明显被污染，如痰标本中混有食物残渣等。
拭子上的标本已经干涸标本不符合检验要求，如痰标本以唾液为主。
标本量太少。
纳入病原学送检率的检验项目无菌体液细菌涂片合格标本细菌培养肺炎链球菌尿抗原军团菌抗原/抗体检验真菌涂片及培养血清真菌G实验或GM试验血清降钙素原检验（PCT）02血培养标本血培养采血指征可以感染患者出现以下任一指征体温＞38℃或＜36℃ 呼吸频率＞20次/分PCO2＜32mmhg寒战心率＞90次/分血培养采血指征 可以感染患者出现以下任一指征皮肤黏膜出血 多器官功能衰竭 昏迷血压降低血培养采血指征可以感染患者出现以下任一指征白细胞增多（>10×10^9/L，特别有“核左移”未成熟的或带状的白细胞增多）粒细胞减少（成熟的多核白细胞<1×10^9/L）血小板减少炎症指标如：CRP、PCT增高血培养采血指征 以下情况需多次采集血培养凡原因未明的发热，持续在1周以上，伴有心脏杂音或心脏超声发现赘生物，或原有心脏基础疾病、人工心脏瓣膜植入患者感染性心内膜炎凡原因未明的发热，持续在1周以上，伴有心脏杂音或心脏超声发现赘生物，或原有心脏基础疾病、人工心脏瓣膜植入患者导管相关血流感染导管相关血流性感染血培养留取方法短期外周导管血培养导管尖端培养1-2套外周血培养中心静脉导管血培养保留导管不保留导管1套导管血培养导管尖端培养1-2套外周血培养1-2套外周血培养血培养采血要求采血时间采血套数采血量寒战或发热初起时采集 抗菌药物使用前采集 每人每次采集2-3套每次从不同穿刺点采集儿童一般仅采集需氧瓶成人每瓶采集量8-10ml注射器采集先注入厌氧瓶蝶形针采集先注入需氧瓶血培养采血要求对于成人血培养，1个需氧瓶和1个厌氧瓶为1套，在体位一侧采集至少10-20ml血液分别注入1套血培养瓶中，每瓶5-10ml血液；同时在另一侧采集至少10-20ml血液注入第2套血培养瓶，如果抽取的血液量很少时，应首先满足需氧瓶。
规范血培养及微生物标本送检
定期对血培养及微生物标本的质量进行评 价，发现问题及时整改，以提高质量控制 水平。
质量控制结果分析
分析质量控制数据
对质量控制数据进行统计和分析， 找出存在的问题和不足之处，为 进一步改进提供依据。
制定改进措施
针对存在的问题和不足之处，制 定相应的改进措施，以提高血培 养及微生物标本的质量控制水平。
标本采集部位
血培养及微生物标本的采集时间应尽量接 近患者发病时间，以反映真实的感染情况 。
采集部位应选择无感染、无炎症、无破损 的皮肤或粘膜，以减少污染。
标本采集量
标本保存和运输
血培养及微生物标本的采集量应满足检测 需要，同时也要考虑患者的承受能力。
采集后的血培养及微生物标本应妥善保存 ，并在规定时间内送达实验室，避免长时 间暴露在不适宜的环境中。
采集时机
选择合适的时机进行血培养标本采集，通常在患者发热、寒战等感 染症状明显时采集，以提高阳性检出率。
消毒准备
采集前应对采血部位进行严格的消毒，以减少污染的风险。
采集过程
01
02
03
采集方法
采用无菌技术进行静脉穿 刺，确保血液的纯净。
采集量
根据不同的培养需求，采 集适量的血液，一般为每 瓶5-10毫升。
。
延迟送检
标本采集后未能及时送检，导 致病原菌死亡或繁殖。
标识错误
标本标识不清晰或错误，导致 检验结果与患者不匹配。
检验结果解读错误
检验人员对检验结果解读不准 确或不全面，影响临床诊断和
治疗。
问题原因分析
操作不规范
采血人员操作不规范，未能严 格遵守无菌操作原则。
培训不足
采血人员缺乏相关培训，对血 培养及微生物标本送检流程不 熟悉。
微生物标本规范化采集和送检
微生物标本规范化采集和送检感染性疾病需要用正确病原学检测保证诊断和治疗的科学性，而正确病原学检测的前提要求是微生物标本规范化的采集和送检，所以在针对临床疑似感染的患者必须先进行微生物标本的采集和送检。
在对微生物标本进行采集送检的过程中，需要尽可能的送检没有细菌感染部位的标本，比如血培养的标本，最后有菌部位的标本需要尽可能的避免正常菌群导致标本污染的情况。
一般情况下，呼吸道、皮肤伤口等等，这些地方的正常菌群一不小心就很容易污染标本，因此在对这些部位进行标本采集的过程中，应该尽量降低这些部位正常菌群对标本污染的情况。
其次在对患者进行微生物标本采集的过程中，应该严格按照相关规定进行正规的操作，保证在采集标本的时候不会被污染，而且盛放标本的容器应该经过灭菌处理。
需要注意的是，在对容器进行灭菌处理的过程中，不要使用化学消毒剂灭菌，最好使用压力蒸汽等等物理方式进行灭菌。
在对微生物标本送检的过程中，应该保证标本的标签和申请单信息填写的完整程度，所以每一份微生物的标本，相关实验室的工作人员都应该有效了解患者的姓名、年龄、性别、编号等等基本信息和标本的申请医生、采集部位、采集日期时间和采集的部位等等相关情况，从而有效保证微生物标本的有效性和正规性。
微生物标本在采集之后应该在两个小时内送到实验室，不过一些样本量比较小的标本在采集之后的十五分钟或者三十分钟之间有效送到实验室。
不过不同类型的标本需要检测的结果也不一样，所以在对不同类型的标本进行储存和运送的过程中应该使用不同的方式进行，比如抗原检测需要采集5ml血清，并在室温的条件下使用封闭容器，保证在两个小时内送到实验室，而血清学则需要在室温的条件下使用干燥管进行盛放。
需要注意的是，在送检的过程中，尽量不要使用拭子送检微生物标本，如果一定要用拭子的话，最好使用运送拭子。
需氧细菌培育的检测标本应该进行组织、体液以及提取物和组织活体检查等等，并用拭子进行标本采集，采集之后需要放置在无菌容器里，在室温的条件下立即送检，如果使用拭子运送容器的情况下需要在两个小时内送到实验室。
血培养标本采集与运送标准操作规程
血培养标本采集与运送标准操作规程一、引言血培养标本采集与运送是临床微生物学中非常重要的步骤，对于准确诊断和治疗疾病起着关键作用。
本文旨在规范血培养标本的采集与运送操作，以提高标本质量、减少污染及误诊率。
二、采集前准备1. 确认患者身份：核对患者的姓名、年龄、性别等个人信息，确保无误。
2. 选择合适的采集器械：根据采集需求，选择适当的采集器械，如无菌针头、无菌试管、培养瓶等。
三、采集操作1. 患者准备：告知患者采集过程，让其了解并配合操作。
保证患者处于舒适、稳定的状态。
2. 消毒程序：对采集部位进行消毒，常用消毒剂如酒精、碘酒，按照规程进行彻底消毒。
3. 采集血样：将无菌针头插入患者的静脉或血管，抽取适量血液，并根据需要分装入无菌试管或培养瓶中。
4. 混匀标本：轻微摇晃或轻拍血样容器，确保血液与培养液充分混合。
四、采集后处理1. 采集器械处理：丢弃使用过的针头、试管等器械，并进行相应的处理，如焚烧或贴有“感染性废物”标签的特殊垃圾袋中。
2. 患者鼓励：告知患者采集已完成，感谢其的配合并鼓励其继续配合后续治疗。
五、运送操作1. 标本标识：确保标本上有患者的姓名、住院号、采集日期和时间等必要信息，以免混淆或丢失。
2. 运送容器：选择合适的运输容器，如耐压、耐震动、密封好的容器，确保标本在运输过程中不泄漏或受到破坏。
3. 防护措施：运送标本时，保持容器稳定，避免与其他容器、物品摩擦和震动，防止标本破损或污染。
4. 运送温度：根据不同培养需求，将标本置于适当的温度条件下运送，如冷藏、冷冻或常温等。
确保温度在规定范围内，避免标本质量受损。
5. 运送时效：尽量缩短标本送达实验室的时间，以保持标本的活性和准确度。
在运送前与实验室联系，确认实验室接收时间和运送方式。
六、备注事项1. 采集者要佩戴符合要求的个人防护装备，包括手套、口罩、防护眼镜等，以确保采集过程中不发生交叉感染。
2. 采集器械和容器要严格按照规定进行消毒、清洁和灭菌，以杀灭或去除潜在污染的微生物。
临床微生物标本采集和运送规范
脓液或伤口分泌物标本 采集运送标准
❖ 本卷须知 ❖ 迅速送往实验室，1小时内不能培养应将标本冷藏。 ❖ 皮肤消毒对培养结果至关重要。 ❖ 不要仅送检脓液。脓液不能代表伤口特点，应在病灶
活动区域或基底部采集标本。 ❖ 除非有渗出物，枯燥、结痂伤口一般不做培养 ❖ 标记：不要只写“伤口〞标记标本，应有专门的描述
5
二、临床各类标本的采集、 运送及保存标准
6
血培养的采集、运送标准
❖ 采集程序: ❖ 皮肤消毒程序：推荐三步法 〔酒精→碘伏→酒精〕 ❖ 培养瓶消毒程序：75%酒精消毒 ❖ 静脉穿刺和培养瓶接种程序
❖ 采血量：成人8-10ml，儿童1-3ml。 骨髓采集量1-2ml ❖ 采血时间和数量: ❖ 采血时间:在寒战或体温顶峰到来之前0.5-1h，或于寒战
储存 环境
标本来源
4℃冰 箱
痰、尿液、粪便、气管冲洗物、导尿管、静脉导管、脓液和伤口分泌物 细菌或真菌培养；无菌体液（胸腹水、心包液、关节液、鞘膜积液、胆 汁）真菌培养；支原体培养；衣原体检查；血清学检查（包括ASO、RF、 肥达反应）
室温 脑脊液、生殖道、眼、耳、鼻、喉、血培养、血管导管尖、活检组织细
❖ 注意：从静脉取血；不要与血气和血沉标本一起采血； 不推荐血入瓶前换针头；不推荐静脉血直接入瓶；不宜 在静脉导管或静脉留置口采血〔除非疑心导管相关性血 流感染〕。
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血培养的采血量
❖ 成人采血量5-10ml〔最好8-10ml〕，儿童采血量1-3ml 〔不超过总血量的1％〕。血液和肉汤之比为1：5~1： 10。骨髓采集量1-2ml。
❖ 应注明具体标本来源如眼标本注明是眼睑、结膜 还是角膜，并注明左眼还是右眼。
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脓液或伤口分泌物标本 采集运送标准
临床微生物标本规范化采集和送检
规范血培养的标本采集
血标本采集方法
（一）静脉血标本（最常用） （二）动脉血标本(血气分析) （三）毛细血管标本（血常规）
静脉血标本分类及目的
全血标本
血清标本 血培养标本
血沉、血常规、
凝血机制检测等
血清酶、脂类、 电解质、肝功能
血中的致病 菌
注意事项
（1）严禁在输液、输血的针头处 抽取标本，以免影响检验结果。 （最好在对侧采集）
血培养标本采集与送检要求—２
血培养标本采集的数量：
研究结果 ➢一套血培养的阳性率为65％ ➢二套血培养的阳性率为80％ ➢三套血培养的阳性率为96％
1套血培养定义：从一个静脉穿刺部位或静脉导管 所获血液的培养，不论被接种在1个还是多个血培 养瓶内只能算是1套
血培养标本采集与送检要求--3
1. 留置深静脉导管且怀疑导管相 关血流感染：
b. 男性：先用肥皂水清洗尿道口，后用清水 冲洗，留取中段尿
c. 儿童、婴儿：先以无菌生理盐水清洗外阴 部或外生殖器，将无菌试管对准尿道口， 待尿排出后送检
采集方法
➢ 中段尿采集方法 （最常用） ➢ 集尿法 结核分枝杆菌检查时，可用一清洁容器，
留24小时尿取其沉渣10-15ml送检 ➢ 未留置导尿管的患者：导尿法 ➢ 留置导尿管的患者：应在导尿管远端接口处用无菌
注射器抽取尿液。 ➢ 肾盂尿采集法 ➢ 膀胱穿刺采集法
中段尿采集方法
a. 女性：成年女性外阴部先以肥皂水清洗， 再以无菌水冲洗，然后排尿弃去前段尿， 留取中段尿10ml左右于无菌试管内送检
菌操作同时采集2套血培养。 （2）当任何部位感染怀疑合并菌血症时，在抗菌药物使用
前从不同外周静脉穿刺部位同时采集2套血培养。 （3）对不明原因的发热、亚急性心内膜炎，建议抽取3套
临床微生物标本的正确采集及运送
主要内容
一、临床微生物标本正确采集的重要意义 二、各种类型标本的正确采集和送捡
临床微生物标本正确采集和运送的重要意义
标本质量的好坏直接影响诊断结果的正误，不当标 本可导致假阴性、假阳性结果的出现。因此正确采 集和运送微生物标本，直接影响到微生物培养鉴定 结果。可靠的检验结果可以指导临床诊断治疗，为 临床科学用药和成功的感染控制提供依据，是正确 、合理使用抗菌药物，延缓细菌耐药，减少抗菌药 物滥用和监测医院感染的第一步，也是最重要的一 步。为此应正确采集各种细菌学标本。
血液标本的采集与运送
⑵ 血培养瓶消毒程序：用75%酒精擦拭血培养瓶橡 皮塞，作用60s；用无菌纱布或无菌棉签清除橡皮 塞子表面残余酒精，然后注入血液。注入血液后 ，应轻轻颠倒混匀防止血液凝固。
血液标本的采集与运送
4、血培养采血量 由于每毫升血量中含菌量很小，血培养的阳性率直接 与血样本容量有关，据报道每增加1ml血样本可使血 培养阳性率上升3%，所以采血量要足够。 通常采血量与培养基之比以1:5~1:10为宜，成人一次采 血10~20ml平均注入两个血培养（需氧、厌氧瓶）中 ，婴幼儿采血量为全血量的1%（1~2ml），儿童采血 量3~5ml。 当发生菌血症时，通常成人血液中含有的菌量小于 1CFU/ml,而儿童血液中含有的菌量常超过100CFU/ml ，所以婴幼儿、儿童Байду номын сангаас血量少于5ml时，不会影响培 养的阳性率。
血液标本的采集与运送
有研究表明，只做1套血培养，病原菌的检出率仅 为65%；2套血培养为80%；3套血培养为96%。对于 成年患者的血培养，只采集单瓶是不允许的，因为 单瓶的培养结果很难解释是致病菌还是污染菌。
血液标本的采集与运送
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+ 采血量不足时应优先保证需氧瓶，因临床
90%的感染为需氧菌或兼性需氧菌感染 + 真菌和严格的需氧菌（如假单胞杆菌和嗜 麦芽窄食单胞菌）几乎全部只能从需氧瓶 中分离到。 + 同时采集需氧瓶和厌氧瓶的血培养标本时， 应先注入厌氧瓶，因为有些厌氧菌对氧极 度敏感，在空气中很短时间内即死亡。
+ 对于非持续性菌血症，应同时或短时间内采集2-3套
+ 采血指征了解不够，送检率低
+ 不正确采样（如采血时机不合适、采血套
+ + + +
数不够，采血量不足、采血部位不对、标 本暂存不当） 污染问题 阳性检出率低 检验周期过长 厌氧培养不受重视等
+ 患者出现以下一种或同时具备几种临床表现时可作为血 + + + + + + + + +
培养的重要指征： 体温：发热（≥38℃）或低温（≤36℃） 寒战、休克 白细胞增多：>10.0X109/L,特别有核左移现象时 粒细胞减少：<1.0X109/L 血小板减少，皮肤黏膜出血 昏迷、多器官衰竭、血压降低、呼吸心率异常加快等 局部感染：肺炎、尿路感染、脑膜炎、…等 免疫功能低下的患者 其他：如CPR\内毒素、PCT等升高时
+ CLSI（美国临床实验室标准化协会）建议（2007） + 对于每位需要血培养的患者需要采取2至3套 + 对于成年患者的血培养，只采单一的血培养是不允
许的，因为单一的血培养的结果的临床意义很难解 释。 + 对怀疑菌血症、真菌血症的成人患者，推荐同时或 短时间间隔（10分钟内）从不同部位（如双臂）每 次采集2～3套标本，每套应包括一个需氧瓶和一个 厌氧瓶 + 采血培养后的2至5天内，不需要重复采血培养，因 为治疗后的2至5天内血液中的感染细菌不会马上消 失。
+ 采血量是影响灵敏度的最关键因素
+ 成人一份标本2个培养瓶（需氧+厌氧），
每瓶8-10ml + 要求至少采集2份标本，即30-40ml. + 儿童一般只需采集需氧瓶，在保证采集量 <1%总血量下，一般为1-3ml + 采血量不足时应优先保证需氧瓶，因临床 90%以上的感染为需氧菌或兼性需氧菌感染。
+
一般超过72小时报警的往往为污染菌； 单纯一次的凝固酶阴性表皮葡萄球菌阳性往往 为污染可能； 多次血培养为同一种菌或其他体液培养结果一 致可排除污染可能； 不能仅凭血培养报告定义血流感染，要密切结 合临床排除污染。
留置静脉导管标本采集要求
方法一（继续留置导管）：采集2个部位血培养，其中 一套来自外周静脉，并做好标记，另一套从中心导管口， 两个来源的采血时间必须接近，各自做好标记，至少抽取 2个部位各1瓶血培养送检。 方法二：（拔除导管）：从独立外周静脉采集2套或2侧 （双侧双瓶或至少双侧单瓶）。先用75%酒精清洁导管周 围皮肤，然后无菌手续拔除导管，剪取5cm置于无菌容器 中，15分钟内送实验室。
+
+ 皮肤消毒程序：
+ 用75%酒精棉签消毒皮肤，待干30秒； + 再用碘伏（10%碘伏60秒）或碘酊（2%碘
酊30秒）消毒皮肤； + 最后使用75%酒精脱碘 + 洗必泰时间和碘酊一样（但不能用于小于2 个月婴儿皮肤消毒）
+ 培养瓶消毒程序：
+ 去掉培养瓶口的塑料瓶盖； + 75%酒精消毒培养瓶瓶口；
2014.9
+ 微生物标本送检要求
+ 规范采集和送检血培养
+ 协助明确病情诊断
+ 推测病情进展 + 观察病情变化
+ 制定正确的治疗措施
+ 有利于合理使用抗菌药物，减少和延缓耐
药菌的出现
+ 无菌体液标本价值更高，临床意义更大!
+ 无菌体液包括：血液、脑脊液、胸腹水、
中段尿、关节液、脓液、其他无菌体液或 分泌物等。 + 血培养结果对感染性疾病的诊断、治疗和 预后都有极为重要的临床意义！
+ 自然待干；
+ 将标本注入培养瓶内；颠倒混匀标本和肉
汤，以避免血液凝集。
+ 血培养对无菌操作的要求比注射、采集生
化、凝血等其他标本要高 + 所以要最先采集血培养标本。 + 污染率的指标应是≤3%（100份标本里只能 有不到3个标本出现污染）
+ 不需要冷藏，保存在15-25℃的室温即可。
+ 温度过低会导致对温度敏感的某些病原微
氧瓶组合检测出的葡萄球菌、肠杆菌科菌中某 些菌和厌氧菌比一对需氧瓶多。 + 如果血培养只做需氧瓶培养，漏检的不仅是严 格厌氧菌，也会影响兼性厌氧菌的分离率。 + 有研究显示，血培养只做一套的检出率仅为 65%，做2套和3套的检出率分别为80%和96%
+
+ 成人一般从双侧上肢静脉采血（肘静脉），
必要时从下肢静脉采血做第三套血培养。 儿童和婴幼儿采集部位多为颈部和腹股沟。 + 不建议采取动脉血，其诊断的价值不高， 且增加了抽血污染的机会和穿刺的危险。 + 尽量避免从静脉留臵导管采血培养，因其 常伴有高污染率。如果必须从留臵导管内 采血，也应该从外周静脉采集另外一个血 培养标本以帮助阳性结果的判断。
+ 血培养“双侧双瓶”或“双管双套”，是
指从一个采血部位采血接种一套培养瓶， 再从另一部位采血接种另一套培养瓶。 + 成人一套血培养：应该包括需氧瓶和厌氧 瓶各一个，也叫“一份” + 一次穿刺采血，算“一套”，采集第二套 应从另一个穿刺点获得 + 儿童一般只做需氧培养，但仍需从多个部 位采集多次，特殊患者才考虑厌氧培养
血培养，因为体内网状内皮系统会在15-30min内清 除进入人体内的细菌。每份血培养间隔应不超过30 分钟。 + 可疑急性心内膜炎患者要立即取血做血培养，30 分 钟内完成3套血培养的采集，采集后立即进行抗菌 药物的经验治疗。如果24小时内报告阴性，则继续 采集2套血培养。 + 可疑的亚急性心内膜炎患者每间隔30分钟至1小时 采集1套，连续采集3套标本。如果24内报告阴性， 则继续采集2套血培养。
生物死亡，如奈瑟氏菌。 + 温箱会导致细菌进入生长对数期，从而错 过检测的最佳时期。 + 接种后的培养瓶最好立即送到实验室，最 迟不能超过2小时。
+ 污染导致的血培养假阳性是一个较为普遍的问
题，即使采用最好的血培养标本采集方法也很 难将污染率降至2%以下。 + 判断血培养污染的金标准并不存在，比如凝固 酶阴性葡萄球菌既是最常见的污染菌，也是现 在常见的菌血症病原菌之一，其临床意义的判 定仍是一个世界性难题，需要临床医生和实验 室人员相互沟通，综合分析。 + 血培养污染的鉴别注意依靠一下几个方面：微 生物鉴定、阳性检出时间、重复培养结果以及 临床特征等。
+ 血培养采血量是影响病原菌检出率的最重
要的可变因素 + 一般情况下，成人菌血症患者外周血中细 菌浓度为1-10CFU/ml，成人血培养采血量在 2-30ml之间，病原菌检出率与采血量成正比 例增长。 + 由于儿童患者血液中病原菌浓度较高，一 般约为成人血流感染病原菌浓度的10倍， 血培养标本量无需等同成人。 采血量一定 要够！
+ 双侧：两个部位采血，左右两侧手臂
+ 双瓶：需氧瓶和厌氧瓶+ Khan源自n等对7070份同时做需氧瓶和厌氧瓶
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的血培养结果分析显示： 640份血培养阳性，阳性率为9% 其中需氧和厌氧同时阳性为55% 仅需氧瓶阳性为26% 仅厌氧瓶阳性为19%
+ 研究表明：一套血培养选择1个需氧瓶和1个厌
+ CAP菌血症发生率：
+ 住院患者：4%～14% + 重症患者：18%
+ 大多数CAP的指南推荐住院的患者进行血培
养 + HAP菌血症发生率：10%～30% + 所有怀疑VAP的患者均应进行血培养
+
+ 研究表明：细菌通常在寒战和发热前1小时
入血，此时为采集血标本进行病原菌培养 的最佳时机； + 采血应尽可能在抗菌药物之前进行。 + 若患者已接受抗菌药物治疗，则应选用含 抗菌药物吸附剂的培养瓶进行血培养。