多肽偶联方案

多肽合成时, 先了解多肽的位点. 如果是炭末端多肽,直接用ALPHA氨基作为连接点. 如果是氨基末端的多肽, 得在多肽的炭末端加一个半胱氨酸(提供-SH基团)
赖氨酸Lys提供游离-NH2 天冬氨酸D 提供游离-COOH 谷氨酸E 提供游离-COOH 半胱氨酸C 提供游离-SH
标记到BSA 羧基端。

1、BSA稀释到1mg/mL（66KD，100个羧基）, 缓冲液为50mM MES（pH 6.0）+0.5M NaCl；
2、搅拌条件下，迅速加入2mM EDC（母液为：50mg/ml 0.25mol/ml）和5mM sulfo-NHS
（母液为：50mg/ml）；室温反应15min；
3、搅拌条件下，加入20mM巯基乙醇（约1/600），室温反应10min（如果蛋白对巯基乙醇
敏感，请改用脱盐柱），活化完毕；
4、目标多肽稀释到适当浓度（考虑与BSA 有效羧基的mol数成一定比例），缓冲液为
100mM PB7.5。

5、搅拌条件下，室温反应2hr；
6、透析至pbs 。