薄层色谱法原理
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将一定粒度的吸附剂 均匀地涂铺在表面光 洁的玻璃板或塑料平 板上，制成薄层板。
把待分析试样的溶液滴 加在薄层板的起始线 上（点样）
薄层板
原点 试样
把薄层板放入层析缸中，底端浸入适当溶剂。
前沿
• 展开过程中，组分在 两相之间发生多次吸 附—解吸平衡，吸附 牢的组分随展开剂移 动慢，吸附弱的组分 随展开剂移动快，一 段时后，组分被分离， 各组分在薄层板上形 成不同距离的斑点。
不活泼 B’
Ⅴ
A’ A
非极性
非极性 被分离物质
极性
展开剂成分的选择： 对于容易分离的化合物，用单一溶剂展 开 优点：溶剂简单，分离重现性好。 对于难分离组分，则选用二元、三元、 甚至多元溶剂 Rf太小——加入强极性展开剂 Rf过大——降低展开剂的极性
优化
1.占比例较大的溶剂为主要溶剂，可使 试样组分溶解并基本分离。 占比例较小的溶剂可进一步调整各组 分Rf值，改善分离效果。 2.分离酸性或碱性组分时，往往在展开 剂中加入少量酸或碱，以防这些组分 离解，使这些组分的斑点更加集中和 清晰，从而提高分离度。 3.当展开剂的粘度太大时，可在展开剂 中加入粘度小的溶剂，以降低展开剂 粘度，从而提高展开速度。
吸附剂和展开剂的选择
• 对于极性较小的被分离试样组分，应 选用活性较强的吸附剂，极性较小的 展开剂； • 对于极性较大的被分离试样组分，应 选用活性较弱的吸附剂，极性较大的 展开剂。
被分离试样组分极性、吸附剂活性和展开剂极性之 间的关系
活泼 Ⅰ C’ B C 极性
吸附剂 （固定相）
展开剂 （流动相）
原点 A B
比移值Rf
溶剂 前沿
原点到斑点中心的距离 Rf 原点到溶剂前沿的距离
c
a b
a R f R c
st
b c
起始线
AA
BB
Rf值相差越大，分离越好。一般要求分 离后组分的Rf值在0.2～0.8之间，各组 分的Rf值之差应大于0.05，以防斑点重 叠。
（二）固定相和流动相
• 1、固定相（吸附剂）
• 常用的吸附剂：硅胶、氧化铝、聚酰胺、活性炭和大孔吸 附树脂等。 • 吸附剂的选择要合适，与流动相、被分离化合物不反应
• 2、流动相（展开剂） 薄层色谱法中采用单一溶剂或多元 混合溶剂作流动相，称为展开剂。 与吸附柱色谱法中选择流动相的一 般规则相同，展开剂的选用要从被分 离试样组分极性、吸附剂活性和展开 剂的极性三个因素综合考虑。
薄层色谱法
thin layer chromatography，TLC
第一节
薄层色谱法的基本原理
• 定义：薄层色谱法是将被分离的试样 溶液点在薄层板的一端，再用溶剂把 试样展开，从而使试样组分分离。 • 分型：吸附薄层色谱、分配薄层色谱 法、离子交换薄层色谱法、凝胶色谱 等。
（一）薄层色谱法的原理
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将一定粒度的吸附剂 均匀地涂铺在表面光 洁的玻璃板或塑料平 板上，制成薄层板。
把待分析试样的溶液滴 加在薄层板的起始线 上（点样）
薄层板
原点 试样
把薄层板放入层析缸中，底端浸入适当溶剂。
前沿
• 展开过程中，组分在 两相之间发生多次吸 附—解吸平衡，吸附 牢的组分随展开剂移 动慢，吸附弱的组分 随展开剂移动快，一 段时后，组分被分离， 各组分在薄层板上形 成不同距离的斑点。
不活泼 B’
Ⅴ
A’ A
非极性
非极性 被分离物质
极性
展开剂成分的选择： 对于容易分离的化合物，用单一溶剂展 开 优点：溶剂简单，分离重现性好。 对于难分离组分，则选用二元、三元、 甚至多元溶剂 Rf太小——加入强极性展开剂 Rf过大——降低展开剂的极性
优化
1.占比例较大的溶剂为主要溶剂，可使 试样组分溶解并基本分离。 占比例较小的溶剂可进一步调整各组 分Rf值，改善分离效果。 2.分离酸性或碱性组分时，往往在展开 剂中加入少量酸或碱，以防这些组分 离解，使这些组分的斑点更加集中和 清晰，从而提高分离度。 3.当展开剂的粘度太大时，可在展开剂 中加入粘度小的溶剂，以降低展开剂 粘度，从而提高展开速度。
吸附剂和展开剂的选择
• 对于极性较小的被分离试样组分，应 选用活性较强的吸附剂，极性较小的 展开剂； • 对于极性较大的被分离试样组分，应 选用活性较弱的吸附剂，极性较大的 展开剂。
被分离试样组分极性、吸附剂活性和展开剂极性之 间的关系
活泼 Ⅰ C’ B C 极性
吸附剂 （固定相）
展开剂 （流动相）
原点 A B
比移值Rf
溶剂 前沿
原点到斑点中心的距离 Rf 原点到溶剂前沿的距离
c
a b
a R f R c
st
b c
起始线
AA
BB
Rf值相差越大，分离越好。一般要求分 离后组分的Rf值在0.2～0.8之间，各组 分的Rf值之差应大于0.05，以防斑点重 叠。
（二）固定相和流动相
• 1、固定相（吸附剂）
• 常用的吸附剂：硅胶、氧化铝、聚酰胺、活性炭和大孔吸 附树脂等。 • 吸附剂的选择要合适，与流动相、被分离化合物不反应
• 2、流动相（展开剂） 薄层色谱法中采用单一溶剂或多元 混合溶剂作流动相，称为展开剂。 与吸附柱色谱法中选择流动相的一 般规则相同，展开剂的选用要从被分 离试样组分极性、吸附剂活性和展开 剂的极性三个因素综合考虑。
薄层色谱法
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第一节
薄层色谱法的基本原理
• 定义：薄层色谱法是将被分离的试样 溶液点在薄层板的一端，再用溶剂把 试样展开，从而使试样组分分离。 • 分型：吸附薄层色谱、分配薄层色谱 法、离子交换薄层色谱法、凝胶色谱 等。
（一）薄层色谱法的原理