Biochrom 30+ 氨基酸分析仪标准操作规程
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1.0目的
1.1制定Biochrom 30+ 氨基酸分析仪的标准操作规程。
1.2确保操作人员规范操作,减少操作失误。
2.0范围
2.1适用于研究院Biochrom 30+ 氨基酸分析仪的标准操作。
3.0基础/定义
3.1不适用。
4.0责任人
4.1研究院二所分析室负责SOP的起草、修订与审核,复印件的日常应用管理。
4.2研究院设备部负责SOP的复核与统一提交QA,并做执行情况监管。
4.3研究院QA负责SOP的审批与签发。
5.0必读文件
5.1DP-EQ-Y0115F1氨基酸分析仪使用记录。
5.2氨基酸分析仪自检记录。
5.3温度、相对湿度记录。
6.0安全注意事项
6.1不适用。
7.0规程
7.1工作环境
7.1.1氨基酸分析仪应置于稳定的工作台上,周围无强烈的机械振动和电磁干扰,避免阳光直射;
环境应整洁干净,无易燃、易爆和腐蚀性气体,室内排风良好。
7.1.2氨基酸分析仪工作条件:温度15~25℃,相对湿度范围45%~80%,电源电压220±20V。
7.2准备
7.2.1将钢瓶的氮气调节成0.5MPa并送到仪器中。
7.2.2打开总电源,稳定后,开电脑主机电源,指示灯亮,同时打开计算机。
7.2.3将所有的缓冲液置于主机上部。
7.2.4确保茚三酮的量足够或是更换一瓶新的茚三酮(茚三酮配制:由Ultrosolve plus1.75L和
Ultra Ninhydrin 250ml组成,可混合配制,共2L,也可按比例配制。取Ultrosolve plus 倒入
茚三酮瓶中,氮气鼓泡10分钟;倒入Ultra Ninhydrin,再用氮气鼓泡10分钟)。
7.2.5检查清洗阀门活塞的溶液瓶(PISTON WASH H2O)和清洗反应线圈的溶液瓶(50/50
IPA/H2O)内的清洗液是否足够用量。
7.2.6检查废液瓶是否位于低位以及是否有空间。
7.2.7打开氨基酸分析仪主机电源、自动进样器电源。
7.3使用方法
7.3.1双击桌面图标,打开自动进样器软件。
7.3.1.1运行手动清洗,控制软件上选择【Wash Control】下的【start】键,直到注射器中没有空
气,一般需要4-5次。使用20%的异丙醇。自动进样器开盖后左前方白色塑料瓶中。如用
完请及时添加。
7.3.1.2勾选【Temp On】,点击【Apply】键。
7.3.2双击桌面,打开控制软件。
7.3.2.1勾选【Reaction coil】,让反应单元及柱温箱升温。
7.3.2.2如果3天及以上不开机请执行步骤A-E,15天以上不开机执行A-G操作:
A、将【Override】前面勾上。
B、打开【Bubble trap bleeding taps】,下面接一个小烧杯。
C、点击【Biosys Manual】软件中【Buffer】,选择【1】→【Enter】,打开缓冲液
【1】,使用氮气驱动缓冲液1流动,排去气泡,持续1min;同样操作排去【2】、
【3】、【4】、【5】、【6】管路的气泡。之后选择【Buffer】,输入【0】→
【Enter】。停泵。
D、打开【Bubble trap bleeding taps】,下面接一个小烧杯,持续10分钟。
E、选择【Buffer】→【1】→【Enter】。将【Buffer pump bleed valve】逆时针旋开90
度,持续5min,排去泵后管路气泡。之后将【Buffer pump bleed valve】旋转回原位。
F、将【Ninhydrin pump bleed valve】逆时针旋开90度,持续5min,排去茚三酮管路里的
气泡,旋回原位。
7.3.2.3勾去【Override】前面的勾。继续下面操作。
7.3.2.4点击【view】→【program control】,点击【insert】,跳出【Sample Details】界面,点击
【program filename】,选择【Lithium Physiological High Performance Regen.prg】,点击
【open】→【OK】。
7.3.2.5点击【insert】,跳出【Sample Details】界面,点击【program filename】,选择【Lithium
Physiological High Performance.prg】,点击【open】→【OK】。在【Sample ld】一栏随便
输入一个数字,在【No of samples】输入要进样的针数,在【Vial No(s)】输入样品的进
样位置(备注:如果勾选【Auto Increment】,就表示样品的进样位置在原先的基础上自
动加1)。点击【Volume】,依据实际情况输入样品的进样体积(1-100微升)→
【Enter】。如果需要满量程进样200微升,点击【Details】,跳出【Autosampler
Details】界面,在【Injection Mode】项下点击【Flushed Loop Injection】→【OK】。返回
【Sample Details】界面,点击【OK】。
7.3.2.6返回【Biosys Programmer】界面,点击【Run】,开始运行程序(备注:如果对软件不熟
可等到下面软件设置完后再点击【Run】)。
7.3.3双击桌面快捷图标,打开数据采集软件。
7.3.3.1点击【登录】→【确定】,出现【登录对话框】,在【输入用户名】中输入操作者姓名,
在【选择工程】项下选择【新工程】,也可以选择已有文件夹。
7.3.3.2出现【Instrument 1】界面,点击【文件】→【打开方法】,在新打开的窗口中进入
【Clarity】文件夹,选择【生理体液.MET】→【确定】。
7.3.3.3在【Instrument 1】界面,点击快捷图标,出现【Instrument 1-序列】界面。在序列
编辑栏中,勾选运行。在【SV】列,按照顺序依次输入数字1、2、3等等。在【I/V】
列,输入样品的进样针数。在【样品ID】列,输入样品位置。在【样品】列,输入样品
名称。在【进样体积】列,输入样品的进样体积。在【文件名】列,点击要输入数字的单
元格,出现图标,点击图标→【固定数字空间】。
7.3.3.4在运行列下方的框内选勾,可以继续填写下一针运行的样品信息,注意样品信息要与前面
的【Biosys manual】软件中设置的样品信息保持一致。
7.3.3.5样品信息填写完毕后,点击(运行序列)。
7.3.4数据处理
7.3.4.1在【Instrument 1
】界面,点击(色谱图窗口),点击【文件】→【打开色谱图】,
选择需要处理的色谱图,点击【确定】。
7.3.4.2
在色谱图界面,可选择(峰起点)、(峰终点)、(添加正峰)、(强制
峰命名)和(删除峰)等按钮进行手动积分。也可以选用设置一些积分参数进行自动积分。
7.3.4.3570nm 和440nm 两个波长下的色谱图分别处理完毕后,点击(保存色谱图)。
7.3.5打印图谱报告
7.3.5.1在色谱图界面,点击【显示】→【属性】,出现【图属性】界面。可分别在【时间轴】和
【信号轴】中设置相应的数值信息,点击【确定】。
7.3.5.2在色谱图界面,点击【文件】→【报告设置】,选择需要在色谱图中体现的信息,点击
【确定】。
7.3.5.3在色谱图界面,选择要打印的色谱图,点击【文件】→【打印】。
7.3.6仪器使用完毕,退出【Biochrom Alias Manager】自动进样器软件、【BioSys Manual】控制
软件和Clarity数据采集软件,关闭仪器电源,关闭计算机,按要求做好仪器使用登记。
7.3.7实验完毕,清洁仪器内外,保持环境整洁。
7.4注意事项
7.4.1注意软件的正常交流,以防止染上计算机病毒。