牛血清白蛋白的提取
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牛血清白蛋白的提取
牛血清白蛋白热乙醇法提取: 分离血浆,在牛血中加入枸橼酸钠离心,提 取,将收集的血浆放入夹层反应罐内,加热 加入辛酸钠,缓慢搅拌,温度在55℃~65℃, 加入盐酸调pH值至4.0~6.5,然后加乙醇, 过滤,脱盐和浓缩,冻干为成品。
具体为以下步骤: 1、分离血浆,取新鲜牛血放入带制冷功能的离心机中,加入 血量的10%的浓度为3.8%的枸橼酸钠,离心,温度在2℃以 下,分离血浆、血球,收集血浆,血球另用; 2、提取,将血浆放入夹层反应罐内,夹层内加热水,边加热 边加入牛血清容积的0.2-0.3%的辛酸钠,缓慢搅拌,温度在 55℃~65℃,溶解后调PH值,加入浓度为1摩尔的盐酸,将 PH调至4.0~6.5,然后加入血清总量的5.5%的浓度为95% 的乙醇,过滤,滤渣弃之; 3、脱盐和浓缩,将滤液用20000分子量以下的超滤器洗脱盐 类及其它小分子杂质,同时进行浓缩; 4、冻干,将浓缩液按冻干曲线冻干,即将浓缩液迅速冷却至40℃,持续1小时左右,升到-25℃,持续10-20小时,再缓 慢升温到0℃,再持续1-4小时升到保存温度20℃。,为成品。