细胞生物实验：小鼠染色体
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6.弃掉股骨，换上4.5号针头，用注射器吸取生理盐水细胞悬液， 以使冲出的骨髓细胞彼此分散开。
7.将悬液以1000r／min离心10分钟。
8.弃上清液，加入9ml37℃预热的0.075MKCL，于恒温水浴箱中 低渗处理30分钟。
9.加入1ml新配制的固定剂，用吸管轻轻混匀。
10.以800r／min速度离心10分钟。
小鼠骨髓染色体标本制备
实验目的
• 了解哺乳动物染色体标本的制作方法 • 了解小鼠骨髓细胞染色体形态与数目。
实验原理
• 由于小鼠四肢骨内骨髓细胞中的造血干细 胞是生成各种血细胞和原始细胞，具有高 度的分裂能力，本实验采用这一材料，通 过前处理，低渗，固定，制片，染色等步 骤制得染色体标本，可观察到许多处于分 裂中期的染色体，可以进行染色体组型分 析。
11.弃上清夜加10毫升新固定剂，用吸管将细胞团打散，混匀Hale Waihona Puke Baidu 室温下固定15分钟。
12.离心1000转／分，10分钟。
13.弃上清液，重新加入10毫升固定剂，用吸管吹打细胞，制成 骨髓细胞悬液，室温固定30分钟。
14.1000转离心10分钟。
15.弃上清液，加入3-4滴固定剂，制成细胞悬液。
16.滴1-2滴悬液于冰水浸过的 载波片上（距离10-40cm)，对准 液滴吹气，酒精灯上过2-3次，晾干。 17.吉姆萨染色8-10分钟。 18.流水冲去染液，晾干，观察（油镜）。
实验器材
1．材料：小白鼠 2．器具：注射器（1ml,5ml）、5号针头、解剖盘、 解剖剪、镊子、玻璃吸管、10ml刻度的离心管、 离心机、载玻片、盖玻片、显微镜、滤纸、擦镜 纸、棉花、量筒、天平、恒温水浴锅 3．药品：0.01%秋水仙素、0.075MKCl、固定液 （甲醇：冰醋酸=3：1）、Giemsa染液、0.01M 磷酸缓冲液（PH6.8），0.85%生理盐水。
实验观察
• 观察细胞的标准为： 1．细胞完整，轮廓清晰，染色体分布在同一水平 面上。 2．染色体形态和分布良好。 3．最好无重叠，即使有个别重叠，也要能明确辩 认，以免差错。 4．所观察的细胞处于同一有丝分裂阶段，即染色 体螺旋化程度或染色体长短大致一样。 在所观察的细胞周围，没有离散的单个或多个染 色体存在，以免影响计数。
作业与思考题
1.绘制一个细胞分裂相。 2.KCL的作用。 3.实验结果不理想的原因。
实验过程
1．预处理：实验前2.5-3小时，按每克体重注射0.02ml，给小 白鼠腹腔注射秋水仙素。
2.断髓法杀死小鼠
3.髋关节处断下肢，剥去皮肉，用纱布擦去残肉，膝关节断下 股骨。
4.用解剖针从两端刺透骨髓腔，将股骨一端固定在装有6.5号针 头的1ml注射器上。
5.在装有3ml生理盐水的离心管中用注射器吸取盐水，反复冲洗 骨髓，直至股骨变白。
7.将悬液以1000r／min离心10分钟。
8.弃上清液，加入9ml37℃预热的0.075MKCL，于恒温水浴箱中 低渗处理30分钟。
9.加入1ml新配制的固定剂，用吸管轻轻混匀。
10.以800r／min速度离心10分钟。
小鼠骨髓染色体标本制备
实验目的
• 了解哺乳动物染色体标本的制作方法 • 了解小鼠骨髓细胞染色体形态与数目。
实验原理
• 由于小鼠四肢骨内骨髓细胞中的造血干细 胞是生成各种血细胞和原始细胞，具有高 度的分裂能力，本实验采用这一材料，通 过前处理，低渗，固定，制片，染色等步 骤制得染色体标本，可观察到许多处于分 裂中期的染色体，可以进行染色体组型分 析。
11.弃上清夜加10毫升新固定剂，用吸管将细胞团打散，混匀Hale Waihona Puke Baidu 室温下固定15分钟。
12.离心1000转／分，10分钟。
13.弃上清液，重新加入10毫升固定剂，用吸管吹打细胞，制成 骨髓细胞悬液，室温固定30分钟。
14.1000转离心10分钟。
15.弃上清液，加入3-4滴固定剂，制成细胞悬液。
16.滴1-2滴悬液于冰水浸过的 载波片上（距离10-40cm)，对准 液滴吹气，酒精灯上过2-3次，晾干。 17.吉姆萨染色8-10分钟。 18.流水冲去染液，晾干，观察（油镜）。
实验器材
1．材料：小白鼠 2．器具：注射器（1ml,5ml）、5号针头、解剖盘、 解剖剪、镊子、玻璃吸管、10ml刻度的离心管、 离心机、载玻片、盖玻片、显微镜、滤纸、擦镜 纸、棉花、量筒、天平、恒温水浴锅 3．药品：0.01%秋水仙素、0.075MKCl、固定液 （甲醇：冰醋酸=3：1）、Giemsa染液、0.01M 磷酸缓冲液（PH6.8），0.85%生理盐水。
实验观察
• 观察细胞的标准为： 1．细胞完整，轮廓清晰，染色体分布在同一水平 面上。 2．染色体形态和分布良好。 3．最好无重叠，即使有个别重叠，也要能明确辩 认，以免差错。 4．所观察的细胞处于同一有丝分裂阶段，即染色 体螺旋化程度或染色体长短大致一样。 在所观察的细胞周围，没有离散的单个或多个染 色体存在，以免影响计数。
作业与思考题
1.绘制一个细胞分裂相。 2.KCL的作用。 3.实验结果不理想的原因。
实验过程
1．预处理：实验前2.5-3小时，按每克体重注射0.02ml，给小 白鼠腹腔注射秋水仙素。
2.断髓法杀死小鼠
3.髋关节处断下肢，剥去皮肉，用纱布擦去残肉，膝关节断下 股骨。
4.用解剖针从两端刺透骨髓腔，将股骨一端固定在装有6.5号针 头的1ml注射器上。
5.在装有3ml生理盐水的离心管中用注射器吸取盐水，反复冲洗 骨髓，直至股骨变白。