细胞生物实验：小鼠染色体
小鼠染色体实验报告
小鼠染色体实验报告实验目的：本实验旨在通过染色体观察和分析小鼠基因组的结构和功能，以进一步了解小鼠的遗传特征。
实验材料：1. 小鼠样本（小鼠尸体或小鼠细胞）2. 血细胞裂解液3. 显微镜4. 醋酸酒精定影液实验步骤：1. 取得小鼠样本并进行准备。
尸体样本直接取用，细胞样本需要分离提取。
2. 将小鼠样本悬浮于血细胞裂解液中，进行细胞裂解。
3. 用匀浆棒轻轻研磨，使细胞完全裂解。
4. 将细胞溶液滴于清洁平凹玻片上，并用平玻片将其铺平。
5. 将玻片加热至70℃，使细胞DNA捕获在玻片上。
6. 用醋酸酒精定影液浸泡玻片，使细胞核卷曲收缩。
7. 用显微镜观察染色体的形态和数量。
8. 根据染色体的形态、长度和着色特点进行鉴定和分析。
实验结果与讨论：通过对小鼠样本的染色体观察，我们发现小鼠染色体具有一定的结构和着色特征。
根据染色体的长度和形状，我们可以初步判断出小鼠的染色体是否正常。
特定的染色体畸变或缺失可能表明小鼠有某些遗传疾病或突变。
在本实验中，我们可以观察到小鼠的染色体数量一般为40个。
这与小鼠常见的染色体数目相符，进一步证实了样本的正常性。
我们还可以观察到染色体的长度不一致，这是由于染色体上的基因片段的数量和排列不同所致。
通过进一步的染色体分析，我们可以了解小鼠的遗传特征，如基因突变、遗传疾病等。
这对于进一步研究小鼠的遗传学、发育生物学以及相关疾病模型的建立具有重要意义。
结论：通过对小鼠染色体的观察和分析，我们可以初步了解小鼠的遗传特征。
染色体的形态和数量可以为我们提供重要的基因信息，有助于后续的研究和分析。
本实验为进一步研究小鼠的遗传学提供了基础数据。
小鼠骨髓细胞染色体制备与观察
滴片：
➢滴2~3滴于玻片上，吹气， ➢在酒精灯火焰过火8次， ➢做记号，凉干，染色
滴片后，将片子侵入Giemsa染液缸中，10~15分 钟，弃去染液，水洗，晾干，镜检。
作业与思考题
• 1、绘制一个你所观察到的小鼠骨髓细胞染 色体中期分裂相。
• 2、本实验中秋水仙素、低渗液、固定液各 起什么作用？
15
9+16+15=40
4.细胞增殖指数统计
细胞增殖指数=
分裂细胞数
×100%
分裂细胞数+间期细胞数
实验三 细胞器的观察
一、中心体 二、高尔基体
一、中心体（4×10）
• 马蛔虫子宫横切片全貌
中心体（10×10）
中心体（40×10）
二、高尔基体（4×10）
脊神经节切片
高尔基体（10×10）
2.了解小鼠染色体核型。
3.认识秋水仙素对细胞增殖的作用。
• 器材与试剂
• 内容与方法
（一）小鼠骨髓细胞染色体制备
预处理
取材，收集细胞
低渗
染色
滴片
固定、再固定
❖取材前2～3h，向腹腔 内注射秋水仙素。注射 浓度随动物种类不同而 异。秋水仙素的主要作 用是使分裂细胞阻断在 有丝分裂中期，增加中 期分裂相的比例。
• 3、简述实验中应注意那些关键问题？
（二）染色体标本片观察 1.标本片质量评价 （1）细胞密度合适、均匀； （2）背景干净，细胞核和染色体清晰； （3）有较多的分裂相； （4）染色体分散较好。
细胞密度
染色体 分散度
2.染色体形态特征观察
3.染色体计数
40
10
（100×10）
高尔基体（40×10）
小鼠骨髓细胞染色体标本的制备
旋化程度或染色体长短大致一样。在所观察细胞 周围，没有离散单个或多个染色体存在，以免影 响计数。
小鼠骨髓细胞染色体标本的制备
第9页
小鼠骨髓细胞染色体标本的制备
第5页
四、试验步骤(continued)
6.离心：1200rpm离心5分钟后弃去上清液， 7.固定：加8ml固定液并用吸管轻轻吹匀，室温下静 置20分钟，每10分钟时吹打一次。 8.离心：1200rpm离心6分钟，弃上清液。
9.离心：加1.5mL固定液，吸管吹打成细胞悬液。
一、试验目标
1. 经过小白鼠骨髓细胞染色体制备，初 步掌握低渗法制备动物骨髓细胞染色体 方法 2.熟悉染色体形态、种类及小白鼠等动 物染色体数目及特点
小鼠骨髓细胞染色体标本的制备
第1页
二、试验原理
骨髓细胞是含有旺盛分裂能力细胞，从这些分裂细胞 中，可观察处处于分裂中期染色体，能对一个动物染色体 形态特征、数目进行准确观察和分析。
小鼠骨髓细胞染色体标本的制备
第7页
几个动物染色体形态特征
动物名称 染色体数
染色体类型
x染色体形态
y染色体形态
青蛙 小白鼠
பைடு நூலகம்
26
中央、亚中央着丝粒染色 中央着丝粒染色体 中央着丝粒染色体
体
，介于6～7号
，介于8～9号
40
全部为近端着丝粒染色体 大小介于5～6号 大小介于19～20号
大白鼠
42
中央、亚中央近端着丝粒 近端着丝粒染色体 近端着丝粒染色体
10.滴片：用吸管吸收细胞悬液，滴在预冷载玻 片上，室温晾干
11.染色：10% Giemsa染液染色30分钟
实验九小鼠骨髓细胞染色体标本制备
四、实验步骤
1、预处理：实验 。作用：
2、处死动物：断颈处死小白鼠， 解剖小鼠内生殖器官，鉴别雌雄性别
3、取股骨：剥取股骨，剔去肌肉 组织，剪去两端的股骨头。
11、滴片：用吸管吸取细胞悬液， 滴在预冷的载玻片上，在酒精灯火焰 上微微加热，室温晾干。预冷载玻片 的作用：
12、染色：10% Giemsa染液染色30分 钟。
13、镜检：低倍———高倍 。
五、作业
1、选择染色体清晰，分散好的 中期分裂相，计数染色体，显微摄影、 并打印出照片。
2、分析成功或失败的原因。
4、取骨髓：注射器吸取0.6ml生 理盐水, 针头插入股骨一端,反复冲 洗骨髓到10ml的离心管中。
5、低渗：加入4.4ml的 0.075MKCl溶液,在37oC水浴中低渗40 分钟，中间（约20分钟时）用吸轻轻 管吹打，使细胞充分低渗。低渗作用
6、离心：离心之前加1ml固定液 并用吸管轻轻吹匀，进行预固定；
同时秋水仙素作用能使染色体缩短、 变粗。
三、实验材料、器具和药品：
1、材料： 小白鼠 2、器具：
注射器（1ml,5ml）、5号针头、 解剖盘、解剖剪、镊子、玻璃吸管、 10ml刻度的离心管、离心机、载玻片 盖玻片、显微镜、滤纸、擦镜纸、棉 花、量筒、天平、恒温水浴锅等。
3、药品： 0.01%秋水仙素、0.075MKCl、
一、实验目的
1、掌握哺乳动物（小白鼠）骨 髓细胞染色体制片技术。
2、并对动物染色体进行观察。
二、实验原理
1、小鼠四肢骨内骨髓细胞中的造 血干细胞是生成各种血细胞的原始 细胞，具有高度的分裂增殖能力。
实验小鼠骨髓染色体制备和观察
8.小鼠染色体观察： 低倍镜、高倍镜下寻找染色体分散的中
期分裂相.
资料仅供参考,不当之处，请联系改正。
小鼠骨髓染色体 10 ×10
资料仅供参考,不当之处，请联系改正。
小鼠骨髓染色体 10 ×40
资料仅供参考,不当之处，请联系改正。
资料仅供参考,不当之处，请联系改正。
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➢ 数目观察：小鼠2倍体细胞染色
体，数目2n=40条。其中19对为常染 色体，一对为性染色体，染色体的核 型分为4组。雄性 XY, 雌性XX,Y染 色体最小。
➢形态特征观察：端着丝粒染色体
“U”“V”。
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五、注意事项
1．掌握好秋水仙素的浓度和处理时间； 2．离心前需要配平； 3. 小鼠骨髓要冲洗干净，以收集足够的骨髓细胞； 3．低渗处理是实验成败的关键，注意低渗时间； 4．固定液要现配现用，固定要充分； 5．载玻片要洁净并预冷，滴片要有一定的高度； 6. 细胞悬液不能太稀，要呈乳白色； 7. 烤片时温度不能太高。 8. 冲洗染液时水流要缓慢，以免细胞流失过多。
放出来。
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秋水仙素处理：秋水仙素溶液可抑制纺锤体的形 成，使正在分裂的骨髓细胞停止在细胞分裂中期， 积累大量中期分裂相细胞。
低渗作用: 使细胞充分膨胀，减少染色体间的相互 缠绕和重叠。
预固定：终止低渗作用，使细胞离心时不易破裂 ，固定维持细胞形态结构。
高距离滴片：使细胞膜易于破裂，获得中期染色 体标本，在显微镜下观察染色体的结构和数量。
资料仅供参考,不当之处，请联系改正。
三、实验器材和试剂
• 1.器材 蜡盘、手术剪、小镊子、平皿、注射
实验五：小鼠骨髓染色体的制备与C带染色
一.小鼠骨髓染色体的制备
【实验目的】 n 学会小鼠骨髓染色体标本的制备
【实验原理】
n 处于分裂期的细胞经秋水仙素处理,由于阻断了 纺锤丝微管的组装,使细胞分裂停止于中期,此 时染色体达到最大收缩,具有典型的形态。
n 本实验所用的小鼠骨髓细胞具有高度的分裂活 性并且数量非常多,经秋水仙素处理后,可使分 裂的细胞阻断在有丝分裂中期,再经低渗、固定、 滴片染色等处理,便可制作较好的小鼠骨髓细胞 染色体标本。
【仪器、材料和试剂】
n （一）仪器 光学显微镜,冰箱,恒温水浴锅。
n （二）材料 n 已制备好的小鼠骨髓染色体载玻片,染色缸,烧杯,镊子
等。 n （三）试剂 n 盐酸(0.2mol/l),5％Ba(OH)2(50℃预热),2×SSC溶液
(60-65℃预热),Giemsa染液
【实验步骤】
1.按上述小鼠骨髓染色体的制备步骤制备染色体
二.染色体C带的制备
【实验目的】 学会小鼠骨髓染色体C带的制备
【实验原理】
n 借助特殊的燃料及染色程序,使染色体的一定部 位呈现深浅不同的带纹,可用来鉴别染色体组, 单个染色体以及深入认识染色体的结构和功能。
n C带可使着丝粒区,端粒区的异染色质及其他染 色体区段的异染色质部分呈Giemsa深染,其他 部分呈淡染。
（三）试剂
n 1．秋水仙素:以1mg/mL的浓度溶于0.85％ 生理盐水中。
n 2．低渗液: 0.075mol/lKCl取5.59gKCl加 到1000mL蒸馏水中,在37℃下预热。
n 3．固定液:甲醇:冰醋酸以3:1配制(新鲜的)
【实验步骤】
1.取雌雄小鼠各一只,注射秋水仙素0。1mL于腹腔中,经3。54h后拉颈椎处死。 2.剪开腹腔,剥离出两条后肢,由股骨关节处剪断,取下后肢(注 意不要将股骨剪断)。 3.将骨骼外面的肌肉尽可能剪掉,剩下附着在骨骼上的少许肌 肉,用棉花或 纱布蘸75％酒精来回搓,直到骨骼外面不带任何肌肉为止。 4.剥离股骨,并将股骨头的两端减去少许,然后用4号针头插入 骨髓腔内,将股骨穿通(注意:不要用力过大,以防骨骼破裂)。
24-小鼠骨髓细胞染色体标本制备与观察-教案
小鼠骨髓细胞染色体标本制备的原理和制备方法，小鼠骨髓细胞染色体的基本特征。
授课难点
小鼠骨髓细胞染色体标本制备的原理和制备方法。
授课形式
小班实验教学，分组操作
授课方法
查阅资料和预实验；板书、板图和PPT，口头讲述，操作示范，针对性辅导。
参考文献
1.翟中和，王喜忠，丁明孝.细胞生物学.高等教育出版社，2011
2.李虹.医学生物学与医学细胞生物学.科学出版社，2007
3.杨保胜，李晓文.医学形态学实验指导—细胞生物学与遗传学分册.人民卫生出版社，2005
4.张光谋，李延兰.医学细胞生物学实验技术.科学出版社，2013
思考题
1.简述小鼠骨髓细胞染色体标本制备的原理和操作过程。
2.绘制小鼠骨髓染色体核型示意图。
新乡医学院教案首页
课程名称
医学细胞生物学实验
授课题目
小鼠骨髓细胞染色体标本制备与观察
授课对象
生物医学各专业一年级本专科生
时间分配
讲解本次实验的目的、原理、方法、注意事项及作业30分钟；学生操作与辅导150分钟；总结20分钟。
课时目标
掌握小鼠骨髓细胞染色体标本制备的原理和方法，掌握小鼠骨髓细胞染色体的基本特征。
5.实验动物：3月龄左右小鼠一只。
6.试剂：
(1)100μg/ml秋水仙素：秋水仙素5mg，加5ml灭菌的生理盐水，即成1mg/ml秋水仙素溶液，于冰箱中闭光保存备用，使用时可用生理盐水稀释到100μg/ml固定液；
(2)固定液：甲醇：冰醋酸=3：1（时间过长会产生沉淀，现配现用）；
(3)低渗液：0.075mol/L KCl（提前37℃预热）；
3．低渗：将离心管置37℃恒温水浴箱中，低渗30 min后取出，使细胞充分吸水膨胀。低渗不好则在制片时细胞不易破裂，染色体不易分散开。
小鼠骨髓染色体实验报告
实验课名称遗传学实验实验名称小鼠骨髓细胞染色体的制备与观察成绩________________姓名王大锤实验报告系列年级学号组别时间温度实验原理及目的实验目的1、学习小鼠骨髓细胞染色体制片程序；2、掌握空气干燥法制片方法；3、观察了解小鼠的端着丝粒染色体的形态。
实验原理1、染色体标本制备染色体标本是细胞遗传学最基本的技术，优良的染色体制片是其它技术（如显带、原位杂交等）的先决条件。
2、骨髓细胞染色体染色体的制备在原则上可以从所有发生有丝分裂的组织和细胞悬浮液中得到。
动物染色体制备最常用的途径是从骨髓细胞、血淋巴细胞和组织培养的细胞中制备染色体。
在骨髓细胞中，有丝分裂的指数很高，可以直接得到中期细胞而不必像血淋巴细胞或其它组织需要经过体外培养。
3、空气干燥法指细胞经过秋水仙素处理、低渗处理、充分固定和滴片等步骤之后，使载片在空气中自然干燥的方法。
实验材料、仪器及试齐U仪器：光学显微镜，2mL注射器，5号针头，10mL刻度离心管，吸管，试管，试管架，载玻片，盖片，离心机，光学显微镜，解剖器具（解剖盘，剪子、镊子）。
材料：小白鼠（Mus musculus 2n=40 ）,体重约18-20g （65-90日龄），雌雄皆可。
试剂及其他：秋水仙素溶液（100卩g/mL）, 2%柠檬酸钠溶液，0.075M KCl，冰醋酸，甲醇，Giemsa原液, 0.01 M 磷酸缓冲液（PBS, pH 7.4）1•预处理生命与环境科学学院实验报告进行秋水仙素处理。
取骨髓前3-4h给小鼠经腹腔注入秋水仙素（100卩g/ mL）0.3-0.4mL。
2. 取骨髓处死动物，立即取后肢骨。
用剪刀剪掉、清除腿部的皮肤和肌肉，然后从股骨两端关节头处剪下股骨，立即用2%柠檬酸钠溶液冲洗干净。
剪掉股骨两端膨大的关节头，使其露出骨髓腔，用吸有适当量的柠檬酸钠溶液注射器，从一端插入注射针头，将骨髓吹入10mL刻度离心管中，可反复吹洗数次，直至股骨变白为止。
小鼠骨髓细胞染色体制备与观察PPT
结果分析
实验过程中，细胞培养和染色环节是关键，需要 严格控制实验条件，以保证染色体制备的质量。
染色体观察需要经验丰富的实验员，以确保准确 识别染色体的数目和结构。
实验结果与预期相符，证明了实验方法的可靠性 和准确性。
结果讨论与展望
本实验为小鼠骨髓细胞染色体制备与观察提供了有益 的参考，但仍需进一步优化实验条件和操作步骤，以
04
其他必要的缓冲液和盐溶液
实验仪器
显微镜
01
02
细胞培养箱
离心机
03
04
染色设备（染色缸、染色架等）
恒温水浴锅
05
06
吸管和移液器等定量工具
02
CATALOGUE
实验步骤
小鼠骨髓细胞的采集
01
02
03
麻醉小鼠
使用麻醉剂将小鼠麻醉， 确保其在整个采集过程中 保持安静。
采集骨髓
使用注射器抽取小鼠的骨 髓，注意抽取时要避免混 入其他组织或血液。
染色体组型分析
将染色体制成中期片，进行染色体组型分析，可以观察到染色体的配对情况、 排列顺序等特征，有助于判断染色体的结构异常。
染色体畸变分析
染色体结构畸变
观察染色体的结构畸变，如染色体断裂、倒位、缺失等， 可以分析出细胞在分裂过程中可能遇到的异常情况。
染色体数目畸变
分析染色体数目畸变，如非整倍体、多倍体等现象，有助 于了解细胞分裂过程中的异常变化。
小鼠骨髓细胞染色 体制备与观察
目录
• 实验准备 • 实验步骤 • 实验结果 • 结论与讨论
01
CATALOGUE
实验准备
实验材料
小鼠骨髓细பைடு நூலகம்胞样本
染色体的实验报告
一、实验目的1. 掌握染色体标本的制作方法。
2. 观察并识别有丝分裂中期相的染色体形态。
3. 了解染色体的形态特征及其数目。
二、实验原理染色体是细胞核中具有遗传信息的结构，由DNA和蛋白质组成。
在细胞分裂过程中，染色体复制并分离到子细胞中，从而保证遗传信息的传递。
本实验通过制作染色体标本，观察染色体的形态特征和数目，以了解染色体的结构及其在细胞分裂中的作用。
三、实验材料与试剂1. 实验材料：小鼠骨髓细胞2. 试剂：甲醇、冰醋酸、秋水仙素、生理盐水、卡诺氏固定液、Giemsa染液、载玻片、盖玻片、显微镜等四、实验步骤1. 注射：提前2小时向小鼠注射秋水仙素，使其细胞分裂。
2. 处死小鼠：处死小鼠后，剪下四肢，剔除肉等，剪碎骨。
3. 制备细胞悬液：将剪碎的骨加入生理盐水，制成细胞悬液。
4. 离心：将细胞悬液离心，取沉淀物。
5. 低渗处理：将沉淀物用生理盐水洗涤，加入低渗液，使细胞膜破裂，染色体释放。
6. 预固定：将低渗处理后的细胞用卡诺氏固定液固定，使染色体固定在特定时期。
7. 染色：将固定后的细胞用Giemsa染液染色，使染色体着色。
8. 滴片：将染色后的细胞滴在载玻片上，盖上盖玻片。
9. 观察与记录：在显微镜下观察染色体的形态特征和数目，并进行记录。
五、实验结果与分析1. 染色体形态特征：观察到的染色体呈带状，具有明显的着丝粒，染色体长度不一，数目与小鼠染色体数目一致。
2. 染色体数目：通过观察，记录小鼠染色体的数目，与文献报道的小鼠染色体数目相符。
六、实验讨论1. 秋水仙素在实验中的作用：秋水仙素可以抑制纺锤体的形成，使染色体停留在有丝分裂的中期，便于观察染色体的形态特征。
2. 染色体固定液的选择：卡诺氏固定液是一种常用的染色体固定液，可以使染色体固定在特定时期，便于观察。
3. 染色体的着色：Giemsa染液是一种常用的染色体染色剂，可以使得染色体着色，便于观察。
七、实验结论本实验成功制作了小鼠骨髓染色体标本，并观察了染色体的形态特征和数目。
小鼠骨髓细胞染色体标本的制备
小鼠骨髓细胞染色体标本的制备【目的要求】1.掌握小鼠细胞染色体标本制备方法。
2.计数并观察小鼠骨髓细胞分裂中期染色体的数目及特点【基本原理】在骨髓细胞中，有丝分裂旺盛，因此不需要体外培养就可以直接得到中期细胞。
骨髓细胞具有高度的分裂活性，经秋水仙素或秋水酰胺处理后，使分裂细胞阻断在有丝分裂中期，再经低渗处理、固定、滴片、染色等步骤，可制作较好的骨髓细胞的染色体标本。
【实验用品】1．器材：解剖刀、剪刀、镊子、注射器、离心机、离心管、恒温水浴箱、冰冷载玻片、酒精灯、大培养皿、显微镜、纱布,标签纸，记号笔等；2．试剂0.1%秋水仙素溶液、Carnoy’s固定液（甲醇：冰醋酸＝3：1）、0.075 mol / L KCI溶液、Giemsa 染液等。
3．材料：65-90天健康小鼠（生技09级72人，新华09生物技术36人，生科08级75人，生技08级70人，共253人，需购小鼠110只）【方法与步骤】1．前处理取材前3～4 h，向腹腔内注射秋水仙素。
注射浓度随动物种类不同而异，一般每克体重注射2～6μg，注射总量不宜超过2 ml（例如一只体重50 g的蟾蜍，若按4μg / g注射，需注射浓度为0.1％的秋水仙素溶液0.2 ml ）。
秋水仙素的主要作用是使分裂细胞阻断在有丝分裂中期，增加中期分裂相的比例。
2．取骨髓细胞处死动物，用装有生理盐水的注射器反复冲洗出骨髓细胞，并用注射器筒轻轻吹打，使细胞团块分散，静置片刻、待大组织团块沉淀后，用吸管将骨髓细胞悬浮液移至离心管中，以1000 r / min 离心5~10 min，弃去上清液。
3．低渗根据骨髓细胞液的多少，加0.075 mol / L的KCI液5～6 ml，在37℃水浴箱中或室温下低渗20～30 min。
低渗时间过长，易造成细胞破裂；时间过短，则染色体难以分散。
4．预固定低渗完毕，立即加入1 ml 新配制的预冷Carnoy’s固定液，用吸管将细胞轻轻吹打均匀，进行预固定。
小鼠染色体
一、实验原理
• 骨髓细胞具有高度的分裂增殖能力。因此 可以直接得到中期细胞而不必象血淋巴细 胞或组织那样要经过体外培养。经秋水仙 素处理后，分裂增殖中的骨髓细胞由于纺 缍体的形成受到抑制，染色体不能正常趋 向两极而使之停留于中期，同时染色体缩 短，轮廓清晰，把收获的细胞进行低渗， 固定处理，使细胞处于膨胀状态，再将细 胞悬液滴在载片上，使细胞破裂，染色体 散开，染色后即可观察到染色体。
七、观察
低倍镜寻找中期分裂相，然后用高倍 镜和油镜观察染色体形态，统计染色 体数目。
可见小鼠的40条染色体呈紫红色。
小鼠骨髓细胞染色体图
小鼠骨髓细胞的40条染色体
小鼠骨髓细胞染色体放大图 (10×100)
作业
•1.找到一个分裂相良好的区域，统计小鼠2n 染色体的数目，仔细观察其形态特征并绘骨 髓细胞中期染色体。 •2.低渗液起到什么作用，在使用过程中应注 意什么问题？ •3.你在实验中遇到哪些问题？如何分析和解 释？ •5.交一张制作好的染色体玻片标本。
0.15mg/ml 秋水仙素：取秋水仙素15mg溶于100ml 0.85%生理盐水
中，混匀；
75%酒精：取375ml 95%乙醇，加入125ml馏蒸水；
六、实验步骤
• 1、处理：用1.5mg/kg秋水仙素腹腔 注射处理小鼠（注射量为0.1ml/10g 体重）。即用以上配制的秋水仙溶 液按每10g体重注射0.1ml。注射后324小时，可以取骨髓。
六、实验步骤
实验三、小鼠骨髓染色体制备与观察PPT课件
染色体观察的原理
染色体观察
通过显微镜观察染色体制片，可以观察到染色体的形态、 数目和结构等信息。观察时需要选择适当的显微镜倍数和 焦距，以便清晰地看到染色体。
显微镜倍数选择
根据实验需求选择适当的显微镜倍数。高倍镜下可以观察 到更加细致的染色体结构，但视野较小；低倍镜下可以观 察到更多的染色体，但分辨率较低。
选择合适的区域，使用高倍镜观察染 色体的形态和数目。
低倍镜观察
使用低倍镜观察载玻片上的细胞分布 情况。
数据分析与处理
数据记录
详细记录每个细胞的染色体数目 和形态。
数据整理
将记录的数据进行整理，统计染色 体异常的比例。
结果分析
根据数据结果分析染色体异常与疾 病之间的关系。
04
结果分析
正常染色体特征分析
THANKS
感谢观看
染色体结构异常特征
染色体结构异常是指染色体内部结构的改变，包括易位、倒位、缺失和重复等。这类异常 可能导致遗传性疾病如唐氏综合征、威廉姆斯综合征等，以及生长发育异常、智力障碍和 生育障碍等症状。
03
实验步骤
小鼠骨髓细胞的采集
麻醉小鼠
脱臼处死
切开皮肤和骨骼
抽取骨髓
使用麻醉剂将小鼠麻醉， 确保其在整个实验过程
疾病易感性增加
某些染色体异常可能导致小鼠对某些疾病或药物的易感性增加，如 肿瘤、感染等。
05
结论与讨论
实验结论总结
实验成功制备了小鼠 骨髓染色体，观察到 了清晰的染色体形态 和结构。
实验结果支持了前期 理论分析，验证了实 验方法的可行性和准 确性。
实验结果表明，小鼠 骨髓染色体数目正常， 未发现染色体异常现 象。
中保持安静。
大学课程遗传学实验小鼠骨髓细胞染色体标本的制备与观察 JC课件
9.染色
10.镜检
【内容与方法】
1.动物预处理
• 4.预固定：现配固定液甲醇、冰
2.取材及收集细胞 醋酸（3：1）1ml，打匀，离心8分
3.低渗
钟（1000r/min），弃上清。
4.预固定
5.固定
6.再固定
7.制备细胞悬液
8.滴片
9.染色 10.镜检
使这些细胞及其染色体都固定在当前所处的时期，便于 观察
• 2.取材及收集细胞：颈椎脱臼法处
死小鼠，剪开后肢皮肤和肌肉，取出完整股骨，剔 除肌肉、肌腱，生理盐水洗净；剪去少许股骨头， 吸取4ml37℃预温0.075mol/L KCl低渗液冲洗两个
股骨的骨髓细胞至同一试管。
5.固定
6.再固定
7.制备细胞悬液
8.滴片
9.染色
10.镜检
1.动物预处理 2.取材及收集细胞 3.低渗 4.预固定 5.固定 6.再固定 7.制备细胞悬液 8.滴片 9.染色 10.镜检
【内容与方法】
• 6.再固定：重复步骤5，本
次实验省略不做。
1.动物预处理
【内容与方法】
2.取材及收集细胞
3.低渗 4.预固定 5.固定 6.再固定
• 7.制备细胞悬液：倒净后重
新加适量固定液至半透明（或留 4~5滴 ） ，吸管缓慢打匀。
7.制备细胞悬液
8.滴片
9.染色
10.镜检
【内容与方法】
1.动物预处理 2.取材及收集细胞 3.低渗 4.预固定 5.固定
3.低渗 4.预固定
，制片，染色等步骤制得染色体标本，可观察 到许多处于分裂中期的染色体，可以进行染色 体组型分析。
5.固定
如何做人的染色体制备？
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作业与思考题
1.绘制一个细胞分裂相。 2.KCL的作用。 3.实验结果不理想的原因。
6.弃掉股骨，换上4.5号针头，用注射器吸取生理盐水细胞悬液， 以使冲出的骨髓细胞彼此分散开。
7.将悬液以1000r／min离心10分钟。
8.弃上清液，加入9ml37℃预热的0.075MKCL，于恒温水浴箱中 低渗处理30分钟。
9.加入1ml新配制的固定剂，用吸管轻轻混匀。
10.以800r／min速度离心10分钟。
11.弃上清夜加10毫升新固定剂，用吸管将细胞团打散，混匀， 室温下固定15分钟。
12.离心1000转／分，10分钟。
13.弃上清液，重新加入10毫升固定剂，用吸管吹打细胞，制成 骨髓细胞悬液，室温固定30分钟。
14.1000转离心10分钟。
15.弃上清液，加入3-4滴固定剂，制成细胞悬液。
16.滴1-2滴悬液于冰水浸过的 载波片上（距离10-40cm)，对准 液滴吹气，酒精灯上过2-3次，晾干。 17.吉姆萨染色8-10分钟。 18.流水冲去染液，晾干，观察（油镜）。
小鼠骨髓染色体标本制备
实验目的
• 了解哺乳动物染色体标本的制作方法 • 了解小鼠骨髓细胞染色体形态与数目。
实验原理
• 由于小鼠四肢骨内骨髓细胞中的造血干细 胞是生成各种血细胞和原始细胞，具有高 度的分裂能力，本实验采用这一材料，通 过前处理，低渗，固定，制片，染色等步 骤制得染色体标本，可观察到许多处于分 裂中期的染色体，可以进行染色体组型分 析。
实验ห้องสมุดไป่ตู้察
• 观察细胞的标准为： 1．细胞完整，轮廓清晰，染色体分布在同一水平 面上。 2．染色体形态和分布良好。 3．最好无重叠，即使有个别重叠，也要能明确辩 认，以免差错。 4．所观察的细胞处于同一有丝分裂阶段，即染色 体螺旋化程度或染色体长短大致一样。 在所观察的细胞周围，没有离散的单个或多个染 色体存在，以免影响计数。
实验器材
1．材料：小白鼠 2．器具：注射器（1ml,5ml）、5号针头、解剖盘、 解剖剪、镊子、玻璃吸管、10ml刻度的离心管、 离心机、载玻片、盖玻片、显微镜、滤纸、擦镜 纸、棉花、量筒、天平、恒温水浴锅 3．药品：0.01%秋水仙素、0.075MKCl、固定液 （甲醇：冰醋酸=3：1）、Giemsa染液、0.01M 磷酸缓冲液（PH6.8），0.85%生理盐水。
实验过程
1．预处理：实验前2.5-3小时，按每克体重注射0.02ml，给小 白鼠腹腔注射秋水仙素。
2.断髓法杀死小鼠
3.髋关节处断下肢，剥去皮肉，用纱布擦去残肉，膝关节断下 股骨。
4.用解剖针从两端刺透骨髓腔，将股骨一端固定在装有6.5号针 头的1ml注射器上。
5.在装有3ml生理盐水的离心管中用注射器吸取盐水，反复冲洗 骨髓，直至股骨变白。