医学细胞生物学实验培训课件
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《细胞生物学实验》课件
荧光染色实验
原理，实验步骤
细胞凋亡实验
1 原理
描述细胞凋亡的机制和原理
2 实验步骤
介绍如何进行细胞凋亡实验的步骤
结束语
总结课程内容，展望细胞生物学的未来研究方向。
《细胞生物学实验》PPT 课件
细胞生物学实验PPT课件大胞质、细胞核
细胞器的功能
线粒体、内质网、高尔基体、溶酶体
细胞生命周期
1
细胞分裂
有丝分裂、减数分裂
2
细胞生长和增殖
细胞周期
细胞生物学实验
细胞培养实验
细胞培养介质的配制，细胞培养的基本操作
细胞敲除实验
原理，实验步骤
2024版医学细胞生物学教学课件电子教案全套课件pptx
•医学细胞生物学概述•细胞基本结构与功能•细胞分裂、增殖与凋亡•细胞信号传导与通讯目录•基因表达调控与疾病关系•细胞免疫与疾病防治策略01医学细胞生物学定义与特点定义特点细胞结构与功能细胞代谢细胞遗传与发育细胞信号传导与调控医学细胞生物学研究内容通过研究细胞结构和功能的异常变化，揭示疾病的发生和发展机制。
疾病发生机制诊断与治疗再生医学与组织工程精准医疗与个体化治疗为疾病的诊断提供细胞学依据，同时为药物设计和治疗策略的制定提供理论支持。
利用细胞培养和组织工程技术，研究和开发用于修复或替代受损组织和器官的生物医学应用。
结合基因测序和细胞分析技术，实现疾病的精准诊断和个体化治疗。
医学细胞生物学与医学关系02细胞膜功能细胞膜组成与结构物质运输、信息传递、能量转换等。
细胞膜与疾病关系细胞质组成与结构细胞质功能细胞质与疾病关系030201细胞核组成与结构细胞核功能细胞核与疾病关系03细胞周期及调控机制细胞周期定义01细胞周期阶段02调控机制03有丝分裂定义真核细胞分裂的一种方式，通过一系列复杂的形态变化，将母细胞的遗传物质平均分配到两个子细胞中。
有丝分裂过程前期、中期、后期和末期，包括染色体凝集、纺锤体形成、染色体分离和细胞质分裂等步骤。
有丝分裂意义保证亲代和子代细胞具有相同的遗传信息，维持生物体的遗传稳定性和连续性。
减数分裂过程第一次减数分裂和第二次减数分裂，包括染色体配对、联会复合体形成、同源染色体分离和非同源染色体自由组合等步骤。
减数分裂定义生物细胞中染色体数目减半的分裂方式，是生殖细胞（精子和卵细胞）形成过程中的一种特殊的有丝分裂。
减数分裂意义实现遗传物质的重组和多样性，为生物进化提供物质基础；同时保证生殖细胞中染色体数目的稳定性，确保生物种群的遗传稳定性。
细胞凋亡机制及意义细胞凋亡定义细胞凋亡机制细胞凋亡意义04信号传导途径和机制膜受体介导的信号传导01胞内受体介导的信号传导02信号传导的分子机制03细胞间通讯方式和作用直接细胞间通讯通过细胞间直接接触，如突触传递、细胞间桥粒连接等实现信息交换。
《医学细胞生物学》课件
细胞周期与细胞分裂
研究细胞增殖的调控机制，包括 细胞周期的调控、细胞分裂和染 色体分离等过程。
细胞膜的结构与功能
研究细胞膜的组成、结构和功能 ，以及物质跨膜运输、信号转导 等机制。
细胞凋亡与自噬
研究细胞死亡的机制和过程，包 括凋亡和自噬等。
医学细胞生物学与医学的关系
医学细胞生物学为医学提供了基础理 论知识和技术手段，为疾病的预防、 诊断和治疗提供了理论基础和实践指 导。
瘤进行治疗。
THANKS
感谢观看
物质进出细胞。
细胞膜的功能
细胞膜具有多种功能，包括物质转 运、信号转导、细胞识别等，对维 持细胞正常生理活动至关重要。
细胞膜的结构特点
细胞膜具有双层膜结构，膜蛋白和 脂质分子具有一定的流动性，这种 流动性对于细胞适应外界环境变化 具有重要意义。
细胞器的结构与功能
线粒体的结构与功能
叶绿体的结构与功能
自身免疫性疾病的细胞基础
自身免疫性疾病概述
自身免疫性疾病是一类由于机体免疫系统对自身组织或器官产生异常反应而导致的疾病 ，如类风湿性关节炎、系统性红斑狼疮等。
自身免疫性疾病的细胞基础
自身免疫性疾病的发生与多种免疫细胞有关，如T淋巴细胞、B淋巴细胞、巨噬细胞等 。这些细胞的异常活化和免疫应答可以导致自身组织的损伤和炎症反应，引发自身免疫
医学细胞生物学的发展也促进了医学 领域的科技进步和创新发展，为提高 人类健康水平和生活质量做出了重要 贡献。
通过研究细胞的生理和病理过程，可 以深入了解疾病的发病机制和发展过 程，为新药研发和治疗方法提供思路 和方向。
02
细胞的结构与功能
细胞膜的结构与功能
细胞膜的组成
细胞膜由脂质、蛋白质和糖类组 成，具有选择透过性，能够控制
医学细胞生物学(全套13PPT课件)
01
通过研究药物对细胞生物学过程的影响，揭示药物作用机制，
为药物优化和研发提供理论依据。
药物筛选与评价
02
利用细胞模型进行药物筛选和评价，预测药物疗效和副作用，
提高药物研发效率。
个性化医疗方案制定
03
基于患者的基因型和细胞特征，制定个性化的医疗方案，提高
治疗效果。
医学细胞生物学在再生医学中应用
1 2
医学细胞生物学(全套 13PPT课件)
目录
• 细胞生物学概述 • 细胞基本结构与功能 • 细胞代谢与能量转换 • 细胞增殖、分化与凋亡 • 医学应用与实践 • 前沿技术与挑战
01 细胞生物学概述
细胞生物学定义与研究对象
细胞生物学的定义
细胞生物学是研究细胞结构、功 能、发生、发展及其与疾病关系 的科学。
医学细胞生物学研究内容与任务
研究内容
医学细胞生物学主要研究人体细胞的结构、功能、代谢、遗传以及与疾病的关 系。
研究任务
揭示人体细胞的生命活动规律；探索疾病的细胞生物学机制；为医学提供理论 基础和实验依据。
02 细胞基本结构与 功能
细胞膜结构与功能
细胞膜的化学组成
主要由脂质、蛋白质和少量糖类组成 ，其中脂质以磷脂为主，蛋白质则以 各种形式嵌入或附着于脂质双分子层 中。
细胞形态学观察
通过对细胞形态、结构和数量的 观察，判断细胞是否正常，辅助
疾病诊断。
细胞遗传学分析
应用细胞遗传学技术，分析染色体 结构和数量异常，诊断遗传性疾病 。
细胞免疫学检测
检测免疫细胞的种类、数量和活性 ，评估机体免疫状态，辅助免疫相 关疾病的诊断。
医学细胞生物学在药物研发中应用
药物作用机制研究
细胞生物学实验ppt课件
nuclei
28
四、作业
1．绘制口腔上皮细胞(点线绘图法) 2．低倍镜、高倍镜下测微尺的标定方法及结果 3．计算核质比
29
镜台测微尺
30
目镜测微尺（200小格）
31
实验二、细胞生理活 动的实验观察
32
实验目的
通过制片与观察加深理解细胞吞噬等生理活动 掌握死活细胞鉴别的原理及方法
许多酸性染料不易穿过活细胞的质 膜进入细胞内，却能渗入死亡的细胞 内，使其着色，以此来鉴别死活细胞。
8
9
(一)临时制片——口腔上皮细胞标本的制备
取载玻片一张(揩净)→加一滴生理盐水→取材(口腔内颊 部上皮细胞)→涂于生理盐水中→盖盖玻片→染色(甲基 蓝)1’→观察
10
(二)显微测量
1．显微测量计
目镜测微尺 镜台测微尺
11
(1) 目镜测微尺
1.外形是一圆形玻片，装入目镜镜筒中。 用于测量标本用。 2.刻度标记0~100，实际分为200等份，每一个格的长
度需用镜台测微尺标定。
12
(2) 镜台测微尺
1.外形是一载玻片，上有一带精细刻度的标尺。 2.总长度为1mm，分为100等份，每一个格的长度为
0.01mm(10μm)。
13
(3)标定方法
①将镜台测微尺置镜台上。 ②低倍下找到镜台测微尺，使之与目镜测微尺平行且
左端对齐(0刻度重合)。
using of the microscope
(I) Use of low objective lens (II) Use of high objective lens
7
Structure of the microscope Mechanical part Optics part Lighting part
28
四、作业
1．绘制口腔上皮细胞(点线绘图法) 2．低倍镜、高倍镜下测微尺的标定方法及结果 3．计算核质比
29
镜台测微尺
30
目镜测微尺（200小格）
31
实验二、细胞生理活 动的实验观察
32
实验目的
通过制片与观察加深理解细胞吞噬等生理活动 掌握死活细胞鉴别的原理及方法
许多酸性染料不易穿过活细胞的质 膜进入细胞内，却能渗入死亡的细胞 内，使其着色，以此来鉴别死活细胞。
8
9
(一)临时制片——口腔上皮细胞标本的制备
取载玻片一张(揩净)→加一滴生理盐水→取材(口腔内颊 部上皮细胞)→涂于生理盐水中→盖盖玻片→染色(甲基 蓝)1’→观察
10
(二)显微测量
1．显微测量计
目镜测微尺 镜台测微尺
11
(1) 目镜测微尺
1.外形是一圆形玻片，装入目镜镜筒中。 用于测量标本用。 2.刻度标记0~100，实际分为200等份，每一个格的长
度需用镜台测微尺标定。
12
(2) 镜台测微尺
1.外形是一载玻片，上有一带精细刻度的标尺。 2.总长度为1mm，分为100等份，每一个格的长度为
0.01mm(10μm)。
13
(3)标定方法
①将镜台测微尺置镜台上。 ②低倍下找到镜台测微尺，使之与目镜测微尺平行且
左端对齐(0刻度重合)。
using of the microscope
(I) Use of low objective lens (II) Use of high objective lens
7
Structure of the microscope Mechanical part Optics part Lighting part
《细胞生物学实验》PPT课件
35
备注
36
实验四 叶绿体的分离与荧光观察
一、实验目的：
1.通过植物细胞叶绿体的分离，了解细胞器 分离的一般原理和方法；
2.观察叶绿体的自发荧光和次生荧光，并熟 悉荧光显微镜的使用方法。
37
二、 实验原理
组织匀浆后悬浮在等渗介质中进行差速离心，是 分离细胞器的常用方法。一个颗粒在离心场中的沉降 速率取决于颗粒的大小、形状和密度，也同离心力以 及悬浮介质的粘度有关。在一给定的离心场中，同一 时间内，密度和大小不同的颗粒其沉降速率不同。依 次增加离心力和离心时间，就能够使非均一悬浮液中 的颗粒按其大小、密度先后分批沉降在离心管底部， 分批收集即可获得各种亚细胞组分。
53
实验内容与实施过程
4、植物原生质体的分离和培养（ 课内完成，180min） ①取充分展开的嫩叶，用自来水冲洗干净； ②将叶片在0.1%升汞溶液中浸泡灭菌10min，然后用无 菌蒸馏水漂洗5次； ③用镊子撕去叶的下表皮，然后将叶放有酶液的培养 皿或带盖三角瓶，每10ml酶液放2g叶片；
49
②原生质体分离纯化或融合后，在适当的 培养基上应用合适的培养方法，能够再生细胞 壁，并启动细胞持续分裂，直至形成细胞团， 长成愈伤组织或胚状体，再分化发育成苗。其 中，选择合适的培养基及培养方法是原生质体 培养中最基础也是最关键的环节。
50
三、实验仪器
台式离心机、 高压灭菌锅、 倒置显微镜、 超净工作台
26
③詹纳斯绿B：詹纳斯绿B能专一的对线粒 体进行活体染色。线粒体中细胞色素氧 化酶使染料保持氧化状态，即有色状态， 呈蓝绿色，而在周围的细胞质中染料被 还原，成为无色状态
27
三、实验仪器
显微镜、恒温水浴锅、解剖盘、剪刀、镊子、 双面刀片、解剖盘．载玻片、凹面载玻片、盖 玻片、表面皿、吸管、牙签、吸水纸。
备注
36
实验四 叶绿体的分离与荧光观察
一、实验目的：
1.通过植物细胞叶绿体的分离，了解细胞器 分离的一般原理和方法；
2.观察叶绿体的自发荧光和次生荧光，并熟 悉荧光显微镜的使用方法。
37
二、 实验原理
组织匀浆后悬浮在等渗介质中进行差速离心，是 分离细胞器的常用方法。一个颗粒在离心场中的沉降 速率取决于颗粒的大小、形状和密度，也同离心力以 及悬浮介质的粘度有关。在一给定的离心场中，同一 时间内，密度和大小不同的颗粒其沉降速率不同。依 次增加离心力和离心时间，就能够使非均一悬浮液中 的颗粒按其大小、密度先后分批沉降在离心管底部， 分批收集即可获得各种亚细胞组分。
53
实验内容与实施过程
4、植物原生质体的分离和培养（ 课内完成，180min） ①取充分展开的嫩叶，用自来水冲洗干净； ②将叶片在0.1%升汞溶液中浸泡灭菌10min，然后用无 菌蒸馏水漂洗5次； ③用镊子撕去叶的下表皮，然后将叶放有酶液的培养 皿或带盖三角瓶，每10ml酶液放2g叶片；
49
②原生质体分离纯化或融合后，在适当的 培养基上应用合适的培养方法，能够再生细胞 壁，并启动细胞持续分裂，直至形成细胞团， 长成愈伤组织或胚状体，再分化发育成苗。其 中，选择合适的培养基及培养方法是原生质体 培养中最基础也是最关键的环节。
50
三、实验仪器
台式离心机、 高压灭菌锅、 倒置显微镜、 超净工作台
26
③詹纳斯绿B：詹纳斯绿B能专一的对线粒 体进行活体染色。线粒体中细胞色素氧 化酶使染料保持氧化状态，即有色状态， 呈蓝绿色，而在周围的细胞质中染料被 还原，成为无色状态
27
三、实验仪器
显微镜、恒温水浴锅、解剖盘、剪刀、镊子、 双面刀片、解剖盘．载玻片、凹面载玻片、盖 玻片、表面皿、吸管、牙签、吸水纸。
医学细胞生物学课件
2023
医学细胞生物学课件
医学细胞生物学概述细胞的基本结构和功能细胞增殖与调控细胞分化与组织构建细胞衰老与死亡医学细胞生物学研究方法
contents
目录
01
医学细胞生物学概述
定义
医学细胞生物学是一门研究细胞结构、功能、生长、发育和死亡规律的科学，是医学研究的重要分支。
特点
具有微观性、实验性、抽象性和应用性等特点。
细胞增殖与调控
细胞周期定义
细胞周期各时相特点
细胞周期与的复制与修复
DNA复制基本过程
解旋、合成子链、形成子代DNA。
DNA修复类型
碱基切除修复、核苷酸切除修复和重组修复。
DNA复制特点
半保留复制和半不连续复制。
03
原癌基因与抑癌基因
原癌基因是细胞内与细胞增殖相关的基因，抑癌基因是抑制细胞过度生长、增殖的基因。
细胞分化的定义
细胞分化是指在个体发育中，由一个或一种细胞增殖产生的后代，在形态，结构和生理功能上发生稳定性差异的过程。
细胞分化的特点包括其不可逆性、基因选择性表达和细胞间的异质性。
细胞分化的分子机制主要包括基因表达调控和表观遗传修饰。
细胞分化的特点
细胞分化的分子机制
胚胎干细胞的特性
01
胚胎干细胞具有自我更新和多向分化的潜能，能够分化为各种组织和器官。
探究药物与靶点的作用机制，研究新药的发现与优化。
生物化学与分子生物学技术
光学显微镜技术
通过普通光学显微镜观察细胞的整体形态、结构及细胞内物质的分布情况。
电子显微镜技术
利用电子显微镜观察细胞的超微结构及细胞内生物大分子的分布情况。
显微观察技术与方法
THANK YOU.
医学细胞生物学实验教学课件
适用人群
医学生
生物学教师
细胞生物学研究人员
对细胞生物学感兴趣的公众
课件特点
内容丰富：涵盖细胞生物学实验的基本原理、操作步骤和注意事项
实用性强：结合实际实验案例，提高学生的实践能力和创新能力
直观易懂：采用图文并茂的形式，便于学生理解和掌握实验操作
互动性强：提供在线问答和讨论区，便于师生互动和交流
课件内容
实验报告撰写：要求学生撰写实验报告，提高实验技能和总结能力
案例分析：通过实际病例分析，加深学生对理论知识的理解
互动讨论：鼓励学生提问和讨论，提高学习积极性
教学评估
5
评估方法一
添加标题
添加标题
添加标题
添加标题
实验结果分析评估：通过分析学生的实验结果，评估其数据分析和问题解决能力。
实验操作技能评估：通过观察学生的实验操作过程，评估其技能掌握程度。
课堂参与度评估：通过观察学生的课堂参与情况，评估其学习积极性和团队合作能力。
评估方法三
实验操作技能评估：通过观察学生的实验操作过程，评估其技能掌握程度。
实验结果分析评估：通过分析学生的实验结果，评估其数据分析和解决问题的能力。
实验报告撰写评估：通过阅读学生的实验报告，评估其实验设计和实验结果的表述能力。
实验后总结：分析实验结果，撰写实验报告
教学方法二：采用多媒体教学，通过视频、图片等方式展示实验过程
实验前准备：预习实验内容，了解实验目的和操作步骤
实验过程中：注重实际操作，掌握实验技能
教学方法二
实验操作演示：通过视频或图片展示实验操作步骤
互动教学：鼓励学生提问和参与讨论，提高学习积极性
案例分析：通过分析实际病例，加深学生对理论知识的理解
医学生
生物学教师
细胞生物学研究人员
对细胞生物学感兴趣的公众
课件特点
内容丰富：涵盖细胞生物学实验的基本原理、操作步骤和注意事项
实用性强：结合实际实验案例，提高学生的实践能力和创新能力
直观易懂：采用图文并茂的形式，便于学生理解和掌握实验操作
互动性强：提供在线问答和讨论区，便于师生互动和交流
课件内容
实验报告撰写：要求学生撰写实验报告，提高实验技能和总结能力
案例分析：通过实际病例分析，加深学生对理论知识的理解
互动讨论：鼓励学生提问和讨论，提高学习积极性
教学评估
5
评估方法一
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添加标题
实验结果分析评估：通过分析学生的实验结果，评估其数据分析和问题解决能力。
实验操作技能评估：通过观察学生的实验操作过程，评估其技能掌握程度。
课堂参与度评估：通过观察学生的课堂参与情况，评估其学习积极性和团队合作能力。
评估方法三
实验操作技能评估：通过观察学生的实验操作过程，评估其技能掌握程度。
实验结果分析评估：通过分析学生的实验结果，评估其数据分析和解决问题的能力。
实验报告撰写评估：通过阅读学生的实验报告，评估其实验设计和实验结果的表述能力。
实验后总结：分析实验结果，撰写实验报告
教学方法二：采用多媒体教学，通过视频、图片等方式展示实验过程
实验前准备：预习实验内容，了解实验目的和操作步骤
实验过程中：注重实际操作，掌握实验技能
教学方法二
实验操作演示：通过视频或图片展示实验操作步骤
互动教学：鼓励学生提问和参与讨论，提高学习积极性
案例分析：通过分析实际病例，加深学生对理论知识的理解
医学细胞生物学课件
G蛋白偶联受体介导的信号转导
01
G蛋白偶联受体结构与功能
G蛋白偶联受体是一种跨膜蛋白，可与G蛋白偶联，通过G蛋白的信号
转导作用，将外界刺激转化为细胞内生化反应。
02 03
信号转导过程
当G蛋白偶联受体受到刺激后，构象发生变化，与G蛋白偶联，激活G 蛋白，进而激活下游效应分子，如腺苷酸环化酶、磷脂酶C等，触发 一系列生化反应。
基因治疗
利用基因编辑技术修复缺陷基因，为遗传病、肿瘤等疾 病的治疗提供新的解决方案。
药物筛选与优化
利用基因编辑技术建立疾病模型，为新药研发提供有效 工具，加速药物筛选与优化过程。
系统生物学在医学细胞生物学中的应用前景
系统生物学的发展
01
系统生物学研究将从基因、细胞、组织等多个层次全面揭示生
物体系的复杂性和协同性。
细胞的基本结构与功能
细胞的化学组成
水分
占细胞重量的70%以上 ，是细胞内酶反应的介 质，且有助于维持细胞 形态。
碳水化合物
蛋白质
脂质
包括糖原、淀粉和纤维 素等，为细胞提供能量 和结构支持。
占细胞干重的50%以上 ，参与细胞的代谢、结 构形成和功能调节。
包括脂肪、磷脂和胆固 醇等，是细胞的能源储 备和调节物质。
信号转导过程
当酶联型受体受到刺激后，构象发生变化，激活酶活性，催化底物反应，产生信号分子， 传递到细胞内部，触发一系列生化反应。
酶联型受体在细胞通讯中的作用
酶联型受体可以感知特定刺激，如激素等，通过信号转导将信息传递给细胞内部，参与多 种细胞反应，如激素调节、神经传导等。
细胞通讯中的信号转导网络
01
细胞核与染色体
细胞核
储存遗传信息的细胞器，由核 膜、核仁和染色质构成。
医学细胞生物学实验_PPT幻灯片
颗粒白细胞 嗜中性颗粒白细胞；嗜酸性颗粒白细胞；嗜碱性颗粒白 细胞
无颗粒白细胞 淋巴细胞；单核细胞
血小板
【作业】 绘图：各种细胞的形态结构，并标示出 细胞的各部分
实验报告要求：
实验名称： 实验目的： 实验原理： 实验步骤： 实验结果和分析：
实验二 线粒体的超活染色 和细胞显微结构的观察
【实验步骤】
A. DNA和RNA的定位
制备蛙血涂片1张，晾干。 固定：70％乙醇固定5min。 染色：滴1d甲基绿-哌洛宁染液染色5-10min，
水冲洗后在纯丙酮中分化处理2-3s。 观察绘图
【实验步骤】
B. 血细胞计数
制备蛙血细胞悬液，稀释400-600× 熟悉血细胞计数板，找到计数室和计数区域 盖玻片盖在计数板槽上，吸取1d血细胞悬液滴在盖
【作业】
绘图：人口腔上皮细胞（显示线粒体） 小鼠肝细胞（显示线粒体） 兔脊神经节细胞（显示高尔基体）
光镜下高尔基复合体
实验三 细胞内核酸的定位 和细胞计数
【实验目的】
掌握细胞化学技术定位细胞组分的一般方法； 掌握细胞内核酸的分布特点； 掌握活细胞计数的方法。
【实验原理】
A. 细胞化学染色与DNA和RNA的定位
核酸分为DNA和RNA，呈酸性, 可与碱性染料 反应而显色和定位。由于两类核酸分子聚合程 度不同，对不同的碱性染料亲和力不同，甲基 绿-哌洛宁染料的两种组分分别对DNA和RNA 有高亲和力，并分别将二者染成蓝绿色和红色。
【实验原理】
B. 细胞计数
血细胞计数板包括2个计数室，每个计数室有9个 大格，每大格的体积为0.1mm3，计数4大格内（4 个角）的细胞数，根据每大格的体积和细胞悬液 的稀释倍数即可算出细胞密度。
玻片外侧边缘，使其渗入计数室 10×物镜下计数（四角的4大格） 细胞密度换算： 细胞数/ml=4大格细胞数/4 ×10000×稀释倍数
无颗粒白细胞 淋巴细胞；单核细胞
血小板
【作业】 绘图：各种细胞的形态结构，并标示出 细胞的各部分
实验报告要求：
实验名称： 实验目的： 实验原理： 实验步骤： 实验结果和分析：
实验二 线粒体的超活染色 和细胞显微结构的观察
【实验步骤】
A. DNA和RNA的定位
制备蛙血涂片1张，晾干。 固定：70％乙醇固定5min。 染色：滴1d甲基绿-哌洛宁染液染色5-10min，
水冲洗后在纯丙酮中分化处理2-3s。 观察绘图
【实验步骤】
B. 血细胞计数
制备蛙血细胞悬液，稀释400-600× 熟悉血细胞计数板，找到计数室和计数区域 盖玻片盖在计数板槽上，吸取1d血细胞悬液滴在盖
【作业】
绘图：人口腔上皮细胞（显示线粒体） 小鼠肝细胞（显示线粒体） 兔脊神经节细胞（显示高尔基体）
光镜下高尔基复合体
实验三 细胞内核酸的定位 和细胞计数
【实验目的】
掌握细胞化学技术定位细胞组分的一般方法； 掌握细胞内核酸的分布特点； 掌握活细胞计数的方法。
【实验原理】
A. 细胞化学染色与DNA和RNA的定位
核酸分为DNA和RNA，呈酸性, 可与碱性染料 反应而显色和定位。由于两类核酸分子聚合程 度不同，对不同的碱性染料亲和力不同，甲基 绿-哌洛宁染料的两种组分分别对DNA和RNA 有高亲和力，并分别将二者染成蓝绿色和红色。
【实验原理】
B. 细胞计数
血细胞计数板包括2个计数室，每个计数室有9个 大格，每大格的体积为0.1mm3，计数4大格内（4 个角）的细胞数，根据每大格的体积和细胞悬液 的稀释倍数即可算出细胞密度。
玻片外侧边缘，使其渗入计数室 10×物镜下计数（四角的4大格） 细胞密度换算： 细胞数/ml=4大格细胞数/4 ×10000×稀释倍数
《医学细胞生物学》PPT课件
激光共聚焦扫描显微镜
绿蓝 色色 为为 微细 管胞
核
激光共聚焦扫描显微镜用激光作扫描光源，由于激光束的波长较短， 光束很细，所以共焦激光扫描显微镜有较高的分辨力，大约是普通光 学显微镜的3倍。
调焦深度不一样时，就可以获得样品不同深度层次的图像，这些 图像信息都储于计算机内，通过计算机分析和模拟，就能显示细胞样 品的立体结构。
1932年Ruska发明了以电子束为光源，用 电磁场作透镜的电子显微镜 。 电子显微镜的放大倍数最高可达近百万倍 透射电子显微镜 扫描电子显微镜
透射电子显微镜
RER的形态
显 与分子生物学技术
细胞化学技术
组织化学或细胞化学染色：是利用染色剂可同细胞的某种成分发生反应而着色 的原理，对某种成分进行定性或定位研究的技术。
分子杂交技术
具有互补核苷酸序列的两条单链核苷酸分子片段，在适当条件下，通过氢键 结合，形成DNA-DNA，DNA-RNA或RNA-RNA杂交的双链分子。 这种技术可用来测定单链分子核苷酸序列间是否具有互补关系。
人类染色体 端粒DNA的 荧光原位杂交
最初是使用带放射性的DNA探针，通过放射自显影 来显示位置。后来又发明了免疫探针法，将探针核 苷酸的侧链加以改造，探针杂交后，其侧链可被带 有荧光标记的抗体所识别，从而显示出位置。
显微光谱分析技术
细胞中有一些成分具有特定的吸收光谱，核酸、蛋白质、细胞色素、维生素 等都有自己特征性的吸收曲线。例如，核酸的吸收波长为260nm，而蛋白质 的则为280nm。根据细胞成分所具有的这种特性，可利用显微分光光度计对 某些成分进行定位、定性，甚至定量测定
放射自显影术
用于研究标记化合物在机体、组织和细胞中的分布、定位、排出以及合成、 更新、作用机理、作用部位等等。 原理是将放射性同位素（如14C和3H）标记的化合物导入生物体内，将标本 制成切片或涂片，涂上卤化银乳胶，组织中的放射性即可使乳胶感光。显 示还原的黑色银颗粒，即可得知标本中标记物的准确位置和数量。
医学细胞生物学ppt课件
细胞结构与功能
细胞膜组成与功能
细胞膜的主要成分
01
脂质、蛋白质和糖类
细胞膜的结构模型
02
流动镶嵌模型
细胞膜的功能
03
物质运输、信息传递、能量转换等
细胞质基质及内含物
细胞质基质的主要成分
水、无机盐、脂质、糖类、氨基酸等
细胞内含物的主要类型
细胞器、包含物、分泌物等
细胞质基质及内含物的功能
参与细胞代谢、维持细胞形态、储存遗传信息等
某些神经退行性疾病中，蛋白质 的异常聚集和沉积可导致神经元
功能障碍和死亡。
心血管疾病内皮细胞功能障碍
内皮细胞损伤
在心血管疾病中，内皮细胞受到 各种有害因素的刺激，如高血压、
高血脂、糖尿病等，导致内皮细 胞损伤和功能障碍。
炎症反应
内皮细胞损伤后，可引发炎症反应， 吸引炎症细胞浸润并释放炎症因子， 进一步加物学关系
肿瘤发生发展过程中细胞变化
肿瘤细胞增殖失控
正常细胞增殖受到严格调控，而肿瘤细胞能够 逃避这些调控机制，实现无限增殖。
细胞凋亡受阻
凋亡是细胞程序性死亡的过程，对于维持组织 稳态至关重要。肿瘤细胞能够抑制凋亡信号， 从而逃避死亡。
细胞侵袭和转移
肿瘤细胞具有侵袭和转移的能力，能够破坏周 围组织并扩散到其他部位。
神经退行性疾病中神经元损伤机制
神经元凋亡
在神经退行性疾病中，神经元凋 亡是一个重要环节。凋亡过程涉 及一系列基因和蛋白的激活，最
终导致神经元死亡。
氧化应激
氧化应激是指细胞内氧化与抗氧 化失衡，导致活性氧（ROS）积 累，对细胞造成损伤。在神经退 行性疾病中，氧化应激可导致神
经元损伤和死亡。
蛋白质异常聚集
细胞膜组成与功能
细胞膜的主要成分
01
脂质、蛋白质和糖类
细胞膜的结构模型
02
流动镶嵌模型
细胞膜的功能
03
物质运输、信息传递、能量转换等
细胞质基质及内含物
细胞质基质的主要成分
水、无机盐、脂质、糖类、氨基酸等
细胞内含物的主要类型
细胞器、包含物、分泌物等
细胞质基质及内含物的功能
参与细胞代谢、维持细胞形态、储存遗传信息等
某些神经退行性疾病中，蛋白质 的异常聚集和沉积可导致神经元
功能障碍和死亡。
心血管疾病内皮细胞功能障碍
内皮细胞损伤
在心血管疾病中，内皮细胞受到 各种有害因素的刺激，如高血压、
高血脂、糖尿病等，导致内皮细 胞损伤和功能障碍。
炎症反应
内皮细胞损伤后，可引发炎症反应， 吸引炎症细胞浸润并释放炎症因子， 进一步加物学关系
肿瘤发生发展过程中细胞变化
肿瘤细胞增殖失控
正常细胞增殖受到严格调控，而肿瘤细胞能够 逃避这些调控机制，实现无限增殖。
细胞凋亡受阻
凋亡是细胞程序性死亡的过程，对于维持组织 稳态至关重要。肿瘤细胞能够抑制凋亡信号， 从而逃避死亡。
细胞侵袭和转移
肿瘤细胞具有侵袭和转移的能力，能够破坏周 围组织并扩散到其他部位。
神经退行性疾病中神经元损伤机制
神经元凋亡
在神经退行性疾病中，神经元凋 亡是一个重要环节。凋亡过程涉 及一系列基因和蛋白的激活，最
终导致神经元死亡。
氧化应激
氧化应激是指细胞内氧化与抗氧 化失衡，导致活性氧（ROS）积 累，对细胞造成损伤。在神经退 行性疾病中，氧化应激可导致神
经元损伤和死亡。
蛋白质异常聚集
《医学细胞生物学》PPT课件
医学细胞生物学重要性
揭示疾病发生机制
通过研究细胞的结构和功能异常，可 以揭示许多疾病的发生和发展机制， 为疾病的诊断和治疗提供理论依据。
寻找新的治疗靶点
推动医学发展
医学细胞生物学的发展不仅推动了基 础医学的进步，也为临床医学提供了 新的诊断和治疗手段，提高了疾病的 治愈率和患者的生活质量。
细胞生物学研究可以发现新的药物作 用靶点和治疗方法，为药物研发提供 新的思路。
生长曲线
描述细胞生长速度与时间关系的曲线，包括潜伏期、对数生长期 、平台期和衰亡期。
衰老过程中细胞结构和功能变化
细胞结构变化
01
细胞核异染色质增多、线粒体数量减少且功能下降、细胞膜通
透性改变等。
细胞功能变化
02
蛋白质合成能力下降、酶活性降低、代谢速率减慢等。
衰老相关基因表达
03
如p53、p16等基因表达上调，促进细胞衰老。
03
比较
凋亡是主动过程，需要能量和基因调控；坏死是被动过程，无需能量和
基因调控。两者在形态学特征、发生机制和生物学意义等方面存在显著
差异。
07
医学应用与展望
医学领域应用举例
疾病诊断
通过细胞生物学技术，如细胞培养、细 胞染色和细胞成像等，对疾病进行早期
诊断和预后评估。
再生医学
通过细胞培养和组织工程等技术，实 现人体组织和器官的再生和修复，为
1 2
G蛋白偶联受体介导的信号传导
通过G蛋白将细胞外信号转导至细胞内，激活或 抑制效应器酶，产生细胞内第二信使，引发细胞 应答。
酶联型受体介导的信号传导
受体本身具有酶活性，或结合后激活酶活性，通 过酶促反应将细胞外信号放大并传递至细胞内。
细胞生物学第二章细胞生物学实验技术(共103张PPT)
距离最近两个光点的能力）为，扫描电镜的有效放 大倍率为。
Figure 3-23.
Scanning electron microscope（ SEM）
• 工作原理：是用一束极细的电子束扫描样品，在样品表面激发出 次级电子，次级电子的多少与样品表面结构有关，次级电子由探 测器收集，信号经放大用来调制荧光屏上电子束的强度，显示出 与电子束同步的扫描图像。
度上扫描样品时，此处电子云重叠，外加一电压（2mV~2V），针 尖与样品之间形成隧道电流。电流强度与针尖和样品间的距 离有函数关系，将扫描过程中电流的变化转换为图像，即可 显示出原子水平的凹凸形态。
• 分辨率：横向为，纵向可达。 • 用途：三态（固态、液态和气态）物质均可进行观察。
扫描隧道显微镜原理
• 分辨力，放大倍数可达百万倍； • 用于观察超微结构（小于）。
表二、不同光线的波长
名 称 可见光 紫外光 X 射线 α 射线
电子束
0.1Kv 10Kv
波长（nm） 390~760 13~390 0.05~13 0.005~1 0.123 0.0122
TEM LIGHT PATHWAY
电镜与光镜的比较
第二章 细胞生物学实验技术
METHODS AND TECHNIQUES
对细胞生命活动的研究成为当今生命科学发展的瓶颈 细胞生命活动
突突变变体体分分析析 基因表达
序列测定
DNA分离与克隆 功能基因组学
蛋白修饰分析
生物信息学
多肽定性分析
机器人技术
(robotics)
双向电泳分析
蛋白质分离与制备
蛋白质组学
（sc三an）nin扫g•描tu隧nn道进eli显ng微入m镜ic显rosc微ope，镜ST的M 光线为偏振光，镜筒中有检偏器 （与起偏器
Figure 3-23.
Scanning electron microscope（ SEM）
• 工作原理：是用一束极细的电子束扫描样品，在样品表面激发出 次级电子，次级电子的多少与样品表面结构有关，次级电子由探 测器收集，信号经放大用来调制荧光屏上电子束的强度，显示出 与电子束同步的扫描图像。
度上扫描样品时，此处电子云重叠，外加一电压（2mV~2V），针 尖与样品之间形成隧道电流。电流强度与针尖和样品间的距 离有函数关系，将扫描过程中电流的变化转换为图像，即可 显示出原子水平的凹凸形态。
• 分辨率：横向为，纵向可达。 • 用途：三态（固态、液态和气态）物质均可进行观察。
扫描隧道显微镜原理
• 分辨力，放大倍数可达百万倍； • 用于观察超微结构（小于）。
表二、不同光线的波长
名 称 可见光 紫外光 X 射线 α 射线
电子束
0.1Kv 10Kv
波长（nm） 390~760 13~390 0.05~13 0.005~1 0.123 0.0122
TEM LIGHT PATHWAY
电镜与光镜的比较
第二章 细胞生物学实验技术
METHODS AND TECHNIQUES
对细胞生命活动的研究成为当今生命科学发展的瓶颈 细胞生命活动
突突变变体体分分析析 基因表达
序列测定
DNA分离与克隆 功能基因组学
蛋白修饰分析
生物信息学
多肽定性分析
机器人技术
(robotics)
双向电泳分析
蛋白质分离与制备
蛋白质组学
（sc三an）nin扫g•描tu隧nn道进eli显ng微入m镜ic显rosc微ope，镜ST的M 光线为偏振光，镜筒中有检偏器 （与起偏器
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活力的原因。
精
7
细胞浓度；
冻存管做好标记。
梯度降温（慢冻）；
精
3
医学细胞生物学实验
2、细胞复苏与计数
取出冻存管→ 37℃水浴1min融化→转入离心管→ 加至5ml培养液→混匀→ 1500rpm离心5min→弃 上清→加1ml培养液→混匀→取0.5ml →加入等体 积台盼蓝→染色1min →计数 → 计算细胞活力和 细胞浓度。
精
2
医学细胞生物学实验
1、细胞冻存
1ml鸡血+1ml生理盐水→1500rpm离心5min(配 平)→弃上清→加2ml冻存液→混匀 (空气吹打法) →分装至1ml的冻存管→标记→液氮罐口（-60~70 ℃ ）10min →液氮中冻存10min （-196℃ ）。
无菌操作;
防止冻伤；
保护剂；
防爆；
细胞活力（率）：活细胞所占的比率。
如何区别死细胞和活细胞？
精
4
3、细胞计数板的使用
7.5cm
3.5cm
பைடு நூலகம்
0.1mm
计数之前熟悉计数板构造并熟练掌握计 数方法。 使用计数板前用酒精棉球轻轻擦拭干净。 先盖盖玻片，再滴细胞悬液。 压线细胞：计上不计下、计左不计右。 计数方向：按一精定顺序。
医学细胞生物学实验
1mm 1mm
0.1mm3 10-4ml
5
医学细胞生物学实验
四大格总细胞数
细胞浓度(个/ml)=
4
×104 ×N(稀释倍数)
四大格活细胞数 细胞活力(率)= 四大格总细胞数×100%
复苏细胞活力影响因素
冻存复苏操作。 染色时间。 计数时间。
精
6
医学细胞生物学实验
作业
1. 列出细胞冻存与复苏的主要操作步骤。 2. 计算细胞浓度和细胞活力，并分析影响细胞
医学细胞生物学实验
徐志浩 遗传与基因工程教研室
院系楼西侧一楼 2016年
精
1
医学细胞生物学实验
实验目的
1. 掌握细胞冻存与复苏的原理。
2. 熟悉细胞冻存复苏的一般操作过程。
3. 掌握细胞计数的一般方法。
实验原理
细胞冻存的必要性 冻存温度 冻存操作对细胞的损伤：冰晶损伤、溶液损伤 冻存保护剂 冻存复苏的原则：慢冻速融
精
7
细胞浓度；
冻存管做好标记。
梯度降温（慢冻）；
精
3
医学细胞生物学实验
2、细胞复苏与计数
取出冻存管→ 37℃水浴1min融化→转入离心管→ 加至5ml培养液→混匀→ 1500rpm离心5min→弃 上清→加1ml培养液→混匀→取0.5ml →加入等体 积台盼蓝→染色1min →计数 → 计算细胞活力和 细胞浓度。
精
2
医学细胞生物学实验
1、细胞冻存
1ml鸡血+1ml生理盐水→1500rpm离心5min(配 平)→弃上清→加2ml冻存液→混匀 (空气吹打法) →分装至1ml的冻存管→标记→液氮罐口（-60~70 ℃ ）10min →液氮中冻存10min （-196℃ ）。
无菌操作;
防止冻伤；
保护剂；
防爆；
细胞活力（率）：活细胞所占的比率。
如何区别死细胞和活细胞？
精
4
3、细胞计数板的使用
7.5cm
3.5cm
பைடு நூலகம்
0.1mm
计数之前熟悉计数板构造并熟练掌握计 数方法。 使用计数板前用酒精棉球轻轻擦拭干净。 先盖盖玻片，再滴细胞悬液。 压线细胞：计上不计下、计左不计右。 计数方向：按一精定顺序。
医学细胞生物学实验
1mm 1mm
0.1mm3 10-4ml
5
医学细胞生物学实验
四大格总细胞数
细胞浓度(个/ml)=
4
×104 ×N(稀释倍数)
四大格活细胞数 细胞活力(率)= 四大格总细胞数×100%
复苏细胞活力影响因素
冻存复苏操作。 染色时间。 计数时间。
精
6
医学细胞生物学实验
作业
1. 列出细胞冻存与复苏的主要操作步骤。 2. 计算细胞浓度和细胞活力，并分析影响细胞
医学细胞生物学实验
徐志浩 遗传与基因工程教研室
院系楼西侧一楼 2016年
精
1
医学细胞生物学实验
实验目的
1. 掌握细胞冻存与复苏的原理。
2. 熟悉细胞冻存复苏的一般操作过程。
3. 掌握细胞计数的一般方法。
实验原理
细胞冻存的必要性 冻存温度 冻存操作对细胞的损伤：冰晶损伤、溶液损伤 冻存保护剂 冻存复苏的原则：慢冻速融