溴甲酚绿法测定血清白蛋白
血清白蛋白ALB溴甲酚绿BCG法测定
血清白蛋白ALB溴甲酚绿BCG法测定1.实验原理在pH值4.2时，白蛋白和溴甲酚绿染料结合产生蓝绿色复合物，在630nm处比色，颜色的深度与白蛋白浓度成正比。
pH4.2白蛋白+溴甲酚绿--------------绿色化合物2. 标本采集2.1 病人准备：无特殊要求。
最好用禁食的标本以减少乳糜血的干扰。
2.2 类型：血清、肝素或EDTA血浆。
3. 标本存放留取标本后请尽快分离血清/血浆。
在室温条件下（15～25℃）可以稳定一周，在冰箱保存的条件下（2～8℃）稳定一个月，-20℃保存至少可以稳定3个月。
4. 标本运输室温条件下运输5. 标本拒收标准：细菌污染的不能做测定。
6. 实验材料:6.1 上海奥林巴斯白蛋白测定试剂盒6.1.1 试剂准备：试剂为即用式。
6.1.2 试剂稳定性与贮存：试剂避光保存于2～25℃，若无污染，可稳定至失效期。
试剂有效期为24个月。
试剂不可冰冻。
开盖后应避免污染。
6.1.3 变质指示：当试剂有浊度时，表明有细菌污染，不能继续使用。
6.1.4 注意事项：避免试剂与皮肤及粘膜接触。
6.2 校准品：参见生化检验校准品和质控品.SOP文件6.3 质控品：参见生化检验校准品和质控品.SOP文件7. 仪器：奥林巴斯AU2700生化分析仪8. 操作步骤8.1 项目基本参数：参见生化检验奥林巴斯AU2700生化分析仪项目测定参数.SOP文件8.2仪器操作步骤：参见生化检验奥林巴斯AU2700生化分析仪操作规程.SOP文件9. 检验结果的判断与分析10. 质量控制：在每一批标本中都应把非定值血清水平I 与II质控做为未知标本进行分析，以2S为质控警告限，3S为失控限，绘制质控图，判断是否在控。
质控规则参见生化室室内质控操作规程.SOP文件。
11. 计算方法：以TruCal U复合校准品白蛋白校准值或标准品标准值校准仪器后，在病人结果可报告范围内，仪器直接报告可靠的检测结果。
手工测定计算方法为：Au白蛋白(g/L)= ×校准液浓度As12. 参考值范围成人35～52g/L参考值因性别、年龄、饮食和地域的不同而有所差别。
血清白蛋白测定及紫外分光光度计的使用
四、临床意义：
• 1、白蛋白/球蛋白=1.5~2.5/1，通过
计算其比值可以判定肝脏的功能情况； • 2、白蛋白降低，其比值降低或倒置： 慢性肝炎（肝细胞功能降低）、肝硬 化（肝细胞坏死、肝腹水）； • 3、球蛋白大量降低：机体免疫功能降 低。
五、方法学评价
1、操作简单、快速，受干扰因素小 2、线性范围：10～60g/L, 3、RCV＜4%（批内重复测定变异系数） 4、白蛋白的测定方法：有色氨酸含量法、 燃料结合法、电泳法、免疫化学法和电化 学测定法。
10 10
于空白管中加入蒸馏水10 μl，各管充分混匀。
2、分光光度计测定方法：波长620nm， 空白管调零，测定标准管和测定管吸光度 值，按公式计算测定结果。
计算公式：
A样 Байду номын сангаас样 C标 A标
（40g/L）
三、参考值：
总蛋白：62~82 g/L 白蛋白：35~55g/L 球蛋白：20~30 g/L 白蛋白/球蛋白=1.5~2.5/1
六、注意事项
1、应保持PH为3.8 2、BCG与多种蛋白呈颜色反应，及与a-球 蛋白、运铁蛋白、结合珠蛋白结合显色， 但血清中BCG在30秒内与白蛋白的反应最 快，且呈主导地位 3、实验小组分批间隔保温。
溴甲酚绿（BCG）与血清蛋白呈非特异性反 应，但是在反应的30秒钟内溴甲酚绿（BCG）与 白蛋白结合形成蓝色复合物呈特异性反应。因此 反应结束后应立刻比色测取吸光度。
二、测定方法
1、加样： 试管三只
试剂
空白管（B） 标准管（C） 测定管（U） 工作试剂（ml） 2 2 2
标 准 液（μl） 样 品（μl）
血清白蛋白（ALB）的测定 (Assays for Serum Albumin) （溴甲酚绿染色法）
溴甲酚绿法测定血清白蛋白
溴甲酚绿法测定血清白蛋白溴甲酚绿法是一种常用的测定血清白蛋白含量的方法，其原理是利用溴甲酚绿与白蛋白混合后的光度变化来测定血清白蛋白的含量。
下面将详细介绍溴甲酚绿法测定血清白蛋白的具体操作过程。
实验原理血清中的白蛋白可以与溴甲酚绿形成复合物，形成的复合物的光学密度与白蛋白的含量呈正相关。
测定方法如下：步骤一：准备溴甲酚绿溶液将溴甲酚绿加入缓冲液中，制备浓度为0.01mg/mL的溴甲酚绿溶液。
步骤二：制备标准工作液将0.01mg/mL的溴甲酚绿溶液和1%的牛血清白蛋白溶液以1:5的比例混合，制备出浓度为0.002mg/mL的标准工作液。
步骤三：制备比色管取6mm x 100mm的试管，标出标准液和待测液的填充线，分别用吸管将标准液和待测液分别加入比色管中。
步骤四：光度测定将加入标准液和待测液的比色管分别放入分光光度计中，设置波长为628nm，测定各试管的吸光度值（OD值）。
步骤五：计算白蛋白含量比较标准工作液和待测液的吸光度值，根据标准曲线计算出待测液中白蛋白的含量。
实验要点1、比色管的选择：使用6mm x 100mm的试管即可。
3、比色管中待测液的加入：待测液的加入应加到标记线上方。
4、比色管中标准液和待测液的混合：比色管中标准液和待测液的混合应该彻底，避免混合不均导致误差。
5、波长的设置：溴甲酚绿法测定血清白蛋白的波长一般定在628nm。
实验注意事项1、实验过程中要保持实验环境的清洁和卫生，保证实验的准确性。
2、所有实验仪器和试剂必须在实验前检查是否正常。
3、实验过程中要严格按照实验步骤进行，保证结果的准确性。
4、实验结束后要保持实验环境整洁，清洁仪器和试管。
总结溴甲酚绿法是一种简单、快速、准确的血清白蛋白含量测定方法。
通过以上步骤，我们可以很容易地进行血清白蛋白含量的测定。
在实验过程中，需要注意实验细节和准确性，保障实验结果的准确性。
血清白蛋白测定(精)
【操作】
取试管三支，标明测定、标准和空白管，按表 操作。
加入物 / ml 工作试剂 标准液 样品 生理盐水
测定管 4.0
0.02
标准管 4.0 0.02
空白管 4.0
0.02
充分混匀，置室温10min，用630nm波长比色，以空白管调零， 读取各管吸光度。
【计算】
血清清蛋白（g/L）＝ A测/A标×清蛋白标准 液浓度g/L
蛋白质分子中的肽键在碱性条件下能与铜离子作 用生成紫红色的络合物与两分子尿素缩合后生成 的双缩脲在碱性溶液中与铜离子作用形成的紫色 物质的反应相似，故称之为双缩脲反应。
双缩脲结构: H2N—OC—NH—CO—NH2试剂:
试剂
双缩脲试剂：称取硫酸铜(CuSO4·5H2O)3.0g, 溶于500mL新鲜制备的蒸馏水或刚煮沸冷却 的去离子水中，加酒石酸钾纳 (NaKC4H4O6·4H2O)9.0g，碘化钾5.0g，待完 全溶解后，加入6mol/L Na2OH 100ml,最后 加蒸馏水至1000mL。
血清总蛋白测定(双缩脲法) 血清白蛋白测定（溴甲酚绿法）
实验一、血清总蛋白测定
实验目的 ⒈掌握双缩脲法测定总蛋白的原理及注意事项。 ⒉熟练测定操作步骤。 ⒊了解TP测定的主要临床意义。
实验原理
蛋白质分子中的肽键在碱性条件下能与铜离子作 用生成紫红色的络合物，产生的颜色强度在一定 范围内与蛋白质的含量成正比，与同样处理的蛋 白标准液比较，经计算或查标准曲线即可求出血 清蛋白质含量。
【方法评价】 1.高胆红素血症和溶血标本对本法不产生干扰。严重高脂血症可使结
果偏高，应采用标本空白校正。若标本混浊，可做标本空白（血清 0.02ml，加琥珀酸缓冲液4ml），用测定管吸光度减去标本空白管吸 光度后再计算结果。 2. BCG系一种pH指示剂，它受酸、碱影响较大，所用器材必须清洁， 无酸、碱污染。 3.BCG试剂的pH必须严格控制在pH4.15±0.05，pH升高可使染料 空白增高，与清蛋白结合率下降。所以，控制反应液的pH是本法测 定的关键。 4.BCG与蛋白质结合的特异性较低。它不仅与清蛋白结合呈色，还与 血 触 不清珠同中蛋，其白与它（清蛋属蛋白白α2质可球呈立蛋色即白，发）其生最中反为以应明α（显1快球，反蛋B应C白G）、与，运不与铁同其蛋蛋它白白蛋（质白属的质β反球反应蛋应速白较率）慢、 （慢反应）。实验证明，血清与BCG试剂一经混合，“慢反应”即可 发生，约持续1h才完成。 5. Brij-35是一种非离子去垢剂，它可增强BCG-清蛋白复合物的溶解 度，消除BCG同清蛋白反应时可能产生的沉淀，它的浓度高于或低于 所指定的浓度时，均导致敏感度降低和直线性丧失，对测定结果有较 大影响。故其配制浓度和所加试剂量一定要准确。
白蛋白 溴甲酚绿法 字符串 相似度 算法
白蛋白、溴甲酚绿法、字符串相似度算法一、白蛋白白蛋白是一种重要的蛋白质，在人体中起着重要的生理功能。
它主要存在于血清中，占血浆总蛋白的60以上，对于维持血浆的渗透压、调节血液的酸碱平衡等都有着重要作用。
另外，白蛋白还可以与许多生物分子结合并运输，如药物、激素等。
由于其重要性，白蛋白的检测方法也成为了医学上不可或缺的一部分。
二、溴甲酚绿法溴甲酚绿法是一种用来测定白蛋白含量的方法。
该方法是通过溴甲酚绿与白蛋白形成复合物，然后通过比色法来测定白蛋白的含量。
这种方法常用于临床化学检验，其操作简单，结果准确可靠。
溴甲酚绿法的原理是利用溴甲酚绿与白蛋白发生复合反应，形成相应的物质，再通过比色法确定含量。
由于其灵敏度高、结果稳定可靠，因此得到了广泛的应用。
三、字符串在计算机科学中，字符串是一种常见的数据类型。
它由字符组成，可以是字母、数字、符号等。
字符串在计算机程序中有着广泛的应用，比如在文本处理、数据交换等方面。
对于字符串的操作和处理也是计算机科学中的一个重要课题。
四、相似度算法字符串相似度算法是用来比较两个字符串之间的相似程度的方法。
在实际应用中，我们经常需要判断两个字符串之间的相似度，比如在信息检索、自然语言处理等领域。
常见的字符串相似度算法包括编辑距离算法、余弦相似度算法、Jaccard相似度算法等。
这些算法各有特点，适用于不同的场景。
五、结语白蛋白、溴甲酚绿法、字符串相似度算法分别代表了生物医学、临床化学及计算机科学领域的重要课题和技术方法。
它们在各自领域中发挥着重要的作用，为我们的生活和工作带来了诸多便利。
也为我们提供了更多的研究和创新空间，带来了更多的可能性。
相信在不久的将来，白蛋白、溴甲酚绿法、字符串相似度算法都会有更广泛的应用和更深入的研究。
由于白蛋白在人体健康和疾病过程中起着至关重要的作用，因此白蛋白的检测和定量分析就变得尤为重要。
溴甲酚绿法作为一种简单、快速、准确的方法，已经成为了临床检验中常用的一种白蛋白分析方法。
实验11溴甲酚绿法测定血清清蛋白
二、显色时间改变对溴甲酚绿法测定 血清清蛋白结果影响
实验原理
BCG与清蛋白结合的特异性较低，不但与 清蛋白呈色，而且还可与其他蛋白质呈色，其中 α1-球蛋白，TRF、Hp最明显。但BCG与不同蛋 白质反应速度不同，清蛋白可立即反应（快反 应），其他蛋白质反应慢（慢反应）。
试剂与器材
同溴甲酚绿法测定血清清蛋白
操作步骤
1．生化自动分析仪分析法 各参数见有关仪器操作 说明书。
2．手工操作法 取试管3支，按表操作。
加入物(ml) 血清 清蛋白标准液 蒸馏水 BCG试剂
空白管 － － 0.02 4.0
标准管 － 0.02 － 4.0
测定管 0.02 － － 4.0
混匀，室温10min，在波长630nm处用空白管调零，读取标准管和 测定管吸光度。
操作步骤
1. 按表3-2操作。 2. 各管混匀，室温放置，显色时间分别为：30s、 1min、5min、10min、15min及20min，每一个显色 时间作9个测定管，在波长630nm处用空白管调零， 读取标准管和测定管吸光度。
计算
1. 计算各组 X 、S。 表3-3 不同显色时间清蛋白测定结果（g/L）
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返回总目录ຫໍສະໝຸດ 编号 1 2 … 8 9X
S
30s
1min 5min 10min 15min 20min
计算
2. 对6组不同显色时间测定的结果进行方差分 析，计算F值（F值计算参见医学统计学教 材），查F界值表（），比较F、F表。
结果判断
若F>F表，则说明不同显色时间对溴甲酚绿法测 定清蛋白结果有显著性差异。
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三、pH改变对溴甲酚绿法测定血清 清蛋白结果影响
血清白蛋白溴甲酚绿法测定
血清白蛋白（ALB）溴甲酚绿（BCG）法测定1.实验原理在pH值4.2时，白蛋白和溴甲酚绿染料结合产生蓝绿色复合物，在630nm 处比色，颜色的深度与白蛋白浓度成正比。
pH4.2白蛋白+溴甲酚绿--------------绿色化合物2. 标本采集2.1 病人准备：无特殊要求。
最好用禁食的标本以减少乳糜血的干扰。
2.2 类型：血清、肝素或EDTA血浆。
3. 标本存放留取标本后请尽快分离血清/血浆。
在室温条件下（15～25℃）可以稳定一周，在冰箱保存的条件下（2～8℃）稳定一个月，-20℃保存至少可以稳定3个月。
4. 标本运输室温条件下运输5. 标本拒收标准：细菌污染的不能做测定。
6. 实验材料:6.1 上海申能白蛋白测定试剂盒（货号：11202271701，8×70ml）6.1.1 试剂组成柠檬酸盐缓冲液pH 4.2 30mmol/L溴甲酚绿(BCG) 0.26mmol/L表面活性剂适量6.1.2 试剂准备：试剂为即用式。
6.1.3 试剂稳定性与贮存：试剂避光保存于2～25℃，若无污染，可稳定至失效期。
试剂有效期为24个月。
试剂不可冰冻。
开盖后应避免污染。
6.1.4 变质指示：当试剂有浊度时，表明有细菌污染，不能继续使用。
6.1.5 注意事项：避免试剂与皮肤及粘膜接触。
6.2 校准品：参见生化检验校准品和质控品.SOP文件6.3 质控品：参见生化检验校准品和质控品.SOP文件7. 仪器：贝克曼AU680生化分析仪8. 操作步骤8.1 项目基本参数：参见生化检验贝克曼AU680生化分析仪项目测定参数.SOP文件8.2仪器操作步骤：参见生化检验贝克曼AU680生化分析仪操作规程.SOP文件9. 检验结果的判断与分析10. 质量控制：在每一批标本中都应把非定值血清水平I与II质控做为未知标本进行分析，以2S为质控警告限，3S为失控限，绘制质控图，判断是否在控。
质控规则参见生化室室内质控操作规程.SOP文件。
溴甲酚绿法测定血清白蛋白(论文资料)
八、临床意义
1. 血清清蛋白 ：常见于严重脱水所致的血浆浓缩。（比 较少见） 2. 血清清蛋白 :临床比较重要和常见，常与总蛋白降低的 原因大致相同。 急性 ：多见于大出血和严重烧伤。 慢性 ：肾病蛋白尿、肝功能受损，肠道肿瘤及结核伴 慢性出血、营养不良和恶性肿瘤。 若低于20g/L，临床上出现水肿。 3. A/G比值：正常人A/G>1.0 某些病人可同时出现清蛋白减少和球蛋白升高的现象， 若A/G<1.0，称为A/G比值倒置，常见于多发性骨髓瘤和 聚球蛋白升高。 4.先天性清蛋白缺乏症：有文献报道，因清蛋白合成障碍， 血清中几乎没有清蛋白而导致清蛋白缺乏。
+
+OH
- R CH COO-
+H+
NH2
pH<pI 阳离子
pH=pI 氨基酸的兼性离子
pH>pI 阴离子
在pH4.2的缓冲液中，清蛋白带正电荷
二、实验原理
血清清蛋白在pH4.2的缓冲液中带正电荷， 在有非离子型表面活性剂存在时，可与带负电荷 的染料溴甲酚绿结合形成蓝绿色的复合物，在波 长630nm处有吸收峰，其颜色深浅与清蛋白的浓 度成正比。 与同样处理的清蛋白标准比较，可求得血清 中清蛋白含量。 清蛋白+ BCG + pH4.2 Brij-35
实验五 溴甲酚绿法测定血清清蛋白
一、实验目的
掌握：溴甲酚绿法测定血清清蛋白的基本原理和操作。 熟悉：血清清蛋白测定的临床意义。 了解：溴甲酚绿法测定血清清蛋白的特点和注意事项。
二、实验原理
血清清蛋白的pI为：4-5.8 R CH COOH
R CH COOH NH3+
+OH
白蛋白ALB溴甲酚绿法作业指导书
白蛋白ALB溴甲酚绿法作业指导书1、前言试验名称：白蛋白测定，英文名称：ALB，方法：溴甲酚绿法。
本文件适用于安阳鼎城糖尿病医院检验科生化实验室，目的是指导工作人员正确的在科华KHB450全自动生化分析仪上测定血清、血浆样本中的白蛋白浓度，以保证测定结果的准确可靠。
本试验用体外定量测定人血清或血浆样本中白蛋白的浓度。
白蛋白是主要的血浆蛋白，其主要功能包括调节细胞外液的分布；运输诸如激素、脂类、维生素、钙和其它微量元素；构成体内部分氨基酸库；维持渗透压。
测定血清白蛋白常用于病人状态的非特异监视。
高白蛋白血症常见于脱水或血液浓缩。
低白蛋白血症通常是由于血液稀释；蛋白质丢失过多，如肾病综合症，烧伤等；摄入不足、吸收不良或肝脏疾病而导致的蛋白合成降低；分解代谢增加，如甲状腺机能亢进、糖尿病和发热。
2、测定原理本试验采用溴甲酚绿染料结合法，即在pH4.2条件下，白蛋白与溴甲酚绿结合形成蓝绿色络合物，反应形成的蓝绿色络合物与样本中白蛋白浓度成正比。
通过在630nm处测定吸光度值的变化值，即可测得样本中白蛋白的浓度。
3、试剂试剂生产商：长海科华公司。
剂型：液体单试剂。
包装量：6*50ml注册号：沪食药监械（准）字2010第2400058号。
生产许可证号：沪药管械生产许20030916号。
基本成份：溴甲酚绿0.35mmol/l丁二酸缓冲液50mmol/l储存条件和有效期：试剂避光储存于2―25℃可稳定18个月。
若试剂混浊，或空白在630nm下吸光度值高于0.3A时，则不能使用。
在本实验室试剂启用后可稳定4天，以后测定结果将偏低，重新定标后可以正常使用。
4、标准品：使用试剂盒附带标准品5、质控品：生产商：英国Randox公司。
剂型：干粉试剂，用5ml去离子水复溶，完全溶解30分钟后使用。
保存条件：未溶解时2―8℃稳定至有效期，复溶后2―8℃稳定一周。
6、、样品要求：样品采集前病人准备无特殊要求，空腹用肝素锂抗凝管或促凝管常规方法肘静脉采血，血标本4000转离心3分钟，分离血清或血浆样品，在无微生物污染时，血清或血浆样品中白蛋白2－8℃可稳定20天。
实验十四血清白蛋白测定(溴甲酚绿法)41
实验十四血清白蛋白测定（溴甲酚绿法）一、实验目的与要求1 了解血清白蛋白（albumin）在人体营养学上的意义及其生理学上的重要性。
2 掌握血清白蛋白的测定方法及721分光光度计或AT648半自动生化多用仪的使用方法和现代生化检测试剂盒的应用。
二、实验原理在具有表面活性剂的酸性环境中，血清中的白蛋白和溴甲酚绿结合，形成绿色。
最高吸收峰628nm，颜色强度与样品中白蛋白浓度成正比。
三、实验仪器与试剂1 仪器（1） AT648半自动生化分析仪1台；（2）四孔恒温水浴锅1个；（3）振动摇床1台。
2 分组与仪器2人一组，每组仪器包括：（1）试管架1个；（2） 2ml试管10个；（3）可调微量加样器1个；（4） 1ml移液管1个；（5）吸耳球1个；（6）搪瓷盘1个；（7）微量加样滴头；（8）吸水纸。
3 本试剂盒内含2种试剂：（1）溴甲酚绿试剂100ml×3瓶；（2）白蛋白标准液1ml×1瓶(45.3g/L)。
四、实验步骤1 于一系列试管中，按下表加入各溶液：表141系列反应管中所加溶液的量空白管标准管测定管血清标本(μl)——5.00蛋白标准血清(μl)—5.00—蒸馏水(μl)5.00——溴甲酚绿试剂(ml)1.001.001.002 以上各管充分混匀,室温放置10min。
3 于721分光光度计/ AT648半自动生化分析仪上628nm处比色,以空白管校正吸光度为零,读取各管吸光度值A。
五、实验结果与分析A628nm测定A628nm标准×标准血清白蛋白浓度（g/L）＝血清白蛋白（g/L）线性范围：在0~60g/L范围内线性良好。
六、实验报告参照《营养学》、《生物化学》原理分析。
七、注意事项1 试剂为空白对照；2 每组样品做2～3个平行实验；3 正常参考范围： 55～75g/L。
临床生化检验：3-血清白蛋白测定(溴甲酚绿法)
2012春季学期
实验目的
掌握溴甲酚绿法测定血清白蛋白原理和方法及影 响因素、条件控制； 了解血清白蛋白各种测定方法的优缺点。
2012春季学期
实验原理
血清白蛋白在ｐH4.2的缓冲液中带正电荷，在有 非离子型表面活性剂存在时，可与带负电荷的染 料溴甲酚绿（BCG）结合形成蓝绿色复合物，在 波长630nm处有光吸收峰，其颜色的深浅与白蛋 白浓度成正比，与同样处理的白蛋白标准比较， 可求得血清白蛋白含量。
取3支试管做好标记，按下表操作：
加入物
血清 蛋白标准液 蒸馏水 R试剂
B
21μl 3ml
S
21μl
3ml
U
21μl 3ml
混匀，37℃孵育1分钟后，在波长630nm处，以B管调零，读取各 管吸光度A。
2012春季学期
数据处理计算
管号 S U
测定次数
1
2
3
ALB g / L 28 A u As
平均A值
2012春季学期
血清白蛋白测定（溴甲 酚绿法）
医学检验系临床生化检验教研室
白蛋白生化特性
血清白蛋白（Albumin,Alb） pI4.7 正常人血清Alb含量为35～55g/L,占血浆蛋白的 50%～60%。 生理功能：营养价值
维持血浆胶体渗透压 运输作用
2012春季学期
Alb测定方法
血清Alb具有两个不同于其他血清蛋白的显著特点 ：一是其分子中色氨酸含量低下（0.2%）； 二是在pH7.4环境中，Alb分子以阴离子形式存在。
2012春季学期
参考值 参考范围：35～55g/L
2012春季学期
溴甲酚绿结合法
血清白蛋白溴甲酚绿比色法原理：白蛋白具有与阴离子染料结合的特性。
在pH4左右，溴甲酚绿与白蛋白结合后由黄色变成绿色，绿色的深浅与白蛋白浓度成正比，因此，应用溴甲酚绿溶液可以直接比色测定血清白蛋白含量。
试剂：1、溴甲酚绿贮存液：在25ml烧杯中称入溴甲酚绿419mg，加入0.1N 氢氧化钠10ml，用玻璃棒搅拌，使溴甲酚绿完全溶解（如用溴甲酚绿钠盐，则称取432mg，用蒸馏水溶解）。
用蒸馏水将此溶液全部转注入1L容量瓶中，再加入叠氮钠100mg，最后加蒸馏水至1L刻度。
2、0.1M枸橼酸缓（柠檬酸）冲液，pH4.2：分别配制0.1M枸橼酸及0.1M 枸橼酸钠，然后按12.3：7.7的体积比例混合，每升混合液中加入叠氮钠100mg。
试测pH，如不符合要求，再在混合液中加入适量0.1M枸橼酸或0.1M枸橼酸钠以校正pH至4.2.3、30%聚氧化乙烯月桂醚溶液：称取聚氧化乙烯月桂醚（Brij-35）30g，加入适量蒸馏水，在约60℃水浴中使溶液，然后加蒸馏水至100ml。
4、溴甲酚绿应用液：取溴甲酚绿贮存液250ml，加0.1M、pH4.2枸橼酸钠缓冲液750ml，再加30%聚氧化乙烯月桂醚溶液8ml，混合。
以上试剂可在室温保存数月。
如不加叠氮钠则枸橼酸缓冲液和溴甲酚绿应用液应保存于冰箱中。
操作：将血清标本及标准血清用生理盐水作1/10稀释（例如血清0.20ml加生理盐水1.8ml），然后按表进行操作：空白管标准管测定管ul ul ul 血清标本20 标本血清40g/L 20生理盐水20溴甲酚绿应用液500 500 500充分混合，室温放置10min后在1小时后用628nm处比色。
以空白管校正光密度到0点，读取各管光密度读数计算：测定管光密度/标准管光密度*40 g/L=血清白蛋白g/L。
两种仪器测定血清白蛋白的方法比较
两种仪器测定血清白蛋白的方法比较摘要目的：分析溴甲酚绿法(BCG)与干化学法在测定血浆白蛋白(ALB)时的偏倚，为实间评估提供依据。
方法：依据美国国家临床实验室标准化委员会(NC—CLS)EP9-A文件，每天随机选取临床标本8份，分别用2种方法测定样本白蛋白含量，共5天，记录检验结果，应用统计分析软件对所测得的结果进行统计分析，并计算方法间的偏倚。
结果：以溴甲酚绿法(x)对干化学法(Y)进行评估，干化学法(Y)和溴甲酚绿法(X)测定血清白蛋白(ALB)的回归方程为：Y=1.1346X+7.3919，相关系数X2=0.9949。
白蛋白浓度为30g/L、40g/L、50g/L 时，干化学法(Y)相对偏倚分别为11.6％、5.5％、1.8％。
结论：溴甲酚绿法与干化学法测定血清白蛋白时，测定结果相对预期偏倚随白蛋白浓度的增大而降低，建议各临床实验室对不同方法建立不同的参考值。
关键词白蛋白类干化学法溴甲酚绿法材料与方法仪器：HITACHI 7080(日本)及VITROS 250(美国)全自动生化分析仪。
临床样本：48份来自甘肃省中医院检验科健康体检样本，无溶血、无脂浊、肝素钠抗凝。
白蛋白试剂及定标液：HITACHI7080应用郎道公司提供的白蛋白试剂(批号：0505004)，定标液为RANDOX公司提供的Cfas校准批号：357UN；干化学法所用试剂定标液为美国VITROS公司生产，批号为09287441。
质控品：由RANDOX公司提供的As—sayed human 8era level I和levelⅡ质控品，批号分别为2350和2352。
测定及分析方法：①溴甲酚绿法(X)在HITACHI 7080上测定；干化学法(Y)在VITROS 250上测定。
②每天选取8份临床病人样本，分别用2种方法按顺序1→8进行样本测定，再按相反顺序8→1重复测定。
③记录测定结果(xij和Yij)，计算每个样本测定结果的均值(Xi和Yi)。
艾美得白蛋白(ALB)测定试剂盒（溴甲酚绿法）说明书
白蛋白(ALB)测定试剂盒（溴甲酚绿法）说明书【产品名称】白蛋白(ALB)测定试剂盒（溴甲酚绿法）【包装规格】a)单一试剂：4×40mLb)单一试剂：5×60mLc)单一试剂：2×100mL【预期用途】用于体外定量测定人体血清中白蛋白的含量。
白蛋白是主要的血清蛋白，主要在肝脏合成，是衡量肝合成功能的一个重要指标。
由于白蛋白独特的分子结构使它成为多种物质如胆红素、脂肪酸、尿酸以及各种药物和抗体的运输载体，此外，白蛋白还具有维持机体渗透压的功能。
白蛋白升高主要见于脱水，降低主要见于营养不良、肝脏疾病、肾功能紊乱和风湿性关节炎等[1]。
【检验原理】在рH为4.2的缓冲液中，白蛋白分子带正电荷，与带负电荷的溴甲酚绿（BCG）生成蓝绿色复合物，在630nm处有吸收峰，复合物的吸收光与白蛋白浓度成正相关。
【主要组成成分】试剂主要组分磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲液210mmol/L溴甲酚绿（BCG）0.25mmol/L单十二烷基九乙二醇醚适量注：不同批号试剂盒中各组分未经试验不可互换。
【储存条件及有效期】贮存于2～8℃，有效期为18个月，生产日期、有效期见标签。
【适用仪器】艾威德AS-420/AS-660/AS-1200；日立HITACHI7020型/7060型/7180型/7600型/LABOSPECT008AS型；贝克曼AU400/AU480/AU640/AU680/ AU2700/AU5400/AU5800/AU5811/AU5821；佳能TBA-FX8/TBA-120FR/ TBA-2000FR；罗氏cobas8000c702/cobas8000c701/cobas8000c502；西门子SIEMENS ADVIA1800/ADVIA2400；雅培ABBOTT ARCHITECT c8000/ARCHITECT c16000/ARCHITECT ci8200；西森美康SYSMEX BM6010/C；科华KHB卓越310/卓越330/卓越400/卓越450/ZY-1200/ZY-1280；迪瑞CS-240/CS-T300/CS-300B/CS-380/CS-400A/CS-400B/CS-600A/ CS-600B/CS-800A/CS-800B/CS-1200/CS-1200ISE/CS-1300B/CS-1400；迈瑞MINDRAY BS-220/BS-330/BS-350E/BS-380/BS-390/BS-400/BS-430/BS-600/ BS-800/BS-2000M；颐兰贝ES-200/ES-380/ES-480；赛诺迈德SUNMATIK-9050型；雷杜Chemray420；英诺华D280；特康TC6010L；锦瑞GS400；普康6066。
人血白蛋白测定标准操作规程
人血白蛋白测定标准操作规程1.实验原理：（溴甲酚绿法）人血白蛋白在 pH 4.1的缓冲液中带正电荷，在有非离子型表面活性剂存在时，可与带负电荷的燃料溴甲酚绿结合形成蓝绿色的复合物，其颜色深浅与白蛋白浓度成正比，与同样处理的白蛋白标准比较，即可求的血清中白蛋白的含量pH白蛋白溴甲酚绿复合物白蛋白+溴甲酚绿−−→−1.42.试剂主要组成成分3.样本要求：新鲜无溶血血清，勿使用肝素抗凝血浆。
22～25℃保存8小时，2～8℃保48小时，-20℃保存7天，样本不可反复冻融！4.检验方法：仪器法（详见DF-603/DI-600标准操作规程）5.参考范围；6.检验结果的解释6.1线性范围：在给定的样本/试剂比例和条件下测定时，本试剂线性范围可达60g/L。
样本含量超出线性范围时，建议用0.9%（W/V）的氯化钠溶液稀释样本。
最大稀释5倍。
6.2单位换算：g/dL=g/L×0.17检验结果的局限性7.1结果的准确性依赖于仪器的校正和测定温度、时间的控制。
7.2若试剂浑浊或以水空白在630nm处吸光度大于0.300时不能使用。
8.产品性能指标8.1试剂外观：无色透明或淡黄色液体，无悬浮物及沉淀物。
8.2装量：不低于标识值8.3空白吸光度：在630nm处，光径1cm时，空白吸光度A≤0.300。
8.4分析灵敏度：在630nm处，光径1cm时，测量40g/L的总蛋白，吸光度差△A≥0.0028.5线性区间：试剂的线性区间为[10.0-60.0]g/L，在此线性区间内：a）线性相关系数r应不小于0.9900；b)[10-20]g/L区间内，线性绝对偏差不超过±4.0g/L；（20.1-60）g/L区间内，线性相对偏差不超过±10%。
8.6精密度8.6.1重复性：重复测试（40.0±5.0）g/L的样本，所得结果的变异系数（CV）应≤2.0%8.6.2批间差：重复测试（40.0±5.0）g/L的样本，所得结果批间相对极差（R）应≤5.0%8.7准确性：相对偏差应不大于±6.0%。
白蛋白(Alb) 溴甲酚绿终点法
目录1. 检测原理2. 标本采集与处理2.1 受检者的准备2.2 静脉采血2.3 抗凝剂2.4 标本处理3. 试剂3.1 试剂3.2 校准血清3.3 试剂与校准血清的稳定性4. 仪器5. 操作6. 计算7. 操作性能7.1 精密度7.2 准确度7.3 灵敏度7.4 可报告范围7.5 特异性7.6 干扰8. 参考值9. 临床意义附录A: 参数1. 检测原理血清中的白蛋白与溴甲酚绿在PH=4.2的条件下结合生成绿色复合物，溶液由黄色变为绿色，其颜色深浅与白蛋白浓度成正比，通过在630nm处测定其吸光度可得出白蛋白的含量。
PH = 4.2白蛋白+ 溴甲酚绿--------------- 绿色复合物2．标本采集与处理2.1 受检者的准备：病人空腹12h，不饮酒24h后采集血样。
体检对象抽血前应有两周的的正常状况记录。
注意有无应用影响测试项目的药物。
此外，对于体检者，采血的季节都应做相关记录，因为样本中各项目的含量有季节性变动，为了前后比较应在每年同一季节检验。
应嘱体检对象在抽血前24小时内不做剧烈运动。
2.2 静脉采血：除非是卧床的病人，一般在采血时取坐位。
体位影响水分在血管内外的分布，会影响测试项目的浓度。
在采血前至少应静坐5分钟，一般从肘静脉取血，使用止血带的时间不超过1分钟，穿刺成功后立即松开止血带。
2.3 抗凝剂：血浆使用EDTA-Na2（1mg/mL）作为抗凝剂。
2.4 标本处理：血标本室温放置30min～45min后离心分离血清或血浆，在两小时内检测完毕；如两小时内不能检测完毕，将离心分离血清或血浆置洁净试管加盖2-8℃保存。
3．试剂3.1 试剂：本科使用湖南永和阳光科技有限责任公司ALB试剂盒，为液体单一试剂，各组分如下：白蛋白校准液40.0g/L3.2 校准血清使用湖南永和阳光科技有限责任公司提供的40项校准血清。
校准频次：空白定标：每日需做试剂空白定标。
全点定标：试剂换批号使用时或质控结果超过规定的2SD范围，需要全点定标。
白蛋白测定实验报告
一、实验目的1. 掌握白蛋白测定原理和方法。
2. 了解白蛋白在临床医学中的重要性。
3. 熟悉白蛋白测定实验操作步骤。
二、实验原理白蛋白（Albumin）是血清中含量最高的蛋白质，占血清总蛋白的50%以上。
白蛋白具有维持血浆胶体渗透压、运输多种物质、调节pH值等功能。
本实验采用溴甲酚绿法测定血清白蛋白含量。
溴甲酚绿法：在酸性条件下，溴甲酚绿与白蛋白结合形成蓝绿色复合物，复合物的颜色深浅与白蛋白含量成正比。
通过比色法测定吸光度，计算白蛋白含量。
三、实验材料与仪器1. 实验材料- 血清标本- 标准白蛋白溶液- 溴甲酚绿试剂- 醋酸缓冲液- 0.4%氢氧化钠溶液- 吸管- 移液器- 50ml容量瓶- 10ml量筒- 721型分光光度计2. 仪器- 电子天平- 磁力搅拌器- 移液器四、实验步骤1. 标准曲线绘制- 将标准白蛋白溶液用醋酸缓冲液稀释成不同浓度（例如：0.1mg/ml、0.2mg/ml、0.3mg/ml、0.4mg/ml、0.5mg/ml）。
- 每个浓度取1ml，加入溴甲酚绿试剂1ml，混匀。
- 60℃水浴15分钟，取出冷却至室温。
- 在540nm波长下，测定吸光度。
- 以吸光度为纵坐标，白蛋白浓度为横坐标，绘制标准曲线。
2. 血清白蛋白测定- 将血清标本用醋酸缓冲液稀释成适宜浓度。
- 每个样品取1ml，加入溴甲酚绿试剂1ml，混匀。
- 60℃水浴15分钟，取出冷却至室温。
- 在540nm波长下，测定吸光度。
- 根据标准曲线，计算样品中白蛋白含量。
五、实验结果与分析1. 标准曲线绘制- 标准曲线呈线性关系，相关系数R²大于0.99。
2. 血清白蛋白测定- 样品中白蛋白含量为X mg/ml。
六、讨论与心得1. 白蛋白测定在临床医学中具有重要意义，可用于评估患者营养状况、肝功能、肾功能等。
2. 溴甲酚绿法操作简便，结果准确可靠，是临床常用的白蛋白测定方法。
3. 在实验过程中，应注意以下事项：- 标准曲线绘制时，需严格控制温度和时间。
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四、操作
加入物（mL） 空白管 （B） 血清 白蛋白标准液 蒸留水 BCG试剂 — — 0.02 4.0 标准管 S1 — 0.02 — 4.0 S2 — 0.02 — 4.0 U1 0.02 — — 4.0 测定管 U2 0.02 — — 4.0
立刻混匀后，在波长630nm处用空白管调零， 30s±3s内读取吸光度。
七、方法学评价
1. 本法操作简便、快速，胆红素、溶血和中度脂血 症无干扰，既可手工操作，也能自动分析，是目前 国内测定血清清蛋白的最常用方法。 2. 本法线性范围为10~60g/L，RCV<4%。但该法 与溴甲酚绿紫法比较，对血清清蛋白特异性稍差， 3. 重复性差，清蛋白特异性稍差（极性氨基酸参与 反应，但参与运输的球蛋白也会与染料反应，不过 反应速度较慢）。 4.溴甲酚紫法：特异性较好，但不能与动物血清反 应，而目前的质控血清多为动物血清，因此临床应 用少。 4. 电泳法：可以将白蛋白、球蛋白等分开，并分别 测定其含量，是种较好的方法，但过程相对复杂。
蓝绿色复合物
三、试剂与器材
1. 0.5mol/L 琥珀酸缓冲贮存液 2. 10mmol/L BCG贮存液 3. 叠氮钠贮存液 4. 聚氧化乙烯月桂醚（Brij-35）贮存液 5. BCG试剂 6. 40g/L 清蛋白标准液 7. 分光光度计
ddH2O 400mL 琥珀酸缓冲贮液100mL BCG贮液8.0mL 叠氮钠贮液2.5mL， Brij-35贮液2.5mL， ddH2O定容至1000mL。
+
+OH
- R CH COO-
+H+
NH2
pH<pI 阳离子
pH=pI 氨基酸的兼性离子
pH>pI 阴离子
在pH4.2的缓冲液中，清蛋白带正电荷
二、实验原理
血清清蛋白在pH4.2的缓冲液中带正电荷， 在有非离子型表面活性剂存在时，可与带负电荷 的染料溴甲酚绿结合形成蓝绿色的复合物，在波 长630nm处有吸收峰，其颜色深浅与清蛋白的浓 度成正比。 与同样处理的清蛋白标准比较，可求得血清 中清蛋白含量。 清蛋白+ BCG + pH4.2 Brij-35
实验五 溴甲酚绿法测定血清清蛋白
一、实验目的
掌握：溴甲酚绿法测定血清清蛋白的基本原理和操作。 熟悉：血清清蛋白测定的临床意义。 了解：溴甲酚绿法测定血清清蛋白的特点和注意事项。
二、实验原理
血清清蛋白的pI为：4-5.8 R CH COOH
R CH COOH NH3+
+OH
NH2-Βιβλιοθήκη +H+R CH COONH3
五、计算
血清清蛋白(g/L)＝Āu/Ās×蛋白标准液浓度(g/L)
= Āu/Ās×40 (g/L)
参考范围：正常人:35－55g/L
六、注意事项
1. BCG是一种pH指示剂，变色域为pH3.8（黄色） ~5.4（蓝绿色），因此控制反应液的pH是本法测 定的关键。 2. 时间必须控制准确。因为BCG不但与清蛋白呈 色，而且与血清中多种蛋白质成分呈色，其中以 a1-球蛋白、运铁蛋白、结合珠蛋白更为显著，其 反应速度较清蛋白稍慢。由于在30s内呈色对清 蛋白特异，故BCG与血清混合后，在30s内读数 可明显减少非特异性呈色反应。
八、临床意义
1. 血清清蛋白 ：常见于严重脱水所致的血浆浓缩。（比 较少见） 2. 血清清蛋白 :临床比较重要和常见，常与总蛋白降低的 原因大致相同。 急性 ：多见于大出血和严重烧伤。 慢性 ：肾病蛋白尿、肝功能受损，肠道肿瘤及结核伴 慢性出血、营养不良和恶性肿瘤。 若低于20g/L，临床上出现水肿。 3. A/G比值：正常人A/G>1.0 某些病人可同时出现清蛋白减少和球蛋白升高的现象， 若A/G<1.0，称为A/G比值倒置，常见于多发性骨髓瘤和 聚球蛋白升高。 4.先天性清蛋白缺乏症：有文献报道，因清蛋白合成障碍， 血清中几乎没有清蛋白而导致清蛋白缺乏。