实验啤酒中双乙酰的测定

实验啤酒中双乙酰的测定

一、实验目的

了解双乙酰的测定方法，监测啤酒质量。

二、实验原理

双乙酰(丁二酮)是赋予啤酒风味的重要物质。但含量过大，能使啤酒有一种馊饭味。轻工部部颁标推规定成品啤酒中双乙酰含量＜0．2ppm。

双乙酰的测定方法有气相色谱法、极谱法和比色法等等。邻苯二胺比色法是连二酮类都能发生显色反应的方法，所以，此法测得之值为双乙酰与戊二酮的总量，结果偏高。但此法快速简便，是轻工部部颁标准规定的方法。

用蒸汽将双乙酰从样品中蒸馏出来，加邻苯二胺，形成2，3—二甲基喹喔琳，其盐酸盐在335nm波长下有一最大吸收峰，可进行定量测定。

三、实验仪器与试剂

(1)紫外分光光度计。

(2)双乙酰蒸馏装置

双乙酰蒸馏装置示意图

1、夹套蒸馏器

2、蒸汽发生器

3、冷凝器

4、25mL容量瓶（或量筒）

5、加样口

6、电炉

(1)4N盐酸

(2)1％邻苯二胺精密称取分析纯邻苯二胺250.0mg，溶于4N盐酸中，并定容至25mL，贮于棕色瓶中，限当日使用。

（3）消泡剂有机硅消泡剂或甘油聚醚。

四、实验步骤

(1)按上图把双乙酰蒸馏器安装好，把夹套蒸馏器下端的排气夹子打开。

(2)将内装2.5mL蒸馏水的容量瓶(或量筒)放于冷凝器下，使出口尖端浸没在水面下，外加冰水冷却。

(3)加热蒸汽发生器至沸，通汽加热夹套，备用。

(4)于100mL量筒中加入2~4滴消泡剂，再注入5℃左右未除气啤酒100mL。

(5)待夹套蒸馏器下端冒大汽时，打开进样口瓶塞，将啤酒迅速注入蒸馏器内，再用约10mL 蒸馏水冲洗量筒，同时倒入，迅速盖好进样口塞子，用水封口。

(6)待夹套蒸馏器下端再次冒大汽时，将排气夹子夹住，开始蒸馏，到馏出液接近25mL 时取下容量瓶，用水定容至25mL，摇匀(蒸馏应在3分钟内完成)。

(7)分别吸取馏出液10mL于两支比色管中。一管作为样品管加入0.5mL邻苯二胺溶液，另一管不加作空白，充分摇匀后，同时置于暗处放置20~30分钟，然后于样品管中加2mL4N 盐酸溶液，于空白管中加2.5mL4N盐酸溶掖，混匀。

(8)在335nm波长处，用2cm比色皿以空白作对照测定样品吸光度。

(9)计算：双乙酰(mg／L)＝A335×1.2

五、注意事项

(1)蒸馏时加入试样要迅速，勿使双乙酰损失。蒸馏要求在3分钟内完成。

(2)严格控制蒸汽量，勿使泡沫过高，被蒸汽带走而导致蒸馏失败。

(3)

(4)

(5)显色反应在暗处进行，否则导致结果偏高。六、思考题

是否可以用1cm比色杯比色？结果应怎样计算？