病毒检测试剂盒说明书

加上额外的损失量。可以用网状带，搅拌器，研钵或者其他的研磨装置研磨样品，如果使用 研钵和研杵在研磨不同的样品时要彻底的清洗干净。
试验步骤 1、加入样品：根据下载的表格，在每个样品孔内加入 100 微升样品液，在阳性对照样品孔 和提取液样品孔个加入 100 微升阳性对照和缓冲液。如果有阴性对照在阴性样品孔加入 100 微升阴性对照。 2、孵化酶标板：加完样品后，用小塑料袋将酶标板装好，放入室温孵化 2 小时或者 2-8 度 过夜。 3、准备酶标抗体溶液：注意：使用前 10 分钟准备酶标抗体溶液。 酶标抗体溶液时浓缩液，因此必须用酶标缓冲液稀释，建议的稀释比例在标签上，在专用的 容器内加入适量的酶标缓冲液。为了确保需要，1 毫升溶液用于 8 个样品孔，一个酶标板需 要 10 毫升缓冲液。然后根据标签比例加入酶标抗体。 举例:如果标签上写着 1:100，并且你准备 10ml 酶标抗体溶液，首先需要准备 10ml 酶标缓冲 液然后加入 100 微升抗体到缓冲液内。 加入抗体后，充分混匀，此步非常重要。 4、洗板：样品孵育完成后洗板，快速倾倒溶液到没有其他液体的水池或者废容器内。 每孔加入 200 微升的 1 倍 PBST，快速倒空酶联板，重复 7 次。 洗板结束后，在吸水纸上吸干残余液体。 检查酶联板，所有的样品孔没有样品残渣，如果还有样品残渣再重复洗板并吸干。 5、加酶标抗体溶液:向每个样品孔加 100 微升酶标抗体溶液。 6 孵育酶标板：室温条件下在湿润的箱子中孵育 2 小时。 7、准备底物溶液：每份底物基片能配置 5 毫升底物溶液，浓度为 1 毫克每毫升，大约够 5 排 8 个样品孔。 大约孵育完成前的 15 分钟，为每个基片量取 5 毫升室温下的 1 倍缓冲液，不能直接用手接 触基片，加基片到缓冲液里。 注意：不能接触基片或者底物溶液暴露在强光下，光及污染会使阴性对照的背景颜色加深。 8、洗板：如前面，用 1 倍洗液洗板 8 次。 检查样品孔存在的气泡，用吸水纸巾吸干残存的液体及气泡，如果还有气泡存在可以用干净 的吸头扎破。 9、加底物溶液：每个样品孔加 100 微升底物溶液。（此步要快，保证显色时间一致） 10、孵育酶联板：闭光孵育酶联板 60 分钟。 11、结果判读：肉眼判断或用酶标仪在 405 纳米读数。在光线下存在气泡会改变测试结果， 因此建议在读数前消除气泡。 样品孔的颜色可以判定测试结果。样品孔的颜色不明显判定为阴性，判定结果只有在阳性对 照颜色明显，缓冲液无色的条件下才有效。 结果可能在孵育 60 项 禁止皮肤或者眼睛直接接触，或吞咽其有效成分。为误食该试剂应了解注意事项，用过该试 剂之后要彻底的冲洗双手。
前期准备 熟悉试剂盒使用，检查试剂盒里的各种成分。
技术服务
如 果 你 有 关 于 试 剂 盒 的 各 种 问 题 ， 请 周 一 至 周 五 致 电 ： 5742642014 或 者 email ： info@
酶标缓冲液：酶标缓冲液用于稀释酶标抗体，1 倍的缓冲液体积根据样品孔来定，每个样品 孔需要 100 微升酶标缓冲液，为了确保用量，1 毫升溶液用于 8 个样品孔，一个酶标板需要 10 毫升缓冲液。 准备 10 毫升缓冲液，用 8 毫升水稀释 2 毫升 5 倍的缓冲液母液。
底物缓冲液:底物缓冲液用于稀释底物基片，1 倍的缓冲液体积根据样品孔来定，每个样品孔 需要 100 微升酶标缓冲液，为了确保用量，1 毫升溶液用于 8 个样品孔，一个酶标板需要 10 毫升缓冲液。 准备 10 毫升底物缓冲液，用 8 毫升水稀释 2 毫升 5 倍的缓冲液母液。 注意：底物基片此时不加，在酶联孵化完成前加入。
病毒检测试剂盒
清单 批号
明细 酶联板 酶标抗体溶液 酶标缓冲液，5 倍浓度 底物，5g 底物缓冲液，5 倍浓度 阳性对照 以上明细储存在 2-8 度条件下 洗液缓冲液，20 倍，50ml 吐温 20 样品提取缓冲液 以上明细储存在室温条件下
96 孔 1
0.15 3 12 12 1
3 15 16.5
288 孔 3
准备对照：每瓶重组冻干的阳性和阴性对照加入 2 毫升样品提取液。 等分对照溶液：在准备阳性和阴性对照之后，等分几份，确保每份都够，分在能盖盖子的离 心管内，如果在测试中用一份对照，准备 120 微升每份。如果在测试中用两份对照，准备 220 微升每份。每份溶液要比使用的标准多一点。 对照等份必须储存在-10 到-30 度。使用前不要解冻，每次使用拿出每次够用的量即可，然 后解冻彻底的混合溶液。加阳性和阴性对照的体积与加样品提起液的体积相同。 注意：不可重复解冻对照
0.35 6.5 12 12 1
5 30 33
480 孔 5 0.55 11 25 25 1
7 30 33
需要准备的物品 去离子水或者纯水 吸水纸巾 移液枪 枪头 购买阴性对照 研磨器材比如：网状样品袋，搅拌机，研钵 密封的孵育袋 测试蓝莓及酸性植物时，提取缓冲液为 GEB3
提示 过期：保质期 1 年 储存：不按上述方法储存会造成试验结果不明显或者失败 缓冲液：不要长时间储存 1 倍的缓冲液，缓冲液在使用前要在试问条件下孵育，缓冲液配方 在第 5 页仅供参考。 稀释：提前仔细阅读说明准备合适的抗体浓度，所有的抗体稀释液应经根据植物分离成分在 灵敏度和特异性上做出了的最大程度的优化。使用其他的稀释液可能会造成假阳性或者假阴 性。
准备缓冲液：提前一天准备 1 倍的缓冲液。 PBST 洗液：取出 1 包 20 倍 PBS 缓冲液母液融于 950ml 去离子水里。
样品提取缓冲液：样品提取缓冲液是用于稀释提取样品的，样品重量：样品提取缓冲液的比 例是 1:10。 缓冲液粉末 16.5g 去离子水 500ml 吐温 20 10g 加 10ml 水到缓冲液粉末里混成匀浆，在缓慢的加入剩余体积的水，再加入吐温 20 到溶液 里。 建议：调节缓冲液的 pH 值在 7.2-7.8 之间，不用储存在 2-8 摄氏度，建议使用前一天配用。 另外可以加每升缓冲液可以加 0.2 克叠氮钠。
准备酶标板：如果使用不了 96 孔，用带干燥剂的铝箔袋把没有用的放回并密封好，用记号 笔标记孔板的数目。 准备潮湿的箱子带有并可以放湿纸巾有密封的空间，湿润的箱子可以阻止酶联板在孵化的时 候蒸发。 复制一个表格记录样品和对照的位置，我们建议每次检测设置一个缓冲液和对照。
研磨和稀释样品：选择有症状的样品，经常使用页做病毒检测，有时根，器官及其他组织也 能测试，一个样品最多可以取 10 片叶子混合测试，这样经济实惠，然而每个样品取太多的 植株会降低测试的敏感度。 用样品提取缓冲液研磨和稀释样品。 研磨样品重量：样品提取缓冲液的比例是 1:10，分配时每个样品孔需要放 100 微升提取液，