仪器分析作业题外标法内标法

一、外标一点法

【含量测定】芍药苷 照高效液相色谱法（附录W D ）测定。

色谱条件与系统适用性试验 以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇 -0.05mol /L 磷酸二氢钾溶液（40 : 65）为流动相；检测波长为230nm 。理论板 数按芍药苷峰计算应不低于3000 。

对照品溶液的制备取经五氧化二磷减压干燥器中干燥 36小时的芍药苷对 照品适量，精密称定，加甲醇制成每 1ml 含0.5mg 的溶液，即得。

供试品溶液的制备 取本品粗粉约0.5g ，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密 加入甲醇25ml ，称定重量，浸泡4小时，超声处理20分钟，放冷，再称定重 量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。

测定法 分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各 10卩l ，注入液相色谱仪, 测定，即得

本品含勺药甘（C 23H 28O 11）不得少于1.8 %

解：设测得对照品溶液和供试品溶液峰面积为 A 对二550000

已知对照品溶液浓度 C 对=0.5mg/ml 器（0.5mg/ml ）0.0071mg/ml

供试品中芍药甘的含量

A 样=7800

m 样 C 样V 样 0.0071 mg/ml

10 l 10

177.5mg

X %= 177 .5mg 100% 0.5g 1000

药典规定药材含芍药甘（C 23H 28O 11）不得少于 的含量为 35.5% ，故供试品药材合格。

二、外标两点法

【含量测定】 黄芪甲苷 照高效液相色谱法（附录W D ）测定。

色谱条件与系统适用性试验 以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈 - 水（32：68）为流动相；蒸发光散射检测器检测。 理论板数按黄芪甲苷峰计算应不 低于 4000 。

对照品溶液的制备 取黄芪甲苷对照品适量， 精密称定，加甲醇制成每 1ml 含 0.5mg 的溶液，即得。

供试品溶液的制备 取本品中粉约 4g ，精密称定，置索氏提取器中，加甲 醇 40ml ，冷浸过夜，再加甲醇适量，加热回流 4 小时，提取液回收溶剂并浓缩 至干，残渣加水 10ml ，微热使溶解，用水饱和的正丁醇振摇提取 4 次，每次 40ml ，合并正丁醇液，用氨试液充分洗涤 2 次，每次 40ml ，弃去氨液，正丁 醇液蒸干，残渣加水 5ml 使溶解，放冷，通过 D101 型大孔吸附树脂柱 （内径为

1.5cm ，柱高为 12cm ） ，以水 50ml 洗脱，弃去水液，再用 40 ％乙醇 30ml 洗 脱，弃去洗脱液，继用 70％乙醇 80ml 洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣加甲醇 溶解，转移至 5ml 量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，即得。

测定法 分别精密吸取对照品溶液10卩l 20卩l 供试品溶液20卩l 注入液 相色谱仪，测定，用外标两点法对数方程计算，即得。

本品按干燥品计算，含黄芪甲苷 （C 41 H 68 O 14 ）不得少于 0.040 ％。

35.5%

1.8 %，供试品中芍药苷

解：设测得对照品溶液色谱峰面积分别为A1=259457 A2=523039 ，测得供试品溶液色谱峰面积A3=2983 。

已知对照品浓度C对=0.5mg/ml ，对照品进样量

m i 0.5mg/ml 10 l 0.005mg

5 g m 2 0.5mg /ml 20 l 0.01mg

10 g

供试品溶液峰面积A 3=2983.带入方程，得到供试品溶液进样量

m 3=1420 ^g=0.00142g

供试品中黄芪甲苷含量为

药典中规定药材干燥品种含黄芪甲苷(C 41H 68O 14)不得少于0.040 %，供试品中 黄芪甲苷含量为8.875%。故供试品药材合格。

二、内标法

【含量测定】照气相色谱法(附录W E)测定

色谱条件与系统适用性试验聚乙二醇20000(PEG-20M)毛细管柱(柱长

为30m ，内径为0.53mm ，膜厚度为1.0卩m)，柱温为160 C 。理论板数按樟

X%

0.00142g 5ml 1000 20 l 4g

100% 8.875% 根据对照品峰面积和进样量可得如下图所示方程即 y=2.6e+5x-4125 ，得

脑峰计算应不低于20 000 O

校正因子的测定 取萘适量，精密称定，加无水乙醇制成每1ml 含4mg 的 溶

液，作为内标溶液。另取樟脑对照品、薄荷脑对照品、冰片对照品各 30mg 、 10mg 、20mg ，精密称定，置同一 50ml 量瓶中，精密加入内标溶液 5ml ，加 无水乙醇稀释至刻度，摇匀，吸取l 卩l ，注入气相色谱仪，计算校正因子。

测定法 精密量取本品1ml ，置50ml 量瓶中，精密加入内标溶 液5ml ， 加无水乙醇稀释至刻度，摇匀，吸取1卩l ，注入气相色谱仪，测定，冰片以龙脑 峰、异龙脑峰面积之和计算，即得。

本品每1ml 中含樟脑(C10H16O)应为25.5〜34.5mg ;含薄荷脑

(C10H200)应为 8.5 〜11.5mg ，含冰片(C10H18O)应为 17.0 〜23.0mg 。

解：(1 )校正因子的测定 设测得萘及樟脑、薄荷脑、冰片对照品溶液的峰 面积分别为A 萘=180000 ， A 樟脑=450000 ， A 薄荷脑=500000 ， A 冰片=520000 。 由题已知萘及各对照品溶液浓度分别为 C 萘=4mg/ml ，C 樟脑=0.6mg/ml,C 薄荷脑=0.2mg/ml

C 冰片=0.4mg/ml 。

据公式f

A 萘

180000 /C 萘 /4mg/ml ° 仃

可得 f 樟脑