口蹄疫液相阻断ELISAPPT
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口蹄疫液相阻断ELISA PPT
6每孔再加50vl终止液终止反应，立即在 450nm波长下读取OD值。
四、结果分析
1、实验成立条件 病毒抗原对照OD值应在2.0±1范围内。 阳性对照抗体效价应在1：1024±1滴度
范围内。 阴性对照抗体效价应＜1：8. 如果实验无效，实验中的操作值得怀疑，
最好重新作一遍。
2、结果判定
抗原对照4孔，弃去1个最高和最低值， 计算剩余2孔的平均OD值，再除以2，即 50%对照值，该值即为临界值，表示阻 断50%反应的对照OD450值。
备检血清OD450值＞临界值，判为阴性；
备检血清OD450值≤临界值，判为阳性；
每份血清系列滴度稀释中，阳性孔的最 高稀释倍数即为该备检血清的抗体效价。
抗体效价在1：64- 1：128之间，判为可 疑；可以血清需要复检，复检抗体效价 ≥1：128，判为阳性；抗体效价≤1：64， 判为阴性；
五、注意事项
1、实验前必须认真阅读说明书。 2、试剂盒所有浓缩试剂在低温放置下，
可能有无机盐结晶，如果有结晶盐出现， 80℃温育30min可溶解，且不影响实验。 3、所有试剂必须回复室温使用，以免影 响抗原抗体反应
2、样抗原抗体混合液及病毒抗原对照从 血清稀释板上按次序转移到包被板上 50vl/孔，封板， 37℃反应30Min。
3、洗涤液洗版5次，拍干。加抗体溶液 50vl/孔，封板， 37℃反应35Min。
4、同上洗板5次，拍干。加酶结合物 50vl/孔，封板， 37℃反应35Min。
5、同上洗板5次，拍干， 50vl/孔加入底 物溶液（显色液A和B按1：1混合），37 ℃避光温育15min。
大家应该也有点累了，稍作休息
大家有疑问的，可以询问和交流
1.1稀释病毒抗原：用配制好的洗涤液在孔外6 倍稀释病毒抗原。
四、结果分析
1、实验成立条件 病毒抗原对照OD值应在2.0±1范围内。 阳性对照抗体效价应在1：1024±1滴度
范围内。 阴性对照抗体效价应＜1：8. 如果实验无效，实验中的操作值得怀疑，
最好重新作一遍。
2、结果判定
抗原对照4孔，弃去1个最高和最低值， 计算剩余2孔的平均OD值，再除以2，即 50%对照值，该值即为临界值，表示阻 断50%反应的对照OD450值。
备检血清OD450值＞临界值，判为阴性；
备检血清OD450值≤临界值，判为阳性；
每份血清系列滴度稀释中，阳性孔的最 高稀释倍数即为该备检血清的抗体效价。
抗体效价在1：64- 1：128之间，判为可 疑；可以血清需要复检，复检抗体效价 ≥1：128，判为阳性；抗体效价≤1：64， 判为阴性；
五、注意事项
1、实验前必须认真阅读说明书。 2、试剂盒所有浓缩试剂在低温放置下，
可能有无机盐结晶，如果有结晶盐出现， 80℃温育30min可溶解，且不影响实验。 3、所有试剂必须回复室温使用，以免影 响抗原抗体反应
2、样抗原抗体混合液及病毒抗原对照从 血清稀释板上按次序转移到包被板上 50vl/孔，封板， 37℃反应30Min。
3、洗涤液洗版5次，拍干。加抗体溶液 50vl/孔，封板， 37℃反应35Min。
4、同上洗板5次，拍干。加酶结合物 50vl/孔，封板， 37℃反应35Min。
5、同上洗板5次，拍干， 50vl/孔加入底 物溶液（显色液A和B按1：1混合），37 ℃避光温育15min。
大家应该也有点累了，稍作休息
大家有疑问的，可以询问和交流
1.1稀释病毒抗原：用配制好的洗涤液在孔外6 倍稀释病毒抗原。
口蹄疫本科兽医传染病学83页PPT文档
对酸和碱十分敏感。 pH7.4-7.6最稳定，不能抵抗pH5.0.肉品中由于产生乳酸 使pH下降，3d可使病毒灭活。 鲜牛奶中的病毒在37℃可生存12h，18 ℃生存6d. 酸奶中的病毒迅速死亡。
2019/9/25
1、易感动物： 主要为偶蹄兽。 奶牛、牦牛、犏牛、水牛、猪、绵羊、山羊、骆驼。 野生动物：黄羊、鹿、麝、野猪、野牛、瘤牛
涎，开口时有吸吮声。 • 1-2天后，在唇内面、齿龈、舌面和颊部粘膜发生蚕豆至核
桃大的水疱，口温高，此时口角流涎增多，呈白色泡沫状 ，常常挂满嘴边，采食反刍完全停止。
2019/9/25
续 • 水疱破裂后形成浅表的红色糜烂，体温降至正常，糜烂 逐渐愈合，全身症状逐渐好转。 • 在口腔发生水疱的同时或稍后，趾间及蹄冠的皮肤发生 水疱，并很快破溃形成烂斑，如有细菌感染，糜烂加深 ，皮肤形成溃疡、坏死，蹄匣脱落等。
FMDV感染细胞培养液中的4种粒子
4
1. 完整病毒，23±2nm，沉降系数146S，有感染性；
3
2. 不含有RNA的空衣壳，直径21nm，沉降系数为
2
75S，没有感染性，有特异性和免疫原性；
3. 衣壳蛋白亚单位，其直径为7nm，沉降系数为
1
12S，无RNA，无感染性，有抗原性；
FMDV感染细胞培养液中的4种粒子
50％甘油生理盐水中在5℃能存活1年以上。
但高温和直射阳光(紫外线)对病毒有杀灭作用。
病毒的抵抗力
对 外 界 的 抵 抗 力 很 强 ， 常 用 2%-4% 的 氢 氧 化 钠 、 0.2%0.5%过氧乙酸、10%的石灰乳、20%漂白粉、3%-5%福尔马林等 消毒剂消毒。但是，碘酊、酒精、石碳酸、来苏尔、新洁尔灭 消毒药毒病毒无杀灭作用。 肉品10-12℃24h，4-8℃24-48h，pH5.3-5.7，病毒灭活，但骨 髓、淋巴结内不易产酸，病毒能存活1月以上。
口蹄疫课件-本科兽医传染病学
发热：体温升高，可达 40-41℃
口腔病变：口腔黏膜红肿、 溃疡、坏死
蹄部病变：蹄冠、蹄踵、 蹄壁出现红肿、溃疡、坏 死
呼吸系统症状：咳嗽、气 喘、呼吸困难
消化系统症状：腹泻、呕 吐、食欲不振
神经症状：共济失调、瘫 痪、抽搐
口蹄疫的病变过程
潜伏期：感染后2-14天，无明显症状 前驱期：体温升高，精神不振，食欲减退 急性期：口腔黏膜、蹄部、乳房等部位出现水疱 恢复期：水疱破裂，形成溃疡，逐渐愈合 慢性期：少数病例出现心肌炎、肺炎等并发症 死亡：严重病例可能出现死亡，死亡率约1%-5%
口蹄疫病毒的传播方式
直接接触：通过 接触病畜或其分 泌物传播
空气传播：通过 飞沫、气溶胶等 方式传播
间接接触：通过接 触被污染的饲料、 水、器具等传播
垂直传播：通过 胎盘、乳汁等方 式传播
口蹄疫病毒的致病机理
病毒侵入：口蹄疫病毒通过口腔、鼻腔、皮肤等途径侵入动物体内
病毒复制：病毒在细胞内复制，产生大量病毒粒子
汇报人：PPT
疫苗接种：定期对健康畜进行疫苗接种，提高免疫力 加强管理：加强饲养管理，提高畜群的抵抗力，减少感染风险
口蹄疫的控制策略与措施
疫苗接种：定期进行疫苗接种，提高动物免疫力 加强管理：加强养殖场管理，保持环境卫生，减少疾病传播 隔离治疗：发现病畜及时隔离治疗，防止疾病扩散 消毒灭菌：对养殖场、运输工具等进行消毒灭菌，减少疾病传播风险 加强监测：定期进行疾病监测，及时发现疫情并采取措施 宣传教育：加强公众宣传教育，提高公众对疾病的认识和防范意识
细胞损伤：病毒复制过程中，导致细胞损伤，影响细胞功能
免疫反应：动物免疫系统对病毒产生免疫反应，导致炎症反应和组织损 伤
传播途径：病毒通过分泌物、排泄物等途径传播给其他动物
口蹄疫A型抗体液相阻断ELISA作业指导书
1．适用范围试剂盒来自中国农业科学院兰州兽医研究所，适用于A型口蹄疫抗体检测。
2. 器材准备2.1移液器：5-50ul移液器、0.2-10ul移液器、50-200ul移液器、50-300ul移液器各一把。
2.2移液枪头。
2.3抗原抗体反应板：微量血凝板（U型、V型均可）5块，试剂盒配备两块，用于被检血清的稀释和抗原抗体反应。
2.4超纯水，无离子水或蒸馏水。
3. 试剂准备3.1 包被缓冲液（PH9.6）将试剂盒配备的碳酸盐缓冲液胶囊1粒小心打开，将胶囊内粉末小心倒入100ml无离子水中溶解即可。
4℃存放，1月内有效。
3.2 洗涤液（PBST）将本试剂盒配备的25倍浓缩PBST液（可能有结晶形成，用时微热溶化）用无离子水或蒸馏水做1:25稀释。
（如果PH降低，务必用NaOH调制7.4）3.3 底物溶液取1片柠檬酸-磷酸盐片剂（试剂盒配备）溶于100ml无离子水中，溶解后，取50ml溶液，再加1片邻苯二胺（OPD）片剂，充分溶解，分装（5ml\瓶或10ml\瓶），避光-20℃保存。
用前避光溶化，临用时每1ml上述溶液加10ul3%的双氧水（H2O2）。
务必加双氧水！4. 操作步骤4.1 用包被缓冲液稀释A型口蹄疫病毒兔抗血清至工作浓度（1:1000）,在ELISA板上每孔加50ul，振荡，封板或置湿盒内，室温过夜。
4.2 抗原抗体（阴阳性对照血清及待检血清）反应根据不同的需要，选择图1-2中的一种布局在抗原抗体反应板上操作。
图1 96孔酶标板检测10份样品布局图1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12A B C D E F G H图1份样品布局图。
图2 96孔酶标板检测20份样品布局图1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12A B C D E F G H以图1为例，在U型血凝板上按50ul\孔量用PBST将待检血清从1:4开始做2倍连续稀释至1:512。
同时，按图示稀释阴阳性对照血清，然后每孔加入50ul用PBST稀释到使用浓度的A型口蹄疫病毒抗原（1:7，即1份病毒抗原加6份PBST），病毒抗原对照孔加100ul。
口蹄疫介绍PPT培训课件
03 预防措施与控制 策略
疫苗接种及免疫程序
01
02
03
疫苗种类选择
针对不同口蹄疫病毒血清 型，选择相应疫苗进行接 种，如O型、A型、Asia 1 型等单价或多价疫苗。
免疫程序制定
根据动物种类、年龄、饲 养环境等因素，制定合理 的免疫程序，包括基础免 疫和加强免疫等。
疫苗接种操作
确保疫苗接种操作规范， 包括疫苗保存、注射部位 消毒、正确注射等，以提 高免疫效果。
疫苗研发
针对不同口蹄疫病毒株的疫苗研发具有挑战性，需要不断更新以 适应病毒变异。
防控措施
实施有效的防控措施，如疫苗接种、疫情监测和报告等，以降低 疫情传播风险。
国际合作
加强国际间口蹄疫防控合作，共同应对疫情挑战，维护全球公共 卫生安全。
未来发展趋势预测
疫苗技术创新
随着生物技术的不断发展，口蹄疫疫苗研发将更加高效、精准。
临床表现
口蹄疫的潜伏期一般为2-7天，病初动物体温升高，精神不振，食欲减退。随后 在口腔、蹄部、乳房等部位出现水泡和烂斑，严重时可能导致蹄壳脱落和跛行。 病猪还可能出现鼻盘、唇边和母猪乳头等部位的水泡和烂斑。
流行病学特点
• 易感动物：口蹄疫主要侵害偶蹄动物，如猪、牛、羊等，不同品种和年龄的动 物均可感染。
THANKS
感谢观看
其他抗病毒药物
如阿糖腺苷、病毒唑等，也有一定的抗病毒效果 ，但需在医生指导下使用。
辅助治疗手段探讨
对症治疗
针对患者出现的发热、疼痛等症状，可采用解热镇痛药、镇痛药 等进行对症治疗。
局部治疗
对于口腔黏膜、皮肤等部位的病变，可采用局部涂抹药物、口腔喷 雾等方式进行治疗，以减轻症状、促进愈合。
口蹄疫及其防治PPT课件
2.疫苗在使用前和使用过程中，均应充分振摇。疫苗瓶开封后，应当日用完。 3.注射器具和注射部位应严格消毒，每注射1头猪，应更换1个针头。注射时，进针应达到适
当深度(肌肉内)，以免影响疫苗效果。 4.不得使用无标签、疫苗瓶有裂纹或封口不严、疫苗中有异物或变质的疫苗。 5.接种前应对猪进行检查。患病、瘦弱或临产母猪不予注射。 6.本疫苗适用于接种疫区、受威胁区、安全区的猪。接种时，应从安全区到受威胁区，最后
再接种疫区内安全群和受威胁群。 7.非疫区的猪，接种疫苗21日后方可移动或调运。 8.接种时，应严格遵守操作规程，接种人员在更换衣服、鞋、帽和进行必要的消毒之后，方
可参与疫苗的接种。 9.接种时，须有专人做好记录，写明省(区)、县、乡(镇)、自然村、畜主姓名、家畜种类、大
小、性别、接种头数和未接种头数等。在安全区接种后，观察7—10日，并详细记载有关情况。 10.由于口蹄疫的特殊性，特别忠告：接种疫苗只是消灭和预防该病的多项措施之一，在接种
罕见. 因为口蹄疫病毒对胃酸敏感，所以人类通常不会通过食用
肉类感染口蹄疫病毒. 在英国，最後一次确认人类罹患口蹄疫是
在1967年。在欧洲大陆，非洲以及南美也只有很少感染案例。口
蹄疫感染人类的症状包括不舒服，发烧，呕吐，口腔组织发生红
色溃疡腐烂(表面腐蚀性水疱)，偶有皮肤小水疱。对于人类，值
得注意的是，该症状与另外一种病毒疾病的症状类似，那种疾病
至四个礼拜再注射第二剂，以提高抗体之产生，此免
疫抗体即可保护猪只不受口蹄疫病毒的感染。
7. 已注射疫苗之猪只，其猪肉可以安心食用吗？
“口蹄疫疫苗”是无毒的，打入猪只体内所产生
的免疫抗体则是安全的蛋质成分，来自免疫猪只的猪
肉经过加热烹调后，当然可以安心食用。
当深度(肌肉内)，以免影响疫苗效果。 4.不得使用无标签、疫苗瓶有裂纹或封口不严、疫苗中有异物或变质的疫苗。 5.接种前应对猪进行检查。患病、瘦弱或临产母猪不予注射。 6.本疫苗适用于接种疫区、受威胁区、安全区的猪。接种时，应从安全区到受威胁区，最后
再接种疫区内安全群和受威胁群。 7.非疫区的猪，接种疫苗21日后方可移动或调运。 8.接种时，应严格遵守操作规程，接种人员在更换衣服、鞋、帽和进行必要的消毒之后，方
可参与疫苗的接种。 9.接种时，须有专人做好记录，写明省(区)、县、乡(镇)、自然村、畜主姓名、家畜种类、大
小、性别、接种头数和未接种头数等。在安全区接种后，观察7—10日，并详细记载有关情况。 10.由于口蹄疫的特殊性，特别忠告：接种疫苗只是消灭和预防该病的多项措施之一，在接种
罕见. 因为口蹄疫病毒对胃酸敏感，所以人类通常不会通过食用
肉类感染口蹄疫病毒. 在英国，最後一次确认人类罹患口蹄疫是
在1967年。在欧洲大陆，非洲以及南美也只有很少感染案例。口
蹄疫感染人类的症状包括不舒服，发烧，呕吐，口腔组织发生红
色溃疡腐烂(表面腐蚀性水疱)，偶有皮肤小水疱。对于人类，值
得注意的是，该症状与另外一种病毒疾病的症状类似，那种疾病
至四个礼拜再注射第二剂，以提高抗体之产生，此免
疫抗体即可保护猪只不受口蹄疫病毒的感染。
7. 已注射疫苗之猪只，其猪肉可以安心食用吗？
“口蹄疫疫苗”是无毒的，打入猪只体内所产生
的免疫抗体则是安全的蛋质成分，来自免疫猪只的猪
肉经过加热烹调后，当然可以安心食用。
《猪口蹄疫》PPT课件
成年动物的口腔黏膜、蹄部和乳房等处皮肤发生 水疱和溃烂，幼龄动物多因心肌受损使其死亡率 升高。
传播速度快，流行范围广。
1-6号病：猪水疱病、马瘟、马传贫、鸭瘟、 口蹄疫、牛瘟
二、历史与分布
1514年，意大利H. Fracastorius描述了牛群中 相继发生的一种疾病，这是对牛口蹄疫病例的最 早记载。
七、病理变化
1.口腔、蹄部或鼻端、乳房等处出现水泡及烂斑。 2.咽喉、气管、支气管和胃粘膜也有烂斑或溃疡。 3.小肠、大肠粘膜可见出血性炎症。 4.心肌变性或坏死而出现灰白色或淡黄色的斑点
或条纹，俗称“虎斑心” 。
八、诊断
1、临床综合诊断：
➢ 口蹄疫常同时侵害多种偶蹄兽，传播迅速，呈流 行性或大流行性发生。
三、口蹄疫病毒的危害
传染性极强，感染率达100％，可形成大范围流 行。
死亡率只有2~3%，犊牛及仔猪和恶性病例死亡率 可达50~100%。
造成巨大的经济损失和政治影响。
国际兽医局(OIE)和联合国粮农组织(FAO) 将FMD列为A类一号烈性传染病。
1.直接经济损失 ➢ 动物死亡、病畜及可疑病畜被屠杀焚毁。 ➢ 患病期间肉和奶的生产停止。 ➢ 病后肉和奶产量长期减少，种用价值丧失。
➢ 同时口腔及蹄部有特征性的水疱和烂斑。 ➢ 死后剖检可见虎斑心和出血性胃肠炎症变。
2、实验室诊断：
采取病畜水疱液及水疱皮，或康复血清送检。 ➢ （1）动物接种分离病毒 ➢ （2）组织培养细胞分离 ➢ （3）中和试验（乳鼠血清保护试验） ➢ （4）补体结合试验 ➢ （5）核酸杂交 ➢ （7）RT-PCR ➢ （8）酶联免疫吸附试验
诊断方法包括
①临床诊断、分析、处理后得出结论； ②流行病学诊断，包括疫情调查，分析处理后得出结论； ③病理学诊断，通过对疫病的特征性病理变化调查，分析作出诊断； ④微生物学诊断，病料的采集，涂片镜检，分离培养鉴定，动物接种等； ⑤免疫学诊断，血清学诊断和变态反应； ⑥分子生物学技术的应用，核酸杂交技术，PCR技术，核酸分析。
传播速度快，流行范围广。
1-6号病：猪水疱病、马瘟、马传贫、鸭瘟、 口蹄疫、牛瘟
二、历史与分布
1514年，意大利H. Fracastorius描述了牛群中 相继发生的一种疾病，这是对牛口蹄疫病例的最 早记载。
七、病理变化
1.口腔、蹄部或鼻端、乳房等处出现水泡及烂斑。 2.咽喉、气管、支气管和胃粘膜也有烂斑或溃疡。 3.小肠、大肠粘膜可见出血性炎症。 4.心肌变性或坏死而出现灰白色或淡黄色的斑点
或条纹，俗称“虎斑心” 。
八、诊断
1、临床综合诊断：
➢ 口蹄疫常同时侵害多种偶蹄兽，传播迅速，呈流 行性或大流行性发生。
三、口蹄疫病毒的危害
传染性极强，感染率达100％，可形成大范围流 行。
死亡率只有2~3%，犊牛及仔猪和恶性病例死亡率 可达50~100%。
造成巨大的经济损失和政治影响。
国际兽医局(OIE)和联合国粮农组织(FAO) 将FMD列为A类一号烈性传染病。
1.直接经济损失 ➢ 动物死亡、病畜及可疑病畜被屠杀焚毁。 ➢ 患病期间肉和奶的生产停止。 ➢ 病后肉和奶产量长期减少，种用价值丧失。
➢ 同时口腔及蹄部有特征性的水疱和烂斑。 ➢ 死后剖检可见虎斑心和出血性胃肠炎症变。
2、实验室诊断：
采取病畜水疱液及水疱皮，或康复血清送检。 ➢ （1）动物接种分离病毒 ➢ （2）组织培养细胞分离 ➢ （3）中和试验（乳鼠血清保护试验） ➢ （4）补体结合试验 ➢ （5）核酸杂交 ➢ （7）RT-PCR ➢ （8）酶联免疫吸附试验
诊断方法包括
①临床诊断、分析、处理后得出结论； ②流行病学诊断，包括疫情调查，分析处理后得出结论； ③病理学诊断，通过对疫病的特征性病理变化调查，分析作出诊断； ④微生物学诊断，病料的采集，涂片镜检，分离培养鉴定，动物接种等； ⑤免疫学诊断，血清学诊断和变态反应； ⑥分子生物学技术的应用，核酸杂交技术，PCR技术，核酸分析。
口蹄疫疾病PPT课件
2019/2/11 4
遗传变异研究
FMDV遗传和变异的研究有两个主要目的，一是以生物学观点解释病毒 基因组每部分的功能；二是解释病毒的遗传关系和产生多样变异的原 因。FMDV的变异主要有以下几方面：
1．温度敏感变异
FMDVts变异的研究主要是为了获得稳定的弱毒株
2．抗胍变异
3．培养特性变异 目前世界上几乎所有制苗用弱毒株都是经过空斑
6
(猪)口蹄疫疾病
口蹄疫是偶蹄兽的一种急性、热性、高度接触性传染病。
临床特点为口腔粘膜、蹄部和乳房皮肤发生水泡和烂斑，故
民间有“口疮”、“蹄癀”、‘‘脱靴症”之称。
病原 口蹄疫的病原体是小核糖核酸病毒科口蹄疫病毒
属的口蹄疫病毒。
2019/2/11
7
口蹄疫病毒的形态特征
FMDV属于小RNA病毒 科（Picornaviridae）口疮病 毒属（Aphthovirus），是已 知最小的动物RNA病毒。在 病毒的中心为一条单链的正 链RNA，由大约8000个碱基 组成，是感染和遗传的基础； 周围包裹着蛋白质决定了病 毒的抗原性、免疫性和血清 学反应能力；病毒外壳为对 称的20面体。
2019/2/11 10
口蹄疫病毒的流行病学 易感动物有猪、牛、绵羊、山羊、骆驼等。
急性病畜和潜伏期带毒动物是最危险的传染源。
病畜的水疱皮和水疱液中含有大量病毒，血液、
肉、唾液、乳汁、精液、尿、粪等分泌物和排
泄物中都含有病毒。本病通过直接接触病原体 和借助空气进行感染，有一定的季节性，感染 率和发病率很高，传染力强，传播迅速，范围 广。
用酸处理FMDV,可使每个病毒粒子释出20个蛋白亚单位。
遗传变异研究
FMDV遗传和变异的研究有两个主要目的，一是以生物学观点解释病毒 基因组每部分的功能；二是解释病毒的遗传关系和产生多样变异的原 因。FMDV的变异主要有以下几方面：
1．温度敏感变异
FMDVts变异的研究主要是为了获得稳定的弱毒株
2．抗胍变异
3．培养特性变异 目前世界上几乎所有制苗用弱毒株都是经过空斑
6
(猪)口蹄疫疾病
口蹄疫是偶蹄兽的一种急性、热性、高度接触性传染病。
临床特点为口腔粘膜、蹄部和乳房皮肤发生水泡和烂斑，故
民间有“口疮”、“蹄癀”、‘‘脱靴症”之称。
病原 口蹄疫的病原体是小核糖核酸病毒科口蹄疫病毒
属的口蹄疫病毒。
2019/2/11
7
口蹄疫病毒的形态特征
FMDV属于小RNA病毒 科（Picornaviridae）口疮病 毒属（Aphthovirus），是已 知最小的动物RNA病毒。在 病毒的中心为一条单链的正 链RNA，由大约8000个碱基 组成，是感染和遗传的基础； 周围包裹着蛋白质决定了病 毒的抗原性、免疫性和血清 学反应能力；病毒外壳为对 称的20面体。
2019/2/11 10
口蹄疫病毒的流行病学 易感动物有猪、牛、绵羊、山羊、骆驼等。
急性病畜和潜伏期带毒动物是最危险的传染源。
病畜的水疱皮和水疱液中含有大量病毒，血液、
肉、唾液、乳汁、精液、尿、粪等分泌物和排
泄物中都含有病毒。本病通过直接接触病原体 和借助空气进行感染，有一定的季节性，感染 率和发病率很高，传染力强，传播迅速，范围 广。
用酸处理FMDV,可使每个病毒粒子释出20个蛋白亚单位。
口蹄疫讲课PPT课件
一进口动物发生口蹄疫，对相 关人员进行追踪调查和隔离观 察
口蹄疫的案例分析重点
案例选择：选择具有代表性的口蹄疫病例，如大规模爆发或造成严重影响的事件。
症状识别：介绍口蹄疫的症状，如何通过观察动物的行为和体征来判断是否患病。
传播途径：详细说明口蹄疫的传播方式，如直接接触、空气传播等，以及防止疾病扩散的 措施。
口蹄疫的控制策略
疫苗接种：定期 为易感动物接种 口蹄疫疫苗，提 高其免疫力。
隔离措施：发现 疑似病例时，应 立即隔离，防止 疫情扩散。
消毒措施：对养 殖场、屠宰场等 场所进行定期消 毒，消灭病毒传 播源。
监测与报告：建 立健全的监测体 系，及时发现并 报告疫情，为防 控提供科学依据。
口蹄疫的疫苗接种
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口蹄疫讲课PPT 课件
汇报人：
汇报时间：20X-XX-XX
汇报人员
口蹄疫的预防与 控制
口蹄疫的概述
口蹄疫的案例分 析
口蹄疫的症状与 诊断
口蹄疫的未来展 望
单击汇报人员：XX医院-XX
口蹄疫的概述
口蹄疫的定义
口蹄疫是一种 由口蹄疫病毒 引起的动物传
染病
主要感染偶蹄 动物，如牛、
易感动物：牛、 猪、羊等偶蹄动 物
流行特点：季节 性、地区性、周 期性
口蹄疫的传播途径
直接接触传播：口蹄疫病毒可通 过患病动物和健康动物直接接触 传播。
空气传播：在特定条件下，口蹄 疫病毒可形成气溶胶，通过空气 传播。
间接传播：口蹄疫病毒也可通过 被病毒污染的物品、水源、土壤 等间接接触传播。
消化道传播：摄入被病毒污染的 食物和饮水也可感染口蹄疫。
防治措施：介绍针对口蹄疫的预防和治疗措施，如疫苗接种、隔离病畜等。
口蹄疫液相阻断ELISA
二、实验前准备
1、使用前，试剂 盒所有组份应回复 到18-26℃，试剂 要混合均匀，每个 样品使用一个吸头。 2、浓缩洗涤液用 蒸馏水或去离子水 25倍稀释。
三、实验操作步骤
1、抗原抗体反应布板
图 2 96 孔酶标板检测 20 份样品布局图
S1 1:32 1:64 1:128 1:256 S2 S3 S4 S5 S6 S7 S8 S9 S10 +1:32 1:64 1:128 1:256 -1:4 1:8
4、温育设备要精确度要高，温度过高过 低都会影响OD值高低。 5、包被板反应时严禁堆叠放置，应平铺 且板间有间隙，切不可离箱壁太近。 6、所用移液器和设备要精准。 7、备检样品要合格。
操作要点
严谨的设计，优质的试剂，正确的操作 和良好的仪器是保证ELISA必要条件。
严格遵照规定操作，必能得出准确的结 果。
抗体效价≥1：128，判为阳性； 抗体效价≤1：64，判为阴性； 抗体效价在1：64- 1：128之间，判为可 疑；可以血清需要复检，复检抗体效价 ≥1：128，判为阳性；抗体效价≤1：64， 判为阴性；
五、注意事项
1、实验前必须认真阅读说明书。 2、试剂盒所有浓缩试剂在低温放置下， 可能有无机盐结晶，如果有结晶盐出现， 80℃温育30min可溶解，且不影响实验。 3、所有试剂必须回复室温使用，以免影 响抗原抗体反应
5、同上洗板5次，拍干， 50vl/孔加入底 物溶液（显色液A和B按1：1混合），37 ℃避光温育15min。 6每孔再加50vl终止液终止反应，立即在 450nm波长下读取OD值。
四、结果分析
口蹄疫防治规范(幻灯片)PPT课件
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鼻镜边缘水泡
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猪口蹄疫， 颊部粘膜糜 烂
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蹄锺部水 泡破溃
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蹄叉部水泡 破溃，蹄冠 部水肿
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猪乳房上的水疱
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四、病变
口腔、蹄部的水疱和烂斑 咽喉、气管、支气管和前胃粘膜有时可见烂斑 心肌切面上有黄白条纹相间于红色心肌纤维间，
称为“虎斑心”，心肌松软、似煮熟样。
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口蹄疫扑灭再发的原因(四)
毒力强
1g水泡皮毒稀释到1000万倍（10-7 ） 以上可以使1头牛发病，也就是说，1头 牛的排毒量可以感染100万头
1g猪水泡皮可以使10万头猪感染发病。
5、传染源多，传播方式多，传播迅速
处在潜伏感染期和临床表现期的病畜 的排泄物
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消灭口蹄疫必备条件
该病传染快、流行广、发病率高，往往牛、 羊、猪在同一时间内发病
近年来，猪发生有扩大的趋势
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行病流学----传播方式
1、空气传播 2、接触传播
提示：加强空气消毒和带动物消毒
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流行形式：
在牧区：常大流行
半农半牧区：流行
在农区：
该病的流行可呈跳跃式传播：主要是流通原因
季节性： 一年四季均可发生，秋季开始，冬季加剧，春 季减轻、夏季基本平息；在农区或半农区不明显， 猪秋末、冬春多发
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型和亚型
● 有7个主型 每一个主型又有若干亚型我国仅见A、O、和亚洲
1型。各型之间不能互相免疫。
C SAT1 SAT2 SAT3
A O 亚洲１型
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5
存在部位：
口蹄疫液相阻断ELISA
口蹄疫的症状和诊断
口蹄疫病毒感染后潜伏期一般为2-14天，平均 为4-7天。
患病动物体温升高，口腔和蹄部出现水疱和溃 疡，严重时蹄壳脱落。
诊断方法包括病毒分离鉴定、抗原检测和核酸 检测等。其中，液相阻断ELISA是一种常用的检 测方法，具有较高的特异性和敏感性。
02
CATALOGUE
液相阻断elisa技术
免疫持久性研究
通过长期监测接种疫苗的动物体 内的抗体和抗原水平，可以了解 疫苗的免疫持久性，为改进疫苗 研制提供依据。
交叉保护研究
通过液相阻断ELISA技术，可以研 究不同型别口蹄疫病毒的交叉保 护情况，为制定有效的免疫策略 提供科学依据。
04
CATALOGUE
液相阻断elisa技术的优缺点
优点
elisa技术的发展历程
01
1971年
ELISA技术诞生，用于检测抗原或抗 体。
1980年代
间接ELISA技术广泛应用于临床诊断 和流行病学调查。
03
02
1977年
改进后的间接ELISA方法用于检测抗 体。
1985年
阻断ELISA技术问世，用于检测抗原 或抗体。
04
液相阻断elisa的原理
液相阻断ELISA是一种基于酶联免疫吸附剂测定的技术，通过阻断抗原与抗体结合的 位点，检测样本中特定抗原或抗体的存在。
口蹄疫病毒有多个血清型，各 型之间无交叉免疫保护，同一 血清型内也有多个亚型。
口蹄疫的流行病学
1
口蹄疫主要通过直接接触传播，如患病动物分泌 物、排泄物以及被其污染的饲料、水源、工具等 。
2
该病四季均可发生，但春秋两季更容易发情期， 易感动物主要是偶蹄动物，如牛、羊、猪等。