促甲状腺素(TSH)实验室检测

M05-0906-v1.0

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促甲状腺素（TSH ）

【试剂名称】 通用名称：促甲状腺素（TSH ）测定试剂盒（化学发光法） 1. 用途

本试剂用于定量测定人血清或血浆内促甲状腺激素（TSH ）的含量。 本方法适用标本的浓度范围为0-100 μIU/ml 。 该测试必须在Maglumi ® 1000 分析仪上进行。 2. 概述与说明

促甲状腺激素是一种分子量范围在28000-30000 道尔顿的糖蛋白激素，由两个非共价连接的亚单位hTSH α及hTSH β组成。TSH 、促黄体生成素（LH ）、促卵泡激素（FSH ），以及人绒毛膜促性腺激素（HCG ）的共同特征在于，它们的糖类含量相当高，且它们的α亚单位序列具有同源相似性。而这四种激素的β亚单位的氨基酸序列各不相同。

腺垂体内TSH 的释放与合成受到下丘脑促甲状腺素释放激素的刺激。所释放的TSH 刺激甲状腺释放甲状腺素（T4）和三碘甲状腺原氨酸（T3），这两者分别以99.9% 及99.7%的比例与血液中的转运蛋白结合。

仅游离的FT3 与FT4没有与结合蛋白相结合，在外周组织具有生理活性，通过垂体反馈机制控制甲状腺的功能。TSH 的测定能够对抑制及替代疗法进行监测。 3. 测试原理

利用免疫发光夹心法的原理检测TSH ；

采用针对TSH 的一株单克隆抗体标记ABEI ，另外一株单克隆抗体标记FITC 。标本、定标液、（质控液）与ABEI 标记的单抗，FITC 标记的单抗，包被有羊抗FITC 抗体的纳米免疫磁性微珠混匀置37℃ 孵育形成“夹心三明治”，然后外加磁场沉淀，去掉上清液，用洗液循环清洗沉淀复合物1次，直接进入样品测量室，仪器自动泵入发光底物1和2，自动监测3秒钟内发出的相对光强度（RLU ）。TSH 浓度与RLU 成一定的比例关系，仪器自动拟合计算TSH 浓度。 4. 试剂

4.1试剂组成

此外试剂盒中不包含以下材料，需另行准备

4.2试剂的准备

在揭开密封纸之前，先轻轻地水平摇晃试剂盒（为了防止泡沫形成！）。揭开密封纸，来回地转动磁颗粒区的小轮，直到悬浮液颜色变成褐色。该试剂盒放入仪器试剂区，等待30分钟。在此期间，磁性微珠自动被搅拌并完全重新悬浮。 ★不同试剂磁珠不得混用！ 4.3试剂的保存

- 未启封时：保存在2-8℃，直到失效日期 - 启封后放于仪器中：最少两星期的稳定性。在此之后，如果质控值还在期望的范围之内，仍可以继续使用 - 直立向上放置 - 避免阳光照射 5. 定标品溯源

该试剂盒中的定标品购自Fitzgerald 公司，生物来源：自人血清中提取，HPLC 纯化，纯度>98%，经检测不含HBsAg, anti-Syphillis,anti-HCV, anti-HIV-1, anti-HIV-2。 6. 定标

6.1两点定标

通过测量定标物，预先定义的主曲线上的每个定标点将被调整（重新定标）为一个新的、仪器特异的测量水平,即工作曲线。 6.2定标的频率

- 每改变一次批号（指试剂盒或者激发试剂而言）

- 每四星期或每使用一个新的试剂盒（建议） - Maglumi ® 1000 分析仪的每次维护之后 - 当质控值不在期望范围之内时 - 房间温度改变超过5℃时（建议） 7. 样本的采集、原料及保存 - 用标准程序采集样本 - 样本原料：血清，血浆 - 在2-8℃下可保存24小时

- 如需保存更长时间：冷冻至-20℃ - 避免反复冰冻和解冻

- 被保存的样本在使用之前应被彻底地混匀（使用旋涡混匀器） 8. 干扰物质

在胆红素<0.125 mg/ml ，血红蛋白<16 mg/dl ，甘油三酯〈12.5 mg/ml 的浓度下，测试结果中没有发现干扰因素。 9. 警告与预防

本试剂仅供体外诊断用。不同批号试剂盒内试剂请勿混用。过了有 效期请停止使用。

所有在测试中用到的样本，生物试剂及原料必须

被视为传染性物质，因而在废弃时应该与实验室管辖机构的盛行条例、指导方针及每个国家的相关条例一致。需废弃的材料必须被焚烧灰化；液体废物必须以最终浓度为5%的次氯酸钠至少净化半小时。所有可再次使用的材料必须使用过度杀伤法（USP 24,2000,p.2143）高压灭菌，虽然用户最初必须常规地使用生物指示剂检查净化效果，但通常在121℃下高压灭菌至少一小时即可达到要求。

10.测试步骤

为了确保正确的测试，请严格按照Maglumi®1000分析仪的操作说明操作。每一个测试参数都由试剂盒上的条形码识别。需要进一步的信息

®

11.质控

- 请遵守医学实验室的质控规则

- 请使用BIO-RAD Lyphochek® Immunoassay Plus Control或其它适当的质控作为内部质控。

12.结果

12.1结果计算

Maglumi® 2000 分析仪借助于由主曲线两点定标而得到的一条工作曲线，自动地计算每一个样本的TSH浓度，结果以μIU/ml表示。需要进一步的信息请参考Maglumi® 2000 用户手册。

12.2结果说明

正常参考值：0.4μIU/ml-4.5μIU/ml。

由于不同地区、不同个体引起的正常的、合理的差别，以及采用不同方法进行检测，其所测得TSH水平也会有所不同，因此建议每个实验室均应针对自己的特色人群建立自己的参考值范围。

13.局限性

13.1某些特定的药物可能影响TSH及TRH值。在怀孕及服用抑制排卵药品的妇女中，正常的TSH值便足以说明甲状腺正常，不管T4及T3值是否升高。

仅TSH水平并不能证实有没有甲状腺疾病，必须与临床症状及其它诊断方法相结合来解释。熟练的技术及严格按照说明操作对获得可靠结果是非常必要的；操作时必须严格按照操作规程,精心操作时才能得到正确结果；对操作程序作任何修改都可能影响结果；样本受细菌污染或反复冰冻和解冻可能影响结果。

13.2HAMA效应

含有人抗鼠抗体（HAMA）的病人血清可能导致假的升高或降低值。虽然加入了中和HAMA的介质，非常高的HAMA血清浓度仍然可能影响结果。13.3高剂量hook效应

浓度值在5000μIU/ml以内没有发现高剂量hook 效应。如果检测样本的相对光强度高于曲线中J 点的相对光强度，仪器可以计算出标本的浓度，但是这一浓度不一定非常准确，为了得到更准确的标本值，建议将相对光强度高于J点的标本作相应的稀释，直至相对光强度在A和J点之间，所测得的结果乘以相应的稀释倍数为标本值。14.临床意义

14.1 数值升高的因素:

病理性的原发性甲状腺机能衰退，肿瘤产生的TSH（垂体或异位肿瘤），靶器官对TSH的阻力，TSH分泌异常激发（TRH或其他的刺激剂），甲状腺衰竭的补偿状态，继发性甲状腺机能衰竭，给予TRN或灭吐灵。

14.2 数值降低的因素：

病理性的原发性甲状腺机能亢进，继发于垂体或下丘脑衰竭的甲状腺机能减退，孤立的家庭性TSH缺损给予T4、T3或Somatostatin。

15.性能特征

15.1 准确性

将已知浓度的标准品J作为样品，用稀释液按1：2比例稀释,测定10次稀释后的浓度，计算实测浓度与期望浓度的回收率，回收率应在90%-110%范围内。

15.2 灵敏度

灵敏度的定义为：对20次零标准品的测定，求其2倍的平均偏差,其从标准曲线上所对应的浓度即是灵敏度.

本试剂的灵敏度为0.15μIU/ml。

15.3 特异性

用测定标本对各种潜在定义反应物有否明显的应答来评价TSH检测系统的特异性。

当FSH=150mIU/ml时，检测结果TSH<0.5μIU/ml；

当LH=200mIU/ml时，检测结果TSH<1.0μIU/ml；

当HCG=500mIU/mL时，检测结果TSH<5μIU/ml。

15.4线性

将标准品各点的相对光强度（RLU）、浓度（C）分别进行对数转换，按照双对数方法拟合，其线性相关性系数（R）绝对值应大于0.9900。

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