Y染色体微缺失基因检测的临床意义

有缺失，缺失率 ８．１６％，其中最常见的是 ＡＺＦａ 和 ＡＺＦｃ＋ｄ 区的 基因位点缺失，未发现单独 ＡＺＦｂ、ＡＺＦｃ、ＡＺＦｄ 区及其他组合 区模式缺失。ＡＺＦａ 区缺失 ４ 例（３３．３３％）和 ＡＺＦｃ＋ｄ 区缺失 ４ 例 （３３．３３％）， ＡＺＦｂ＋ｃ＋ｄ 区缺失者 ３ 例（２５％），ＡＺＦａ＋ｂ＋ｃ＋ｄ 区均缺 失者 １ 例（８．３３％）。
［关键词］ 染色体，人，Ｙ；不育，男性；无精子症 ／ 遗传学；Ｙ 染色体缺失
Ｙ 染色体是男性特有的染色体，其上存在精子发生相关 基因。含有对睾丸决定和睾丸分化过程起重要作用的基因和 基因家族［1］，称为无精子症因子（ＡＺＦ），在 Ｙ 染色体长臂上的 ＡＺＦ 区的缺失与男性不育密切相关。本研究采用 ４ 组多重 ＰＣＲ 法对男性不育患者进行 Ｙ 染色体微缺失检测，探讨 Ｙ 染 色体微缺失基因检测对明确部分男性不育患者的病因，同时 对治疗方案的选择所具有的临床意义。
陈暖，张俏忻，程碧珍
［摘要］ 目的 讨 Ｙ 染色体微缺失基因检测的临床意义。 方法 应用 ４ 组多重 ＰＣＲ 技术对 １４７ 例不孕患者 进行 Ｙ 染色体 ＡＺＦ 基因家族 ＡＺＦａ 、ＡＺＦｂ 、ＡＺＦｃ、ＡＺＦｄ ４ 个座位上 １５ 个 ＳＴＳ 位点和 １ 个内控位点的检测 。 结果 １４７ 例原发性不孕患者中共发现 １２ 例有缺失，缺失率为 ８．１６％，其中最常见的是 ＡＺＦａ 和 ＡＺＦｃ＋ｄ 区的基因位点缺失， 未发现单独 ＡＺＦｂ 、ＡＺＦｃ、ＡＺＦｄ 区及其他组合区模式缺失 。ＡＺＦａ 区缺失 ４ 例（３３．３３％）和 ＡＺＦｃ＋ｄ 区缺失 ４ 例（３３．３３％）， ＡＺＦｂ＋ｃ＋ｄ 区缺失者 ３ 例（２５％），ＡＺＦａ＋ｂ＋ｃ＋ｄ 区均缺失者 １ 例（８．３３％） 。 结论 开展 Ｙ 染色体微缺失的基因检测对 明确男性不育患者的病因、选择治疗方案具有非常重要的意义。
２ 结果
２． １ 对照组 １０ 例正常生育男性标本均可见 ＳＲＹ、ＡＺＦａ、 ＡＺＦｂ 及 ＡＺＦｃ 扩增带，表明无 ＡＺＦ 因子微缺失。 ２． ２ 患者组 （表 １） １４７ 例原发性不孕患者中共发现 １２ 例
［作者单位］ 汕头大学医学院第一附属医院检验科 （广东 汕头 ５１５０４１）
［作者简介］ 陈暖（１９７５－），女，广东汕头人，副主任检验师，本科学 历，从事检验工作。
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开展 Ｙ 染色体微缺失的基因检测具有非常重要的意义， 可全面评价男性不育遗传缺陷， 从而更好的解释发病原因， 不 同的位点缺失其治疗方法是不一样的，检测的结果将指导临床 医生决定是否采用供精人工授精或移植前遗产学诊断（ＰＧＤ） 实施辅助生育。该法为当前临床实验室 Ｙ 染色体微缺失检测 最实用的方法，其具有灵敏度高、特异性强、方法简单、检测速
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中国校医 2015 年 8 月第 29 卷第 8 期 Chin J School Doctor Aug.2015 Vol.29 No.8 ［文章编号］ １００１ － ７０６２（２０１５）０８ － ０５９９ － ０２ ［中国分类号］ Ｒ ６９８．２ ［文献标识码］ Ａ
·599· ［临床医学］
Ｙ 染色体微缺失基因检测的临床意义
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［收稿日期］ ２０１５－０１－０８
３ 讨论
男性不育症的正确诊断和治疗是全世界男科医学家经常 面临的临床问题。据 Ｂｕｓｈｎｉｋ 报道［2］全世界普通人群男性不育 症发病率约为 １０％～１５％，不育的患者人数有逐年上升趋势。 近年来研究表明，Ｙ 染色体 ＡＺＦ 微缺失引起生精障碍是导致 男性不育的重要遗传学因素 ［3,4］。 随着对 Ｙ 染色体微缺失研 究的深入，可供检测的位点和基因越来越多，建立一种高效的 Ｙ 染色体微缺失方法，可以避免重复实验。本文应用四组多重 ＰＣＲ 技术对 １４７ 例不孕患者进行 Ｙ 染色体 ＡＺＦ 基因家族 ＡＺＦａ、ＡＺＦｂ、ＡＺＦｃ、ＡＺＦｄ ４ 个座位上 １５ 个 ＳＴＳ 位点和 １ 个内 控位点的检测，共检测出缺失患者 １２ 例，缺失率为 ８．１６％，与 Ｆｏｒｅｓｔａ 的报道接近［5］。
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（上接第 602 页）
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１ 对象和方法
１．１ 对象 １．１．１ 患者组 ２０１３ 年 ４ 月至 ２０１４ 年 １０ 月在汕头大学医学 院第一附属医院生殖中心就诊的 １４７ 例不孕患者。 １．１．２ 对照组 ２０１３ 年 ４ 月至 ２０１４ 年 １０ 月在汕头大学医学 院第一附属医院健康管理中心进行健康体检的健康并且已生 育的男性志愿者 １０ 例。 １．２ 主要仪器与试剂 ＧｅｎｅＰｒｏ 扩增仪（杭州博日科技有限公 司），ＲＤＹ－ＳＰ１ 型琼脂糖水平电泳仪，６５６－２０００ 核酸 ／ 蛋白凝 胶图像分析管理系统 （珠海黑马）；Ｙ 染色体微缺失基因检测 试剂盒（深圳亚能生物技术有限公司）。 １．３ 实验方法 １．３．１ 标本采集 采集乙二胺四乙酸二钾（ＥＴＤＡ－Ｋ２）抗凝外 周静脉血 ２ ｍＬ 进行 Ｙ 染色体微缺失基因检测。 １．３．２ ＤＮＡ 提取及 Ｙ 染色体微缺失基因检测 严格按照试 剂盒说明书进行全血 ＤＮＡ 的提取、模板扩增、扩增产物通过 １．２％琼脂糖凝胶电泳，根据电泳片段是否显带判断检测样品 是否存在基因位点的缺失。
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中国校医 2015 年 8 月第 29 卷第 8 期 Chin J School Doctor Aug.2015 Vol.29 No.8
主要感染 ５ 岁以下儿童，其中又以 １～３ 岁儿童为最 多 。 ［16-18］
综上所述，ＥＶ７１ 型是 ２００９—２０１３ 年邳州市手 足口病的主要病原体，本市手足口病的流行呈现一 定的季节性和地区差异性，主要累及 ５ 岁以下婴幼 儿，其中男童明显多于女童。因此手足口病的防控应 重点保护易感人群，尤其是 ５ 岁以下婴幼儿，以控制 该病的流行。对本市手足口病的防控笔者认为应着 力于以下几个方面：（１）充分利用疫情监测系统，全面 了解病例数量的变化情况，做好疫情报告。（２）加强病 原学监测，掌握手足口病的流行趋势、病毒株基因型 变异和病毒致病性的改变。（３）开展全面的健康教育， 利用电视、报纸、宣传海报等方式积极向居民宣传手 足口病的预防知识。（４）落实好学校的晨检制度，培养 儿童养成良好的卫生习惯，若发现可疑患儿应尽早 送医就诊，做好消毒措施。（５）开展相关危险因素的研 究，从而达到控制手足口病的暴发或流行，以减少重 症病例的出现，降低病死率。
［２］ Ｉｗａｉ Ｍ， Ｍａｓａｋｉ Ａ， Ｈａｓｅｇａｗａ Ｓ， ｅｔ ａｌ． Ｇｅｎｅｔｉｃ ｃｈａｎｇｅｓ ｏｆ ｃｏｘｓａｃｋｉｅｖｉｒｕｓ Ａ１６ ａｎｄ ｅｎｔｅｒｏｖｉｒｕｓ ７１ ｉｓｏｌａｔｅｄ ｆｒｏｍ ｈａｎｄ， ｆｏｏｔ， ａｎｄ ｍｏｕｔｈ ｄｉｓｅａｓｅ ｐａｔｉｅｎｔｓ ｉｎ Ｔｏｙａｍａ， Ｊａｐａｎ ｂｅｔｗｅｅｎ １９８１ ａｎｄ ２００７［Ｊ］． Ｊｐｎ Ｊ Ｉｎｆｅｃｔ Ｄｉｓ， ２００９， ６２（４）： ２５４－２５９．