WHO推荐的破伤风类毒素效价测定方法

WHO推荐的破伤风类毒素效价测定方法（毒素攻击法）

1 免疫及攻击

用生理盐水将吸附破伤风类毒素标准品和待检样品以2倍稀释法稀释成3～5个稀释度（中间的稀释度必须在攻毒后能保护约半数动物）。每一稀释度样品免疫体重14～16g小白鼠14只（或250～350g豚鼠至少10只）。另外10只小白鼠不注射作为对照（另外5只豚鼠不注射作为对照）。免疫4周，每只免疫小白鼠攻击破伤风毒素50LD50(免疫豚鼠攻击100LD50)，皮下注射0.5ml。对照组健康小白鼠注射25倍稀释的上述毒素（对照组豚鼠注射100倍稀释的上述毒素），每只皮下注射0.5ml，攻击后观察5日，每日记录结果。

2 试验成立应具备的条件

（1）检品的最低稀释度能保护半数以上动物。

（2）检品的最高稀释度能保护半数以下动物。

（3）对照组动物应部分死亡而不全部死亡。

（4）检品和标准品的剂量反应曲线在平行性及直线性上没有太大的偏差。

3 结果计算

用平行线分析法进行结果计算。

4 结果判定

待检样品的效价每个剂量应不少于40IU。如95%可信限大于50%～200%则95%可信限的低限效价应大于40IU/1个人用剂量。