F4500荧光分光光度计的使用操作方法

日立F4500荧光分光光度计，用于测试液体、固体粉末、薄膜等材料在常温及低温（除薄膜）条件下的荧光分析、发光分析、磷光分析。可进行三维测量，波长扫描(荧光、磷光、发光光谱)，时间扫描(荧光、磷光、发光时间)，定量分析(荧光、磷光、发光)，磷光寿命测定，叁波长测定。可在发光材料、生化、医药等领域应用。

主要技术指标：

（1）波长范围200～900nm ；

（2）扫描速度可达30,000nm/min；

（3）同等条件下最高灵敏度S/N≥100:1 (水的拉曼峰，EX350nm,带宽5.0nm,响应2.0s。

F4500荧光分光光度计的使用操作

1.打开电脑主机电源。

2.打开F4500主机电源。间隔10秒后，按下氘灯开关按键（不得超过5秒），当黄灯亮起不熄灭时，

打开主板电源。

3.点击FL solutions图标，打开仪器工作程序窗口。

4.将待测溶液倒入荧光比色皿，用柔软的滤纸（最好为擦镜纸）拭去荧光比色皿外侧溶液，打开仪器盖，

将荧光比色皿放入仪器中的专用位置，盖好盖子。

5.点击“方法”图标。在打开的框图中，点击“一般”图标，选择“波长扫描”方式；点击“仪器”

图标，选择扫描方式为“发射”，固定激发波长为某一整数值X，发射扫描开始波长为“X + 20”nm，发射扫描结束波长为“2X－20”nm，但发射扫描结束波长最大不超过900nm。

6.点击“测量”图标，开始进行发射光谱扫描。仪器结束扫描后自动给出相应的测量参数和最大发射波

长及对应的荧光强度。

7.点击“方法”图标。在打开的框图中，点击“仪器”图标，选择扫描方式为“激发”，发射波长选择

刚才所得的最大发射波长数值Y，激发扫描开始波长为“1/2Y + 20”nm，激发扫描结束波长为“Y－20”nm。

8.点击“测量”图标，开始进行激发光谱扫描。仪器结束扫描后自动给出相应的测量参数和最大激发波

长及对应的荧光强度。

9.将激发波长设为“八、”确定的数值。重复“五、”至“八、”的步骤。直至获得的激发波长和发射

波长的数值不再明显改变为止。

10.点击“方法”图标，在打开的框图中，点击“一般”图标，选择“光度计”方式，选择“使用样品

表”；点击“定量”图标，“定量”为波长，“校正曲线”为1级，“浓度”为mg/L，“小数点后位数”为1；点击“仪器”图标，在Ex 和Em项填写获得的最佳激发波长和发射波长数值，“重复”为3，“波长”为两者波长固定；点击“标准”图标，“样品数”为6，栏中分别输入相应溶液的浓度。

点击“确定”。

11.点击“样品”图标，选择测定的样品数目，点击“确定”。

12.将待测溶液装入荧光比色皿，放入仪器荧光架。点击“测量”，按提示逐步操作。记录测量样品溶液

的荧光强度、浓度、回归方程、相关系数及样品溶液浓度。计算含量。

13.工作结束后，清洗荧光比色皿，关闭仪器工作程序窗口。

14.顺序关闭主板电源、主机电源。