抗菌药物敏感性试验
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报告：细菌对该抗生素是 敏感（susceptible，S）； 耐药（resistant，R）； 还是中介（intermediate，I）。
三、肉汤稀释法
原理：
以水解酪蛋白（MH）液体培养基将抗生素 做不同浓度的稀释，然后种入待检细菌，定 量测定抗菌药物对被测菌的最低抑菌浓度 （MIC）或最低杀菌浓度（MBC）。
贴含药纸片：平板在室温下干燥3-5min，用无菌镊子 将含药纸片紧贴于琼脂表面，各纸片中心相距应大于 24mm，纸片距平板内缘应大于15mm；
孵育：35ºC 16-18h，量取抑菌圈直径。
结果判读：
用刻度尺量取抑菌圈直径，根据CLSI （Clinical and Laboratory Standards Institute）标准判读结果；
抗菌药物敏感性试验
南华大学预防医学与放射卫生实验教学中心
教学对象：高等医学院校卫生检验专业学生 实验课时：4学时 课程类型：专业实验课 课程要求：必修 每组人数：2人
实验目的和要求
掌握纸片扩散法（K－B法）的原理、操作 方法等、结果判断、意义及质量控制；
熟悉肉汤稀释法抗生素敏感性试验的原理、 操作方法、结果判断及意义等；
方法：
试管编号：取26只试管排成两排（测试菌排， 质控菌排）每排13支编号。另取3支试管，分别 标记上“肉汤对照”、“测试菌生长对照”和 “质控菌生长对照”等对照。
抗菌药物稀释：用MH肉汤倍比稀释抗菌药物至 13管，稀释后使每管含抗菌药物稀释液2ml。
肉汤对照、测试菌生长对照、质控菌生长对照 管：分别加入MH肉汤2ml。
方法：
菌液制备：生理盐水校正测试菌和质控菌至 0.5麦氏比浊标准，再用MH肉汤稀释到 107CFU/ml；
加菌液：用微量加样器取0.1ml稀释菌液由低 到高加于各排试管中，其最终的接种量为 5×105 CFU/ml。测试菌排、测试菌生长对照 管加测试菌液；质控菌排、质控菌生长对照 管加质控菌液。
了解稀释法的质量控制。
实验内容
常用抗菌药物敏感性试验与耐药检测 方法介绍。
纸片扩散法。 肉汤稀释法。
含药纸片 抑菌圈
方法：
菌液制备：挑取孵育16-24h的血平板上数个菌落置于 生理盐水管中，校正浓度至0.5麦氏标准；
涂布接种：无菌棉拭蘸取菌液，在试管壁旋转挤去多 余菌液后在MH琼脂表面均匀涂布接种3次，每次旋转 平板60º，最后沿平板内缘涂抹1周；
孵育：35ºC 24h观察结果。
பைடு நூலகம்果：
测试菌（或质控菌）不出现肉眼可见生长的 最低药物浓度为该药对测试菌（质控菌）的 MIC。
注意事项：
培养基、接种细菌的菌量、抗菌药物纸片的质 量、孵育温度和观察时间、操作是否规范等均 能影响本试验的结果。
为保证结果的可靠性，需同时采用相应标准菌 株同时进行药敏试验作为质量控制的方式。
三、肉汤稀释法
原理：
以水解酪蛋白（MH）液体培养基将抗生素 做不同浓度的稀释，然后种入待检细菌，定 量测定抗菌药物对被测菌的最低抑菌浓度 （MIC）或最低杀菌浓度（MBC）。
贴含药纸片：平板在室温下干燥3-5min，用无菌镊子 将含药纸片紧贴于琼脂表面，各纸片中心相距应大于 24mm，纸片距平板内缘应大于15mm；
孵育：35ºC 16-18h，量取抑菌圈直径。
结果判读：
用刻度尺量取抑菌圈直径，根据CLSI （Clinical and Laboratory Standards Institute）标准判读结果；
抗菌药物敏感性试验
南华大学预防医学与放射卫生实验教学中心
教学对象：高等医学院校卫生检验专业学生 实验课时：4学时 课程类型：专业实验课 课程要求：必修 每组人数：2人
实验目的和要求
掌握纸片扩散法（K－B法）的原理、操作 方法等、结果判断、意义及质量控制；
熟悉肉汤稀释法抗生素敏感性试验的原理、 操作方法、结果判断及意义等；
方法：
试管编号：取26只试管排成两排（测试菌排， 质控菌排）每排13支编号。另取3支试管，分别 标记上“肉汤对照”、“测试菌生长对照”和 “质控菌生长对照”等对照。
抗菌药物稀释：用MH肉汤倍比稀释抗菌药物至 13管，稀释后使每管含抗菌药物稀释液2ml。
肉汤对照、测试菌生长对照、质控菌生长对照 管：分别加入MH肉汤2ml。
方法：
菌液制备：生理盐水校正测试菌和质控菌至 0.5麦氏比浊标准，再用MH肉汤稀释到 107CFU/ml；
加菌液：用微量加样器取0.1ml稀释菌液由低 到高加于各排试管中，其最终的接种量为 5×105 CFU/ml。测试菌排、测试菌生长对照 管加测试菌液；质控菌排、质控菌生长对照 管加质控菌液。
了解稀释法的质量控制。
实验内容
常用抗菌药物敏感性试验与耐药检测 方法介绍。
纸片扩散法。 肉汤稀释法。
含药纸片 抑菌圈
方法：
菌液制备：挑取孵育16-24h的血平板上数个菌落置于 生理盐水管中，校正浓度至0.5麦氏标准；
涂布接种：无菌棉拭蘸取菌液，在试管壁旋转挤去多 余菌液后在MH琼脂表面均匀涂布接种3次，每次旋转 平板60º，最后沿平板内缘涂抹1周；
孵育：35ºC 24h观察结果。
பைடு நூலகம்果：
测试菌（或质控菌）不出现肉眼可见生长的 最低药物浓度为该药对测试菌（质控菌）的 MIC。
注意事项：
培养基、接种细菌的菌量、抗菌药物纸片的质 量、孵育温度和观察时间、操作是否规范等均 能影响本试验的结果。
为保证结果的可靠性，需同时采用相应标准菌 株同时进行药敏试验作为质量控制的方式。