酶抑制剂筛选模型研究进展
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ＷＡＮＧ Ｚｈ ｅ ｎ Ｓ ＯＮＧ Ｙ ａ ｎ ｇ Ｐ ＥＮＧ Ｋｕ ｎ
合， 更 要观 察药 物对 酶 活性 的影 响 。 根 据酶 的特点 ， 酶 的反 应底 物 和产 物 都可 作 为检 测指 标［ ２ １ 。以酶 为 作用 靶 点 的 高
通量 检 测 方 法 ， 绝 大 多数 是 直 接 检测 酶 的活 性 ， 主 要 有 基
酶 的专 ＿ 二 抑制 剂 作 为药 物 ， 来调 节体 内的异 常代 谢 。 酶 抑 制剂 作 为药 物 的治 疗 基 础 是 通 过 限制 酶 催 化底 物 的 反 应 能力 ， 使 底 物 浓 度增 高 或 代 谢 产 物 浓度 降 低 ， 以 达 到 改善 症状 的 目的 。在一 系列 酶 促 反应 中 ， 以抑 制 限速 酶 或 关键 酶 的效 果 最好 。在 目前 上市 的 药物 中 ， 以受 体 为
Ｓ ｈ ａ ｎ ｄ ｏ ｎ ｇ Ａ ｒ ｕ ｌ ａ Ｐ ｈ ａ ｒ ｍａ ｃ ｅ ｕ ｔ ｉ ｃ ａ ｌ Ｒ ｅ ｓ ｅ ａ ｒ ｃ ｈ＆ Ｄｅ ｖ ｅ ｌ ｏ ｐ ｍ ｅ ｎ ｔ Ｃ ｏ ｍ ｐ ａ ｎ ｙ Ｌ ｉ ｍｉ ｔ ｅ ｄ ， Ｓ ｈ ａ ｎ ｄ ｏ ｎ ｇ Ｐ ｒ ｏ ｖ ｉ ｎ ｃ ｅ ， Ｊ ｉ ｎ ａ ｎ ２ ５ ０ １ ０ １ ， Ｃ ｈ ｉ ｎ ａ
９ ６孔 板建 立 了适 合高通 量筛选 神经 氨酸酶抑 制剂 的荧光 分
来自百度文库
析法 。方 法 ： ９ ６孔板 中 ， １ ０ ０ ｌ 体 系 中含有 ２ ０ ｐ ￣ ｍ ｏ ｌ ／ Ｌ ＭＵ ． Ｎ Ａ ＮＡ（ 底物） ， ３ Ｉ ｘ ｌ 神经 氨 酸酶 溶 液 ， １ Ｏ ｌ 待 测样 品溶液 ，
【 Ａ ｂ ｓ ｔ ｒ ａ ｃ ｔ 】Ａ ｆ ｔ ｅ ｒ ｒ ｅ ｓ ｅ ａ ｒ ｃ ｈ ｉ ｎ ｇ ｒ ｅ ｌ ｅ ｖ ａ ｎ ｔ ｌ ｉ ｔ ｅ ｒ ａ ｔ ｕ ｒ ｅ ｓ ， ｔ ｈ ｅ ａ ｒ ｔ ｉ ｃ ｌ ｅ ｓ ｕ ｍｍａ ｒ ｉ ｚ ｅ ｓ ｔ ｈ ｅ ｃ ｕ ｒ ｒ ｅ ｎ ｔ ｍａ ｉ ｎ ｍｏ ｄ ｅ ｌ ｓ ｏ ｆ ｅ ｎ ｚ ｙ ｍｅ ｉ ｎ ｈ ｉ ｂ ｉ ｔ ｏ ｒ
・
综
述 ・
２ ０ １ ３ 年 ８ 月第 ２ ０ 卷第 ２ ２ 期
酶抑制剂筛选模型研 究进 展
王 振 宋 洋 彭 坤 ２ ５ ０ １ ０ １ 山东 阿如 拉药 物研 究 开发 有 限公 司 ， 山东 济 南
【 摘要】 通 过查 阅文献 ， 综述 目前 酶抑 制剂 筛选 的主 要模 型 ， 包 括 动 物模 型 、 高 通量 筛 选模 型 及 固定化 酶 反应 器 。
【 Ｋｅ ｙ ｗｏ ｒ ｄ ｓ 】 Ｅ ｎ ｚ ｙ ｍｅ ｉ ｎ ｈ ｉ ｂ ｉ ｔ ｏ ｒ ； Ｓ ｃ ｒ ｅ ｅ ｎ ｉ ｎ ｇ ｍｏ ｄ ｅ ｌ ； Ｔ ａ ｒ ｇ ｅ ｔ ｓ ｐ ｏ ｔ ； Ｃ ｏ ｎ ｉ ｆ ｒ ｍａ ｔ ｉ ｏ ｎ
２ ０世纪 ６ ０年 代 ， 日本科 学 家 梅 译 滨 夫 提 出 了酶 抑 制 剂 的概 念 。从 而将 抗 生 素 的研究 扩 大 到酶 抑 制 剂 的新 领
为分 子水 平 的筛 选模 型 ，也 有 少量 细胞 水 平 的筛 选 模 型 。
筛选 以酶 为 作 用靶 点 的药 物 ，不 仅 要 观 察 酶 与 药 物 的 结
域 。随着 酶学 研究 的深 入 ， 对 酶结 构 的认 识 ， 已能在 分 子水
平上 认 识酶 的 作用 机 制 ． 并 根据 酶 的作用 原理 来 设 计 各种
靶 点 的药 物 占 ５ ２ ％， 以酶 为靶 点 的药 物 占 ２ ２ ％， 以离 子 通 道 为靶 点 的药 物 占 ６ ％， 以核酸 为靶 点 的 药物 占 ３ ％。酶 抑 制 剂 的开 发是 新药 的 重要 来源 。随 着现 代 生物科 学技 术 的
于放 射性 的方法 和基 于 比色 、 荧 光 的方 法 两大 类［ ３ １ 。 曹鸿 鹏 等 采 用荧 光 分 析法 建立 了流 感 病 毒 神经 氨 酸 酶抑 制 剂 的高 通量 筛选 模 型 ， 从 甲型及 乙 型流 感 病 毒 中制 备 出神 经氨 酸酶 ， 以有荧 光 特性 的化合 物为 酶 的底 物 ， 利 用
并 对其应 用 原 理 、 应用 情况 及优 缺 点进 行 了阐述 。
【 关键 词】 酶 抑 制剂． ； 筛选模 型 ； 靶点； 验 证 【 中图分 类号】 Ｒ ９ ６ ５ ． １ 【 文 献标 识码】 Ａ
［ 文章 编号】 １ ６ ７ ４ － ４ ７ ２ ｔ （ ２ ０ １ ３ ） ０ ８ （ ａ ） 一 ０ ０ １ ８ — ０ ３
Ｒｅ ｓ ｅ ａ ｒ ｃ ｈ Ｐｒ ｏ ｇ ｒ ｅ ｓ ｓ ｏ ｆ Ｓ ｃ ｒ ｅ ｅ ｎ ｉ ｎ ｇ Ｍｏ ｄ ｅ ｌ ｏ ｆ Ｅｎ ｚ ｙ ｍｅ Ｉ ｎ ｈ ｉ ｂ ｉ ｔ ｏ ｒ
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合， 更 要观 察药 物对 酶 活性 的影 响 。 根 据酶 的特点 ， 酶 的反 应底 物 和产 物 都可 作 为检 测指 标［ ２ １ 。以酶 为 作用 靶 点 的 高
通量 检 测 方 法 ， 绝 大 多数 是 直 接 检测 酶 的活 性 ， 主 要 有 基
酶 的专 ＿ 二 抑制 剂 作 为药 物 ， 来调 节体 内的异 常代 谢 。 酶 抑 制剂 作 为药 物 的治 疗 基 础 是 通 过 限制 酶 催 化底 物 的 反 应 能力 ， 使 底 物 浓 度增 高 或 代 谢 产 物 浓度 降 低 ， 以 达 到 改善 症状 的 目的 。在一 系列 酶 促 反应 中 ， 以抑 制 限速 酶 或 关键 酶 的效 果 最好 。在 目前 上市 的 药物 中 ， 以受 体 为
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９ ６孔 板建 立 了适 合高通 量筛选 神经 氨酸酶抑 制剂 的荧光 分
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析法 。方 法 ： ９ ６孔板 中 ， １ ０ ０ ｌ 体 系 中含有 ２ ０ ｐ ￣ ｍ ｏ ｌ ／ Ｌ ＭＵ ． Ｎ Ａ ＮＡ（ 底物） ， ３ Ｉ ｘ ｌ 神经 氨 酸酶 溶 液 ， １ Ｏ ｌ 待 测样 品溶液 ，
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２ ０ １ ３ 年 ８ 月第 ２ ０ 卷第 ２ ２ 期
酶抑制剂筛选模型研 究进 展
王 振 宋 洋 彭 坤 ２ ５ ０ １ ０ １ 山东 阿如 拉药 物研 究 开发 有 限公 司 ， 山东 济 南
【 摘要】 通 过查 阅文献 ， 综述 目前 酶抑 制剂 筛选 的主 要模 型 ， 包 括 动 物模 型 、 高 通量 筛 选模 型 及 固定化 酶 反应 器 。
【 Ｋｅ ｙ ｗｏ ｒ ｄ ｓ 】 Ｅ ｎ ｚ ｙ ｍｅ ｉ ｎ ｈ ｉ ｂ ｉ ｔ ｏ ｒ ； Ｓ ｃ ｒ ｅ ｅ ｎ ｉ ｎ ｇ ｍｏ ｄ ｅ ｌ ； Ｔ ａ ｒ ｇ ｅ ｔ ｓ ｐ ｏ ｔ ； Ｃ ｏ ｎ ｉ ｆ ｒ ｍａ ｔ ｉ ｏ ｎ
２ ０世纪 ６ ０年 代 ， 日本科 学 家 梅 译 滨 夫 提 出 了酶 抑 制 剂 的概 念 。从 而将 抗 生 素 的研究 扩 大 到酶 抑 制 剂 的新 领
为分 子水 平 的筛 选模 型 ，也 有 少量 细胞 水 平 的筛 选 模 型 。
筛选 以酶 为 作 用靶 点 的药 物 ，不 仅 要 观 察 酶 与 药 物 的 结
域 。随着 酶学 研究 的深 入 ， 对 酶结 构 的认 识 ， 已能在 分 子水
平上 认 识酶 的 作用 机 制 ． 并 根据 酶 的作用 原理 来 设 计 各种
靶 点 的药 物 占 ５ ２ ％， 以酶 为靶 点 的药 物 占 ２ ２ ％， 以离 子 通 道 为靶 点 的药 物 占 ６ ％， 以核酸 为靶 点 的 药物 占 ３ ％。酶 抑 制 剂 的开 发是 新药 的 重要 来源 。随 着现 代 生物科 学技 术 的
于放 射性 的方法 和基 于 比色 、 荧 光 的方 法 两大 类［ ３ １ 。 曹鸿 鹏 等 采 用荧 光 分 析法 建立 了流 感 病 毒 神经 氨 酸 酶抑 制 剂 的高 通量 筛选 模 型 ， 从 甲型及 乙 型流 感 病 毒 中制 备 出神 经氨 酸酶 ， 以有荧 光 特性 的化合 物为 酶 的底 物 ， 利 用
并 对其应 用 原 理 、 应用 情况 及优 缺 点进 行 了阐述 。
【 关键 词】 酶 抑 制剂． ； 筛选模 型 ； 靶点； 验 证 【 中图分 类号】 Ｒ ９ ６ ５ ． １ 【 文 献标 识码】 Ａ
［ 文章 编号】 １ ６ ７ ４ － ４ ７ ２ ｔ （ ２ ０ １ ３ ） ０ ８ （ ａ ） 一 ０ ０ １ ８ — ０ ３