溶血的检验

血清结合珠蛋白检测
原理：血清结合珠蛋白检测（Hp）是在待测血清中加入 一定量的血红蛋白液，使之与待测血清中的结合珠蛋白 形成 Hp-Hb 复合物。通过电泳法将结合的 Hp-Hb 复合物 与未结合的Hb分开，测定Hp-Hb复合物的量，可测得血 清中结合珠蛋白的含量。 参考范围：0.5-1.5gHb/L 应用评价： 1. 减低：常见于各种溶血，尤其是血管内溶 血。严重肝病、先天性无珠蛋白血症、传染性单核细胞 增多症等Hp也明显减低，此时不能以此指标判断有无溶 血。 2.增高：常见于感染、创伤、SLE、恶性肿瘤、类固醇治 疗、妊娠、胆道阻塞等（Hp为急性期反应蛋白）。此时 如Hp正常，不能排除合并溶血的可能。
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尿卟啉检测

实验原理：尿中卟啉类物质在酸性条件下，经乙醚提取， 于405nm 处显红色荧光，从而可对尿卟啉进行定性检测。 参考范围：健康人呈阴性。 应用评价： 1.增加 主要见于先天性红细胞生成型卟啉病、迟发性皮 肤型卟啉病、肝红细胞生成型卟啉病等。 2. 卟啉类化合物检测对研究血红素代谢障碍有重要意义， 除卟啉病外，对缺铁性贫血、铅中毒、铁粒幼细胞贫血 和珠蛋白生成障碍性贫血等的诊断有一定价值。

原理：血红蛋白可催化过氧化氢释放新生态氧，使邻苯 氧化为蓝紫色。根据显色深浅，与同时测定标准血红蛋 白液对照，可测出血浆游离血红蛋白的量。 参考范围：0-40mg/L 应用评价： 1. 明显增高是判断血管内溶血的指征。蚕豆病、 PNH 、 冷凝集素综合征、阵发性寒冷性血红蛋白尿、溶血性输 血反应等明显增高；自身免疫性溶血性贫血、珠蛋白生 成障碍性贫血可轻到中度增高。 2.血管外溶血、红细胞膜缺陷不增高。

抗人球蛋白试验


一、原理：抗人球蛋白试验（ Coombs 试验）检测自身免疫性溶血 性贫血的自身抗体（IgG）。分为检测红细胞表面有无不完全抗体的 直接抗人球蛋白试验（ DAGT ）和检测血清中有无不完全抗体的间 接抗人球蛋白试验（ IAGT ）。直接试验应用抗人球蛋白试剂（抗 IgG、IgM、IgA和（或）抗C3）与红细胞表面的IgG分子结合，如果 红细胞表面存在自身抗体，出现凝集反应。目的是检查红细胞表面 的不完全抗体。间接试验应用Rh(D)阳性O型红细胞与受检血清混合 孵育，如血清中存在不完全抗体，红细胞致敏，再加入抗人球蛋白 血清，可出现凝集。 二、参考范围：健康人直接和间接抗人球蛋白试验均阴性。 三、临床意义： 自身免疫性溶血性贫血、新生儿同种免疫性溶血和血型不合引起的 输血反应、药物性免疫性溶血、冷凝集素综合征、阵发性冷性血红 蛋白尿等直接抗人球蛋白试验阳性，当抗体与红细胞结合后，有过 剩抗体时直接和间接试验均阳性。

血浆高铁血红素白蛋来自百度文库检测

原理：血浆中游离的血红蛋白可被氧化为高铁血红蛋白， 再分解为珠蛋白和高铁血红素，后者先与血红蛋白结合， 血红蛋白消耗完后，再与白蛋白结合形成高铁血红素白 蛋白，与硫化铵形成一个易识别的铵血色原，用光谱仪 观察结果，于绿光区558nm处有一最佳吸收区带。 参考范围：阴性 应用评价：血管内溶血时，血浆中游离血红蛋白大量增 加，血浆中可检测出高铁血红素白蛋白，血清中出现高 铁血红素白蛋白是溶血严重的指标。
溶血的检验
酸化血清溶血试验

一、原理：酸化血清溶血试验，也称Hamtest。阵发性睡 眠性血红蛋白尿症（ PNH）患者体内存在对补体敏感的 红细胞，即红细胞在酸性（ pH6.4～ 6.5 ）的正常血清中 孵育，补体被激活， PNH红细胞破坏而产生溶血。而正 常红细胞不被溶解，无溶血现象。如血清经56℃加热30 分钟，使补体灭活，患者红细胞即不被溶解。 二、参考范围：健康人：阴性。 三、临床意义：阳性主要见于 PNH ，敏感度较低，有 30% 以上患者呈阴性反应。自身免疫性溶血性贫血发作 严重时可呈阳性。

尿含铁血黄素试验
实验原理：尿含铁血黄素试验又称 Rous试验。当血红蛋 白通过肾滤过时，部分铁离子以含铁血黄素的形式沉积 于上皮细胞，并随尿液排出。尿中含铁血黄素是不稳定 的铁蛋白聚合体，其中的高铁离子与亚铁氰化钾作用， 在酸性环境下产生普鲁士蓝色的亚铁氢化铁沉淀。尿沉 渣肾小管细胞内可见直径1~3um的蓝色颗粒。 参考范围：健康人为阴性。 应用评价：Rous试验阳性提示慢性血管内溶血，尿中有 铁排出，无论有无血红蛋白尿，只要存在慢性血管内溶 血如PNH ，本实验即成阳性，并可持续数周，但在溶血 初期，虽然有血红蛋白尿，上皮细胞内尚未形成可检出 的含铁血黄素，此时本实验可呈阴性反应。


蔗糖溶血试验

一、原理：根据 PNH患者的红细胞，在低离子强度的蔗 糖溶液中对补体敏感性增强，经孵育后可使补体与红细 胞膜结合加强，蔗糖溶液进入补体敏感的红细胞内，导 致渗透性溶血。 二、参考值：定性试验：正常为阴性；定量试验：正常 溶血率<5%. 三、临床意义： PNH患者为阳性或溶血率增加，可作为PNH的筛选试验。 部分自身免疫性溶血性贫血患者可为阳性，白血病、骨 髓硬化时可出现假阳性。
红细胞寿命测定

原理：红细胞寿命测定将标记放射性核素的红细胞注入 血循环后，逐日观察其消失率，记录成活曲线，计算出 红细胞寿命。 参考范围：半寿期25-32天 应用评价： 1.溶血性贫血：红细胞寿命缩短，约为14天。 2.再生障碍性贫血：红细胞寿命缩短，约为15-29天。

血浆游离血红蛋白检测