免疫学检验 知识点
(整理)医学免疫学检验考试重点
概论+抗原抗体反应1 免疫学基本概念及其生物学功能;免疫:机体识别和排斥抗原性异物的一种生理功能免疫三大功能:免疫防御、免疫自稳、免疫监视中枢免疫器官(骨髓和胸腺)外周免疫器官(淋巴结、脾脏、扁桃体)免疫细胞:淋巴细胞(T,B,NK)、单核巨噬细胞、其他免疫应答细胞(中性粒、嗜酸性、嗜碱性和肥大细胞)免疫分子:免疫球蛋白(IgM,IgG,IgA,IgE,IgD),补体,细胞因子,细胞黏附分子,人类白细胞分化抗原免疫应答:机体免疫系统接受抗原刺激发生的一系列反应,并以排出或分解该抗原为目的的反应过程。
过程:抗原的识别、处理、信息传递(识别阶段),免疫细胞的激活、增殖、分化(活化阶段)以及产生一系列的免疫效应因子(效应阶段)。
临床免疫学检验:研究免疫学检测理论、技术、应用,免疫疾病发病机制、免疫诊断、及防治的一门医学领域的应用学科。
免疫学检测技术的基础是抗原抗体反应,免疫学技术有凝集反应、沉淀反应、补体参与的反应、中和反应和标记免疫反应五种类型。
免疫检验:1)利用免疫检测原理和技术检测免疫活性细胞、抗原、抗体、补体、细胞因子、细胞黏附分子等免疫相关物质;2)体液中的微量物质如激素、酶、血浆微量蛋白、血液药物浓度、微量元素。
临床免疫学:利用免疫学理论和技术研究疾病的免疫病理机制、诊断和鉴别诊断、疗效评价、预后判断和预防的多个分支学科的总称。
免疫性疾病:各种原因引起的机体免疫应答异常所致的疾病,包括超敏反应性疾病、自身免疫病、免疫缺陷病和免疫增生病。
感染免疫学:研究病原微生物与宿主相互关系从而控制感染的学科,传统免疫学核心。
肿瘤免疫学:研究肿瘤免疫原性、机体抗肿瘤的免疫效应及机体的免疫功能与肿瘤发生、发展的相互关系以及肿瘤免疫诊断与防治的学科。
移植免疫学:研究移植物与宿主相互关系从而选择移植物和延长移植物存活的学科。
2 血清学反应的概念;抗体主要存在于血清中,体外的抗原抗体反应称为血清学反应。
抗原抗体反应:抗原与相应抗体在体内或体外发生的特异性结合反应,特异性取决于抗原表位和抗体超变区分子间的结构互补性与亲和性,并通过静电引力、范德华引力、氢键结合力和疏水作用力等非共价键结合在一起。
免疫学检验知识点
第一章概论1. 免疫学(Immunology)是研究免疫系统的结构与功能,并通过对其在免疫应答过程中所产生的免疫保护与免疫损伤机制的研究,探讨有效的免疫措施,实现以防病、治病为目的的一门现代医学学科。
免疫学技术对推动免疫学的发展及基础与临床免疫学的结合起了重要作用。
学习免疫学的基本概念,了解临床免疫学的理论基础,掌握免疫技术的检测原理是学习和研究临床免疫学与免疫技术的重要保障。
第一节免疫学简介1. 免疫(immunity)是机体识别和排斥抗原性异物的一种生理功能。
免疫系统与机体的其他系统相互配合,相互制约,共同维持机体在生命过程中的生理平衡。
一、免疫学概念与免疫应答1. 宿主体内的免疫系统能识别并清除从外环境中侵入的病原生物及其产生的毒素、内环境中因基因突变产生的肿瘤细胞、自身衰老残损的组织细胞或自身变性抗原,实现免疫防御、免疫自稳、免疫监视。
免疫防御——指机体排斥外源性异物的能力。
免疫自稳——指机体识别和清除自身衰变残损的组织细胞的能力,以维持正常内环境稳定。
免疫监视——指机体杀伤和清除异常突变细胞的能力,以监视和抑制恶性肿瘤在体内生长。
2. 免疫应答反应(immune response):是指机体免疫系统接受抗原刺激发生一系列反应,并以排出或分解该抗原为目的的反应过程。
免疫应答的过程主要分为:识别阶段(recognition phase)——抗原识别处理传递信息活化阶段(activation phase)——免疫细胞活化增殖产生效应细胞、分子效应阶段(response phase)——执行效应功能3. 免疫应答效应大多为生理性,是机体对外来抗原或自身变性抗原的清除效应。
免疫应答反应过强时,可致机体组织或器官发生病理损伤,出现临床疾病。
二、免疫组织与器官1. 免疫系统(immune system)由免疫器官、免疫细胞和免疫分子构成。
淋巴组织及免疫细胞分布于机体全身,执行免疫防卫功能,维持机体内环境正常的生理功能及动态平衡。
免疫学检验的这些基础知识你都了解吗
免疫学检验的这些基础知识你都了解吗免疫学检验是一种重要的医学检验方法,通过检测人体的免疫反应来了解疾病的发生和发展情况。
在现代医学中,免疫学检验已经广泛应用于各个领域,包括诊断疾病、评估治疗效果、筛查潜在疾病等。
了解免疫学检验的基础知识对于我们理解和应用这项技术具有重要意义。
一、免疫学检验是什么?免疫学检验是一种利用免疫反应原理进行检测和测量的技术。
免疫学检验基于免疫系统的特异性和记忆性,通过检测免疫系统产生的抗体或抗原结合来确定目标物质的存在、浓度或活性。
免疫学检验可以分为两种类型:抗体检验和抗原检验。
在抗体检验中,通过检测患者体内产生的抗体水平,来确定是否感染病原体或是否存在特定疾病。
常见的抗体检验方法包括酶联免疫吸附试验(ELISA)、免疫荧光法、免疫电泳等。
在抗原检验中,通过检测目标物质本身,来确定其存在和浓度。
这种方法常用于检测病原体或其他特定物质。
常见的抗原检验方法包括放射免疫测定法(RIA)、免疫荧光法、免疫沉淀法等。
二、免疫反应的基本原理免疫反应是人体免疫系统对抗外来病原体或其他异物的一种防御机制。
它主要由细胞免疫和体液免疫两个方面组成。
1、细胞免疫细胞免疫是由T细胞介导的免疫反应。
当外来抗原进入人体后,它会被特定的抗原呈递细胞(抗原递呈细胞)捕获并进行处理。
这些抗原递呈细胞会将抗原分解成小片段,并将其展示在细胞表面的主要组织相容性复合体(MHC)分子上。
T细胞通过识别这些抗原-MHC复合物来激活免疫反应。
激活的T细胞会分化成不同类型的效应细胞,包括细胞毒性T细胞(CTL)和辅助T细胞。
CTL主要通过释放细胞毒素杀死感染细胞,而辅助T细胞则通过分泌细胞因子来协助其他免疫细胞的活化和功能发挥。
2、体液免疫体液免疫是通过抗体介导的免疫反应。
当外来抗原进入人体后,B细胞会识别并结合特定的抗原。
这会激活B细胞,使其分化成浆细胞,产生大量的抗体。
抗体是一种特异性的免疫蛋白,可以结合并中和病原体或其他异物,从而阻止它们侵入和繁殖。
临床免疫学检验知识点
临床免疫学检验知识点1.免疫系统的基本知识:了解免疫系统的组成、功能和调节机制是理解临床免疫学检验的基础。
免疫系统由免疫器官(如脾脏、淋巴结、骨髓等)和免疫细胞(如淋巴细胞、巨噬细胞、树突细胞等)组成,其功能包括抵御病原体的入侵、清除异常细胞和产生抗体等。
2.免疫细胞的检测方法:常用的免疫细胞检测方法包括流式细胞术、免疫组化和染色技术等。
流式细胞术可用于检测和计数不同类型的免疫细胞,免疫组化和染色技术可用于检测细胞表面标记物和细胞内分子的表达水平。
3.免疫球蛋白的检测方法:免疫球蛋白是免疫系统中的重要成分,其浓度和种类的改变可以指示一些疾病的存在和进展。
测定免疫球蛋白的方法包括免疫电泳、免疫扩散和化学发光等技术。
4.免疫反应的检测方法:免疫反应的检测方法可以用于评估机体对病原体的免疫应答以及检测自身免疫疾病的存在。
常用的免疫反应检测方法包括抗体检测、细胞毒性测定和溶菌试验等。
5.自身抗体的检测方法:自身抗体是机体免疫系统对自身组织产生的免疫反应产物,其异常产生与自身免疫疾病的发生和进展密切相关。
常用的自身抗体检测方法包括酶联免疫吸附试验(ELISA)、间接免疫荧光和免疫印迹等。
6.免疫功能的评估方法:免疫功能的评估可以指导临床医生判断机体的免疫状况和预测疾病的发展趋势。
常用的免疫功能评估方法包括淋巴细胞亚群分析、细胞因子水平检测和细胞增殖测定等。
7.临床应用:临床免疫学检验在临床诊断和治疗中具有重要意义。
例如,检测艾滋病病毒抗体可用于艾滋病的早期诊断和监测;自身抗体的检测可用于系统性红斑狼疮和类风湿性关节炎的诊断;细胞因子水平的检测可以评估炎症反应和肿瘤的进展等。
综上所述,临床免疫学检验涵盖了多个方面的知识点,包括免疫系统的基本知识、免疫细胞和免疫球蛋白的检测方法、免疫反应和自身抗体的检测方法、免疫功能的评估方法以及临床应用等。
这些知识点对于临床医生正确使用和解读免疫学检验结果具有重要的指导意义。
免疫学检验常考点
免疫学检验常见考点一、免疫学概论(一)免疫的概念1、免疫概念现代免疫的概念是机体免疫系统识别和排斥抗原性异物的一种特异性生理功能。
这种反应在生理条件下对机体有利,在病理条件下对机体有害。
2、免疫功能免疫功能主要表现为以下三种生理功能:(1)免疫防御:指机体排斥微生物的侵袭及其他外源性抗原异物的能力。
过高产生超敏反映;过低引起免疫缺陷病。
(2)免疫自稳:机体识别和清除自身衰老残损的组织、细胞的能力,借以维持正常内环境稳定,失调时引起自身免疫病。
(3)免疫监视:机体杀伤和清除异常突变细胞的能力,一旦功能低下可导致肿瘤发生或病毒持续感染。
二、免疫应答反应1、免疫应答概念、特征免疫应答是机体免疫系统接受抗原刺激发生一系列反应,并以排出或分解该抗原物质为目的的反应过程。
免疫应答反应的重要特征是识别自身和非己、特异性和记忆性。
免疫应答包括固有免疫应答和适应性免疫应答。
(1)固有免疫应答:在正常机体内任何时段均以抗原非特异性方式识别和清除各抗原异物和病原体,称为非特异性免疫应答,如人体的血脑屏障、胎盘屏障、皮肤屏障。
(2)适应性免疫应答:免疫细胞在机体选择识别某种抗原后,自身活化、增殖、分化为免疫效应细胞,产生免疫效应分子,排除该抗原的全过程,也称为特异性免疫应答。
2、免疫应答过程免疫应答的基本过程分为识别阶段、淋巴细胞活化阶段和效应阶段。
(1)识别阶段:指巨噬细胞、树突状细胞和活化B细胞等抗原提呈细胞摄取和加工处理抗原并提呈抗原肽供T细胞识别,此过程又称为感应阶段。
(2)淋巴细胞活化阶段:指接受抗原信号后的T、B淋巴细胞在一系列免疫分子参与下,发生活化、增殖和分化的阶段。
其中T淋巴细胞接受抗原刺激和协同刺激信号后活化、增殖和分化为效应T细胞,并合成细胞因子;B淋巴细胞接受抗原刺激后活化、增殖和分化为浆细胞产生抗体。
此过程又称为反应阶段。
(3)效应阶段:抗体、Tc、TD或细胞因子等对抗原发挥免疫效应的阶段。
3、体液免疫应答和细胞免疫应答适应性免疫应答根据淋巴细胞发挥的效应可分为B细胞介导的体液免疫和T细胞介导的细胞免疫。
免疫学检验
免疫学检验概述免疫学检验是一种通过检测人体免疫系统的功能和状态来评估健康状况的方法。
免疫学检验主要用于检测和诊断免疫相关疾病、监测免疫治疗效果和评估免疫功能。
在免疫学检验中,通常使用抗体和抗原相互作用的原理进行检测。
抗体是一种由免疫系统产生的特异性蛋白质,可以与抗原结合,形成免疫复合物。
通过检测免疫复合物的形成和浓度变化,可以获得相关信息和数据来评估免疫系统的功能和状态。
常见的免疫学检验方法免疫荧光检测免疫荧光检测是一种常用的免疫学检验方法。
它利用荧光标记的抗体与目标分子(如抗原、细胞表面分子等)发生特异性结合,然后使用荧光显微镜观察荧光信号的强度和分布情况。
免疫荧光检测具有高灵敏度和特异性的优势,可以用于检测抗体、抗原和免疫细胞的分布和表达情况。
在临床诊断中,免疫荧光检测常用于检测自身抗体、病毒抗体和细胞免疫功能等方面。
免疫酶联免疫吸附试验(ELISA)免疫酶联免疫吸附试验(ELISA)是一种常见的免疫学检验方法。
它基于酶标记的抗体与抗原特异性结合的原理,利用酶催化的反应产生可测量的信号。
ELISA具有高精确性和灵敏度的特点,可用于检测抗体、抗原和细胞因子的浓度。
在临床检验中,ELISA常用于检测病毒感染、风湿性疾病和免疫调节等方面。
流式细胞术流式细胞术是一种免疫学检验方法,可以同时检测和分析多种免疫细胞类型和功能的改变。
它基于细胞表面标志物的特异性结合和荧光标记的抗体的检测,通过流式细胞仪实现高通量的细胞检测和分析。
流式细胞术广泛应用于免疫学研究和临床诊断中。
它可以用于检测细胞表面分子的表达情况、分析细胞亚群的比例和功能状态,并可进行细胞分选和细胞功能实验等。
免疫学检验的临床应用免疫学检验在临床诊断和治疗中具有重要的应用价值。
它可以用于检测和诊断多种免疫相关疾病,如自身免疫病、感染性疾病和免疫缺陷病等。
在自身免疫病的诊断中,免疫学检验可以检测自身抗体的产生和水平变化,帮助确定疾病类型和活动度。
免疫检验知识点总结
免疫检验知识点总结一、免疫检验的基本原理① 抗体与抗原的相互作用免疫检验的基本原理是利用抗体与抗原的特异性相互作用。
抗体是一种由机体产生的特异性蛋白质,可以识别并结合与之对应的抗原,形成抗原-抗体复合物。
这种特异性相互作用是免疫检验能够有效识别某些疾病的基础。
② 免疫检验的灵敏度和特异性免疫检验的灵敏度是指测试方法能够准确检测到低浓度抗原或抗体的能力,而特异性是指方法能够区分目标抗原或抗体与其他非特异性成分的能力。
通常情况下,免疫检验需要具有较高的灵敏度和特异性,才能准确诊断疾病。
二、常见的免疫检验方法1. ELISA(酶联免疫吸附实验)ELISA是一种广泛应用于医学诊断的免疫检验方法。
它利用酶标记的抗体或抗原与待检测的抗原或抗体结合,通过酶底物的显色反应来检测特定物质的存在和浓度。
ELISA方法可以用于检测各种疾病的标志物,包括感染病原体、肿瘤标志物、药物残留等。
2. 免疫荧光分析免疫荧光分析是利用荧光标记的抗体识别和检测待检测的抗原或抗体。
通过荧光显微镜或荧光光度计来观察或定量分析荧光信号,以确定特定物质的存在和浓度。
免疫荧光分析广泛用于细胞学、免疫学、微生物学等领域的研究和诊断。
3. 免疫固定电泳免疫固定电泳是通过将抗体和待检测的抗原在电泳条件下结合,然后通过免疫印迹方法检测特定蛋白质或其他生物分子的存在和浓度。
免疫固定电泳在临床诊断和科研领域有广泛的应用。
4. 放射免疫测定放射免疫测定是利用放射性同位素标记的抗体或抗原与待检测的抗原或抗体结合,通过放射性测量仪器来检测特定物质的存在和浓度。
放射免疫测定通常具有较高的灵敏度和特异性,可用于检测一些低浓度的生物分子。
5. 流式细胞术流式细胞术是利用激光技术和荧光标记的抗体来检测和分析细胞表面或内部标志物的存在和表达水平。
流式细胞术可以快速高效地分析大量细胞样本,广泛用于免疫学、细胞生物学、肿瘤学等领域的研究和诊断。
三、免疫检验在疾病诊断中的应用1. 传染病的诊断免疫检验方法可以用于感染病原体的检测,例如HIV、乙肝病毒、丙肝病毒等。
免疫学检验重点
十三、抗核抗体的组成、临床意义及测定方法。
十四、常见感染性疾病的检测项目有哪些?
十五、Байду номын сангаас射免疫技术的分类及原理。
十六、斑点金免疫层析试验的原理、结果判断及方法学评价。
十七、化学发光免疫分析的主要类型及常用发光剂。
十八、肿瘤标志物的分类、常用肿瘤标志物的临床意义及检测技术。
三、免疫的三大功能。
四、免疫应答的类型、过程及生物学意义。
五、五类Ig的特性与功能。
六、抗原抗体反应的原理、特点及影响因素。
七、抗原抗体反应的类型及免疫标记技术的类型。
八、超敏反应的类型、发生机制及临床常见疾病。
九、凝集反应的类型、原理及临床应用。
十、沉淀反应的类型及原理。
十一、胶乳凝集法检测ASO、RF的实验原理、材料、方法步骤及结果判断。
一、名词解释:免疫、Ag、Ab、Ig、免疫应答、超敏反应、补体、抗原抗体反应、MHC、单克隆抗体、M蛋白、TORCH检测、免疫标记技术、AID、酶免疫分析技术、本周蛋白、PBMC、凝集反应、直接凝集反应、间接凝集反应、沉淀反应
二、英译中:AFP、RF、CEA、CIC、HCG、ELISA、DICA、ECLIA、RIA、IMRA、FCM、IBT、HLA、TRFIA、PBMC、FIA、FPIA
免疫学检验基础理论知识
IgE:血清中含量最少,介导1型超敏反应。 IgD:血清型IgD作用尚不清楚。
抗原抗体反应
定义:抗原及相应抗体之间的特异性结合反应。
原理:抗原抗体的特异性结合是基于抗原决定簇及 抗体超变区分子间的结构互补性和亲和性。这种特 性是有抗原、抗体分子空间构型所决定的。
3、加酶标抗Ig
及抗体结合 洗涤
EYY
4、加酶作用的底物
+
产生颜色
间接法测抗体
EY EY EY
2、加待检物 无抗体及抗原结
洗涤
3、加酶标的抗 洗抗涤体
4、加酶作用的底
- 不产生颜色
Y EY
EYY
酶联免疫吸附实验类型
竞争法 竞争法可用于抗原和半抗原的定量测定,也可对
抗体进行测定。 酶标记抗原(抗体)及待测品中的抗原(抗体)
洗涤
3、加特异性 抗原,及特异 性抗体结合
洗涤
4、加酶标抗体 及特异性抗原结 合,加底物显色
捕获法原理
YYY YY YY YY YY YY YY
YY YY YY
-
EY EY EY
1、固相化抗人 IgM
2、加待测物 非特异性IgM 和抗人IgM结合
洗涤
3、加特异性抗 原,不能及非 特异性IgM结合
洗涤
抗原
完全抗原及半抗原 完全抗原: 具有免疫原性及反应原性的物质,多为分
子量大于5000的蛋白质。 半抗原: 只具有反应原性而无免疫原性的物质,一般
为小分子化合物,例如某些激素、药物等。
免疫系统组成
抗体
抗体: 机体受到抗原物质刺激后,由B 淋巴细胞转化为浆细胞产生的,能及 相应抗原发生特异性结合的免疫球蛋 白(Ig)。
临床免疫学检验-名词解释考点重要知识点归纳(全面)
免疫学考试重点归纳(全面)1抗原抗体反应:是指抗原与相应抗体在体内或体外发生的特异性结合反应。
抗原抗体间的结合力涉及静电引力、范德华力、氢键和疏水作用力,其中疏水作用力最强,它是在水溶液中两个疏水基团相互接触,由于对水分子的排斥而趋向聚集的力。
2亲和性(affinity):是指抗体分子上一个抗原结合点与一个相应抗原表位(AD)之间的结合强度,取决于两者空间结构的互补程度。
3亲合力(avidity):是指一个完整抗体分子的抗原结合部位与若干相应抗原表位之间的结合强度,它与亲和性、抗体的结合价、抗原的有效AD数目有关。
4抗原抗体反应的特点:特异性、可逆性、比例性、阶段性。
5带现象(zone phenomenon):一种抗原-抗体反应的现象。
在凝集反应或沉淀反应中,由于抗体过剩或抗原过剩,抗原与抗体结合但不能形成大的复合物,从而不出现肉眼可见的反应现象。
抗体过量称为前带,抗原过量称为后带。
6免疫原(immunogen):是指能诱导机体免疫系统产生特异性抗体或致敏淋巴细胞的抗原。
7免疫佐剂(immuno adjustvant):简称佐剂,是指某些预先或与抗原同时注入体内,可增强机体对该抗原的免疫应答或改变免疫应答类型的物质。
8半抗原(hapten):又称不完全抗原,是指仅具有与抗体结合的能力(抗原性),而单独不能诱导抗体产生(无免疫原性)的物质。
当半抗原与蛋白质载体结合后即可成为完全抗原。
9载体(carrier):结合后能给予半抗原以免疫原性的物质。
10载体效应:初次免疫与再次免疫时,只有使半抗原结合在同一载体上,才能使机体产生对半抗原的免疫应答,该现象称为~。
11单克隆抗体(McAB):将单个B细胞分离出来,加以增殖形成一个克隆群落,该B细胞克隆产生的针对单一表位、结构相同、功能均一的抗体,即~。
12多克隆抗体(PcAb):天然抗原分子中常含多种不同抗原特异性的抗原表位,以该抗原物质刺激机体免疫系统,体内多个B细胞克隆被激活,产生含有针对不同抗原表位的免疫球蛋白,即~13基因工程抗体(GEAb):是利用DNA重组及蛋白工程技术,从基因水平对编码抗体的基因进行改造和装配,经导入适当的受体细胞后重新表达的抗体。
免疫学检验知识点总结
免疫学检验知识点总结Immunology testing is a crucial aspect of modern medicine, encompassing a diverse range of techniques used to detect and monitor immune responses. It plays a pivotal role in diagnosing diseases, assessing the effectiveness of treatments, and understanding the immune system's intricate functions.免疫学检验是现代医学的关键领域,包括一系列用于检测和监测免疫反应的技术。
它在诊断疾病、评估治疗效果以及理解免疫系统的复杂功能方面发挥着核心作用。
One fundamental aspect of immunology testing is the identification of antigens and antibodies. Antigens are substances that trigger an immune response, while antibodies are proteins produced by the immune system to neutralize these antigens. Techniques such as immunoassay and ELISA (Enzyme-Linked Immunosorbent Assay) are commonly used to detect and measure the presence of antigens and antibodies in biological samples.免疫学检验的一个基本方面是抗原和抗体的识别。
临床免疫学检验知识点
临床免疫学检验1、免疫:是机体识别和排斥抗原性异物的一种生理功能2、免疫防御(对外);免疫自稳(防自身免疫病);免疫监视(防肿瘤)。
3、中枢免疫器官:骨髓、胸腺;外周免疫器官:淋巴结、脾脏(最大)、黏膜相关淋巴组织4、B细胞:通过识别膜免疫球蛋白来结合抗原,介导体液免疫;B细胞受体=BCR=mIg表面标志:膜免疫球蛋白(SmIg)、Fc受体、补体受体、EB病毒受体和小鼠红细胞受体。
成熟B细胞:CD19、CD20、CD21、CD22 (成熟B细胞的mIg主要为mIgM和mIgD)同时检测CD5分子,可分为B1细胞和B2细胞。
B细胞功能检测方法:溶血空斑形成试验(体液免疫功能)。
5、T细胞:介导细胞免疫。
共同表面标志是CD3(多链糖蛋白);辅助T细胞的标志是CD4;杀伤T细胞的标志是CD8;T细胞受体=TCR。
T细胞和NK细胞的共同表面标志是CD2(绵羊红细胞受体);CD3+CD4+CD8- = 辅助性T细胞(Th)CD3+CD4-CD8+ = 细胞毒性T细胞(Tc或CTL)(T细胞介导的细胞毒试验)CD4+CD25+ = 调节性T细胞(Tr或Treg)T细胞功能检测:植物血凝素(PHA)刀豆素(CONA)刺激T细胞增殖。
增殖试验有:形态法、核素法。
T细胞亚群的分离:亲和板结合分离法,磁性微球分离法,荧光激活细胞分离仪分离法*E花环试验是通过检测SRBC受体而对T细胞进行计数的一种试验;6、NK细胞:具有细胞介导的细胞毒作用。
直接杀伤靶细胞(肿瘤细胞和病毒感染的细胞)表面标志:CD16(ADCC)、CD56。
测定人NK细胞活性的靶细胞多用K562细胞株,而测定小鼠NK细胞活性则常采用YAC-1细胞株。
7、吞噬细胞包括:单核-吞噬细胞系统(MPS,表面标志CD14,包括骨髓内的前单核细胞、外周血中的单核细胞和组织内的巨噬细胞)和中性粒细胞。
(表达MHCⅡ类分子)8、人成熟树突状细胞(DC)(专职抗原呈递功能):表面标志为CD1a、CD11c和CD83。
临床常用免疫学检验
免疫学检验
2.Ig含量增高:
多克隆性增高,见于各种慢性感染、慢性肝病、某些自身免疫病,如 SLE、RA、SS等;也见于寄生虫疾病、结节病等。
1
单克隆性增高,又称 “M”蛋白,主要见于免疫增殖性疾病,如多发性骨髓瘤、重链病、轻链病,巨球蛋白血症等。
2
免疫学检验
〖注意事项〗 Ig水平与年龄、性别有一定的关系,Ig 含量因检测方法不同而有差别,各地区参考值也不相同,在判断结果时应综合考虑。如有“M 蛋白”,可进一步作血清或尿液免疫电泳,检测轻链和重链。
免疫学检验
第一章 免疫功能检验 (Immunological Function Test) 免疫功能检验分为细胞免疫功能检验和体液免疫功能检验,对于了解患者的免疫状态,以及细胞的各种功能,为深入研究和认识机体免疫系统的生理、病理改变,阐明某些疾病的发病机制和临床诊断与治疗将提供有利的信息。下面简单介绍临床常用的一些免疫检验项目。
免疫学检验
CAP检测系统 〖原理〗CAP,一个很小的塑料帽状物,其内置有多孔性、弹性和亲水性的纤维素粒,此粒多孔,吸咐了更多的变应原,加入血清,血清中的sIgE就会和变应原结合,再加入酶标抗人IgE,再加入荧光显色系统,在荧光分光光度计上测定荧光强度,计算机提供相应软件,自动计算出结果。报告sIgE含量。
*
免疫学检验
三. 特异性IgE抗体(sIgE)的检测 过敏患者的血清中存在着具有变应原特异性的IgE 称之为特异性IgE,如对牛奶过敏者则有针对牛奶变应原的IgE;对蒿草花粉过敏者,则有针对该花粉的IgE,该抗体只能与该变应原特异性结合。
sIgE的测定在变态反应体外诊断中占有重要地位。在呼吸疾病中,过敏性哮喘,过敏性鼻炎,职业性哮喘等患者血清中均能检出 sIgE。sIgE检测方法有许多种,目前临床上常用的有ELISA,FEIA,免疫印迹等。随着sIgE测定技术的完善,此项测定已日趋商品化,开发了各种检测系统,如CAP过敏原检测系统,Master过敏原检测系统,Px过敏原检测系统等,这些测定系统包括了仪器、试剂、计算机软件处理系统。国内目前应用最多的是CAP检测系统。
免疫学检验知识点
免疫学检验知识点免疫学检验是一种通过检测体内免疫系统的功能状态来评估健康状况的方法。
免疫系统是人体的一种重要的防御机制,可以识别和清除病原体,保护身体免受感染。
免疫学检验可以帮助医生诊断和治疗各种免疫相关的疾病,例如自身免疫性疾病、过敏反应、免疫缺陷等。
本文将介绍一些常见的免疫学检验知识点。
一、抗体检测抗体是一种由免疫系统产生的蛋白质分子,可以识别和结合特定的抗原。
通过检测抗体的存在和量来评估免疫系统对疾病的应答情况。
常见的抗体检测包括ELISA(酶联免疫吸附试验)、Western blotting(蛋白质印迹)等。
这些检测方法可以用于检测感染性疾病的抗体,例如HIV、肝炎病毒等,并可用于确认诊断和评估治疗的效果。
二、免疫球蛋白检测免疫球蛋白是一种由免疫细胞分泌的抗体,可以帮助中和细菌毒素、清除细菌和病毒等。
免疫球蛋白检测可以评估免疫系统的功能状态。
常见的免疫球蛋白检测包括免疫球蛋白G(IgG)、免疫球蛋白A(IgA)、免疫球蛋白M(IgM)等。
这些检测可以用于评估免疫系统对感染的应答情况、诊断免疫缺陷病、监测免疫治疗的效果等。
三、细胞免疫学检测细胞免疫学检测是一种评估免疫系统功能的重要方法。
常见的细胞免疫学检测包括淋巴细胞亚群分析、细胞毒性检测、细胞增殖试验等。
这些检测可以评估免疫细胞的数量、功能和应答情况,用于诊断免疫相关疾病、评估治疗效果等。
四、炎症指标检测炎症是免疫系统对感染和损伤的一种典型反应。
炎症指标检测可以评估免疫系统对炎症的应答情况。
常见的炎症指标包括C-反应蛋白(CRP)、白细胞计数、红细胞沉降率(ESR)等。
这些指标可以用于评估感染和炎症性疾病的程度、监测治疗效果等。
五、过敏原检测过敏反应是一种免疫系统过度应答一些外界物质的情况,例如花粉、食物、宠物等。
过敏原检测可以帮助确定引发过敏反应的具体物质,以便采取相应的预防和治疗措施。
常见的过敏原检测包括皮肤划痕试验、血清IgE测定等。
免疫学检验知识点总结
免疫学检验知识点总结免疫学检验是临床检验中非常重要的一个领域,通过检查人体的免疫系统功能,可以帮助医生诊断疾病、监测疾病进展以及评估治疗效果。
免疫学检验涉及到许多知识点,包括免疫学基础知识、免疫学检验方法、常见的免疫学检验指标等。
本文将对免疫学检验的相关知识点进行总结。
一、免疫学基础知识1. 免疫系统的组成免疫系统由两大部分组成:体液免疫和细胞免疫。
体液免疫主要通过抗体来进行免疫应答,而细胞免疫则通过吞噬细胞和T细胞来进行免疫应答。
2. 免疫系统的功能免疫系统的主要功能包括防御感染、清除异常细胞、调节炎症反应等。
免疫系统通过对抗原的识别和消除来维护机体内稳态,保护机体免受外界病原体的侵害。
3. 免疫系统的异常免疫系统的异常会引发一系列疾病,包括自身免疫病、免疫缺陷病、过敏性疾病等。
免疫系统的异常分析对于疾病的诊断和治疗至关重要。
二、免疫学检验方法1. 免疫荧光法免疫荧光法是一种常用的免疫学检验方法,包括直接免疫荧光法和间接免疫荧光法。
直接免疫荧光法可以用于检测抗原,间接免疫荧光法可以用于检测抗体。
该方法操作简便、灵敏度高,被广泛应用于临床诊断。
2. 酶联免疫吸附测定法(ELISA)ELISA是一种敏感度高、特异性强的免疫学检验方法,可以用于检测抗体或抗原。
它的操作简便,可以同时进行多个样本的检测,被广泛应用于病毒感染、免疫性疾病等的诊断。
3. 免疫印迹法(Western Blot)西方印迹法是一种用于检测蛋白质的技术,可以用于分析抗原或抗体的特异性。
该方法适用于检测免疫印迹图谱,可用于疾病的诊断和治疗。
4. 流式细胞术流式细胞术是一种用于分析或分选细胞的技术,可以用于检测免疫细胞的表面标记物、分析细胞免疫学特性等。
该方法操作简便、高通量化,被广泛应用于免疫学研究和临床诊断。
5. 免疫电泳法免疫电泳法是一种用于分离和检测蛋白质的技术,可以用于检测血清中的免疫球蛋白和其他蛋白质。
该方法适用于检测免疫球蛋白谱图、诊断多发性骨髓瘤等。
检验免疫知识点总结
检验免疫知识点总结免疫学是研究生物体如何全面抵抗外来微生物及其毒素、组织和细胞损伤、异常细胞生长和无源异物,并调节维持体内稳态和相互适应的一门学科。
从分子、细胞和器官水平上探讨动物对抗病原体和抗体、激素、神经系统发挥作用的机制。
下面我们来总结一下免疫学的知识点。
1. 免疫系统的功能免疫系统是机体内部一项极为复杂的保卫系统,其功能包括三个方面:(1) 抵抗病原体:免疫系统是机体最重要的防御系统,能对多种病原体进行抵抗,包括细菌、病毒、真菌、寄生虫等。
(2) 抗癌:免疫系统能够识别和消灭体内的异常细胞,对抗癌症具有重要作用。
(3) 维持稳态:免疫系统还参与维持机体内部环境的平衡,调节机体内部的代谢和稳态。
2. 免疫系统的组成免疫系统由两大部分组成:先天免疫系统和获得免疫系统。
(1) 先天免疫系统:是机体天生具备的免疫保护机制,包括皮肤、黏膜、血清种种无特异性体液等。
先天免疫系统具有快速、广谱的抵抗作用,是人体抵御感染的第一道防线。
(2) 获得免疫系统:是机体在接触抗原后,通过体液免疫和细胞免疫产生相对特异性和记忆性的免疫应答,并能够产生抗体和免疫记忆。
获得免疫系统对新入侵的抗原有更为精确、灵活的识别和清除能力。
3. 免疫系统的细胞及其功能免疫系统中主要包括多种细胞类型,包括淋巴细胞、巨噬细胞、树突状细胞等。
(1) 淋巴细胞:包括T细胞、B细胞和NK细胞。
T细胞能够通过识别抗原并参与细胞毒性作用,调节免疫应答。
B细胞则是产生抗体的细胞,能够对抗原进行专一性识别,并分泌抗体发挥清除作用。
NK细胞则主要参与对病毒感染及肿瘤细胞的清除。
(2) 巨噬细胞:巨噬细胞是淋巴系统中最重要的抗原递呈细胞,其主要功能是对抗原进行摄取、加工和递呈,并发挥抗原呈递和清理作用。
(3) 树突状细胞:树突状细胞是一类具有高度抗原呈递功能的抗原递呈细胞,其主要功能是感知并识别抗原,激活T细胞和B细胞,并参与T细胞的活化。
4. 免疫应答的类型及过程免疫应答是机体对抗原刺激产生的制约性的反应。
免疫学诊断技术考点总结
免疫学诊断技术考点总结●免疫血清学技术(反应的抗体几乎都是IgG和IgA)●凝集试验(直接,间接凝集)●主要用于区分细菌的血清型●参与凝集反应的抗体主要是IgG IgM●直接凝集●直接凝集反应:抗原与抗体直接结合并出现凝集现象的试验●颗粒性抗原+凝集素●分类●玻片法(仅能定性)●试管法●原理:抗原抗体结合形成可见反应(肉眼可见)●间接凝集●用于有可溶性的抗原或抗体●间接凝集反应:将可溶性抗原(或抗体)先吸附于一种与免疫无关的,一定大小的不溶性颗粒(统称为载体颗粒)的表面然后与相应抗体(或抗原)作用,在有电解质存在的适宜条件下,所出现的特异性凝集反应●正原反体●正向间接凝集反应(可溶性抗原+载体颗粒+抗体)●反向间接凝聚反应(抗体+载体颗粒+可溶性抗原)●HA-HI试验血凝-血凝抑制试验(没有特异性)●用于有血凝型的病毒●禽●新城疫禽流感●猪●猪细小病毒●非洲猪瘟●犬猫●犬细小病毒●犬瘟热●犬传染性肝炎●猫泛白细胞减少症●羊●蓝舌病●小反刍兽疫●其他●水貂病毒性肠炎●兔瘟●马流行性感冒●HA血凝试验●病毒与红细胞凝集●HI血凝抑制试验●病毒与抗体凝集,红细胞沉淀●沉淀试验●沉淀试验:可溶性抗原(如细菌的内外毒素,菌体裂解液,病毒的可溶性抗原,血清等)与相应抗体结合,在适量电解质存在下形成肉眼可见的白色沉淀●液相沉淀试验●环状沉淀试验(炭疽-Ascoli环状沉淀试验)●絮状沉淀试验●固相沉淀试验●琼脂扩散试验(鸡的血清需要8-10%氯化钠溶液稀释)●传染性法氏囊马传染性贫血兔病毒性出血病●免疫电泳试验(电泳可以将混合抗原初步分开)●非洲猪瘟●标记抗体技术●免疫荧光抗体技术(用荧光素)●免疫荧光抗体技术:用荧光素对抗体或抗原进行标记,然后用荧光显微镜观察荧光以分析示踪相应的抗原或抗体的方法●非洲猪瘟马立克氏病●常用的荧光素●异硫氰酸荧光素●四乙基罗丹明●四甲基异硫氰酸罗丹明●免疫酶技术(用酶)●免疫酶标记技术:根据抗原抗体反应的特异性和酶催化反应的高敏感性结合起来而建立的免疫检测技术●酶联免疫吸附试验ELISA●口蹄疫猪瘟非洲猪瘟●可以判断抗体水平的高低●免疫酶组织化学染色技术●斑点-酶联免疫吸附试验●放射免疫分析(用放射素)●放射免疫技术:是将放射性同位素测量的高度敏感性和抗原抗体反应的高度特异性结合起来而建立的一种免疫分析技术●是最敏感的分析技术灵敏度可达纳克(ng)至皮克(pg)级水平●中和试验●基于抗体能否中和抗原的感染性而建立,具有严格的种型特异性●中和抗体:凡能与病毒结合,使其失去感染力的抗体抗毒素:凡能与细菌外毒素结合,中和其毒性作用的抗体●鸡传染性喉气管炎伪狂犬●补体结合试验●通过抗原抗体复合物对补体的消耗能检出抗原或抗体的试验●敏感度高●非洲猪瘟马传染性贫血●免疫转印技术●又称蛋白质转印技术,一种将蛋白质凝胶电泳,膜转移电泳与抗原抗体反应相结合的技术●测蛋白质和抗体结合的技术●免疫组织化学技术●/免疫细胞化学,指带显色剂标记的特异性抗体在组织细胞原位通过抗原抗体反应和组织化学的呈色反应对相应抗原进行定色定位定量测定的一项新技术●用指示剂对感染细胞进行定位●E玫瑰花环试验●细胞免疫技术检测T细胞。
免疫与免疫学检验卫生资格证考试必背知识点要点总结(初级、中级)
免疫与免疫学检验卫生资格证考试必背知识点要点总结(初级、中级)1、免疫是机体识别和排斥抗原性异物的一种生理功能。
2、免疫应答:是指机体免疫系统接受抗原刺激发生一系列反应,并以排出或分解该抗原为目的的反应过程。
3、免疫系统的三大功能:免疫防御:机体排斥微生物的侵袭及其他外源性抗原异物的能力,过高产生超敏反应,过低引起免疫缺陷病;免疫自稳:机体识别和清除自身衰老残损的组织细胞的能力,以维持正常内环境稳态;免疫监视:机体杀伤和清除异常突变细胞的能力,机体防止监视和抑制恶性肿瘤在体内生长,一旦功能低下宿主一环恶性肿瘤。
4、胸腺是T细胞发育的重要中枢器官;切除胸腺,T细胞的免疫功能下降;皮质区的浅层为副皮质区为T淋巴细胞区。
5、脾脏是富含血管的最大外周淋巴器官;6、CD2表达全部人T细胞和NK细胞表面能与绵阳红细胞结合,又称绵羊红细胞受体;利用E花环试验,以测定外周血中T细胞总数;CD3分子转导T细胞活化的第一信号,TCR与CD3分子通过盐桥结合形成稳定的复合物;CD3分子是所有T细胞表面的标志,是TCR-CD3复合物的重要部分;CD4+/CD8+是区别T细胞亚群的主要标志,表达CD4主要是辅助性细胞;表达主要是细胞毒细胞7、CD19、CD20是B细胞的表面标志;B细胞的功能是:产生抗体、递呈抗原、分泌细胞因子参与免疫调节;8、CD16、CD56是NK细胞的表面标志;NK细胞可非特异直接杀伤肿瘤和病毒感染的靶细胞;9、免疫辅佐细胞主要包括单核巨噬细胞,主要表达MHCII类分子及具有吞噬作用;10、所有的抗体均是免疫球蛋白,但并非所有免疫球蛋白都是抗体;11、免疫球蛋白的重链恒定区分为5类;根据轻链可分为k型或λ型;12、IgG是血清中含量最高的免疫球蛋白;是再次免疫应答的主要抗体;是唯一能通过胎盘的抗体;IgA存在于分泌液中,是参与黏膜局部免疫的主要抗体;IgM是免疫应答中最先产生的抗体,水平升高,说明近期感染;IgE是Ig中最低;为亲细胞抗体,介导I型超敏反应。
临床免疫学检验(名解及答题)
临床免疫学检验【名词解释】1、enzyme immunoassay(EIA)酶免疫分析技术,是以酶标记的抗体(抗原)作为主要试剂,将酶高效催化反应的专一性和抗原抗体反应的特异性相结合的一种免疫标记检测技术。
2、colloidal gold immunoassay胶体金免疫技术,是以胶体金作为示踪标记物或显色剂,应用于抗原抗体反应的一种标记免疫测定技术。
3、immunoblot test(IBT)免疫印迹试验,是一种将高分辨率凝胶电泳和免疫化学分析技术相结合的技术。
4、precipitation reaction沉淀反应,指可溶性抗原与相应抗体在适当的条件下发生特异性结合而出现可见的沉淀现象。
5、agglutination reaction凝集反应,指细菌和红细胞等颗粒性抗原或表面包被可溶性抗原(或抗体)的颗粒性载体与相应抗体(或抗原)特异性结合后,在适当电解质存在下,出现肉眼可见的凝集现象。
6、immunogen免疫原,指能诱导机体免疫系统产生特异性抗体或致敏淋巴细胞的抗原。
7、adjuvant (immunoadjuvant)佐剂(免疫佐剂),指预先或与抗原同时注入体内,可增强机体对该抗原的免疫应答或改变免疫应答的类型的物质。
8、hapten半抗原,指仅有抗原性而无免疫原性的物质。
如多糖、多肽、类脂和核酸等物质。
9、monoclonal antibody(McAb)单克隆抗体,设法将单个B细胞分离出来加以增殖形成一个克隆群落,该B细胞克隆产生出针对单一表位、结构相同、功能均一的抗体,称为单克隆抗体。
10、Polyclonal antibody(PcAb)多克隆抗体,亦称免疫血清,用抗原以不同途径免疫动物,从动物血清中获取抗体,该类含有抗体的血清称为抗血清。
由于免疫动物的抗原往往具有多种抗原表位,可激活体内多个B细胞克隆产生针对抗原多种表位的混合抗体,因而抗血清也称为多克隆抗体。
11、tumor antigen肿瘤抗原,指细胞癌变过程中新出现的或异常表达的抗原物质。
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第一章概论1. 免疫学(Immunology)是研究免疫系统的结构与功能,并通过对其在免疫应答过程中所产生的免疫保护与免疫损伤机制的研究,探讨有效的免疫措施,实现以防病、治病为目的的一门现代医学学科。
免疫学技术对推动免疫学的发展及基础与临床免疫学的结合起了重要作用。
学习免疫学的基本概念,了解临床免疫学的理论基础,掌握免疫技术的检测原理是学习和研究临床免疫学与免疫技术的重要保障。
第一节免疫学简介1. 免疫(immunity)是机体识别和排斥抗原性异物的一种生理功能。
免疫系统与机体的其他系统相互配合,相互制约,共同维持机体在生命过程中的生理平衡。
一、免疫学概念与免疫应答1. 宿主体内的免疫系统能识别并清除从外环境中侵入的病原生物及其产生的毒素、内环境中因基因突变产生的肿瘤细胞、自身衰老残损的组织细胞或自身变性抗原,实现免疫防御、免疫自稳、免疫监视。
免疫防御——指机体排斥外源性异物的能力。
免疫自稳——指机体识别和清除自身衰变残损的组织细胞的能力,以维持正常内环境稳定。
免疫监视——指机体杀伤和清除异常突变细胞的能力,以监视和抑制恶性肿瘤在体内生长。
2. 免疫应答反应(immune response):是指机体免疫系统接受抗原刺激发生一系列反应,并以排出或分解该抗原为目的的反应过程。
免疫应答的过程主要分为:识别阶段(recognition phase)——抗原识别处理传递信息活化阶段(activation phase)——免疫细胞活化增殖产生效应细胞、分子效应阶段(response phase)——执行效应功能3. 免疫应答效应大多为生理性,是机体对外来抗原或自身变性抗原的清除效应。
免疫应答反应过强时,可致机体组织或器官发生病理损伤,出现临床疾病。
二、免疫组织与器官1. 免疫系统(immune system)由免疫器官、免疫细胞和免疫分子构成。
淋巴组织及免疫细胞分布于机体全身,执行免疫防卫功能,维持机体内环境正常的生理功能及动态平衡。
免疫器官按功能不同,分为中枢免疫器官和外周免疫器官。
中枢免疫器官是免疫细胞产生、分化和成熟的场所。
外周免疫器官是免疫应答的场所。
2. 单核细胞和淋巴细胞经血液循环及淋巴循环,进出于外周淋巴组织及淋巴器官,形成机体免疫系统的免疫网络。
3. 通过免疫网络,免疫细胞能及时到达机体各脏器及皮肤粘膜的病原微生物入侵部位,又能将机体各部位的抗原成分经抗原递呈细胞携带至相应淋巴组织及淋巴器官,活化T淋巴细胞与B淋巴细胞,执行特异性免疫应答功能。
4. (一)中枢淋巴器官:骨髓:(1)是造血干细胞生成、分化发育的场所;(2)是功能性B细胞分化成熟的唯一场所;(3)提供各种免疫细胞的前体细胞; T细胞分化成熟的场所胸腺: T细胞分化成熟的场所(二)外周淋巴器官:淋巴结、脾脏、粘膜相关淋巴组织(扁桃体、阑尾等)(三)淋巴细胞再循环与归巢淋巴细胞在全身器官组织及体液中的循环,可扩大与病原异物抗原接触的机遇,并将被抗原激活的淋巴细胞引流入局部淋巴组织及器官,在T细胞、B细胞、抗原递呈细胞(antigen presenting cells, APC)间发挥协同的免疫应答,产生的效应淋巴细胞定向地迁移于病原异物部位,发挥免疫效应功能。
5. 外周免疫器官及外周淋巴组织既是淋巴细胞再循环的起点和中途站,也是淋巴细胞归巢的终点。
淋巴细胞在发挥免疫效应的同时,被归巢受体引导回该类细胞的原定居处,进行修整、增殖和发育,以提高该类淋巴细胞的数量和功能,这是保证淋巴细胞功能健全的重要环节。
三、免疫细胞1. 免疫细胞:凡参与免疫应答或与免疫应答有关的细胞统称为免疫细胞,按免疫细胞在体内的作用不同分为三大类。
淋巴细胞——T细胞、B细胞、NK细胞(能增殖分化并产生免疫效应)免疫辅助细胞——吞噬细胞、树突状细胞(DC)(参与辅助淋巴细胞的活化)免疫应答细胞——中性粒细胞、嗜酸性粒细胞、嗜碱性粒细胞、肥大细胞(参与免疫应答的某一环节)四、免疫分子1. 免疫分子是由一些免疫活性细胞或相关细胞分泌的蛋白质及小分子多肽物质组成,它们参与机体的免疫反应或免疫调节。
主要的免疫分子:免疫球蛋白(Ig)、补体系统(C)、细胞因子、细胞粘附分子(CAM)、白细胞分化抗原(CD)第二节临床免疫学1. 临床免疫学(clinical immunology)是将免疫学基础理论、临床医学疾病与免疫学技术相结合,用于研究疾病的免疫病理机制、诊断与鉴别诊断、评价治疗效果和判断愈后的多个分支学科的总称。
第三节临床免疫学与免疫检验1. 免疫学检验(laboratory immunology)是研究免疫学技术及其在医学检验领域的重要学科。
2.第二章抗原抗体反应1. 抗原抗体反应:指抗原与相应抗体之间所发生的特异性结合反应。
物质基础: ①抗原表位与抗体高变区间的互补结合②抗原表位与抗体高变区的沟槽分子表面的结合③抗原抗体之间的结合力④亲水胶体转化为疏水胶体2. 抗原抗体结合力:静电引力、范德华引力:作用最小、氢键:最具特异性、疏水作用力:作用最大。
3. 亲和力(affinity):抗体分子上一个抗原结合点与对应的抗原决定簇之间相适应而存在着的引力,是抗原抗体间固有的结合力。
亲合力(avidity):抗体结合部位与抗原表位之间结合的强度。
4. 亲水胶体转化为疏水胶体:5. 抗原抗体反应的特点:⑴特异性:抗原与抗体结合反应的专一性,分子基础——抗原表位与抗体分子高变区之间空间构型的互补性⑵可逆性:抗原与相应抗体结合成复合物后,在一定条件下又可解离为游离抗原与抗体的特性,影响因素:①抗体对相应抗原的亲合力-亲合力越高,结合越牢固,越不易解离;②环境因素对复合物的影响-pH、离子强度。
⑶比例性:抗原与抗体发生可见反应需遵循一定的量比关系,前带(prezone):抗体过量后带(postzone):抗原过量等价带(equivalence zone):抗原抗体比例合适⑷阶段性:第一阶段:特异性结合阶段,反应快,不可见; 第二阶段:反应可见阶段,反应慢,出现凝集、沉淀和细胞溶解等现象。
6. 交叉反应(cross reactions):两种不同的抗原分子具有部分相同或类似结构的抗原表位,可与彼此相应的抗血清发生反应。
7. 影响抗原抗体反应的因素:⑴抗原、抗体反应物的自身因素:①抗原:理化性状、表位种类和数目②抗体:来源、特异性、亲和性、效价⑵环境因素:①电解质: 生理盐水或缓冲液②酸碱度: pH6~pH9③温度: 15℃~40℃,37℃最适8. 标记免疫技术:用荧光物质、放射性核素、酶或化学发光物质等标记抗原或抗体,进行抗原抗体反应后,通过检测标记物对抗原或抗体进行定性、定位或定量分析⑴按实际用途分为:①免疫组织化学技术(immunohistochemistry technique,IHCT)②免疫测定(immunoassay)⑵按测定反应体系的物理状态分为:①均相免疫测定(homogenous immunoassay)②非均相免疫测定(heterogenous immunoassay)⑶按检测现象分为:①放射免疫技术②荧光免疫技术③酶免疫技术④化学发光免疫技术⑤金免疫技术9.第三章免疫原和抗血清的制备第一节免疫原的制备1. 免疫原(immunogen)是能诱导机体产生抗体并能与抗体发生反应的物质。
类型:①颗粒性抗原-细胞、细菌、寄生虫②可溶性抗原-蛋白质、糖蛋白、脂蛋白、核酸2. 颗粒性抗原的制备细胞抗原:绵羊红细胞细菌抗原:菌体抗原、鞭毛抗原寄生虫体抗原:虫卵3. 可溶性抗原的制备和纯化⑴可溶性抗原的制备①组织细胞抗原的制备:高速捣碎法-组织捣碎机捣碎研磨法-用玻璃匀浆器或乳钵研磨②组织细胞或培养细胞可溶性抗原的制备:反复冻融法--20℃冻结,然后室温融化超声破碎法-超声波(1~20kHz)自溶法-自身酶系酶处理法-溶菌酶、纤维素酶、蜗牛酶表面活性剂处理法-SDS、去氧胆酸钠、二乙基十六烷基溴⑵免疫球蛋白片段的制备:非共价键解离法-改变pH 、利用强变性剂共价键解离法-氧化法和还原法溴化氰裂解法酶解法-木瓜酶、胃蛋白酶4. 可溶性抗原的纯化⑴超速离心法:差速离心法-低速和高速离心交替进行密度梯度离心法-区带离心法⑵选择性沉淀法:核酸去除法-氯化锰、硫酸鱼精蛋、链霉素盐析法-硫酸铵、硫酸钠有机溶剂沉淀法-乙醇、丙酮聚合物沉淀法-聚乙二醇⑶凝胶过滤法:利用凝胶的分子筛作用,对分子量不同的蛋白质进行分离⑷离子交换层析法:利用蛋白质带电荷不同进行分离⑸离子交换剂:离子交换纤维素、离子交换凝胶、离子交换树脂亲和层析法:利用生物大分子之间具有的专一性亲和力(1)亲和层析支持物的选择:①非特异性吸附低;②液体流速快;③在各种pH和高浓度盐溶液中稳定;④有合适丰富的化学基团,与蛋白质或其它化合物结合;⑤有丰富的微孔,以增加结合容量。
最常用的支持物是Separose4B(2)配体的选择条件:①抗原或抗体必须单一特异性;②抗原与抗体必须具有较高的亲和力;③配体必须有一个适当的化学基团。
(3)抗原或抗体与支持物的结合:①活化:溴化氰;②接“手臂”:带“手臂”琼脂糖有氨基琼脂糖、羧基琼脂糖、溴乙酰琼脂糖、重氮盐衍生物琼脂糖、疏基琼脂糖。
(4)亲和层析条件的选择:①封闭活性基团:用无关蛋白质或三乙醇胺过柱;②除去未结合和结合不牢的蛋白:先用NaHCO3洗脱,再用解脱剂处理;解脱剂:3mol/L 硫氰酸钾(或钠)、0.1mol/L pH2.4甘氨酸缓冲液电泳法:利用分子量和电荷量不同进行分离(二)纯化抗原的鉴定蛋白含量测定:紫外吸收法、双缩脲法、酚试剂法分子量测定:SDS-PAGE、凝胶过滤纯度鉴定:醋酸纤维膜电泳、SDS-PAGE、毛细管电泳、等电聚焦、高效液相层析免疫活性鉴定:双向免疫扩散、免疫电泳、ELISA三、半抗原性免疫原的制备半抗原(hapten):仅有抗原性而无免疫原性的物质如多肽、甾体激素、核苷、某些药物等。
载体(carrier):赋予半抗原以免疫原性的物质(一)载体①蛋白质:牛血清白蛋白、人血清白蛋白、兔血清白蛋白牛甲状腺球蛋白血蓝蛋白②多肽聚合物:多聚赖氨酸(polylysine)③大分子聚合物:羧甲基纤维素(carboxymethyl cellulose, CMC)聚乙烯吡咯烷酮(polyvinylpyrrolidone,PVP)(二)半抗原与载体的连接方法①物理方法:利用通过电荷和微孔吸附半抗原吸附的载体有CMC、PVP、硫酸葡聚糖等②化学方法:利用某些功能基团将半抗原连接到载体上带有游离氨基或羧基以及两种基团都有的半抗原:碳二亚胺法戊二醛法混和酸酐法过碘酸氧化法不带氨基和羧基的半抗原:用化学方法使其转变为带有游离氨基或游离羧基的衍生物,再与载体连接(三)半抗原性免疫原的鉴定一个载体分子至少要连接20个以上的半抗原分子半抗原与载体的比例测定:吸收光谱分析法放射性核素标记半抗原渗入法第二节免疫佐剂免疫佐剂(immunoadjuvant):预先或与抗原同时注入体内,可增强机体对该抗原的免疫应答或改变免疫应答的类型的物质称为免疫佐剂,简称佐剂(adjuvant)。