大肠埃希氏菌原始记录表
大肠菌群计数平板法检验原始记录
样品名称
样品编号
检验项目
大肠菌群平板计数法
检验日期
检验地点
□BSL-2实验室
□洁实验净室
检验依据
判定依据
检验仪器
□生化培养箱□均质器□菌落计数仪
□生物安全柜□超净台□电子天平
□恒温振荡器□冰 箱□冰 箱
检验试剂
VRBA琼脂、BGLB肉汤、磷酸盐缓冲液或无菌生理盐水等。
h
稀释度
空白
2
25g(mL)样品+225mL稀释液均质（或原液直接检验）；
平板A1
平板A2
3
10倍系列稀释；
结果
平板B1
4
选2-3个适宜稀释度样品匀液；每梯度接种VRBA平板2个；
平板B2
结果
5
36±1℃，18-24h培养，计数典型和可疑菌落；
平板C1
平板C2
6
挑10个可疑菌落接种于BGLB肉汤管36±1℃，24-48h；
结果
平板D1
7
若BGLB肉汤管产气则阳性；
平板D2
结果
8
按比例记录结果，报告。
平板E1
平板E2
温度（℃）
相对湿度（％RH）
结果
证实实验比例
结果
报告
检验员： 审Βιβλιοθήκη 员：样品制备□固体和半固体样品：无菌称取25g，置于盛有225mL磷酸盐缓冲液或无菌生理盐水的无菌灭菌袋内，进行均质处理。
□液体样品：吸取25mL于样品于225mL磷酸盐缓冲液或无菌生理盐水中，混匀。
检验程序
大肠菌群计数[ CFU/g (mL ) ]
1
实验采集抽样方案来自GB4789.1；
大肠埃希菌检查原始记录
文件编号：************
大肠埃希菌检查原始记录
1.培养基及菌种
胰酪大豆胨液体培养基配制批号： 麦康凯液体培养基配制批号： 麦康凯琼脂培养基配制批号： 菌种编号： 2.增菌预培养
取1： 供试液 ml(相当于1g 或1ml 供试品),接种至 ml （经方法适用性试验确认）的胰酪大豆胨液体培养基中，混匀，30-35℃培养18-24小时
3.选择和分离培养
①取上述培养物 ml 接种至
ml 麦康凯液体培养基中，42-44℃培养24-48小时
培养起止时间： ；培养箱编号： ；培养温度： ℃ 备注：“+”代表浑浊，“
-”代表未发生浑浊
②取麦康凯液体培养物划线接种于麦康凯琼脂平板上，30-35℃培养18-72小时 培养起止时间： ；培养箱编号： ；培养温度： ℃ 结果判定： □检出 □未检出
检查人/日期： 复核人/日期：。
水质 总大肠菌群、粪大肠菌群和大肠埃希氏菌(酶底物法)分析原始记录
接种量 （mL）
阳性孔数（个） 大孔 小孔
查表结果 （MPN/100mL）
检测结果 （MPN/L)
备注 XXXX-04-J071
分析人：
校核人：
审核人：
分析日期及时间：
XXXXXX 有限公司
2021 年 09 月 09 日颁布
水质总大肠菌群、粪大肠菌群和大肠埃希氏菌（酶底物法）分
析原始记录（续表）
培养温度℃培养时间 h 大肠埃希氏菌 黄色 无色
金黄色葡萄球菌 无色
培养温度℃培养时间 h 大肠埃希氏菌 黄色 无色
金黄色葡萄球菌 无色
培养温度℃培养时间 h 大肠埃希氏菌（耐热型） 黄色有荧光 无荧光
产气肠杆菌 无色
样品空白对照
样品编号
接种量 （mL）
阳性孔数（个） 大孔 小孔
接种量 （mL）
阳性孔数（个） 大孔 小孔
查表结果
（MPN/100mL）
检测结果
（MPN/L)
样品编号
接种量 （mL）
阳性孔数（个） 大孔 小孔
接种量 （mL）
阳性孔数（个） 大孔 小孔
接种量 （mL）
阳性孔数（个） 大孔 小孔
查表结果
（MPN/100mL）
检测结果
（MPN/L)
样品编号
接种量 （mL）
阳性孔数（个） 大孔 小孔
接种量 （mL）
检出限
10MPN/L
采样日期
样品描述
液态色澄清浑浊
样品种类 分析步骤
地表水地下水工业废水 生活污水 其他
环境条件
温度℃；湿度 RH%
1. 样品稀释：根据样品污染程度确定接种量，接种量为 10mL 时，取 10mL 样品加入到盛有
大肠菌群检测原始记录
发酵试验
阳性管数
报出值 MPN/ml
LST肉汤管初 BGLG肉汤管复
发酵试验
发酵试验
阳性管数
报出值 MPN/ml
LST肉汤管初 BGLG肉汤管复
发酵试验
发酵试验
阳性管数
报出值 MPN/ml
审核：
年月
日
编号： 样品名称：
检验依据：GB/T4789.3-2016 培养开始时间： 年 月 培养结束时间： 年 月
稀பைடு நூலகம்度
1
稀释度
项目 管号
1 2 3 1 2 3 1 2 3
项目 管号
2
稀释度
3
稀释度
4
稀释度
1 2 3 1 2 3 1 2 3
项目 管号
1 2 3 1 2 3 1 2 3
项目 管号
1 2 3 1 2 3 1 2 3
项目 管号
1
2
3
5
1
2
3
1
2
3
检验员：
大肠菌群检测原始记录
批次：
日时
日时
LST肉汤管初 BGLG肉汤管复
发酵试验
发酵试验
恒温时间： h 恒温温度：36℃±1℃
阳性管数
报出值 MPN/ml
LST肉汤管初 BGLG肉汤管复
发酵试验
发酵试验
阳性管数
报出值 MPN/ml
LST肉汤管初 BGLG肉汤管复
发酵试验
大肠埃希氏菌检验原始记录
五、革兰氏染色试验：用接种针接触菌落（典型菌落或可疑菌落）中心部位，接种至营养琼脂平板上，℃培养h，取培养物进行革兰氏染色试验。
六、鉴定：取营养琼脂培养物进行靛基质试验、MR-VP试验和柠檬酸利用试验。
大肠埃希氏菌检验原始记录
检测项目：大肠埃希氏菌检测依据：GB4789.38-2012（MPN计数法）
生产批号：样品数量：
检测日期：环境湿度：
环境温度：
大肠菌群检验过程：
1、称取样品g（ml）样品放入盛有225ml灭菌的磷酸缓冲液中，充分混匀，制成1：10的样品匀液，用1ml无菌吸管吸取1：10的样品匀液1ml，沿管壁缓缓注入盛有9ml生理盐水的无菌试管中，制成1：100的样品均液，用1ml无菌吸管吸取1：100的样品匀液1ml，沿管壁缓缓注入盛有9ml生理盐水的无菌试管中，制成1：1000的样品均液。从制备样品匀液至样品接种完毕，全过程不得超过15min。
2、初发酵试验：每个样品，选择3个适宜的连续稀释度的样品匀液，每个稀释度接种3管月桂基硫酸盐胰蛋白胨（LST）肉汤,每管接种1ml，℃培养h，观察倒管内产气情况，产气者进行复发酵试验，如未产气，培养至48h±2h，如产气着进行复发酵试验。如所有LST肉汤管均未产气，即可报告大肠埃希氏菌MPN结果。
三、复发酵试验：用接种环从产气的LST肉汤管中分别取培养物1环，移种于已提前预稳至45℃的EC肉汤管中，放入带盖的℃水浴箱内，培养h，检查小倒管内是否有气泡产生，如未有产气则继续培养至48h±2h，记录产气的EC肉汤管数。如所有EC肉汤管均未产气，即可报告大肠埃希氏菌MPN结果；如有产气，则进行EMB平板分离培养。
疾病预防控制中心大肠菌群原始记录表
疾病预防控制中心
大肠菌群原始记录
UCDPC/ZYS.W42·68 第页共页
检测项目：□大肠检测依据：□GB4789.3-2010
检测环境：无菌送检日期：检验日期：
检测仪器：电热恒温培养箱□（UCDPC/YQ.C-W ）□（UCDPC/YW.C-W ）
培养基配制，生理盐水（）蒸馏水（）BGLB-肉汤（）VRBA（）
大肠菌群
培养时间：始末
培养时间：h 培养温度：36℃＋1
固体样品：无菌称取25克样品剪碎或研磨，加入225毫升生理盐水或蒸馏水中。
备注：典型菌落数大于10个，BGLB最多接种10管。
典型菌落数小于10于，BGLB接种实际典型菌落数计算公式：大肠菌群数=可疑菌落数×BGLB阳性比例管数×稀释倍数
检验者：日期：校核者：日期：。
大肠埃希氏菌原始记录表
委托书编号：委托单位：
检测项目：大肠埃希氏菌检测依据：GB/T多管发酵法
样品名称：样品数量：
样品编号：样品状态：
收样日期：检测日期：
环境温度：环境湿度：
操作方法：
一、乳糖发酵实验
1、取10ml水样接种到10ml双料乳糖蛋白胨培养液中，取1ml水样接种到10ml单料乳糖蛋白胨培养液中，另取1ml水样注入到9ml灭菌生理盐水中，混匀后吸取1ml(即水样）注入到10ml单料乳糖蛋白胨培养液中，每一稀释度接种5管。对已处理过的出厂自来水，需经常检验或每天检验一次的，可直接种5份10ml水样双料培养基，每份接种10ml水样。
2、检验水源水时，如污染较严重，应加大稀释度，可接种1，，甚至，，,每个稀释度接种5管，每个水样共15管。接种1ml以下水样时必须作10倍递增稀释后，取lml接种，每递增稀释一次，换用1支lml灭菌刻度吸管。
3、将接种管置36±l°C培养箱内，培养24h±2h,如所有乳糖蛋白胨培养管都不产气产酸，则可报告为总大肠菌群阴性，如有产酸产气者，则按下列步骤进行。
36±1°C
24h±2h
EC-MUG培养基
±°C
24h±2h
观察结果
序号
样品
编号
乳糖发酵
EC-MUG
结果报告(MPN/100mL)
10ml
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
14
15
16
17
18
19
20
21
22
23
24
25
26
27
28
操作人：复核人：
菌落总数、大肠菌群检验原始记录
菌落总数、大肠菌群检验原始记录
产品名称：规格型号：检验报告编号：
检验依据:GB/T4789.2 GB/T4789.3 检测项目：菌落总数、大肠菌群生产批量：
所使用主要仪器：电热恒温培养箱、手提式压力灭菌锅、电热恒温干燥箱、显微镜。
一、菌落总数
取 5 份样品，分别取25g做为测试样品，加入225 mL无菌生理盐水，均质，制成1:10样品均液，用1ml 灭菌吸管吸取1:10的稀释液1ml加入9ml灭菌生理盐水的试管内，振荡摇匀做成1:100稀释液，以此法制备10倍系列递增稀释液，依据样品污染状况的估计，选取2个适宜稀释度的样品稀释液，每个稀释度各吸取1ml稀释液放入无菌平皿内，每个稀释度做两个平皿。
同时吸取1ml稀释液放入两个无菌平皿中做空白对照。
将凉至46℃的营养琼脂培养基注入培养皿内15～20ml混匀，待琼脂凝固后，翻转平板置36℃±1℃
二、大肠菌群
依据标准要求，选择稀释好的2个稀释度检测，培养基为结晶紫中性红胆盐琼脂（VRBA），置于36°C±1°C培养18-24h。
证实实验：挑选10个不同类型典型和可疑菌落，接种煌绿乳糖胆盐（BGLB）肉汤管，36°C±1°C培养24-48h。
观察产气情况，凡BGLB肉汤管产气，即可报告大肠菌群阳性。
检验：复核：审核：检验日期：。
大肠菌群检验原始记录(平板计数法)
XX公司
食品微生物检验记录
检品编号：检品名称：
【大肠菌群】按GB 4789.3-2010第二法平板计数法进行检验
环境条件：温度：湿度：
仪器设备：超净工作台编号：；培养箱（36℃±1℃）编号：
电子天平编号：
培养基与试剂：（配制日期：年月日）
①结晶紫中性红胆盐琼脂（VRBA）；②无菌生理盐水；③煌绿乳糖胆盐（BGLB）肉汤
样品操作
取 5 份独立包装的样品，分别取（）、、、、做为测试样品，按如下述操作，测得结果；
每份测试样品加入225 mL无菌生理盐水，均质，制成1:10样品均液（调节pH值为6.5~7.5），吸取 1 mL（1:10）样品均液至9 mL灭菌生理盐水中做10倍递增稀释。
选、和稀释液检测，培养基为结晶紫中性红胆盐琼脂（VRBA），℃，培养h（从月日: 到月日: ）,
挑选10个不同类型典型和可疑菌落，接种煌绿乳糖胆盐（BGLB）肉汤管，℃培养h（从月日: 到月日: ）。
标准规定：（标准号：）
n=5 c= m= CFU/g（mL）M= CFU/g（mL）结论：□符合规定□不符合规定
检验者：复核者：检验日期：。
大肠菌群检验原始记录表
从VRBA平板上挑取10个不同类型的典型和可疑菌落，分别移种于BGLB肉汤管内，36℃±1℃培养24-48h，观察产气情况
。凡是BGLB肉汤管产气，即可报告为大肠菌群阳性。
操作依据
GB4789.3-2010
稀释倍数
a-10倍
b-100倍
c灭菌生理盐水对照
/6.1
VRBA平板
操作依据 GB4789.3-2010
检验日期：
2016 年 月 日
采样依据 GB4789.12010/4.1、 4.2.1二级 采样方案 (n、c、m值 5、0、0)
10的均匀稀释液，编号a 灭菌生理盐水，编号c做
、b2、c1。向上述5个平 ，依次置于36℃±1℃培
养24-48h，观察产气情况
操作依据 B4789.3-2010
/6.1 操作依据 B4789.3-2010
/8.2 操作依据 B4789.3-2010
/8.3
实试验及观察结果 依据
B4789.3-2010 /8.4
肠菌群数的计算 据GB4789.3-2010
/8.5 数据修约依据 789.来自-2010/7.2报告依据 B4789.3-2010
/8.5
培养基）
年月日
。用灭菌吸管取1mla，加入9ml灭菌生理盐水中，混合均匀做成1:100的均匀稀释液，编号b。取1ml灭菌生理盐水，编号c做
为空白对照。
从a、b、c液中，分别前后2次，各吸取1ml移液到2个灭菌平皿中，平皿编号分别为a1、a2、b1、b2、c1。向上述5个平
皿中分别注入凉至46℃的VRBA15ml，混匀待VRBA凝固后，再加3mlVRBA覆盖平板表层，翻转平板后，依次置于36℃±1℃培 养箱中，培养20h。
大肠菌群检验原始记录-平板计数法5样
10-1
24 26 10
10-2
3
2
0
10-3
0
0
0
BGLB 阳性管数
6
稀释度
第一稀释度 第二稀释度 第三稀释度
样
品 VRBA 疑似大肠菌群菌落数
5
接种 BGLB 管数
10-1
20 22 10
10-2
1
2
0
10-3
0
0
0
BGLB 阳性管数
7
VRBA 空白（仅 VRBA）
-
-
空 白
稀释液空白（稀释液+VRBA）
样品名称
xxxx
样品批次
2022xxxx
仪器设备及耗材： 天平：( xxxx) 培养箱: ( xxxx)
洁净工作台: (xxxx)
培养基及试剂： 结晶紫中性红胆盐琼脂培养基（VRBA）： xxxx 煌绿乳糖胆盐肉汤（BGLB）： xxxx 磷酸盐缓冲液：xxxx 0.1mol/L 氢氧化钠：
配制日期 2022/xx/xx 配制日期 2022/xx/xx 配制日期 2022/xx/xx 配制日期：2022/xx/xx
实验过程： 1.样品处理和稀释： 1.1 如需要，使用 0.1mol/L 氢氧化钠或 0.1mol/L 盐酸将样品调整 pH 在 6.5~7.5 之间。 1.2 制备样品稀释液
根据样品状态，无菌操作，称取/吸管吸取 25g（mL）样品，加入到 225mL 无菌磷酸盐缓冲液中均质（混 匀），制成 1:10 样品匀液。根据对样品污染情况的估计，按上述操作将样品稀释至所需浓度。 2.接种 VRBA
-
-
BGLB 空白（仅 BGLB）
-
-
大肠埃希氏菌O157H7检验原始记录
□固体和半固体样品：无菌称取25g样品，置于盛有225mLmEC+n肉汤的无菌均质袋内，拍击式均质器均质1min～2min。
□液体样品：吸取25mL于样品置于盛有225mLmEC+n肉汤的无菌均质袋内,振荡混匀。
检验程序
1.实验采集抽样方案来自GB4789.1；
2.上述样品匀液于36℃±1℃培养18～24h；
赖氨酸脱羧酶
鸟氨酸脱羧酶
纤维二糖
山梨醇
斜面
底层
产气
H2S
ABΒιβλιοθήκη CDE阳性
报告
检验员： 审核员：
大肠埃希氏菌O157：H7/NM检验原始记录表
样品名称
样品编号
检验项目
大肠埃希氏菌O157：H7/NM检验
检验日期
检验地点
BSL-2实验室
温湿度（℃，RH%）
检验依据
GB 4789.36—2016
判定依据
检验仪器
生化培养箱均质器电子天平
生物安全柜显微镜三用紫外分析仪
检验试剂
mEC+n肉汤，CT-SMAC平板， O157显色平板，MUG-LST肉汤，生化鉴定试剂盒，乳胶凝结试剂
3.划线于CT-SMAC平板和大肠埃希氏菌O157显色琼脂，36℃±1℃培养18～24h；
4.挑取典型可疑菌落初步生化实验和血清学实验；
5.据生化鉴定试剂盒要求做大肠埃希氏菌O157：H7/NM生化鉴定。
样品
结果
项目
是否典型菌落
MUG试验
动力实验
血清学试验
MR
VP
三糖铁琼脂
靛基质
棉子糖
西蒙氏柠檬酸盐
大肠菌群计数(法一)原始记录
大肠菌群计数（法一）原始记录
第页共页
样品编号：环境温湿度：℃ %RH
检验依据：GB 4789.3-2016 检测地点：微生物室
检验日期：检毕日期：
培养开始时间：培养终止时间：
仪器设备：培养箱ZYXYJC/S- □天平ZYXYJC/S-
□pH计ZYXYJC/S-
检测过程：以无菌操作取样品□g或□mL，用□生理盐水或□磷酸盐缓冲液制成10倍梯度稀释液。
选择3个适宜连续稀释度的样品匀液（液体样品可包括原液），
每个稀释度接种3管月桂基硫酸盐胰蛋白胨(LST)肉汤，每管接种1mL（如接种
量超过1mL，则用双料LST肉汤），36℃培养h进行初发酵试验，未产气
者为大肠菌群阴性，产气者进行复发酵试验。
用接种环从产气试管中取培养物1
环，移种于BGLB内，36℃培养h，根据复发酵产气试管数查MPN表，
上报结果。
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委托书编号：委托单位：
检测项目：大肠埃希氏菌检测依据：GB/T 5750.12-2006 4.1多管发酵法
样品名称：样品数量：
样品编号：样品状态：
收样日期：检测日期：
环境温度：环境湿度：
操作方法：
一、乳糖发酵实验
1、 取10ml水样接种到10ml双料乳糖蛋白胨培养液中，取1ml水样接种到10ml单料乳糖蛋白胨培养
24h±2h
EC-MU（培 养基
44.5±0.5°C
24h±2h
观察结果
序号
样品
编号
乳糖发酵
EC-MUG
结果报告
(MPN/100mL)
10ml1ml0.1ml
10ml1ml0.1ml
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
14
15
16
17
18
19
20
21
22
23
24
25
262728操作人：复核人：每个稀释度接种5管，每个水样共15管。接种1ml以下水样时必须作10倍递增稀释后，取Iml接种， 每递增稀释一次，换用1支lml灭菌刻度吸管。
3、 将接种管置36±l°C培养箱内，培养24h±2h,如所有乳糖蛋白胨培养管都不产气产酸，则可报告 为总大肠菌群阴性，如有产酸产气者，则按下列步骤进行。
二、分离培养验证：
液中，另取1ml水样注入到9ml灭菌生理盐水中， 混匀后吸取1ml（即0.1ml水样）注入到10ml单料乳 糖蛋白胨培养液中，每一稀释度接种5管。对已处理过的出厂自来水，需经常检验或每天检验一次的，
可直接种5份10ml水样双料培养基，每份接种10ml水样。
2、检验水源水时，如污染较严重，应加大稀释度，可接种1，0.1，0.01ml甚至0.1，0.01，0.001ml,
经培养24h后，将产酸产气的发酵管，接种于EC-MU（培养基，置于44.5°C±0.5°C水浴箱培养24h
±2h,将培养后的EC-MUGt在暗处用紫外光灯照射，如有蓝色荧光产生，则表示水样中含有大肠埃希 氏菌。
培养基
培养温度
培养时间
二倍浓缩乳糖蛋白胨培养液
36±1°C
24h±2h
乳糖蛋白胨培养液
36±1°C