蝴蝶兰组织培养术

蝴蝶兰组织培养术————————————————————————————————作者：————————————————————————————————日期：毕业论文（设计）学生姓名：指导教师：专业名称：园林技术所在系部：园林系2010年 3 月 9 日辽宁林业职业技术学院毕业论文评审书论文摘要（由论文作者填写）摘要：被誉为“洋兰王后”的蝴蝶兰，几年来一直都处于花卉销售的首位，一直受到花迷们的青睐。

近年来除了盆花，还大量被用作切花材料，切花中除我们常见的插花用途之外，还是制作胸花的好材料，在开会庆典场合备受瞩目，至于用来制作新娘捧花，也是目前国内流行的新风潮，深受广大消费者的好评，这就使得高品质的蝴蝶兰需求量逐年增加。

但目前由于专业性培育蝴蝶兰的整体水品不是很高，关键的生产环节技术薄弱，造成蝴蝶兰生产成本较高繁殖系数偏低，工业化生产效率不高，许多名贵品种短缺，品质较低，且市场售价较高。

因此建立和完善蝴蝶兰组培快繁技术是解决这一问题的关键环节.本文针对植物组织培养中常见的褐变现象,详细地分析了其产生的机理及影响因素,并提出了相应的对策,为科研和生产提供了一定的理论和实践依据。

指导教师评语（含观点、内容、文字表达方面的评价）指导教师评定成绩：指导教师：年月日评审小组意见及成绩：评审小组组长签字：年月日答辩小组意见及成绩：答辩小组组长签字：年月日毕业论文成绩：备注：蝴蝶兰品种组织培养技术摘要：被誉为“洋兰王后”的蝴蝶兰，几年来一直都处于花卉销售的首位，一直受到花迷们的青睐。

近年来除了盆花，还大量被用作切花材料，切花中除我们常见的插花用途之外，还是制作胸花的好材料，在开会庆典场合备受瞩目，至于用来制作新娘捧花，也是目前国内流行的新风潮，深受广大消费者的好评，这就使得高品质的蝴蝶兰需求量逐年增加。

但目前由于专业性培育蝴蝶兰的整体水品不是很高，关键的生产环节技术薄弱，造成蝴蝶兰生产成本较高繁殖系数偏低，工业化生产效率不高，许多名贵品种短缺，品质较低，且市场售价较高。

因此建立和完善蝴蝶兰组培快繁技术是解决这一问题的关键环节.本文针对植物组织培养中常见的褐变现象,详细地分析了其产生的机理及影响因素,并提出了相应的对策,为科研和生产提供了一定的理论和实践依据。

关键词：蝴蝶兰；快繁技术；养殖；褐变目录前言……………………………………………………………………………………………第一章蝴蝶兰的生态习性…………………………………………………第二章蝴蝶兰的快速繁殖技术…………………………………………………2.1茎尖培养…………………………………………………2.2蝴蝶蝶兰的诱导培养基为ＶＷ、ＫＣ、ＭＳ、ＢＫ……………………………2.3叶片培养…………………………………………………2.4花梗腋培养…………………………………………………2.5根尖培养…………………………………………………2.6 原球茎的继代培养与育苗…………………………………………………第三章蝴蝶兰的栽培管理…………………………………………………3.1栽培介质…………………………………………………3.2温度……………………………3.3浇水………………………………………………………………………3.4光照……………………………………………………………………3.5通风……………………………………………………………………3.6营养………………………………………………3.7花后管理………………………………………第四章蝴蝶兰褐变产生的影响因素…………………………………4.1植物种类及基因型不同的植物和不同的基因型……………………………………4.2外植体部位及生理状态外植体的部位及生理状态不同……………………………………4.3培养基成分…………………………………………………………………4.4培养条件…………………………………………………………………第五章防止外植体产生褐变的对策…………………………………5.1适当外植体的选择…………………………………………………………………5.2对外植体的处理………………………………………………………………5.3适宜的培养基………………………………………………………………5.3.1适当的无机盐浓度………………………………………………………5.3.2适当和适量的激素………………………………………………………5.3.3培养基的硬度………………………………………………………5.3.4培养基中水的硬度………………………………………………………5.3.5培养基的pH值………………………………………………………5.3.6培养条件………………………………………………………5.4添加褐变抑制剂和吸附剂………………………………………………5.5进行细胞筛选和多次转移………………………………………………总结………………………………………………………………………………………致谢………………………………………………………………………………………参考文献…………………………………………………………………………………1 蝴蝶兰的生态习性喜高温、高湿、半阴环境，越冬温度不低于18度。

由于蝴蝶兰出生于热带雨林地区，本性喜暖畏寒。

生长适温为15～20℃，冬季10C以下就会停止生长，低于5℃容易死亡。

蝴蝶兰的气根颇多，其根尖翠绿，相当敏感，要细心加以保护，切不可触动损伤，否则，就好像打坏了人的嘴巴，要正常进食就困难了。

蝴蝶兰喜欢潮湿和半阴的环境，要求空间经常保持湿度50％～70％，盆内不能淋水过多。

在夏秋季节不能让阳光直射。

但早上的朝阳对它生长最好，应充分加以利用。

如果春季阴雨天过多，晚上要用光管给它增加光照，以利日后开花。

蝴蝶兰对病虫害的抵抗力较弱，经常会发生叶斑病和根腐病，可采用农药百菌清或达仙冲1000倍溶液喷射，每隔七八天喷1次，连喷3次。

这些药液沾在叶上留有白色痕迹，可不必抹去，以利于继续发挥杀菌作用。

2蝴蝶兰的快速繁殖技术2.1茎尖培养将除去叶的茎用流水冲洗干净，再用10%的漂白粉表面消毒15min，除去叶原基后，用5%漂白粉用业灭菌10min,用无菌水冲洗干净。

在无菌条件下将茎尖及叶基部腋芽切成大小约2～3mm的方块，进行接种。

2.2蝴蝶蝶兰的诱导培养基为ＶＷ、ＫＣ、ＭＳ、ＢＫ用培养基附加15%的椰乳进行液体和固体培养。

液体培养时，至于以160转/min速度震荡培养，10d左右更新新的培养液。

培养温度为25℃，光强2000LX，每天光照16～24h，1个月左右诱导出原球茎，这时可转到固体培养基上继续培养。

也可取试管苗植株的直径约为0.30mm的茎尖，不需要消毒接种在MS+BA3mg/1的培养基上，培养温度为23-27℃，光强1500LX,14d后茎尖膨大，颜色转绿，三个月后，原球茎直径生长达6mm。

2.3叶片培养取试管实生苗片尾外植体，实生苗年龄以3～4个月为最好，其诱导率及每个外植体上的原球增殖的个数最高。

对于120d的小苗，可将整叶切下直接插入培养基中，效果比将叶切断好。

并且取自第1叶的外植体，原球茎形成率较老叶好；将幼叶骗切断进行培养时，中间部分原球茎形成率比顶部和基部好；成年植株用叶片基部好；切断大小与诱导率直接相关，切断太小成活率低，以0.50cm 左右为最好。

原球茎的诱导培养基选用。

2.4花梗腋培养增殖，最后分化成苗。

另一种培养方式是不切下腋芽，取带叶芽的花梗先进行消毒，想消毒后的芽接种到卡特兰属1号培养基上并在培养基中加入10%的香蕉匀浆。

也可用VW液体培养基震荡培养一段时间后，产生原球茎，进行切割转移、取带腋芽的花梗节。

消毒后直接插入培养基上，接种7天后，侧芽膨大并向外伸长。

2.5根尖培养将150天实生苗根尖培养在附加肌醇100mg/l、烟酸1mg/l、VB6 mg/l、VB110 mg/l、蔗糖30g/l,PH=5.5的B5培养基上，或以30转/min的转速液体震荡培养，培养温度5℃，光强2000lx每天光照12h，结果光培养与暗培养的诱导率差异不大，KT10mg/l和NAA5mg/Ld的激素配比诱导率最高达70%。

原球茎的增殖在同样的培养基上，6个月后可形成幼苗。

2.6 原球茎的继代培养与育苗继代培养基可选用诱导培养基，也可选用KC、KYOTO。

可适当加人某些附加物质及调整激素含量以促进原球茎的生长。

育苗时用培养基可选用继代培养基，加入一定量复合添加物质促进小植株的发育，如香蕉匀浆或椰乳，也可加人少量的维生素，促进根的生长。

进行球茎增殖时，将需要转移的球茎切成几小块，转人新培养基进行增殖培养，培养一段时间后，再进行切割转移，通过这种方式原球茎成倍增长。

不需继代的原球茎在继代培养基或育苗培养基上分化出芽，并逐渐发育成丛生小植株，切开丛生小植株，转人育苗培养基上，不久小植株生根，等长到一定大小时可移人温室。

切离丛生小植株时，基部未分化的原球茎及刚分化的小芽不要丢弃，收集起来植人另一育苗培养基中，作为种苗。

异端时间后将长大的种苗挑出，种植，小苗和原球茎可继续增殖分化。

这样既能得到大量的种苗，又能得到大量的不断分化的试管苗。

3蝴蝶兰的栽培管理3.1栽培介质蝴蝶兰常见的栽培介质主要以水草、苔藓为主。

3.2温度蝴蝶兰喜欢高温高湿的环境，生长时期最低温度应保持在15℃以上，蝴蝶兰适宜生长温度为16℃至30℃。

秋冬和冬春之交以及冬季气温低时应注意增温。

夏季温度偏高时需要降温，并注意通风，若温度高于32℃，蝴蝶兰通常会进入半休眠状态，要避免持续高温。

春节前后为盛花期，适当降温可延长观赏时间，开花时夜间温度最好控制在13℃至16℃之间，但不能低于13℃。

3.3浇水蝴蝶兰原产于原始森林中，雾气较多，温度较高。

zB Wlwm)9蝴蝶兰没有粗大的假球茎储存养分，如果空气中温度不足，则叶面发皱且软弱无力。

因此，蝴蝶兰宜在通风、湿度高的环境中栽培养护。

蝴蝶兰适宜生长空气湿度为50％至80％。

3.4光照尽管蝴蝶兰较喜阴，但仍需要使兰株能接受部分光照，尤其花期前后，适当的光可促使蝴蝶兰开花，使开出的花艳丽持久，一般应放在室内有散射光处，勿让阳光直射。

3.5通风蝴蝶兰的正常生长需要流动的新鲜空气，尤其是在夏季高湿期，一定要以良好的通风来防暑，同时也能避免病虫害的感染。

3.6营养蝴蝶兰要全年施肥，除非低温持续很久，否则不应停肥。

冬天为蝴蝶兰的花芽分化期，停肥很容易导致无花或花少。

春夏期间为生长期，可每隔7天至10天施用一次稀薄液肥，宜用有机肥，也可施用蝴蝶兰专用营养液，但有花蕾时勿施，否则容易提早落蕾。

夏天长叶（即花期过后），可以追施氮肥和钾肥。

秋冬花茎生长期则可用磷肥，但要稀薄，约每隔2周至3周施用一次。

施肥的时间在下午浇水以后，施肥数次后，要用大量水冲洗兰盆及兰株，以免残留的无机盐类危害根部。