花粉生活力测定(终)

花粉发芽试验观察记载表
品种
培养 基配
方
视野1
视野2
视野3
花粉 总数 (个）
发芽 数(个）
萌发 率(%)
花粉 总数 (个）
发芽 数(个）
萌发 率(%)
花粉 总数 (个）
发芽数 (个）
萌发 率(%)
1
2
3
4
5
花粉活力测定观察记载表
视野1
视野2
视野3
品种
染色 方法
花粉 总数 (个）
染色 数(个）
生活 力(%)
花粉 总数Байду номын сангаас(个）
染色 数(个）
生活 力(%)
花粉 总数 (个）
染色数 (个）
生活 力(%)
1
2
3
4
5
➢花粉发芽率=发芽花粉总数/花粉总数*100
★ 优点：能够统计出百分率，准确度高 ★ 缺点：操作相对复杂，而且花粉发芽条件与实际不完全相 符易受培养基配方的影响导致结果的偏差。
【注意事项】
1.不同种类植物的花粉萌发所需温度、蔗糖和硼 酸浓度不同，应依植物种类而改变培养条件。
2.此法也可用于观察花粉管在培养基上的生长速 度以及不同蔗糖浓度，离体时间，环境条件等因素 对花粉活力的影响。
统计生活力的方法同前。
2 TTC法：
TTC即2、3、5-三苯基四唑氯化物。主要原理在于检验花 粉呼吸过程中脱氢酶的活性。2、3、5-氯化三苯基四氮唑 (TTC)的氧化状是无色的，被氢还原时成红色的TTF。
有活力
（1）取少量花粉放在载玻片上，并在花粉上滴上1~2滴配制液， 用玻璃棒混合盖上盖玻片。 （2）将载玻片置于恒温箱中（35~40℃）约15~20分钟。 （3）在显微镜下观察：凡具有生活力的花粉呈红色，部分丧失生 活力的呈淡红色，无色的是死的和不育的花粉粒。 （4）观察和测定结果：每片观察3个视野，并统计具有生活力的 花粉的百分率。
实验五 花粉发芽试验和 生活力的测定
指导教师：姜喜 2014.6.19
一、实验目的
学习和掌握果树发芽 试验和花粉生活力测 定的技术。
花粉
二、实验原理
果树杂交工作中，往往会遇到父母本花期不遇，必须采 集花粉短暂贮藏，经贮藏的花粉及其生活力如何，必须 经过测定，以保证杂交效果。
正常条件下花粉在雌蕊上萌发的能力，就是花粉的生活 力。
3、碘－碘化钾法
以碘－碘化钾溶液 （ 0.3g 碘＋ 1.3g 碘 化钾溶于 100ml 蒸馏 水）染色后于显微镜 下观察。
有活力
无活力
五、结果与分析
➢ 1、将培养基法和染色法两种方法测得的结果 列表记录，并计算花粉的生活力。
➢ 2、比较测定花粉生活力三种方法的优缺点。 ➢ 3、绘制一花粉粒发芽形态图。
花粉生活力的高低直接影响植物授粉、受精乃至坐果。
三、实验材料与用具
1、材料: 正在开花的植株花粉 2、器具:
盖玻片 载玻片 培养皿 滴管 镊子 解剖针 吸水纸 水浴锅 恒温箱 天平 烧杯 玻棒 电炉 普通显微镜
3、药品:
蒸馏水 硼酸 蔗糖 琼脂 联苯胺 α-奈酚 碳酸钠 过氧化氢 磷酸氢二钠 磷酸二氢钾 氯化三苯基四氮
H2O2 + 酚 过氧化氢酶 醌 +H2O
（无色） （红色、玫瑰红色）
将适量花粉置于载玻片上
先滴1滴甲液，再滴1滴乙液
充分反应
显微镜下镜检计数，红色的为有活力的花粉
★优点：染色法用时短，见效快 ★优点：颜色判断易受个人因素影响，导致结果有较大差
别。
【注意事项】
滴加甲液和乙液后，会 产生大量的气泡，待 气泡基本消失后方可 观察。
3.不是所有植物的花粉都能在此培养基上萌发， 本法适用于易于萌发的植物花粉活力的测定。
4h
密
集
24 h
（二）花粉生活力的测定
1 过氧化物酶法：
具有生活力的花粉含有活跃的过氧化物酶。此酶能利用过 氧化氢使各种多酚及芳香族胺发生氧化而产生颜色，依据颜色 可知花粉有无活性。实验中甲液成分为联苯胺，α-萘酚、碳酸 钠，乙液成分为过氧化氢。
四、实验方法与步骤
（一）花粉发芽试验
配置培养基 （ 1%琼脂+0.01%硼酸+ 5%-20%蔗糖 ）
煮沸溶化
用玻棒分装与凹玻片中
播撒花粉
置于培养皿中20-25℃恒温培养数小时
保持湿度
镜检计数
➢显微镜 ➢隔一定时间检查一次 ➢随机调查5个视野，若发现花粉已发芽时，就记录花粉粒总 数和发芽数，算出平均值，将观察结果填入表内。 ➢花粉发芽的标准：以花粉管伸长超出花粉直径为准。若花 粉发芽率在5%以下，为极弱，不能采用。