毛细管电色谱
第五章 高效毛细管电泳和电动色谱
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3Leabharlann 101三、毛细管凝胶电泳
毛细管凝胶电泳 CGE）：按照试样中各个组 分相对分子质量的大小进行分离的方法。 用途：常用于蛋白质、寡聚核苷酸、核糖核 酸、DNA片段的分离和测序及聚合酶链反应产 物的分析。CGE能达到CE中最高的柱效。
• 毛细管等电聚焦是基于不同蛋白质或多肽之 间等电点的差异进行分离的电泳技术。 • 毛细管等电聚焦最具特色的应用是测定蛋白 质的等电点。在异构酶鉴定、单克隆抗体、 多克隆抗体、血红蛋白亚基等研究中，经常 用毛细管等电聚焦。
五、亲和毛细管电泳
亲和毛细管电泳是利用配体与受体之间存在特异性 相互作用，可以形成具有不同荷-质比的配合物而达 到分离目的。
梯度升压方式对毛细管电泳分离的影响 A. 2kV至25kV，0min，一步升压；B.2kV至25kV，5min，线性梯度 升压. 样品：β-乳球蛋白A，溶菌酶，细胞色素C，肌红蛋白，微白蛋白
二、毛细管及其温度控制
毛细管电泳柱作为分离分析的载体，其材料、 形状、内径、柱长、温度对分离度和重现性都 有影响。
缓冲液中加入添加剂，并让缓冲液与毛 细管充分平衡.如加入阳离子表面活性剂 十四烷基三甲基溴化铵(tetradecyl trimethyl ammonium bromide ,TTAB)， 能在内壁形成物理吸附层，使EOF反向. 添加剂还有聚乙烯亚胺、甲基纤维素 (MC)、十六烷基溴化铵(CTAB)等。
毛细管电泳和毛细管电色谱
其他领域
毛细管电泳还应用于食品分析 、冶金、地质等领域，可用于 金属离子、矿物成分等的分离
和检测。
02 毛细管电泳技术
CHAPTER
进样技术
压力进样
通过施加压力使样品进 入毛细管，适用于大体
积样品。
电动进样
利用电场力驱动样品进 入毛细管，适用于低粘
电解质浓度
影响电场强度和离子迁移率。
温度
影响分子热运动和扩散系数。
毛细管材料和内壁处理
影响样品在毛细管内的吸附和分离效 果。
03 毛细管电泳实验
CHAPTER
实验流程
安装毛细管
选择合适的毛细管，将其插入 仪器，确保密封良好。
运行实验
设定合适的实验参数，如电压、 温度、检测波长等，开始实验。
准备毛细管电泳仪
进系统
用于将样品注入到毛细管中。
实验材料
毛细管
具有微米级内径的玻璃或石英管，是电泳的分离通道。
电解质溶液
用于提供电泳所需的离子环境。
样品
待测物质，需进行适当预处理。
清洗液
用于清洗毛细管和仪器，保持实验的准确性。
04 毛细管电色谱简介
CHAPTER
定义与原理
定义
毛细管电色谱（CEC）是一种将高效电泳分离与高效液相色谱的固定相相结合 的分离技术。
亲和电泳
利用特异性亲和作用进行分离 ，如抗体-抗原、酶-抑制剂等
。
检测方法
紫外可见光谱
利用紫外可见光谱检测分离出的组分。
电化学检测
利用电化学方法对分离出的组分进行检测。
荧光检测
利用荧光物质标记待测组分，通过荧光信号 进行检测。
毛细管电色谱的方法原理与应用课件
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05
毛细管电色谱的未来发展与挑战
微型化与集成化
将毛细管电色谱技术向微型化、集成化方向发展，实现便携式、低成本、高效率的分析设备。
智能化与自动化
引入人工智能、机器学习等技术，实现毛细管电色谱的智能化和自动化分析，提高分析效率和准确性。
新型分离材料的研发
探索和开发新型的分离材料，如纳米材料、多孔材料等，以提高毛细管电色谱的分离效率和选择性。
毛细管电色谱的方法原理与应用课件
目录
contents
毛细管电色谱概述 毛细管电色谱的方法原理 毛细管电色谱的应用 毛细管电色谱的实验技术与操作 毛细管电色谱的未来发展与挑战
01
毛细管电色谱概述
01
02
毛细管电色谱概述
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高效毛细管电泳色谱仪的介绍
高效毛细管电泳色谱仪的介绍前言高效毛细管电泳色谱仪（High Performance Capillary Electrophoresis）简称CE，是一种用于分离、检测和定量小分子有机化合物及生物大分子（如蛋白质、核酸等）的分析仪器。
与传统的色谱技术相比，CE具有分离速度快、分离效果好、耗时少、消耗试剂和样品量少等优点，因此广泛应用于医药、生物、环境等领域的分析和检测。
原理CE是利用毛细管中的电泳作用使样品离子在电场力下向电极运移，通过毛细管壁上的化学修饰、填充剂和区带电荷来实现分离，并通过荧光检测器等检测器来检测和定量分离后的样品成分。
优点分离速度快毛细管内径小，距离相对短，使得样品离子的迁移速率快，从而实现快速分离。
分离效果好毛细管表面可以进行化学修饰和填充剂处理，通过组分间的电荷、氢键、范德华等相互作用，进一步增强样品分离能力。
耗时少样品分离后直接进行检测，无需进一步净化、萃取等操作，减少了样品制备的时间。
消耗试剂和样品量少毛细管内径小，所需样品量和试剂量大大减少，节约了分析成本。
系统组成CE主要由毛细管容器、高压电源、检测器、数据采集系统等四部分组成。
毛细管容器毛细管容器是对样品进行分离的主体，通常是具有内径为5-75μm的管（通过融离池、拉伸等方法得到），通过氧化铟、二氧化硅等材料修饰表面，增加毛细管和分离物之间的作用力和优化分离效果。
毛细管容器通过两端接口一个容纳高压电源的阳光非金属管，并与检测器连接。
高压电源高压电源主要是为毛细管提供足够的驱动力，使样品能够快速通过毛细管，一般的工作电压为2-30kV之间。
检测器检测器通常使用荧光检测器、紫外检测器、折射率检测器和质谱检测器等，常见的是荧光检测器。
荧光探测器最适用于无色或淡黄色的样品，因为它可以通过激发荧光产生亮丽的蓝光来检测和定量测量毛细管中的分离样品。
数据采集系统数据采集系统主要用于记录和处理从检测器输出的信号，并将其转换为可读的图形或数字信号，以便进一步分析和研究。
高效毛细管电泳色谱仪电泳基本概念
高效毛细管电泳色谱仪电泳基本概念一、简介高效毛细管电泳色谱仪（Capillary Electrophoresis, CE）是一种利用电场对带电化合物进行分离的技术。
它可以用来分离带正电荷、负电荷或无电荷的化合物，且在分离过程中不需要添加外部成分，如胶体或分离介质，因此不会改变样品的组成。
CE具有分离速度快、样品消耗少、自动化程度高和分离精度高等特点，在生物、医药和环境等领域得到了广泛应用。
二、电泳原理在CE中，带电荷的样品离子在电场中移动，移动速度与带电离子的电荷数和电场力大小成正比。
由于样品分子的大小、形状和电荷都不相同，它们在电场中的移动速度也各不相同，因此分离出不同成分的样品提供了可能。
CE通过在一根毛细管内施加高电场，使带电离子向着管底方向移动，借此实现所有样品分子的分离。
三、电泳参数CE基本的电泳参数包括电场强度、毛细管内液体pH值、毛细管壁面涂层、电容耦合、温度等。
1.电场强度：CE中的电场强度通常在10-100 kV/m之间，由于呈现出非线性的行为，这个参数对电泳速度和分离能力有着重要的影响。
2.pH值：毛细管内液体pH值的选择和调整是CE中的一个重要环节。
通常选择分析物理化性质相似的缓冲液，以使质氢或氢氧离子浓度在毛细管内始终保持一定水平。
3.微粒衬底：在一些情况下，添加微粒衬底可以增加分离能力和电泳效率，但是同样也会使分辨率降低。
4.温度：温度对分离速度、分离度和电泳峰形都有影响，通常情况下，温度越高，电泳速度会越快。
四、毛细管电泳色谱仪毛细管电泳色谱仪（Capillary Electrophoresis Instrument, CEI）包括注射器、毛细管、高压电源、检测器和控制软件等部件。
其中，注射器和毛细管是CE中最关键的部件。
毛细管通常是由非活性材料制成的，如硅胶或石英玻璃。
常用的检测器包括荧光检测器、紫外-可见光检测器、电化学检测器和质谱检测器等。
五、应用CE在分析各种样品中有着广泛的应用，包括各种生物分子、有机和无机化合物、药物、食品、环境和化妆品样品。
毛细管电色谱技术
毛细管电色起来的一种新型分离分析技术。 按流动相驱动力的不同,可分为 电渗流驱动毛细管电色谱和电 渗流与压力联合驱动的毛细管 电色谱。
毛细管色谱法的应用
目前已用于各种复杂混合物分析， 包括大气及环境污染物质、生物 试样、食品、矿物燃料、宇宙物 质和一些无机物及金属有机物等。
毛细管色谱柱组成
毛细管色谱柱由柱管、压帽、 卡套（密封环）、筛板（滤 片）、接头、螺丝等组成
毛细管色谱柱可分为
多微填空 孔填充心 层充毛柱 空柱细、 心 管 柱 柱 、
毛细管电色谱技术的特点
色谱柱温度极限：一根色谱柱通常有两 个温度极限，温度下限和温度上限。如 果在低于温度下限的条件下实验，得到 的色谱峰又圆又宽(柱效降低)。但是色 谱柱并不会受到什么损坏。这样并不能 发挥色谱柱的正常功能。在达到下限温 度或者高于下限温度时，得到的色谱峰 会有明显的好转。
色谱柱容量：色谱柱容量是指色谱 柱对一种溶质可容纳的最大量值， 一旦超过此数值，该溶质的色谱峰 就会发生畸变，也就是说该溶质超 载。
毛细管电色谱基本原理及设计要求
毛细管电色谱基本原理及设计要求毛细管电色谱是80年代末发展起来的一种新型分离分析技术。
按流动相驱动力的不同,可分为电渗流驱动毛细管电色谱和电渗流与压力联合驱动的毛细管电色谱。
前者可在一般的毛细管电泳商品仪器上进行,是目前研究较多的一类。
在这种电色谱中,既引入了高选择性的色谱固定相,提高了电泳的分离能力,又克服了压力驱动的压力流引起的区带展宽,可以实现高效、高选择性分离。
但是因电渗流的限制,难于驱赶出电泳过程中产生的气泡,实验常因气泡而中断。
在电渗流与压力联合驱动的毛细管电色谱中,液相泵产生的压力流可以将操作中产生的气泡冲出毛细管或者使气体在高压下溶解,不仅是流动相的平均线速度比相同条件下HPLC大,缩短分析时间,而且能减少压力流引起的区带展宽,使分离效率比HPLC明显提高。
若利用HPLC的进样和检测装置,可使其重现性和定量性优于毛细管电泳(CE)。
此外,还能像HPLC那样进行梯度洗脱,使分离能力进一步提高。
因此,有效的梯度洗脱是所开发仪器应有的重要功能。
在电渗流与压力联合驱动的毛细管电色谱中,被分离组分按照它们的容量因子在固定相和流动相之间进行分配,溶质的流动速度决定于它们的电泳淌度、电渗流和流动相的压力。
电色谱的分离选择性包括两部分的贡献[5],即溶质在两相间的分配对分离选择性的贡献和电场作用溶质的泳动对分离选择性的贡献。
当电场的作用与分配的作用相一致时,CEC将表现更高的选择性。
否则两者作用相互抵消,降低分离的选择性。
在相同的表现线速度下,若电场驱动的流向与压力流方向相同,此时电场的作用有助于提高柱效;反之,电场的作用将降低柱效。
所以,选择能使分配与电场协同作用的分离条件对提高选择性和增加柱效都非常重要,这些条件包括电场方向及强度、洗脱液的流速及组成和固定相的种类等。
(上海通微)。
毛细管气相色谱分析法
在环保领域的应用
空气质量监测
毛细管气相色谱分析法可用于检测空气中的有害气体和挥发性有机物，帮助评 估空气质量状况。
废水处理
毛细管气相色谱分析法可用于检测废水中的有害物质，如有机溶剂、农药等， 为废水处理提供技术支持。
在食品药品安全领域的应用
食品添加剂检测
毛细管气相色谱分析法可用于检测食品中的添加剂，确保食品添加剂符合安全标 准。
氢火焰离子化检测器通过燃烧反应将 物质转化为带电粒子，并用电场将其 分离和检测，适用于烃类物质的检测。
定性与定量分析方法
定性分析
通过比较已知物质的色谱特征（如保 留时间）来确定未知物质。
定量分析
通过测量已知浓度标准物质的色谱峰 面积或峰高，利用外标法或内标法计 算未知物的浓度。
03 毛细管气相色谱分析法的应用
毛细管气相色谱分析法
目录
CONTENTS
• 毛细管气相色谱分析法简介 • 毛细管气相色谱分析法的基本理论 • 毛细管气相色谱分析法的应用 • 毛细管气相色谱分析法的实验技术 • 毛细管气相色谱分析法的优缺点及未来发展
01 毛细管气相色谱分析法简介
CHAPTER
定义与原理
定义
毛细管气相色谱分析法是一种分离和分析复杂样品中各组分的方法，利用不同组分在固定相和流动相之间的分配 平衡进行分离，并通过检测器进行检测。
萃取
对于不易溶解的样品，需 要进行萃取操作，以提高 样品的提取效率。
净化
去除样品中的杂质，以提 高色谱分析的准确性和可 靠性。
进样技术
直接进样
将溶解或萃取后的样品直 接注入进样口。
分流进样
通过分流装置将样品分成 两路，大部分样品被排入 废液，小部分样品被引入 进样口。
色谱技术的最新发展
色谱技术的最新发展色谱技术作为一种基础分析技术，在化学、生物和环境等领域有着广泛的应用。
随着科学技术的不断进步，色谱技术也在不断地进行创新和发展，为各种领域的分析提供更为高效、灵敏、准确的方法。
一、毛细管电泳色谱技术的新进展毛细管电泳是一种在细直管道中利用电场对分离物的电荷进行分离的技术，是分子分离与分析的一种重要方法。
目前，毛细管电泳色谱技术已经成为分析生物分子的重要手段之一。
近年来，毛细管电泳色谱技术已经得到了一定的发展，在处理高增益的问题上有了极大的提升。
比如，灵敏的荧光检测器的引入，提供了更高的检测灵敏度和分子选择性，从而使得毛细管电泳色谱技术成为越来越适合生物领域的研究方法。
二、气相色谱质谱联用技术的新进展气相色谱质谱联用技术是通过将气相色谱和质谱联合使用，将两种技术的优点紧密结合在一起，以便实现高分辨率分离和分析化学分子。
最近，气相色谱质谱联用技术在分离和分析复杂物质方面得到了进一步的实践和发展。
利用气相色谱质谱联用技术，可以有效地分离和分析生物、化学和环境研究中的复杂混合物。
同时，由于气相色谱分离和分析具有高速分离和分析能力，因此在分析过程中不需要液相介质，也不易污染和重复分析。
三、液相色谱电喷雾质谱联用技术的新进展液相色谱电喷雾质谱联用技术是将高效液相色谱和电喷雾质谱联合使用，结合了二者的优点，使得它具有了很高的分离和分析能力。
近来，液相色谱电喷雾质谱联用技术得到了更为实际的研究和应用。
针对生物玻璃混合物和高分子化合物的分析，液相色谱电喷雾质谱联用技术已经成为现在最先进和最高效的分析方法之一。
四、离子色谱技术的新进展离子色谱是分析离子材料的一种特殊方法，在分析和检测离子性污染物等领域有广泛的应用。
在过去，离子色谱的使用限于离子物学科学的专家和学者使用，但现在它已经广泛应用于生物、环境和食品等领域。
近年来，离子色谱技术得到了很好的发展。
其新一代离子色谱仪器具有定量高、灵敏度高、速度快和准确性好等特点，从而提供了更广泛的应用前景。
毛细管电色谱技术的研究与应用
有 的数量甚 少 ， 的极难 分辨 ……科 学家们 急需 更高 明 的“ 金 ” 具 和“ 鱼 ” 有 淘 工 捕 的手段 。 纵观 近 ３ ０年来 液相 色谱 的发 展史 ， 柱效 和分 辨率 方 面的重 大突 破并 不 多 。２ ０ 在 ０ ４年 Ｗａ —
ｔｒ 推 出的超高效 液 相色谱 （ Ｐ Ｃ） ｅｓ Ｕ Ｌ 可算 是一个 突破 性 的进展 ， 技 术 使用 １ ７微米 的小颗 粒 该 ． 填料 和超 高压 ， 大提 高 了色谱 分 离 的柱 效 和 分 辨率 。而另 一 个 可 ｌ 和 Ｕ Ｌ 大 三 ｌ Ｐ Ｃ媲美 的 电动 分 离 技术 是 毛细管 电色 谱 。它融 合 了毛 细 管 电泳 的 高效 性 和 高 效 液 相 色谱 的高 选 择性 ， 靠 电 依
“ 细 管 电色 谱 技 术 的研 究 与 应 用 ” 栏 客座 主编 毛 专
上 海 交 通 大学 药 学 院 教 授
阎超
一＼
ห้องสมุดไป่ตู้
引
言
随着人 类基 因组 学落 下帷 幕 ， 生命 科 学领 域 的 “ 金热 潮 ” 蓬 勃兴 起 ， 淘 正 以蛋 白质组 学 、 代 谢组学、 糖组 学等组 学 为代表 的系统 生 物 学要 从 整 体上 研 究 一 个 生 物 或 细胞 的全 体 生物 分 子
的特 征 。不妨把 一个 细胞 放大 而看 成 一 个海 洋 ， 海 洋里 藏 有 多 少 珍 鱼 异兽 ， 的藏 得很 深 ， 这 有
色谱 技术 的研 究 与应用 ” 专栏 。我们 有幸 邀请 到部 分在 毛细 管 电色谱 领 域造 诣 深厚 、 成绩 斐 然
的专家 、 者撰 写 了相关 的学 术论 文 和 综述 。这 些 文 章 囊 括 了 毛细 管 电色谱 的最 新 研 究 和进 学
毛细管胶束电动色谱分离技术
基本原理毛细管电色谱(Capillary electrochromatography, 简称 CEC)是在毛细管中填充或在管壁涂布、键合液相色谱的固定相,然后在毛细管的两端施加高压直流电，在电场作用下产生电渗流(Electroosmotic flow ，简称EOF）,流动相在电渗流的驱动下通过色谱柱。
对中性化合物，其分离过程和HPLC类似，即通过溶质在固定相和流动相之间的分配差异而获得分离；当被分析的物质在流动相中带电荷时，除了和中性化合物一样的分配机理外，自身电泳淌度的差异对物质的分离也起相当的作用。
毛细管电色谱（capillary electro chromatography，CEC）以内含色谱固定相的毛细管为分离柱，兼具毛细管电泳及高效液相色谱的双重分离机理，既可分离带电物质也可分离中性物质。
毛细管电色谱法是用电渗流或电渗流结合压力流来推动流动相的一种液相色谱法。
因此，毛细管电色谱法可以说是HPLC和HPCE 的有机结合，它不仅克服了HPLC 中压力流本身流速不均匀引起的峰扩展，而且柱内无压降，使峰扩展只与溶质扩散系数有关，从而获得了接近于HPCE 水平的高柱效，同时还具备了HPLC 的选择性。
HPLC是用压力驱动流动相。
流速是随填充微粒的大小和柱长而变化的。
流速在管中呈抛物线轮廓，因而造成了色谱峰谱带的展宽，降低了柱效。
而CEC是采用电场推动流动相。
其线速度是与柱的直径和填微粒的大小无关的，因而在毛细管中几乎没有流速梯度。
谱带展宽效应相应的就十分小。
这点是CEC与HPLC的本质差别，也是CEC效率高于HPLC 的根本。
依靠电渗流（EOF）和电渗流结合压力流推动流动相，使中性和带电荷的样品分子根据它们在色谱固定相和流动相间吸附、分配平衡常数的不同和电泳速率不同而达到分离分析。
仪器设备: 毛细管电色谱的早期研究是在改装的CE商品仪器上进行的，随着研究的深入和对研究前景的良好预期，现在已有商品仪器既可进行电泳模式也可方便地进行电色谱研究。
毛细管电色谱
毛细管电色谱
什么是薄层毛细管电色谱
1、薄层毛细管电色谱是一种快速而有效的化学分析方法，它将分析物质分解成多
种成分，并将它们在一定时间内单独检测出来。
2、薄层毛细管电色谱是利用毛细管电色谱仪，将样品被涂覆于毛细管薄膜上，与
氯仿和乙腈混合物并可分离，然后穿过电压控制器，并用电压导电物质来进行分离，然后根据物质的电离性及极性，从而区分不同的物质来计算成分。
3、薄层毛细管电色谱主要分为三部分组成：碳极、流动相、检测器。
碳极和检测
器之间的区别是，检测器在模拟环境中，可分辨各种物质电离性，而碳极只对物质极性有反应。
4、流动相是由氯仿和乙腈两种溶剂混合制成的溶液，可以通过毛细管引入样品，
将物质吸附在毛细管上，充当载体，使物质随电流流动，进行检测分析。
5、薄层毛细管电色谱具有速度快，效率高，分辨能力强等特点，测定结果准确可靠，是现代化学分析中经常提到的分析方法之一。
它已在药物、食品、环境、土壤等领域得到广泛应用。
6、薄层毛细管电色谱操作过程中，应注意安全措施，并正确使用工具，小心操作
样品，以免混杂物质使测定结果受到影响。
色谱分析法和毛细管电泳分析法的基本原理与应用
色谱分析法和毛细管电泳分析法的基本原理与应用在现代化学中，分析技术是不可或缺的一部分。
众所周知，分析技术有很多种类，例如，质谱分析、放射性分析、光谱分析等等。
然而，本篇文章将重点讨论色谱分析法和毛细管电泳分析法这两种分析技术的基本原理与应用。
一、色谱分析法的基本原理与应用色谱分析法是一种从杂质混合物中分离纯化化学物质的技术。
它基于不同组分在特定条件下通过固定相和移动相之间的相互作用，实现组分的分离和定量化分析。
在色谱分析法中，样品溶液被喷洒到固定相上，然后通过移动相流动，不同化学物质因其物理化学性质差异，从而可能在固定相上停留不同的时间，从而被分离。
色谱分析法又分为气相色谱和液相色谱两个主流技术。
1. 气相色谱气相色谱是一种以气体作为载体的色谱技术。
它基于杂质在蒸汽状态下通过固定相时与它相互作用的特定适配关系，实现杂质的分离和定量化分析。
分离组分是根据它们的挥发性、极性、分子量、化学反应性等从样品中引导到固定相上的微小涂层上，通过气流来驱动气溶胶在涂层上的流动。
2. 液相色谱液相色谱是一种以液体作为载体的色谱技术。
它基于样品在液相中分离和移动的特性，通过以固定相对其它组分有不同的吸附性能，完成对有机化合物、药物等成分的分离和提纯。
具体而言，液相色谱的分离过程通过在移动相中加入一种固定相，通过样品流动的压力差在二者中达成交换，样品分子成分被吸附在不同程度的高校固定相上。
那么，色谱分析法有哪些具体应用呢？1. 生物医学分析色谱分析法广泛应用于生物医学分析，并成功用于药物的分析，纯化和鉴定。
比如进口药物中已知的有毒成分，利用气相色谱可以进行快速检测，而液相色谱则可用于肝炎病毒和细胞生化结构的分析。
2. 环境分析色谱技术在环境分析中也有着不可替代的作用。
如有机物质、金属离子、化学反应物等的分离和测定。
其中，危险废物的色谱分离技术得到广泛的应用。
3. 食品质量检测色谱技术在食品质量检测中也有所应用。
它可以用来进行食品添加剂和有害物质的检测。
毛细管电泳的原理
毛细管电泳的原理
毛细管电泳是一种高效液相色谱技术，利用电场的作用将样品中的化合物沿着内径较小的毛细管进行分离和分析。
在毛细管电泳中，有两种常用的电泳模式：毛细管区带电泳和开列电泳。
毛细管区带电泳中，毛细管两端分别注入带有不同荧光标记的样品，再施加直流电场，荧光标记的样品由于在电场作用下带电移动，在毛细管中形成不同带电物质的区带；而在开列电泳中，毛细管中注入样品后，在施加电场的同时使用在线探测器进行实时监测，通过测量峰面积或峰高来判断样品的含量。
毛细管电泳的分离机理主要包括电泳迁移和色谱效应两个因素。
电泳迁移是指样品分子在电场作用下由于带电而移动，其移动速度与电场强度和分子带电量有关；色谱效应是指毛细管内壁与样品分子的相互作用，在毛细管中形成不同的分离机制，如离子交换、氢键作用、静电作用等。
毛细管电泳的原理还与毛细管内径、电场强度、缓冲液pH值
等因素有关。
毛细管内径越小，分离效率越高；电场强度越大，迁移速度越快，但也会增加毛细管的热效应；缓冲液pH值的
选择要根据样品的性质来确定。
在实际应用中，毛细管电泳具有分离效率高、分析速度快、耗样量小、操作简便等优点。
它广泛应用于生物医药、环境监测、食品安全等领域。
同时，还可以与其他技术如质谱联用，进一步提高分析的灵敏度和准确性。
毛细管电泳和毛细管电色谱(ppt)
度量电渗流大小是单位电场下的电渗流速率即电渗淌度
(eo)或电渗速率(ueo)，可用Smoluchowski 方程表示：
eo
o w
ueoeoEowE
u eo
Ld t0
eouE eoL t0d
1Ld E to
Lt U
3.1.3． 电渗流
以电场力驱动产生的溶液EOF，与高效液相色谱中由高压 泵产生的液体流型不同：
3.1.5. 分离原理
电泳和电渗流并存，在不考虑相互作用的前提下，粒子在 毛细管内电介质中的迁移速率是两种速率的矢量和：
uuep ueo (epe)oE
令µapp=µep + µeo，称之为表观淌度，即从毛细管电泳测量 中得到的淌度为粒子自身的电泳淌度和由电渗引起的淌度之
和，并有
ap pepeou/EL trdU Lt
目前有三种方法可以让样品直接进入毛细管：
电动法、压力法和浓差扩散法。
3.2.3. 电源及其回路
电流回路系统包括高压电源、电极、电极槽、导线和电 解质缓冲溶液等。CE和CEC一般采用0 ~ ±30 kV连续可 调的直流高压电源。理想的电源应具备： 1.能输出单极直流高压(一端接地)； 2.电压、电流、功率输出模式任意可选； 3.能控制电压、电流或电功率的梯度； 4.电压输出精度应高于1%。 CE的电极通常由直径0.5~l mm的铂丝制成。 电极槽，即缓冲液瓶，通常是带螺口的小玻璃瓶或塑料 瓶(1~5mL不等)，要便于密封。缓冲液内含电解质，充于 电极槽和毛细管中，通过电极、导线与电源连通，一同 构成整个电流回路。
毛细管电色谱由于引入了色谱机制，其保留机理包括两个 方面:
其一，如同HPLC，基于溶质在固定相和流动间分配过程； 其二，如同CE，基于溶质电迁移过程。CEC容量因子可 用下式表示：
色谱仪的种类
色谱仪的种类
色谱仪是一种分析仪器，根据样品中分子的特性在不同的固定相中进行分离和检测。
根据不同的分离机理和检测方法，可以将色谱仪分为多种类型，如下所述：
1. 气相色谱仪(GC)
气相色谱仪是利用气相作为载气，将样品中的化合物分离并检测的一种色谱仪。
它通常使用毛细管柱或开管柱作为分离柱，具有高分离能力和灵敏度，广泛应用于环境、食品、药物等领域的分析。
2. 液相色谱仪(LC)
液相色谱仪是利用液相作为流动相，将样品中的化合物分离并检测的一种色谱仪。
它通常使用反相柱、离子交换柱、凝胶柱等作为分离柱，可以分离不同极性的化合物，广泛应用于生化、医药、食品等领域的分析。
3. 毛细管电泳色谱仪(CE)
毛细管电泳色谱仪是利用电场作用下，将样品中的化合物分离并检测的一种色谱仪。
它通常使用毛细管作为分离柱，具有高分离速度、灵敏度和分辨率，广泛应用于蛋白质、核酸等生物大分子的分析。
4. 薄层色谱仪(TLC)
薄层色谱仪是利用在硅胶或氧化铝薄层上的分离柱，将样品中的化合物分离并检测的一种色谱仪。
它具有操作简单、分离速度快等优点，广泛应用于天然产物、食品、药物等领域的分析。
5. 水相色谱仪(SC)
水相色谱仪是利用水相作为流动相，将样品中的离子分离并检测的一种色谱仪。
它通常使用离子交换柱、大小排除柱等作为分离柱，可以分离不同离子之间的相互作用，广泛应用于水质、环保等领域的分析。
综上所述，色谱仪根据不同的分离机理和检测方法可以分为多种类型，每种类型都具有不同的适用范围和优点，选择适合的色谱仪是根据分析需求和实验条件来决定的。
毛细管电色谱
毛细管电色谱1. 介绍毛细管电色谱（Capillary Electrophoresis，简称CE）是一种利用玻璃毛细管内的电流和电场力来实现物质分离和分析的方法。
它结合了毛细管电泳和色谱技术的优点，具有高分离效率、快速分析速度、小样本体积和无需柱填充物等优势。
2. 工作原理毛细管电色谱的工作原理基于溶液中离子的迁移速度差异，通过在毛细管内加上电场来引导有电荷的离子在电场中运动。
不同离子由于大小、电荷、空间结构和溶液pH等因素的影响，会以不同的速度游离迁移。
通过测量这些离子的迁移时间和峰面积，可以得到溶液中各组分的含量信息。
3. 仪器结构毛细管电色谱仪主要由电场供应器、样品注射器、分离柱和检测器等部分组成。
•电场供应器：提供所需的电压和电流，用于产生分析电场。
•样品注射器：用于在毛细管内引入待分析的样品，常使用自动进样器实现定量和连续进样。
•分离柱：通过对毛细管内壁表面进行涂覆或改性使其具有特定的分离能力，用于分离混合物中的组分。
•检测器：用于监测分离出的各组分的信号，常见的检测器有紫外吸收检测器和荧光检测器。
4. 分析步骤1.样品准备：将待分析的样品溶解在合适的缓冲液中，同时进行必要的前处理，如蛋白质的还原和糖类的酶解等。
2.样品进样：将样品注射到毛细管中，一般可以使用自动进样器来实现精确的样品进样。
3.分离：通过在毛细管内施加电场，使样品中的离子在电场力和溶液流动力的共同作用下，沿毛细管内壁迁移，实现样品分离。
4.检测：通过检测器监测样品分离过程中形成的信号，如紫外吸收和荧光等，获取样品分离和定量分析的结果。
5.数据分析：根据检测到的峰面积或峰高，结合标准曲线，计算样品中各组分的浓度或含量。
5. 应用领域毛细管电色谱在生物医药、环境监测、食品检测与安全等领域具有广泛的应用。
•生物医药：用于药物分析、蛋白质分析、核酸分析等。
•环境监测：可以分析水体中的微量重金属和有机污染物等。
•食品检测与安全：可以分析食品中的添加剂、农药残留和食品中的有害物质等。
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毛细管电色谱(ＣＥＣ)
近年来发展起来的一种新型微分离分析技术,这种分离模式结合了高效液相色谱(ＨＰＬＣ)和毛细管区带电泳(ＣＺＥ)的特征,溶质可以按多种机制在柱内完成分离。
毛细管电色谱为纳升级技术,适合与质谱(ＭＳ)方法联用。
将ＣＥＣ分离速度快、柱效高和样品、试剂用量少等特点与ＭＳ能提供精确分子量和结构信息、灵敏度高以及专属性强等功能相结合,为复杂生化、环境等样品的定性、定量分析提供了强有力的工具。
（最后的荣耀，丁香园战友）
光色谱：
90年代中期出现的利用辐射力和流体介质分离粒子的新方法,在生物大分子的分离及研究中有广泛应用前景。
光色谱的概念首次由日本福岗九州大学工学院化学工程系的今板藤太郎等人提出,几年来该研究小组在光色谱理论、应用等方面做了许多工作,大大推进了光色谱的发展。
光色谱是指以激光的辐射压力为色谱分离的驱动力,在毛细管中将待分离组分(或粒子)按几何尺寸的大小予以分离的技术。
今板藤太郎等人的研究表明,与其它色谱分离技术相比光色谱具有许多独特之处，以下列举一些：(1)进样简单；(2)改变分离操作条件简单；(3)不需要标准物质对照定性；(4)通过适当地延长测定时间可以比较准确地测定粒子的位置，提高分离度；(5)色谱柱的尺寸可以减小至微米级，可以为微米区域内的化学或分子生物研究提供场所。
（最后的荣耀，丁香园战友）
离子色谱（IC）：
作为高效液相色谱（HP LC）的一种，是分析离子的一种新的液相色谱方法。
由于操作简便，对常见阴阳离子分析的高灵敏度，特别是对阴离子和价态形态分析的突出优点，已广泛应用于环境、电厂、半导体、食品卫生、石油化工和生命科学等领域。
世纪著名色谱学家G.Guiochon认为，近30年来气相色谱（GC）和高压液相色谱（HP LC）取得了辉煌成就。
在GC 和HP LC中；HP LC是应用最广泛，发表文献最多的一个领域。
1977年后，以6%-8%的速度递增，其中离子色谱是最活跃的领域之一。
离子色谱作为实验室中常规分析手段，近几年发展的趋势主要集中在以下几方面：高性能的分离柱和抑制器的研究；减少人为误差，提高自动化程度；离子色谱分析方法成为国家、各行业中某些项目特别是阴离子“标准分析方法”的数量不断增加；增加数据容量和数据集中管理使用。
本文着重讨论第一方面的进展。
分离柱和抑制器是IC的关键部件，一直是IC研究的热点，随着新型离子交换柱填料的发展，IC技术已成功地扩展到复杂基体中有机和无机离子的分析。
新型的高聚物离子交换材料除了离效之外，在pH0-14以及在与水互溶的有机溶剂中稳定。
可用强酸和强碱作流动相，也可在流动相中加入有机溶剂调节和改善分离的选择性以及色谱峰的对称性，缩短疏水性化合物的保留时间，用有机溶剂清洗色谱柱的有机污染物以延长柱子的使用寿命。
IC固定相发展的另一个方向是高容量柱，其离子交换容量较常用柱高10-20倍，可改善弱保留离子的分离和峰形，而且高浓度基体的样品和相邻两峰浓度比高1000：1的样品可直接进样，简化样品的前处理过程。
对羟基（OH-）选择性的新型分离柱，用氢氧化钠或氢氧化钾作流动相，因其抑制反应产物为水，背景电导低，可提高检测灵敏度和减小梯度淋洗时的基线漂移，改善弱保留离子的分离。
这些新型柱填料的问世，改善了分离的选择性，简化了样品前处理步骤，提高了分析结果的准确度。
简单而有效地解决了化学方式或样品前处理方法难以解决的很多问题。
IC对分析化学的突出贡献是阴离子分析，IC已成为分析阴离子的首选方法。
IC的硬件和应用发展很快，最近在硬件上的一项突破是“只用水”，淋洗液因线发生器与自动再生抑制器结合，不用化学试剂，只需高纯水就可完成阴、阳离子的分析。
使用化学试剂，手工配制所需要的浓度的淋洗液一直是液相色谱分析中不可缺少的步骤。
“只用水”仅需点击计算机鼠标即可得到所需浓度的淋洗液。
“只用水”，不仅免用化学试剂、消除化学试剂杂质和大气中二氧化碳溶入碱性溶液的干扰，而且可排队由于配制溶液操作和人为因素等所引起的误差，使分析结果的精密度和准确度明显提高。
“只用水”装置简单，但包含了综合性的高科技。
其基本原理是在氢氧化钾电解池中置入的微形铂金电极（正极）电解水产生的氢离子（H+），推动电解池中的钾离子（K+）通过阳离子交换膜，进入置入铂金阴极的淋洗液发生舱，与阴极电解水产生的羟基（OH-）结合生成IC的淋洗液氢氧化钾（KOH）。
离子交换膜的功能除了允许阳离子（或阴离子）通过之外，还隔离常压区（电解池）与高达210大气压的高压区（泵→分离柱→检测器）。
淋洗液的浓度与外加电流成正比，与泵的流速（泵入的高纯水）成反比。
所需要浓度的淋洗液不再经过泵前的管道和阀门以及泵头。
直接进入分离柱，不仅操作简便，无污染，而且带来另一个突出的优点，使液相色谱中梯度（浓度梯度）淋洗非常简单。
常规梯度淋洗的完成需要用两个或多个高压泵，或者用四通比例阀泵前低压混合。
“只用水”作梯度淋洗也只需点击鼠标。
IC硬件发展的另一个
趋势是用2mm小孔径柱，常用的标准孔柱的内径为4mm。
因为用于小孔径柱的流动相用量较标准孔径柱的用量减少3 -6倍，而且对相同的进样体积，用小孔径柱时的质量灵敏度增加4倍。
但小孔径柱对填料粒度的均匀性、柱管、填充技术以及泵在低流量时的准确度要求更高。
IC的应用发展很快，近年来与有关监管部门合作，在环境、食品卫生等领域提出并公布了一系列标准分析方法。
现在医学已证明馀用水消毒中所产生的副产品，如卤素含氧酸、溴酸、次氯酸和氯酸盐等，对人体有毒害性，一些国家已作为法规必须检测，如美国要求所有自来水公司必须将其作为每天的常规检测项目严格控制其含量。
但方法难度很大，因为在饮用水中氯与卤素含氧酸的浓度差大到5个数量级以上，用特殊选择性的高容量柱不作复杂的化学前处理，就很好的解决了这个问题。
今年9月在法国尼斯召开的国际离子色谱学术报告会上，离子色谱在饮用水分析中的应用是会议三个主要议题之一。
IC应用的一个新的突破是氨基酸分析，对氨基酸的分析一直沿用的方法是用特殊的化学试剂与氨基酸进行柱前或柱后衍生反应，用紫外或萤光检测。
不仅仪器结构复杂，操作费时，而且影响因素多，难以掌握。
新的氨基酸IC直接分析方法不需要柱前或柱后衍生。
基于氨基酸的羧基（-COOH）在强碱性介质中以阴离子形态存在；氨基酸的氨基（-NH2）在电场中可被氧化。
因而直接在高pH稳定的有机高聚物阴离子交换树脂填充的柱上，用氢氧化钾作流动相，阴离子交换分离，脉冲安培检测。
方法操作非常简便，选择性好，灵敏度高。
现代IC仪是涉及多学科的综合性高科技。
与国际水平相比，我们目前的IC仪在硬件和软件方面确实存在不小的差距，特别是消耗性部件分离柱和抑制器的性能差距，使进口仪器占据了国内主要市场。
生物膜色谱技术以生物膜或模拟生物膜为固定相，当混合药物随流动相通过的时候，由于不同物质与膜的作用强度的差别而表现出在膜上的不同保留性能，根据这种差别就可以对它们进行分离分析。
药物在生物膜色谱上的保留体积取决于药物与膜的相互作用、柱上固定化磷脂（或其他脂类尤其是胆固醇、蛋白与磷脂的比例）的量，以及药物与凝胶基质的相互作用等诸多因素。
为了表示药物在生物膜色谱上的保留性能，定义了一个与磷脂的量及药物与基质的相互作用均无关的容量因子，并可由下面的方程式得到：VR－V0＝Ks×A＋C
式中VR为药物在有脂质体或脂微球的色谱柱上的保留体积；V0为药物在无脂质体或脂微球的色谱柱上的保留体积；K s为斜率，容量因子；A为固定化磷脂的量；C为由药物与基质的相互作用所决定（理论上为零）。
用于色谱研究的生物膜主要有三种：固定化膜（IAM）、细胞膜微球以及脂质体。
可用于研究药物与生物膜的相互作用，进行药物的体外筛选和活性评价。
这种技术在国内大连化学物理所的邹汉法研究较多。
最近好像南药的李萍又申请了一项国家自然科学基金。
（bigwatch，丁香园准中级站友）。