细菌菌落总数的测定ppt课件

发育的细菌菌落总数。所以厌氧或微需氧菌、
有特殊营养要求的以及非嗜中温的细菌，由于
现有条件不能满足其生理需求，故难以繁殖生
长。
细菌菌落总数的测定
•
菌落总数并不表示实际中的所有细菌总数，
也不能区分其中细菌的种类，只包括一群在计数
平板琼脂中生长发育、嗜中温的需氧和兼性厌氧
的细菌菌落总数，所以有时被称为杂菌数，需氧
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•
• 1、 平皿菌落数的选择 选取菌落数在30～300之间的平板作为菌落总
数测定标准。每一个稀释度应采用两个平皿， 大于300的可记为多不可计。 •
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•
2、其中一个平板有较大片状菌落生长时，
则不宜采用，而应以无片状菌落生长的平板作
为该稀释度的菌落数；若片状菌落不到平板的
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• 例如：
稀释度 1:100（第一稀释度） 1:1000（第二稀释度）
菌落数
232，244
33，35
232+244+33+35
•
(2+0.1×2) ×10-2
•
=544/0.022=24727
• 四舍五入表示为: 2.5 × 104
细菌菌落总数的测定
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五、 步骤
• (一) 取样、稀释和培养 1、 以无菌操作取检样25g（mL），放于
225mL灭菌生理盐水或磷酸盐缓冲液 的灭菌玻璃 瓶内（瓶内预置适量的玻璃珠）或灭菌乳钵内， 经充分振荡或研磨制成1:10的均匀稀释液。
•
固体和半固体检样在加入稀释液后，最好
置灭菌均质器中以8000～10000r/min的速度处理
次即换用1支1 mL吸管。
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•
4、根据标准要求或对污染情况的估计，
选择2～3个适宜稀释度，分别在制作10倍递增
稀释的同时，以吸取该稀释度的吸管移取1ml稀
释液于灭菌平皿中，每个稀释度做两个平皿。
•
同时分别取1ml稀释液（不含样品）加
入两个灭菌平皿内作空白对照。
•
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•
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四、 流程
• 1、检样 • 2、做几个适当倍数的稀释液 • 3、选择2~3个适宜稀释度各1 mL,分别加
入灭菌平皿内 • 4、平皿内倾注15～20 mL琼脂培养基，混
匀 • 5、36 ±1℃培养48±2小时或（24±2）小时 • 6、记录稀释倍数和相应的各平板菌落数量 • 7、 计算菌落细总菌菌落数总数的测→定 报告
一半，而其余一半中菌落分布又很均匀，则可
以计算半个平板后乘以2，以代表一个平板的菌
落数。
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•
3、当平板上有链状菌落生长时，如
呈链状生长的菌落之间无任何明显界限，则
应作为一个菌落计，如存在有几条不同来源
的链，则每条链均应按一个菌落计算，不要
把链上生长的每一个菌落分开计数。
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食品微生物学检验 菌落总数的测定
细菌菌落总数的测定
• 一、 目的
• 1、 学习并掌握食品中菌落总数测定方法和 原理。 2 、了解菌落总数测定在对被样品进行卫生学 评价中的意义 。
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二、原理
•
细菌数量的表示方法由于所采用的计数
方法不同而有两种：菌落总数和细菌总数。
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5 、稀释液移入平皿后，将冷却至46℃琼
脂培养基注入平皿约15～20ml，并转动平皿，
混合均匀。
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•
6、 待琼脂凝固后，翻转平板，置36±1℃温
箱内培养48±2h，水产品30±1℃温箱内培养72±3h。
•
如样品中可能含有在琼脂培养基表面弥漫生
长的菌落时，可在凝固后的琼脂表面覆盖一薄层琼
• （三）菌落总数的计算
• 1、若只有一个稀释度平板上的菌落数在适宜
计数范围内，计算两个平板菌落数的平均值，再 将平均值乘以相应稀释倍数，作为每g（mL）中 菌落总数结果。
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• 2、若有两个连续稀释度的平板菌落数在适宜计
数范围内时，按如下公式计算： N=∑C/（n1+0.1n2）d…………（1 ) 式中： N ― 样品中菌落数； ∑C ― 平板（含适宜范围菌落数的平板）菌落数 之和； nl ― 第一个适宜稀释度平板数； n2 ― 第二个适宜稀释度平板数； d ― 稀释因子（第一稀释度）。
• 1、菌落总数
•
是指食品检样经过处理，在一定条件下
培养后，所得1g或1mL检样中形成的细菌菌落
总数。以 CFU/g（mL）来表示。
•
一定条件包括培养基成分、培养温度和时
间、pH、是否需要氧气等。
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•
按国家标准方法规定，即在需氧情况下，
36 ±1℃培养48±2 h，能在平板计数琼脂上生长
菌数等。
•
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•
菌落总数主要作为判别食品被污染程度
的标志，也可以应用这一方法观察细菌在食品
中繁殖的动态，以便对被检样品进行卫生学评
价时提供依据。
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•
食品中细菌菌落总数越多，则食品含有
致病菌的可能性越大，食品质量越差；菌落总
数越小，则食品含有致病菌的可能性越小。须
配合大肠菌群和致病菌的检验，才能对食品做
脂培养基（约4毫升），凝固后培养。
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• （二） 菌落记录方法 做平板菌落数记录时，可用肉眼观察，必要
时用放大镜检查，以防遗漏。在记下各平皿的菌 落总数后，求出同稀释度的各平板平均菌落数。 • 到达规定培养时间，应立即计数。如果不能 立即计数，应将平板放置于0～4℃，但不要超 过24h。
1～2min，制成1:10的均匀稀释液。
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•
2、用1 mL灭菌吸管吸取1:10稀释液1
mL，沿管壁徐徐注入含有9 mL灭菌生理盐水
或磷酸盐缓冲液的试管内，振摇试管或反复吹
打混合均匀，制成1:100的稀释液。
•
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•
3 、另取1 mL灭菌吸管，按上项操作顺
序，制10倍递增稀释液，如此每递增稀释一
出较全面的评价。
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• 2、细菌总数
•
指一定数量或面积的食品样品．经过适
当的处理后，在显微镜下对细菌进行直接计数
。其中包括各种活菌数和尚未消失的死菌数。
细菌总数也称细菌直接显微来自百度文库数。通常以1 g或
1 mL样品中的细菌总数来表示。
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三 、 材料
• 1、 食品检样 2、 培养基 平板计数培养基，无菌生理盐水或磷酸盐缓冲 液 3、 其它 无菌培养皿，无菌吸管，电炉、恒温培养箱等。