重组糜蛋白酶(人源)
上海雅心生物技术有限公司
重组糜蛋白酶（人源）
Cat. No.:RCT10 CAS: 9004-07-3 EC: 3.4.21.1
来源：重组人糜蛋白酶，基因工程生产，大肠杆菌表达
1.简介
重组糜蛋白酶是利用大肠杆菌表达系统表达，经HPLC 纯化所得的一个丝氨酸内肽酶，其氨基酸序列与人糜蛋白酶相同。重组糜蛋白酶可选择性水解芳香族氨基酸如：酪氨酸、苯丙氨酸和色氨酸的C 端形成的肽键，也可以较慢的速率缓慢水解由亮氨酸和蛋氨酸形成的肽键，也可作用于敏感氨基酸形成的酯。糜蛋白酶的最适pH7.0--9.0。
2.优势
? 无动物源性：重组生产，无外源性的病毒污染，如猪流感病毒、猪细
小病毒等。
? 纯度高：无其它杂酶污染：酶切反应无其它副反应。
? 稳定：冻干粉，易于储存和运输；批量生产，产品质量稳定。
3.特性
来源 重组大肠杆菌 纯化 HPLC
产品性状 白色或类白色冻干粉 比活
≥1000 unit/mg pro 纯度 (HPLC) > 95% 分子量
26,950 Da
酶活定义：25℃，pH7.0，1分钟催化1μmol N -乙酰-L-酪氨酸乙酯水解的酶量为一个酶活单位。
4.用途
单独使用，或与其他蛋白酶共同作用消化蛋白，或其他特殊用途，如有机相合成等。
5.推荐使用方法
使用1mM HCl 或50mM HAc 溶解成1mg/ml--10mg/ml ，两天内使用完毕，若需长期保存，保存于-20℃以下。
6.储存
重组糜蛋白酶冻干粉存于2℃-8℃，24个月稳定，溶解以后，存于-20℃以下。
7.相关产品
重组羧肽酶B ； 重组人胰蛋白酶。
胰蛋白酶分离工艺
1、集落刺激因子（G-CSF ） 组成结构：是一种含有二硫键的单链糖蛋白，由175个氨基酸残基组成的单链非 糖基化多肽链 理化性质：①性状：无色澄明液体 ②分子量：20000，等电点为5.8～6.6 ③溶解度： ④稳定性： 生理作用与临床适应症：作用于造血祖细胞，促进其增殖和分化，其重要作用是 刺激粒、单核巨噬细胞成熟，促进成熟细胞向外周血释放，并能促进巨噬细胞及 噬酸性细胞的多种功能 ，主要用于预防和治疗肿瘤放疗或化疗后引起的白细胞 减少症， 分离纯化工艺： G-CSF 为无菌冻干粉剂，由含有10mM 醋酸钠pH 为4的蛋白溶液经0.2um 过滤后 分装冻干。 由含有高效表达人G-CSF 的原核表达系统（E.coli ）经发酵、分离和高度纯化后 经冻干制成。 纯化液聚乙二醇浓缩洗脱液柱层析透析液透析缓冲液溶解沉淀沉淀蛋白质盐析洗脱液纤维素柱层析透析液透析 缓冲液溶解沉淀饱和度至加入硫酸铵透析液透析滤液超滤浓缩正常成人尿液150 ephadexG -%8020000 S DEAE 2、超氧化物歧化酶（SOD ）： 组成结构： 理化性质：①性状：淡蓝色冻干粉结晶体 ②分子量：32000左右 ③溶解度： ④稳定性：耐热性强，90℃ 环境120分钟酶活几乎没有损失，100℃环境60分 钟酶活保持90%以上；稳定性高，在pH4.0—11.0范围内酶活稳定。 生理作用与临床适应症：是一种能够催化超氧化物通过歧化反应转化为氧气和过 氧化氢的酶，是一种重要的抗氧化剂，保护暴露于氧气中的细胞 分离纯化工艺： 血液预处理,洗涤红细胞和溶血;去除大部分杂蛋白得SOD 粗品;再经柱层析分离 得到精品。猪血经血液预处理、洗涤红细胞、溶血、乙醇一氯仿混合液除去血红 蛋白，然后用坟柳043HZO 萃取、丙酮沉淀、55一65℃热变性得到粗酶液。粗酶 液上阴离子DEAE 一Cellulose52交换层析柱、分子筛SephadexG-75柱,最终获 得了纯化的铜锌超氧化物歧化酶。
重组融合人血清白蛋白-人白介素-2+C125A突变体在毕赤酵母中的表达
５９８食品与生物技术学报第２９卷 的产物，经ＥｃｏＲＩ和ＮｏｔＩ双酶切得到长约２．２ｋｂ 的插入片断和长约９．３ｋｂ的载体片断，表明融合基 因已经成功插入到载体ｐＰＩＣｇｋ中。质粒测序结果 显示，全部序列没有发生突变，与预期一致。 １．ＧｅｌｅｘｔｒａｃｔｉｏｎｏｆＩＬ２ｍｌ２．ＧｅｌｅｘｔｒａｃｔｉｏｎｏｆｐＢｌｕｅ／ ＨＳＡ，３．ＤｉｇｅｓｔｉｏｎｏｆｐＢＨＩｍｗｉｔｈＥｅｏＲＩ＃４．Ｄｏｕｂｌｅｄｉｇｅｓ— ｔｉｏｎｏｆｐＢＨＩｍｗｉｔｈＥｃｏＲｌ／Ｎｏｔｌ；Ｍ．ＸＤＮＡ／ＨｉｎｄⅢＭａｒｋｅｒ 圈１重组质粒ｐＢＨｌｍ的酶切分析 Ｆｉｇ．１Ｒｅｓｔｒｉｃｔｉｏｎａｎａｌｙｓｉｓｏｆｔｈｅｒｅｃｏｍｂｉｎａｎｔｐｌａｓｍｉｄ ｐＢＨｌｍ ３．３阳性转化子的筛选及诱导产物的Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ鉴定 质粒ｐＰＨＩｍ经ＳａｌＩ酶切，回收线性化片断，电 击转化Ｐ．ｐａｓｔｏｒｉｓＧＳｌｌ５感受态细胞。涂布ＭＤ 平板，３０℃培养４ｄ后共长出了约４００个转化子，挑 选其中２００个菌落进行初筛，选其中表达量较高的 １０株重组菌进行复筛验证，得到一株产量最高的重 组菌Ｐ．ｐａｓｔｏｒｉｓＧＳｌｌ５／ｐＰＨＩｍ，诱导３ｄ后上清液 的ＳＤ§ＰＡＧＥ分析和Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ结果如图３ 所示。 ３’ＡＩＬ２ｍ １．ＤｉｇｅｓｔｉｏｎｏｆｐＰＩＣ９ＫｗｉｔｈＥｃｏＲｌ；２．ＤｉｇｅｓｔｉｏｎｏｆｐＰＨＩｍｗｉｔｈ ＥｃｏＲＩ；３．ＤｏｕｂｌｅｄｉｇｅｓｔｉｏｎｏｆｐＰＨＩｍｗｉｔｈＥｃｏ—Ｒｌ／ＮｏｔＩ；Ｍ．）．ＤＮＡ／ＨｉｎｄⅢＭａｒｋｅｒ 图２重组质粒ｐＰＨＩｍ的物理图谱（Ａ）和酶切分析 （Ｂ） Ｆｉｇ．２ＰｈｙｓｉｃａｌｍａｐＩＡ）ａｎｄｒｅｓｔｒｉｃｔｉｏｎａｎａｌｙｓｉｓ（Ｂ）ｏｆ ｔｈｅｒｅｃｏｍｂｉｎａｎｔｐｌａｓｍｉｄｐＰＨｌｍ 研究发现，表达的蛋白质的相对分子质量约为８２０００，与理论计算ＨＳＡ－ＩＬ２ｍ的相对分子质量相 符，且这一位置的蛋白与１１．－２、ＨＳＡ的抗体都能发 生免疫反应，进一步证实酵母经诱导表达ＨＳＡ— ＩＬ２ｍ。但７００００和４５０００这两处的降解条带又都 可以与ＨＳＡ的抗体发生免疫反应，认为是融合蛋 白降解所产生的条带。经白蛋白测定试剂盒测得 其中白蛋白融合蛋白的量约为６０．２ｍｇ／Ｌ（以 ＨＳＡ—ＩＬ２ｍ计）。 ３．４诱导产物的活性测定 发酵液经脱盐处理后，冻干保存。取０．１ｍｇ冻干粉用２ｍＬＰＢＳ复溶后，离心取上清，测得其中 融合蛋白的量约为３００／－ｇ／ｍＬ。采用ＩＬ－２依赖细 胞株ＣＴＬＬ一２以标准品ＩＬ－２为对照，对上清液中的 融合蛋白的生物学活性进行了测定。标准品的活 性为２×１０５ＩＵ／ｍＬ，用ＲＰＭｌｌ６４０稀释到浓度为 ２００ＩＵ／ｍＬ。测定结果表明，上清液中的融合蛋白 可以有效的刺激ＣＴＬＬ－２细胞增殖。以标准品的 最高浓度ＯＤ啪值为１００ｏ／６，计算标准品、样品梯度 百分率。将百分率换算为概率单位，以概率单位为 纵坐标，以稀释度Ｘ的对数为横坐标，绘制直线回 归图（图４），通过计算得出融合蛋白粗蛋白的比活 性为１．５１×１０６ ＩＵ／ｍｇ。
重组人胰蛋白酶
重组人胰蛋白酶 Cat. No.: RHT03 CAS: 9002-07-7 EC:3.4.21.4 来源：人胰蛋白酶，基因工程生产，大肠杆菌表达 1. 重组生产，无动物源性 重组人胰蛋白酶，氨基酸序列及性质与人胰蛋白酶完全相同。无动物源性，无病毒污染。可用于干细胞治疗、肿瘤的细胞治疗等过程中，无抗原性。 2. 优势 安全性高 重组生产，无动物源性的病毒污染，如猪流感病毒、猪细小病毒等； 特殊工艺，无内源性病毒污染，无细菌、真菌、支原体污染； 冻干粉，运输及储存安全，活性不易损失； 不含任何蛋白酶抑制剂，如PMSF等。
?纯度高 HPLC纯化； 活性特异，无其它蛋白酶活性。 ?活性高 比活性不低于2500 USP u/mg。 3.用途范围 胰蛋白酶是一种内肽酶，可用于赖氨酸及精氨酸C末端剪切肽键，从而将大分子蛋白裂解为小肽。 胰蛋白酶广泛用于各种生物技术过程中，如：细胞培养各种组织的细胞分离；变性蛋白质的降解；蛋白质的酶解、测序；干细胞、肿瘤的细胞治疗等。 4.特性 来源重组大肠杆菌 纯化HPLC 产品性状白色或类白色冻干粉 纯度（HPLC）≥95% 比活不低于2500 USP u/mg 其他酶含量无糜蛋白酶、羧肽酶A等污染及活性 不含任何蛋白酶抑制剂无PMSF、EDTA等任何蛋白酶抑制剂
5.信息 产品名称比活包装产地 重组人胰蛋白酶≥2500 USP u/mg10mg,100mg,1g上海雅心 活力单位：25℃，pH7.6，反应体系3.0ml (1cm 光路)，每分钟酶解BAEE使253nm下的吸收值增加0.003定义为一个USP单位。 6.相关产品 重组猪胰蛋白酶； 重组胰蛋白酶细胞消化液。
关于重组人血白蛋白的系统性表述
关于重组人血白蛋白的系统性表述 人血白蛋白（HSA）作为一种重要的临床急救药物及重要的药物辅料，在医药，科研及化妆品生产等领域应用广泛。随着国内医疗水平及居民收入水平的提升和对血液制品认知度的提高，血液制品的临床使用量不断增加，市场容量不断增长，行业快速发展。根据国家医药管理局的报告，2010年全国16城市医院血液系统用药金额约62亿元，其中白蛋白类药物占据了血液制品的主要份额（大于50%）。但作为一种血液制品，HSA同时也面临原料短缺及病毒污染等缺陷的影响。 用基因工程重组人血清白蛋白（rHSA）替代HSA是国际上公认的最有前途的高新技术途径。 一．什么是重组人血白蛋白 1.定义 通过基因重组的技术将目的蛋白的基因克隆后，将该基因插入到某种生物（如细菌、酵母、植物，哺乳动物细胞等）中进行复制，然后收集的白蛋白称为重组人血白蛋白。 2.rHSA的等级分类 按不同的质量标准分为了培养基级、药用辅料级和药用注射级（药用级）三类，三类级别的重组人血白蛋白生产工艺相同，但最终控制参数不同，药用级白蛋白质量标准最高。 3.rHSA的表达系统分类 白蛋白(Human Serum Albumin,HSA)是一组复杂的大分子蛋白质，必须经过正确的折叠、组装和翻译后修饰，才能赋予其特定的结构和功能，表达系统是重组人血白蛋白生产过程中极其重要的环节。 （1）原核表达系统 HSA基因最早就是在原核生物大肠杆菌(E.coli)中表达成功的，Lawn等于1981
年首次报道了rHSA的cDNA序列并首次构建了第一个表达rHSA的表达载体pHSA，然后在E.coli中表达成功，表达量为细胞总蛋白的7%，但E.coli表达系统体外很难正确折叠和组装结构复杂的HAS，缺乏翻译后的修饰和加工，表达的蛋白多形成包涵体，且纯化较难，所以未能得到有生物功能的蛋白，细菌细胞壁脂多糖还会造成热反应。因为HSA在原核生物中表达量不高且分泌效果不够理想，所以研究的重点转向其在真核生物细胞中的表达。 （2）酵母表达系统 酵母作为单细胞真核生物，既具有原核生物的容易培养、生长繁殖快、相对易于进行基因工程操作等优点，还具有原核生物缺少的其他优点，如蛋白质翻译后修饰和加工以获得有生物活性的重组蛋白，表达量和分泌量较大，易于产业化培养，非常适合白蛋白及其他非糖基化血浆蛋白的大规模制备。 研究者们用到的酵母表达系统有毕赤酵母(Pichia pastoris)、酿酒酵母(Saccharomycescerevisiae)、汉逊酵母(Hansenula polymorpha)、克鲁维氏酵母(Kluyveromyces lactis)等。在酿酒酵母中，Okabayashi等通过构建在染色体LEU2和HIS4位点上整合的质粒获得能连续分泌rHSA的稳定转化株，每升培养基达到85mg rHSA。 毕赤酵母表达量和分泌量高且稳定，自身分泌蛋白量小，作为基因表达系统研究和使用的最多，已基本掌握其生长规律及大规模高密度发酵技术，被认为是最有发展前景的蛋白质生产工具之一。毕赤酵母非常适合人血白蛋白等非糖基化血浆蛋白的大规模制备，成为目前rHSA的主要表达系统。 （3）其他表达系统 作为“生物反应器”的转基因动物自1987年以来就引起学者们广泛的关注。就生产rHSA来说，最理想的表达场所是乳腺，因为乳腺是外分泌器官从而不会影响转基因动物本身的生理，表达的蛋白能经过充分的翻译后修饰加工，组织细胞密度高从而分泌水平高，目标蛋白纯化相对容易。2000年黄淑帧等通过
重组人源胶原蛋白(RHC)原料及终端产品项目可行性研究报告模版
中咨国联｜出品二〇二〇年五月
目录 第一章总论 (6) 1.1项目概要 (6) 1.1.1项目名称 (6) 1.1.2项目建设单位 (6) 1.1.3项目建设性质 (6) 1.1.4项目建设地点 (6) 1.1.5项目负责人 (6) 1.1.6项目投资规模 (6) 1.1.7项目建设规模 (7) 1.1.8项目资金来源 (7) 1.1.9项目建设期限 (7) 1.2项目建设单位介绍 (8) 1.3编制依据 (8) 1.4 编制原则 (9) 1.5研究范围 (10) 1.6主要经济技术指标 (10) 1.7综合评价 (11) 第二章项目市场分析 (12) 2.1建设地经济发展概况 (12) 2.2我国重组人源胶原蛋白（RHC）原料及终端产品行业发展状况分析 (13) 2.3我国重组人源胶原蛋白（RHC）原料及终端产品行业发展趋势分析 (14) 2.4市场小结 (15) 第三章项目建设的背景和必要性 (16) 3.1项目提出背景 (16) 3.2项目建设必要性分析 (17) 3.2.1有利于促进我国重组人源胶原蛋白（RHC）原料及终端产品工业快速发展的 需要 (18) 3.2.2提升技术进步，满足重组人源胶原蛋白（RHC）原料及终端产品行业生产高 品质产品的需要 (18) 3.2.4符合《中国制造2025》“三步走”实现制造强国战略目标 (19) 3.2.5提升我国重组人源胶原蛋白（RHC）原料及终端产品产品研发和技术创新水 平的需要 (20) 3.2.6提升企业竞争力水平，有助于企业长远战略发展的需要 (20) 3.2.7增加当地就业带动产业链发展的需要 (21) 3.3项目建设可行性分析 (21) 3.3.1政策可行性 (21) 3.3.2技术可行性 (22)
02-重组赖氨酰内切酶 重组赖氨酰肽链内切酶(Lys C)
重组赖氨酰内切酶 ? 产品简介 赖氨酰内切酶（Lysyl Endopeptidase ，EC 3.4.21.50）属于丝氨酸蛋白酶，可特异性切割赖 氨酸残基羧基端的肽键。赖氨酰内切酶广泛用于 生物制药、生物分析、细胞培养等领域。 冀百康生物的系重组大肠杆菌表达、经多步分 离纯化后冷冻干燥而制成冻干粉，具有天然赖氨 酰内切酶相同的活力和特异性。本品为生物化学级别的基因工程酶，不含DFP 、PMSF 和TLCK 等酶抑制剂。丝氨酸蛋白酶抑制剂如PMSF 等抑 制酶活，但金属离子螯合剂如EDTA 不会抑制酶活。本品为无标签的赖氨酰内切酶，与天然的赖氨酰内切酶具有相同的氨基酸序列。 一种高纯度、高活性、高特异性的重组蛋白水解酶 ? 产品特性 活力单位：30℃， pH9.5条件下，每分钟催化底物生成1μmol 对硝基苯胺的酶量为1AU 。 ? 产品优势 ● 无动物源性：产品无病毒污染，生产过程不 使用任何动物来源的材料。 ● 符合BP2019和EP8.8的标准。 ● 耐受性强：广泛的pH 耐受，较强的表面活 性剂耐受性。 ● 生产规模1000L 以上。 ● 质量稳定：可保证连续稳定的批量生产，批 间质量差异小。 ● 合规性：生产设备和生产环境符合相关法规 要求，符合GMP 指导原则。 ● 质量文件完整：按客户需求，可提供相关法 规支持文件。
SDS-PAGE电泳图谱35KD 27KD ?产品用途 ●蛋白药物的生产，如胰岛素及类似物生产， GLP-1类似物生产。 ●蛋白质结构与功能研究，如蛋白质质谱、测 序、肽图谱分析。 ●小分子蛋白或多肽的生产，如美容肽，抗菌 肽、食品风味肽的生产等。 ●Lys-X化合物的酶催化合成。 ●干细胞、原代细胞的培养，作用更加温和。 ?使用方法 ●推荐使用pH8.0~10.0的20mM Tris-HCl 溶 解冻干粉，酶：融合蛋白=2~100AU：1g， 最适pH9.0-10.0，最适温度25-35℃，反应 时间2~18h。 ●注意事项：高于0.1M的无机盐对酶活性会 有一定的影响，建议脱盐后再进行酶切反 应。如无法脱盐，建议增加酶的用量并延 长酶切时间。 ?产品规格 ?运输和储存稳定性 ●运输稳定性：冰袋保温运输，保证酶活稳定。 ●储存稳定性：于-15℃~ -20℃储存，24个月内 稳定；当Tris-HCl缓冲液配制成酶溶液时，于-20℃储存反复冻融10次无活性损失，在4℃和-20℃能稳定存放一周。 ?相关产品 重组赖氨酰内切酶（含组氨酸标签）冻干粉；重组胰蛋白酶冻干粉；重组羧肽酶B（含组氨酸标签）。重组赖氨酰内切酶用于融合蛋白的酶切 35KD 27KD
核心原料：生物源胶原蛋白 RHC
生物源胶原蛋白 (关键词：生物源、胶原蛋白、胶原) （备选名称：RHC、酵母胶原蛋白、发酵型胶原蛋白） 1. 生物源胶原蛋白 1.1 生物源胶原蛋白定义 胶原蛋白被称为“骨中之骨，肤中之肤”，是人体最重要的结构蛋白质，约占蛋白总量30%，广泛存在于人体的皮肤、骨骼、肌肉、软骨等组织中，起支撑、修复、保护等重要作用，在肌肤细胞的生长、更新过程中起着重要作用。20岁时真皮层中胶原蛋白含量达70%以上，随着年龄增长，胶原蛋白不断流失，25岁进入流失高峰，40岁时已不足年轻时一半。科学合理的补充胶原蛋白能巩固肌底支撑，提供肌肤营养，起到保湿锁水，滋润皮肤，延缓衰老，消除皱纹等功效。 生物源胶原蛋白，又称RHC（Recombinant Human-source Collagen），是根据人胶原蛋白的结构特性，利用先进生物科学技术和国际领先发酵技术，通过微生物（如活性酵母）高密度发酵，绿色分离纯化工艺生产的一种高分子的生物源蛋白，与人胶原蛋白高度一致。 1.2 生物源胶原蛋白特点 1.2.1 同质性 生物源胶原蛋白是根据人胶原蛋白的特点进行结构设计，因此与人胶原蛋白结构高度一致，生物相容性好，亲和性和渗透性好，无排异反应，不易致敏。1.2.2 无病毒隐患 从动物组织提取的胶原蛋白存在携带病毒的隐患，直接限制了其应用领域。生物源胶原蛋白是利用酵母高密度发酵获得，从根源上避免了病毒隐患，所使用的原料来源可控，成分简单，具有良好溯源性，不存在动物源杂质，弥补了传统胶原蛋白的缺陷，成为更安全的新型高科技胶原蛋白。 1.2.3 纯度高，分子量确切 纯度可达99.5%以上，不含其它杂蛋白。分子量与人胶原蛋白相近，犹如人体自身物质。
(人)胰蛋白酶
重组人胰蛋白酶 Cat.No.:RHT03 CAS:9002-07-7 EC:3.4.21.4 来源：人胰蛋白酶，基因工程生产，大肠杆菌表达 1.重组生产，无动物源性 重组人胰蛋白酶，氨基酸序列及性质与人胰蛋白酶完全相同。无动物源性，无病毒污染。可用于干细胞治疗、肿瘤的细胞治疗等过程中，无抗原性。 2.优势 安全性高 重组生产，无动物源性的病毒污染，如猪流感病毒、猪细小病毒等； 特殊工艺，无内源性病毒污染，无细菌、真菌、支原体污染； 冻干粉，运输及储存安全，活性不易损失； 不含任何蛋白酶抑制剂，如PMSF等。 上海雅心生物技术有限公司
?纯度高 HPLC纯化； 活性特异，无其它蛋白酶活性。 ?活性高 比活性不低于2500USP u/mg。 3.用途范围 胰蛋白酶是一种内肽酶，可用于赖氨酸及精氨酸C末端剪切肽键，从而将大分子蛋白裂解为小肽。 胰蛋白酶广泛用于各种生物技术过程中，如：细胞培养各种组织的细胞分离；变性蛋白质的降解；蛋白质的酶解、测序；干细胞、肿瘤的细胞治疗等。 4.特性 纯化HPLC 产品性状白色或类白色冻干粉 纯度（HPLC）≥95% 比活不低于2500USP u/mg 其他酶含量无糜蛋白酶、羧肽酶A等污染及活性 不含任何蛋白酶抑制剂无PMSF、EDTA等任何蛋白酶抑制剂 上海雅心生物技术有限公司
5.信息 产品名称比活包装产地 重组人胰蛋白酶≥2500USP u/mg10mg,100mg,1g上海雅心 活力单位：25℃，pH7.6，反应体系3.0ml(1cm光路)，每分钟酶解BAEE使253nm下的吸收值增加0.003定义为一个USP单位。 6.相关产品 重组猪胰蛋白酶； 重组胰蛋白酶细胞消化液。 上海雅心生物技术有限公司
【CN109810185A】一种重组人血清白蛋白的分离纯化方法【专利】
(19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请号 201910276004.5 (22)申请日 2019.04.08 (71)申请人 北京蛋白质组研究中心 地址 102206 北京市海淀区中关村生命科 学园生命园路38号 (72)发明人 钱小红 张养军 余谦 张普民 高方圆 焦丰龙 夏朝双 张汉卿 (74)专利代理机构 北京纪凯知识产权代理有限 公司 11245 代理人 关畅 (51)Int.Cl. C07K 14/765(2006.01) C07K 1/36(2006.01) C07K 1/18(2006.01) C07K 1/20(2006.01) C07K 1/30(2006.01) (54)发明名称 一种重组人血清白蛋白的分离纯化方法 (57)摘要 本发明公开了一种重组人血清白蛋白的分 离纯化方法。该方法首先采用热乙醇沉淀法从转 基因猪血浆中对重组人白蛋白进行粗提纯，再利 用两种色谱方法以串联方式进一步精纯化，即先 用阴离子交换色谱法进行第一步精纯化，再采用 反相色谱法或者凝胶色谱法进行二次精纯化。结 果表明，本发明能从转基因猪血浆中分离纯化出 高纯度的重组人血清白蛋白，并有望替代人血清 白蛋白用于临床用药和生化研究中。权利要求书2页 说明书5页 附图3页CN 109810185 A 2019.05.28 C N 109810185 A
权 利 要 求 书1/2页CN 109810185 A 1.一种对含有重组人血清白蛋白的血浆中的重组人血清白蛋白进行分离纯化方法，包括： 1)去除含有重组人血清白蛋白的血浆中的凝血因子和纤维蛋白原后，将所得血浆上清液用热乙醇沉淀法进行粗提纯，得到rHSA粗提取液； 2)将所述rHSA粗提取液脱盐浓缩后，用阴离子交换色谱柱洗脱，收集洗脱液即为第一步精纯化rHSA溶液； 3)将所述第一步精纯化rHSA溶液脱盐浓缩后，用反相色谱柱或凝胶色谱柱进行二次精纯化，即得到rHSA溶液，完成所述重组人血清白蛋白的分离纯化。 2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述含有重组人血清白蛋白的血浆按照如下步骤制得：对含有重组人血清白蛋白的血进行血浆抗凝处理后离心，收集上清液而得； 具体的，所述血浆抗凝处理步骤中，所用抗凝剂为柠檬酸钠水溶液；所述含有重组人血清白蛋白的血与抗凝剂的体积比为15:1～20:1；所述抗凝剂的浓度为70g/L～90g/L； 所述离心步骤中，离心力为1500-2500×g；具体为2000×g；时间为20-40min；具体为30min。 3.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于：所述步骤1)去除含有重组人血清白蛋白的血浆中的凝血因子和纤维蛋白原的方法包括：将所述含有重组人血清白蛋白的血浆冷冻沉淀，解冻后离心，收集上清液，即为所述血浆上清液； 具体的，所述冷冻沉淀步骤中，温度为-30--10℃；具体为-20℃； 所述解冻步骤中，温度为0-10℃；具体为4℃； 所述离心步骤中，离心力为4500-5500×g；具体为5000×g；时间为10-20min；具体为15min。 4.根据权利要求1-3中任一所述的方法，其特征在于：所述步骤1)热乙醇沉淀法包括：将所述血浆上清液与由蛋白保护剂、变性剂、氯化钠和水组成的混合液混匀后，调节pH至 5.0～7.0，在55℃～80℃，恒温保持20～60min，冷却至室温后调节pH至4.0～5.0，静置，一次离心，收集上清，淋洗所得沉淀，再进行二次离心，收集上清，合并两次上清，即为所述rHSA粗提取液。 5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于：所述蛋白保护剂为辛酸钠；所述辛酸钠在由蛋白保护剂、变性剂、氯化钠和水组成的混合液中的浓度为5～10g/L； 所述变性剂为有机溶剂；具体为乙醇；所述氯化钠在由蛋白保护剂、变性剂、氯化钠和水组成的混合液中的浓度为5～9g/L；所述由蛋白保护剂、变性剂、氯化钠和水组成的混合液的体积用量与所述血浆上清液相同； 所述变性剂的用量为所述血浆上清液体积的8％～12％； 所述静置步骤中，温度为室温；时间为1-3h；具体为2h； 所述淋洗步骤中，所用淋洗液为pH值为4.8的蒸馏水； 所述一次离心和二次离心步骤中，离心力为4500-5000×g；具体为5000×g；时间为50-70min；具体为60min。 6.根据权利要求1-5中任一所述的方法，其特征在于：所述步骤2)中，所用流动相A为0.02mol/L Tris-HCl，流动相B为0.02mol/L Tris-HCl+0.3mol/L NaCl； 所用阴离子交换色谱柱为DEAE弱阴离子交换色谱柱；流速为1mL/min；柱温为室温；检 2
简单的认识一下胶原蛋白
简单的认识一下胶原蛋白 一、综述 胶原蛋白是一种生物性高分子物质，在动物细胞中扮演结合组织的角色。为生物科技产业最具关键性的原材料之一，也是需求量十分庞大的最佳生医材料。其应用领域包括生医材料、化妆品、食品工业、研究用途等。现在胶原蛋白正慢慢进入美容护肤领域，慢慢变成了女性的至爱。 胶原蛋白富含除色氨酸和半胱氨酸外的18种氨基酸，其中维持人体生长所必需的氨基酸有7种。胶原蛋白中的甘氨酸占30％．脯氨酸和羟脯氨酸共占约25％，是各种蛋白质中含量最高的，丙氨酸、谷氨酸的含量也比较高．同时还含有在一般蛋白中少见的羟脯氨酸和焦谷氨酸和在其他蛋白质几乎不存在的羟基赖氨酸。所以胶原蛋白的营养十分丰富。 二、胶原蛋白存在的部位 胶原蛋白属于动物性生质，在动物细胞中扮演着粘结功能的角色，广泛存在动物细胞，也是细胞外基质最重要的组成成分，也是动物结缔组织中最主要的一种结构性蛋白质。 人体成分有16%左右是蛋白质，而蛋白质中又有35-45%的胶原蛋白，所以，成年人身体中大约有3公斤胶原蛋白，主要存在的部位有皮肤，肌肉、骨骼、牙齿、内脏（如胃、肠、心肺、血管与食道）与眼睛等。胶原蛋白是人体骨骼、尤其是软骨组织中的重要组成成分。胶原蛋白就像骨骼中的一张充满小洞的网，它会牢牢地留住就要流失的钙质。没有这张充满小洞的网，即便是补充了过量的钙，也会白白地流失掉。通常情况下，骨质总量中的钙、镁、磷等无机物质仅占总量的百分之几，而胶原蛋白等有机物质却要占超过80%。对运动人群来说，关节的不断剧烈磨损会形成软骨损伤，短期内乃至永久地得不到恢复。对一般人来说，在25岁之后，体内的胶原蛋白就开始逐渐流失，尤其是女性，由于年龄造成的体内激素失调，流失的速度要比男性快数倍。因此维持关节和骨骼健康的最佳办法就是及时地补充钙质以及胶原蛋白。 胶原蛋白存在于动物皮肤与骨胳中，如猪皮、牛筋、鸡及鸟的皮肤及骨骼中也含有大量的胶原蛋白。 虽然胶原蛋白来源很多，但目前工业上生产主要来自牛、猪、鸟及鱼的皮肤骨骼与筋肉等。 近年来生物技术学家也尝试以重组DNA（遗传工程）方法，将生产胶原蛋白有关的基因剪接到牛或羊等家畜细胞，借由牛乳或羊乳的分泌，可由乳汁中萃取得到胶原蛋白，这种以“基因转殖动物”（transgenic animals）来生产胶原蛋白的方法叫[动物工厂](animal bioreactor)，但目前仍处于研发阶段，尚未工业生产。 三、胶原蛋白在人体之功能 (一)对皮肤功能：保护、具适当弹性 皮肤可分表皮、真皮及皮下组织三层，最外表为表皮，只有0.2公厘厚，可防止外界异物入侵。由表皮外侧往内，依次是角质层、透明层、颗粒层、有棘细胞层及基底细胞层等五层细部结构，由于基底细胞层会有老旧细胞向上层顶升，大约两个星期左右到达最外层，所以角质层最后会成为污垢而剥落。
胰蛋白酶最适PH及其稳定性
重组胰蛋白酶最适pH和pH稳定性 样品：重组胰蛋白酶（RPT），比活4500USP units/mg pro.（上海雅心生物技术有限公司），纯度如图1所示，BAEE（Sigma）. 图1.重组胰蛋白酶的纯度的SDS-PAGE鉴定 1.最适pH的研究 准备pH为3.0~12.0的底物BAEE（0.25mM），分别测定RPT纯酶液的活性，最后结果表示为测定数值占最高酶活的百分比。缓冲液成分依次为25mM NaAc-HAc(pH3.0~6.0)，25mM Tris-HCl(pH7.0~8.0)，25mM Gly-NaOH(pH9.0~12.0)，所有缓冲液均为25℃下配制。底物在25℃温浴10分钟后，开始测活。 2.pH稳定性的研究 取浓度为10mg/ml纯酶液，分别在pH3.0~12.0缓冲液中稀释10倍，在25℃下温浴2h，取样品测定酶活，以水浴前酶液初始活性作为100%，计算残余活性。缓冲液依次为25mM NaAc-HAc (pH3.0~6.0)，25mM Tris-HCl(pH7.0~8.0)，25mM Gly-NaOH(pH9.0~12.0)，所有缓冲液均为25℃下配制。
图2.a,RPT最适pH曲线；b,RPT的pH稳定性 分别在pH3.0~12.0不同的pH条件下，测定RPT活性。结果见上图2a，最适pH范围是7.0~11.0，而pH为9.0时测得RPT活性为最大值，这与天然提取的猪胰酶不同（天然胰酶最适pH为7.6-9.0），几乎接近极值，确定该值为测活最适条件，但是底物在碱性条件易降解，所以底物尽量要现用现配。 分析不同pH环境对RPT活性的影响，如图2b所示，RPT在pH3.0NaAc-HAc缓冲液里最为稳定。随着pH的升高，RPT酶活的损失程度也随之提高。在测定RPT最适pH值时发现，pH≤5.0底物条件下，RPT蛋白几乎无活性，如图2a所示。而图1b所示，在pH≤5.0的缓冲液中，2小时后依然保持较高的活性。说明在pH≤5.0，RPT稳定，自降解的速率大大降低，酶分子处于相对稳定的状态。此时把酶液转入到pH7.6的测活体系中，此时酶分子的构象瞬间发生变化，重新暴露出活性位点，于是又恢复了活性。此外，RPT对碱性环境有一定时间的耐受性，在pH<9.0环境中，2小时后依然有80%以上的酶活残余，从这一点讲，RPT扩大了胰酶的应用pH范围，有很大的意义。但是pH>10.0环境中，活性损失非常快。
转基因水稻大规模生产重组人血清白蛋白
转基因水稻大规模生产重组人血清白蛋白 由武汉大学生命科学院教授、武汉禾元生物科技有限公司董事长杨代常领衔的研发团队从2006年开始进行植物源替代血浆来源的医药蛋白的 研究与开发，现已取得突破性进展并已跨入规模化生产的阶段，填补了国际上此项技术空白。相关论文于2011年10月31日在线发表于《美国 科学院院报》。该论文在线之际，受到国外Scientist ，Nature news, The Australian, Thomson Reuters, Fox News, Agence France Presse (AFP法新社)等美国、英国、俄罗斯、德国、巴西、印度各专业杂志及媒体的广泛关注和报道。 该研究表明由转基因水稻种子生产的重组人血清白蛋白(OsrHSA)在生理生化性质、物理结构，生物学功能、免疫原性与血浆来源的人血清白 蛋白一致；并建立了大规模生产重组人血清白蛋白的生产工艺，获得了高纯度和高产量重组人血清白蛋白产品。利用大量数据证明了转基因 水稻种子可取代现有基于发酵的表达技术来生产重组蛋白质是经济有效的。正如PNAS 审稿人对该文章的评价：“这篇文章解决了在科学上振 奋人心、在经济上都非常重要的议题－－即用转基因植物生产血浆产品或其他蛋白产品的技术平台，可代替其他基于发酵的表达技术，其重 要性也不言而喻……这篇文章近乎完美地证实了植物生产的医药蛋白和批准临床使用的血浆来源医药蛋白是完全相同的，并提供了翔实数据 证明植物系统规模化容易和成本优势。” 目前，人血清白蛋白(human serum albumin)广泛应用于临床治疗和细胞培养领域。常见的人血清白蛋白大多数从人的血浆中提取，这样的生 产方式不仅受到血浆供应的限制，而且还具有携带病毒传播的高风险性。国际上以重组人血白蛋白替代血源产品的应用已成为趋势，国内市 场需求也逐年扩大，2010年已达150吨。尽管市场广阔，但高纯度重组人血白蛋白的规模化生产技术和质量控制技术却是世界性难题。武汉禾 元历经多年的技术攻关，利用水稻胚乳表达技术平台，研发出国际先进水平的重组人血白蛋白产品生产技术，并成功实现重组人血白蛋白规 模化和产业化，完全摆脱了相关制约，具有纯度更高、无动物组分、安全、高效、绿色环保、廉价、无限量供应等优势。随着植物源重组人 血清白蛋白的发展，我国人血清白蛋白日益紧张的局面必将得到缓解。
医用重组人源胶原蛋白功能敷料(凝胶型)使用说明书
医用重组人源胶原蛋白功能敷料（凝胶型）使用说明书 【产品名称】医用重组人源胶原蛋白功能敷料（凝胶型） 【结构及组成】该产品主要材料为重组人源胶原蛋白，辅以透明质酸钠、甘油和少量防腐剂（尼泊金酯类和苯氧乙醇）。包装材料为医用聚乙烯（或聚丙烯）瓶、玻璃瓶、树脂或铝管。 【产品规格】2g、3g、5g、10g、20g、30g、40g、50g、100g/支（瓶） 【生产xx】xx食药监械生产许号 【注册证号】晋械注准011 【执行标准】YZB/晋0076-2012 【适用范围】 用于面部痤疮的治疗。用于痤疮引起的皮肤红斑、丘疹、脓疱、黑头粉刺、白头粉刺、红血丝及皮肤萎缩变薄等多形性皮损症状。可改善皮肤局部症状，如： 瘙痒、灼热、皮肤紧绷、疼痛。可通过增加皮肤含水量、调节皮肤pH值及油脂重建皮肤屏障功能。用于皮肤屏障功能损伤引起的皮肤干燥脱屑及其他皮肤损伤的修复。预防疤痕形成及色素沉着。重建皮肤屏障功能，改善局部干燥、疼痛、瘙痒等自觉症状。修复激光创面，具有覆盖、止血、促进创面愈合的作用。可抑制创面色素沉着及疤痕形成。 【禁忌症】 1、xx体质者慎用或禁用； 3、化脓性伤口禁用。 【注意事项】
1、产品出现以下情况请勿使用： ①超出产品有效期；②颜色发生改变；③包装出现破损。 2、本品仅供皮肤外敷，切忌口服。 4、将本品放在儿童不能接触到的地方。 【使用方法】 局部外用，每天3次，15天为一疗程。 【包装】本产品为医用聚乙烯（或聚丙烯）瓶、玻璃瓶、树脂或铝管包装。 【贮藏运输】本产品在通风良好、干燥，无腐蚀性、无刺激性气体的室内常温贮存。常温运输。 【生产日期及使用期限】见外包装 【注册人名称】太原锦波生物医药科技有限公司 【生产企业】太原锦波生物医药科技有限公司 【注册地址】太原经济技术开发区经北街18号 【生产地址】太原经济技术开发区经北街18号 【售后服务单位】太原锦波生物医药科技有限公司 【联系方式】 （86） 【传真】
中国药典级重组胰蛋白酶简介
重组胰蛋白酶(液体)—药典级 Cat.No.：RPT0204 CAS：9002-07-7 EC：3.4.21.4 来源：重组猪胰蛋白酶，基因工程生产，与猪胰腺来源的胰蛋白酶氨基酸序列一致。 1.产品简介 胰蛋白酶可特异切割赖氨酸及精氨酸C末端肽键，可降解细胞间结合蛋白。雅心生物生产的重组猪胰蛋白酶的氨基酸序列与猪胰腺来源的胰蛋白酶一致，由重组大肠杆菌表达生产。可替代传统提取胰酶用于疫苗、干细胞、免疫细胞治疗、药物筛选、抗体等领域细胞消化过程。抑肽酶、大豆胰蛋白酶抑制剂等可抑制酶 活力单位：25℃，pH7.6，反应体系3.2ml(1cm光路)，每分钟酶解BAEE使253nm下的吸收值增加0.003定义为一个胰蛋白酶单位（USP）。 4.使用说明 1.溶液配制：重组胰蛋白酶室温下融化，根据COA中的蛋白含量，取适量胰蛋白酶，加入HBSS平衡液（或其他适宜细胞消化的缓冲液，如需要加入EDTA其终浓度推荐0-1mM，最好不超过2mM），推荐一般使用的胰蛋白酶浓度约为0.1-0.3mg/ml（浓度根据不同细胞进行调整），轻柔混匀；该步骤可在室温环境操作； 2.使用0.22μm滤膜对上述胰蛋白酶溶液过滤并转移至无菌容器中；该步骤可在室温环境操作； 3.过滤后的胰蛋白酶溶液应在当天按照要求直接使用（例如加入1ml至T25瓶，37℃消化细胞），该液体可在2-8℃条件下保存1-2周。
4.长期保存:配好的重组胰蛋白酶细胞消化液，若需长期保存，-20℃保存，可稳定保存12个月； 5.稳定性 储存稳定性：重组胰蛋白酶溶液保存在-20℃以下，12个月稳定； 运输稳定性：干冰保温运输，运输过程不融化，活性稳定。 6.产品用途 细胞培养方面： 1.组织块消化，原代细胞获取； 2.贴壁细胞的传代消化； 3.微载体方法培养的细胞消化； 4.干细胞温和消化； 5.免疫细胞治疗等。 重组蛋白方面： 1.重组胰岛素生产； 2.蛋白测序、肽谱图； 3.蛋白组学研究等特异性蛋白酶解过程。 7.相关产品 重组羧肽酶B； 序列分析纯胰蛋白酶； 重组人胰蛋白酶； 重组肠激酶。
提取与重组胰蛋白酶的不同
胰蛋白酶与重组胰蛋白酶药典标准比较 胰蛋白酶药典标准历史 2014年之前，只有从猪或牛胰腺提取的胰蛋白酶的标准，活性标准为2500USP units/mg，目前临床已不应用。在2011年左右，通过了胰蛋白酶:糜蛋白酶（6:1）配方，用于消化道疾病的治疗。在2013年12月出版了修订稿的“用于生物医药制造过程的辅助材料”，重组胰蛋白酶作为一个例子，给出标准。2017年2月，FDA正式颁布胰蛋白酶的药典标准。 2010版中国药典第二部规定: 药品的安全性保障得到进一步加强。凡例中规定所有来源于人或动物的供注射用的原料药均增订“制法要求”。在总则十四规定：（1）来源于动物组织提取的药品，其所用动物种属要明确，所用脏器均应来自经检疫的健康动物，涉及牛源的应取自无牛海绵状脑病地区的健康牛群；来源于人尿的药品，均应取自健康人群。上述药品均应有明确的病毒灭活工艺要求以及质量管理要求。（2）直接用于生产的菌种、毒种、来自人和动物的细胞、DNA重组工程菌及工程细胞，来源途径应经国务院药品监督管理部门批准并应符合国家有关的管理规范。 2010版中国药典第三部规定: 2010版药典对安全性问题更加重视。增修订细菌内毒素检查的品种达112种；药典三部增订了逆转录酶活性检查法等。培养细胞用牛血清应来源于无牛海绵状脑病地区的健康牛群，其质量应符合本药典的有关规定；在生物制品生产检定用动物细胞基质制备及检定规程中，应提供细胞培养液的详细成分，如使用人或动物源成分，如血清、胰蛋白酶、乳蛋白水解物
胰蛋白酶重组胰蛋白酶
外观形状白色或类白色溶解性可溶 溶解性可溶生物载量NMT100CFU/ml 微生物限量- 比活力 (USP units/mg pro.) NLT3800 金黄色葡萄球 菌阴性纯度（HPLC） NLT70%β-trysin, NMT20%α -trypsin 绿脓假单胞菌阴性 沙门氏菌阴性 干燥失重不高于5.0% 灼烧残渣不高于2.5% 糜蛋白酶限量不高于5.0% 活性不低于2,500USP units/mg 美国药典中，两种胰蛋白酶的标准的主要不同点: 项目胰蛋白酶2014美国药典 来源 动物来源： 从猪或牛的胰腺提取重组（无动物源性）：DNA来源产品 纯度检测方法无HPLC 活性2,500USP units/mg比活性：3800USP units/mg pro.
在水稻种子中高效表达重组抗胰蛋白酶及其对胚乳发育的影响
在水稻种子中高效表达重组抗胰蛋白酶及其对胚乳发育的影响抗胰蛋白酶是人体血液中浓度最高的一个丝氨酸蛋白酶抑制剂。它在人的肝 脏中合成,主要的生理功能是在肺部阻止嗜中性粒细胞胰肽酶E的活性。 在抗胰蛋白酶基因的一个或几个突变会引起血液中抗胰蛋白酶浓度的降低, 从而产生肺和肝脏的相关疾病,需要终身补充人源抗胰蛋白酶。因为血液来源的 限制和其它的表达体系的重组抗胰蛋白酶表达水平低较低,所以我们应用成熟的 水稻种子表达平台表达重组抗胰蛋白酶。 研究了重组抗胰蛋白酶的纯化工艺,物理、生化特征,药代动力学及亚细胞定 位,并分析了重组抗胰蛋白酶的糖苷修饰结构。由于重组抗胰蛋白酶的表达导致 种子产生异常的表型,我们进一步的对影响种子表型变化的分子机理进行了系统 的研究。 除此之外,通过比较重组抗胰蛋白酶及内源谷蛋白的糖苷修饰结构,分析内 质网胁迫对水稻种子中蛋白质糖苷化修饰的影响。主要结果如下：1.本研究通过 农杆菌双质粒转化的方法得到23个转基因株系,12株可育,其中9个转基因植株 在胚乳中表达重组抗胰蛋白酶,表达量从每千克糙米0.41克到2.24克。 2.MALDI-MS分析重组抗胰蛋白酶分子量发现有40.1KDa、44.8KDa、49KDa 和53.3KDa四个主要的分子量。圆二色分析重组抗胰蛋白酶的二级结构,证明重 组抗胰蛋白酶和人源抗胰蛋白酶有相同的二级结构。 N-端序列分析发现重组抗胰蛋白酶和人源抗胰蛋白酶一样存在N-端序列的 加工,40.1KDa的重组抗胰蛋白酶是N-端序列缺失11个氨基酸,并且不含有糖苷 化修饰的重组抗胰蛋白酶。 3.LC-MS分析重组抗胰蛋白酶的糖苷修饰结构检测到 11种糖苷结构,GN2XFGN2,GN2M4XGNs,GNM3XFGN2,GNM3XGN2, M3XFGN2, M3XGN2,
人血清白蛋白临床治疗的作用
人血清白蛋白临床治疗的作用 人血清白蛋白，当前在临床的治疗方面，可以说它的作用越来越大，有很多的疾病都能通过人血清白蛋白，通过有效的治疗让自己得到有效的康复，所以对于很多的患者，想具体全面了解一下人血清白蛋白的临床治疗的作用，为了你们全面了解，就来一起看看下面介绍。 “人血清白蛋白”，临床上是治疗烧伤、休克、肝腹水、肝硬化、肾水肿、脑水肿等疾病的“黄金救命药”，并可用于癌症、艾滋病的辅助治疗，是疫苗生产、干细胞培养的重要原料。眼下，它只能从血浆中提取，缺口极大。而现在，在中国能让它从大米里“长”出来。 人血清白蛋白是我国的一线大宗临床用药的重大品种，国际市场上需求大约600吨/年;我国临床需求约为215吨/年左右。随着我国预防为主的医药策略的推进，疫苗生产的需求将增至60-70吨，因而我国的人血清白蛋白需求将达到近300吨/年左右。而我国供应量仅能满足市场的1/3，人血清白蛋白在医院里
已是“一药难求”，一些重要疾病因人血清白蛋白的短缺不能得 到有效治疗，尤其是我国肝病的重灾国家，有肝炎引起的肝硬化腹水病人较多，对人血清白蛋白需求量大。尽管人血清白蛋白加工工艺安全性较好，但仍存在感染肝炎、艾滋等血液病毒的风险;我国曾出现因卖血而造成的艾滋病村的悲剧。 禾元生物利用水稻胚乳细胞作为植物生物反应器表达的植 物源重组人血清白蛋白OsrHSA已通过临床前试验。结果表明与 市售制剂对照品血浆来源的人血清白蛋白相比，植物源重组人血清白蛋白对大鼠和灵长类食蟹猴的毒理学反应与药物代谢动力 学均无显著差别，部分指标甚至优于血浆来源的人血清白蛋白。这是国际上首次通过临床前试验证明植物源重组人血清白蛋白 的药物安全性，为植物源重组人血清白蛋白进入临床试验奠定了基础。OsrHSA已成功实现了规模化和产业化。 人血清白蛋白临床治疗的作用，以上的内容就会很多的患者，介绍了人血清白蛋白的临床治疗，以及它的作用，所以在充分了解后，相信你已经了解了人体血清白蛋白的临床治疗作用，在了解后，如果你得了需要通过这方面治疗的一些疾病，可以尽快选择人血清白蛋白。
重组胰蛋白酶
Cat.No.：RPT0201 CAS：9002-07-7 EC：3.4.21.4 储存温度：2-8℃ 来源：重组猪胰蛋白酶，基因工程生产，大肠杆菌表达。 蛋白序列：氨基酸序列与猪胰腺来源的胰蛋白酶完全一致。 1.产品简介 胰蛋白酶是一种丝氨酸蛋白酶，可特异切割赖氨酸及精氨酸C末端肽键。雅心重组猪胰蛋白酶是由重组大肠杆菌表达生产，氨基酸序列与猪胰腺来源的胰蛋白酶完全一致，重组猪胰蛋白酶具有与动物源性猪胰蛋白酶相同的酶学性质，可替代猪胰腺来源胰蛋白酶应用于各种生物技术过程中。重组胰蛋白酶分子量24kD，最适pH为7.0-11.0。活性受丝氨酸蛋白酶抑制剂如PMSF等的抑制，金属离子螯合剂如EDTA等抑制酶活。 2.产品特性 来源重组大肠杆菌 产品外观白色、类白色、类黄色粉末 比活≥3800USP units/mg pro. 纯度（蛋白电泳）单一主条带 分子量（蛋白电泳）24.0±2.4kDa 活力单位：25℃，pH7.6，反应体系3.0ml(1cm光路)，每分钟酶解BAEE使253nm下的吸收值增加0.003定义为一个USP单位。 3.使用方法 1mMHCl溶解，重组胰蛋白酶浓度为1-10mg/ml。使用时，酶量：目的蛋白=1：50-1：1000，最适pH为7.0-11.0。 4.储存和运输稳定性 储存稳定性：重组胰蛋白酶冻干粉存于2-8℃，24个月稳定； 1mM盐酸或50mM醋酸溶解后储存于-20℃，反复冻融10次，无活性损失。 运输稳定性：蓝冰保温运输，活性稳定。 5.产品优势 ●无动物源性：重组生产，无外源性的病毒污染，生产过程不使用任何动物源原料。 ●质量稳定：批量生产，可保证稳定连续的批次生产；产品批次间无差异，质量稳定。 ●纯度高：比活高；宿主蛋白残留小于生物制品限度要求。 ●冻干粉：易于储存和运输。 ●符合法规要求：生产设备和生产环境符合相关法规要求，生产过程完全遵循NSF ISO9001:2008质量 体系并符合GMP指导原则。 ●质量文件完整：按客户需求，可提供相关法规支持文件。