梅毒血清学检测策略
梅毒血清学检测策略
1.非梅毒螺旋体抗原血清学试验：•原理：梅毒螺旋体破坏宿主细胞释放以及其螺旋体细胞表面释放的类脂物质，刺激机体产生抗类脂抗体（反应素）。
在体外该抗体与心磷脂、卵磷脂和胆固醇组成的抗原反应，形成凝集反应。
•方法：VDRL (venereal disease research laboratory test) USR (unheated serum reagin test )RPR (rapid plasma reagin circle card test) TRUST (tolulized red unheated serum test)特点：非特异性反应，一、梅毒血清试验2、梅毒螺旋体抗原血清试验基于TP特异性抗原，检测TP抗体TPPA TPPA物，荧光镜下，TP呈苹果绿色荧光。
阴性弱阳性阳性图18-1 TP抗体酶联免疫法试验双抗原夹心一步法原理图18-2 TP抗体酶联免疫法试验双抗原夹心二步法原理•电化学发光(ECLIA)免疫检测原理亲和素5）TP-RT胶体金法：•临床：用于梅毒筛查•注意：高敏感性，特异较？IgG 特异性总抗体特异性IgG 抗体特异性IgM 抗体5-7周 反应素抗体变化规律Comparison of three syphilis serodiagnosis algorithms and clinical 665 RPR-/TPPA+ patients were excluded from positive serodiagnosis due to a missed diagnosis rate of 24.2% (665/2,749).Man-Li Tong, et al. Analysis of three algorithms for syphilis serodiagnosis and implications for clinical management. ClinicalInfectious Diseases 2014;58:1115-1124.The traditional algorithm•One lab ：•98%EIA +/PRP+→•TP-PA+•CDC. Discordant results from reverse sequence syphilis screening--five laboratories ，United States ，2006-2010. MMWR. Morbidity and mortality weekly report ，2011，60(5): 133.特点：仅检测活动性梅毒。
梅毒螺旋体血清学试验常用方法
梅毒螺旋体血清学试验常用方法标题：深度解析梅毒螺旋体血清学试验常用方法梅毒螺旋体血清学试验是检测梅毒感染的常用方法之一，其结果对于梅毒的诊断有重要意义。
本文将深度解析梅毒螺旋体血清学试验的常用方法，包括其原理、操作流程、结果解读以及临床应用，并对梅毒螺旋体血清学试验的意义进行探讨。
1.梅毒螺旋体血清学试验的原理梅毒螺旋体血清学试验是通过检测患者血清中的抗梅毒螺旋体抗体来判断是否感染了梅毒。
常用的方法包括不同类型的血清学试验，如血浆凝集试验（RPR）、螺旋体血清凝集素试验（TPPA）和梅毒血清酶免疫吸附试验（EIA）。
这些方法可以检测患者的血清中是否含有特异性的抗梅毒螺旋体抗体，从而进行梅毒的诊断。
2.操作流程及常用方法梅毒螺旋体血清学试验的操作流程包括标本采集、标本处理、试剂配置、反应操作等步骤。
常用的方法包括RPR、TPPA和EIA。
RPR是一种快速筛查试验，可以在诊断初期进行使用，但其结果需要进一步确认。
TPPA是一种高度特异性的确认试验，可以用来确认疑似梅毒感染的患者。
EIA是一种定量检测方法，可以检测血清中特异性的抗体水平，有助于判断患者的感染程度。
3.结果解读及临床意义梅毒螺旋体血清学试验的结果需要进行准确解读。
阴性结果可以排除梅毒感染的可能，但也有假阴性的风险；阳性结果需要结合临床症状、病史及其他检测结果进行综合分析。
对于梅毒感染的患者，早期诊断和治疗至关重要，可以避免并发症的发生，同时也有助于阻断梅毒的传播。
4.个人观点和理解在进行梅毒螺旋体血清学试验时，我们需要充分理解不同方法的原理和操作流程，以确保结果的准确性。
梅毒螺旋体血清学试验的结果需要综合分析，结合临床情况进行判断，避免假阳性或假阴性结果的影响。
对于梅毒患者，及时的诊断和治疗对于控制疾病的传播和预防并发症的发生至关重要。
总结梅毒螺旋体血清学试验是诊断梅毒的重要方法之一，其结果对于患者的治疗和预后有重要意义。
通过深度解析梅毒螺旋体血清学试验的常用方法，我们可以更加全面地理解梅毒的诊断和治疗，为临床工作提供重要参考。
梅毒螺旋体血清学试验常用方法
梅毒螺旋体血清学试验常用方法梅毒螺旋体血清学试验常用方法梅毒是一种由梅毒螺旋体感染引起的性传播疾病，其在世界范围内广泛存在。
为了准确诊断梅毒，血清学检测是一种常用的方法。
本文将介绍梅毒螺旋体血清学试验的常用方法，旨在帮助读者更全面、深入地了解这一主题。
1. 微量血试验微量血试验是常用的梅毒螺旋体血清学试验之一。
它的优势在于只需要很少的血液样本，却能提供准确可靠的结果。
该试验通过检测患者血液中的抗梅毒螺旋体抗体来诊断梅毒。
这些抗体在感染后数周内开始产生，并持续存在于血液中。
微量血试验通常采用凝集试验、免疫层析试验或酶联免疫吸附试验等方法进行。
2. 血清螺旋体沉降率试验血清螺旋体沉降率试验是另一种常用的梅毒螺旋体血清学试验。
该试验可以评估患者血清中的梅毒螺旋体抗体的水平。
试验原理是将患者血清与一定量的抗原（梅毒螺旋体）混合，并在一定时间内观察螺旋体与血清中的抗体结合沉降形成的沉降率。
沉降率越高，说明血清中的抗体水平越高，暗示患者可能存在梅毒感染。
3. 链球菌溶血试验链球菌溶血试验是一种常见的反应型血清学试验，也可用于梅毒的检测。
该试验基于患者血清中的抗链球菌溶血素抗体与试剂中的链球菌溶血素结合的反应。
通过测定溶血素结合率，可以评估患者血清中的抗体水平。
一旦患者感染了梅毒螺旋体，抗链球菌溶血素抗体的水平会升高，从而反映出可能存在梅毒感染。
总结回顾：梅毒螺旋体血清学试验是诊断梅毒的常用方法。
微量血试验、血清螺旋体沉降率试验和链球菌溶血试验是其中常见的三种方法。
微量血试验通过检测患者血液中的抗梅毒螺旋体抗体来诊断梅毒；血清螺旋体沉降率试验通过观察螺旋体与血清中的抗体结合沉降形成的沉降率评估抗体水平；链球菌溶血试验则是通过测定抗链球菌溶血素抗体的结合率进行评估。
这些试验的目的都是为了准确诊断梅毒感染，帮助患者尽早接受治疗以防止疾病的进展和传播。
个人观点和理解：虽然梅毒螺旋体血清学试验在梅毒的诊断中发挥着重要的作用，但我们也需要意识到这些试验对梅毒感染的早期诊断有一定的局限性。
梅毒血清学检测的操作规范
检测操作
血清分离
抗凝处理：加入抗凝剂如肝 素钠
离心分离：将血液样本放入 离心机中，以一定速度离心
采集静脉血：使用无菌注射 器抽取静脉血
分离血清：将离心后的血液 分为血清和血细胞两部分
抗原检测的原理
抗原检测
抗原检测的方法
抗原检测的注意事项
抗原检测的结果解释
抗体检测
采集样本：采 集静脉血液样 本，确保样本
一次性使用的针头、针管、玻片等物品，应按照医疗废物处理。 检测过程中产生的废弃标本，应按照生物安全要求进行高压灭菌或化学消毒处理。
检测过程中产生的废弃试剂、缓冲液等，应按照实验室废弃物处理规定进行分类处理。
检测结束后，应对实验室进行全面清洁和消毒，确保环境安全。
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汇报人：
频率：每周至少进行一次室内质控，并记录相关数据
室间质评
定义：室间质评是指实验室与其他实验室之间对相同或相似项目进行比较和评价
目的：提高实验室检测结果的准确性和可靠性
实施方式：通过参加权威机构组织的室间质评活动，对实验室的检测能力进行评估和 验证
意义：帮助实验室发现存在的问题和不足，及时采取措施进行改进，提高实验室的整 体水平
假阴性结果：可 能由于窗口期、 检测方法等原因 导致，需要结合 临床判断
注意事项
生物安全防护
实验室布局与设施：合理规划实验室空间，确保空 气流通，使用专用实验台和防护服
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废弃物处理：正确处理实验废弃物，防止交叉感染 和环境污染
单击此处输入你的正文，请阐述观点
严格遵守实验室操作规程，确保实验结果的准确性 和可靠性
静脉血：采集肘静脉血
采集部位
梅毒血清学检查的方法和临床意义的简述
梅毒血清学检查的方法和临床意义的简述梅毒血清学检查是一种常见且有效的检测方法，用于诊断和监测梅毒感染。
通过检测人体对梅毒螺旋体所产生的抗体反应，可以确定是否存在梅毒感染，并评估感染的程度和治疗效果。
本文将对梅毒血清学检查的方法和临床意义进行简要介绍。
一、梅毒血清学检查的方法梅毒血清学检查主要包括结核试验（Treponemal tests）和非结核试验（Non-treponemal tests）两类。
1. 结核试验结核试验是通过测量患者体内特异性的抗体反应来确认梅毒感染。
最常用的结核试验方法包括：（1）梅毒螺旋体颗粒凝集试验（Treponema pallidum particle agglutination assay，TPPA）：该试验基于抗体和抗原的凝聚反应，通过检测血清中是否存在梅毒抗体来确定感染情况。
（2）补体结合试验（Complement fixation test，CFT）：该试验通过补体结合反应来检测患者血清中特异性抗体的存在。
阳性结果显示患者体内存在梅毒抗体，可能存在梅毒感染。
（3）荧光抗体试验（Fluorescent treponemal antibody-absorption test，FTA-ABS）：该试验通过检测患者体内的抗梅毒抗体，使用荧光标记的抗体来确认感染情况。
2. 非结核试验非结核试验主要用于初筛梅毒感染和监测治疗效果。
最常用的非结核试验方法包括：（1）梅毒血清反应素试验（Venereal Disease Research Laboratory test，VDRL）：该试验基于血清中患者对梅毒螺旋体组织破坏产生的反应素，通过测量血清的滴度来评估感染的程度。
（2）快速测定试验（Rapid Plasma Reagin test，RPR）：该试验与VDRL类似，通过观察血清与梅毒抗原接触后是否发生凝集反应来判断感染情况。
需要注意的是，结核试验（Treponemal tests）通常被认为是高度特异性的，但对于监测治疗效果并不敏感；而非结核试验（Non-treponemal tests）则具有较高的敏感性，但特异性较低。
三种梅毒血清学检验方法在梅毒检测中的应用
三种梅毒血清学检验方法在梅毒检测中的应用梅毒是一种由梅毒螺旋体细菌引起的性传播疾病，其主要途径是性接触。
梅毒的早期症状可能很轻微，甚至不易察觉，但如果不及时治疗，梅毒会逐渐发展为严重的并发症，影响患者的生活质量甚至生命健康。
及早检测和治疗梅毒至关重要。
而血清学检验方法是目前梅毒检测的主要手段之一，三种常用的梅毒血清学检验方法包括血浆螺旋体抗体试验（RPR）、螺旋体特异性抗体试验（FTA-ABS）和改良螺旋体暗视野试验（MHA-TP）。
本文将对三种梅毒血清学检验方法在梅毒检测中的应用进行介绍和分析。
一、血浆螺旋体抗体试验（RPR）血浆螺旋体抗体试验（RPR）是目前常用的梅毒血清学检验方法之一，它可以快速检测出患者体内的非特异性抗体反应。
RPR检测的原理是利用碳颗粒结合胶体金技术测定患者血清或血浆中的非特异性抗体反应，通过观察血清样品和RPR抗原之间的物质交互作用来判断患者是否感染了梅毒螺旋体。
RPR检测方法具有操作简单、敏感度高和结果快速的特点，因此在临床检测中得到了广泛的应用。
在梅毒的初期感染阶段，患者体内可能已经产生了非特异性抗体反应，因此RPR检测方法对于早期患者的检测具有较高的准确性。
RPR检测结果还可以用于监测患者的治疗效果和疾病的进展情况。
但需要注意的是，RPR检测方法可能会出现假阳性反应，因此在诊断过程中需要结合临床症状和其他检测结果来综合判断。
血浆螺旋体抗体试验（RPR）在梅毒检测中具有重要的临床应用价值。
二、螺旋体特异性抗体试验（FTA-ABS）虽然FTA-ABS检测方法比RPR检测方法更为特异和敏感，但其检测过程相对复杂，需要使用荧光染色和免疫分析等高级技术，因此成本较高。
由于FTA-ABS检测方法只能检测出患者体内的特异性抗体反应，不能用于监测治疗效果和疾病进展情况。
尽管如此，螺旋体特异性抗体试验（FTA-ABS）在梅毒检测中仍然具有重要的临床应用价值。
三、改良螺旋体暗视野试验（MHA-TP）与FTA-ABS检测方法相比，MHA-TP检测方法的操作相对简单，成本较低，因此在一些医疗资源相对匮乏的地区仍然是一种常用的检测方法。
各期梅毒试验诊断方法
二，梅毒血清学筛查策略：
梅毒筛查策略 I RPR/TRUST阳性 TPPA/FTA阳性
梅毒
特点：传统方法，漏检高（15%），现症。
梅毒筛查策略 II：
TP-ELISA阳性 TPPA阳性确证（阳性） TRUST阳性 梅毒
一期梅毒
1-3月
二期梅毒
1-3月
潜伏梅毒
28%三期梅毒 梅毒树胶肿
2-50年
心血管梅毒
72% 终生潜30伏% 梅毒
脊髓痨, 麻痹性痴呆
[2]Gjestland, T. 1955. The Oslo study of untreated syphilis; an epidemiologic investigation of the natural course of the syphilitic infection based upon a re-study of the Boeck-Bruusgaard material. Acta Derm. Venereol. 35:3–368;
转阴率
1.14％ 17.65％ 39.91%
40％ 23.08％
累计阴转率
1.14％ 18.59％ 44.57% 66.74％ 74.42％
[1]顾伟鸣等，先天梅毒的血清学随访，中华传染病杂志 2007，25（2）：117-119
误诊率？？？？ 检测能力差！！
2011年梅毒诊断试剂临床评估结果
中国性病控制中心，广西皮肤病防治研究所、北京市CDC、云南省 CDC、甘肃省CDC、浙江省皮肤病防治研究所等
[18]Baughn, R. E., and R. F. Schell. 2001. Immune responses to Treponema pallidum and Borrelia burgdorefi, p. 27.1–27.7. In R. R. Rich (ed.), Principles and
梅毒实验室检测技术
梅毒IgM抗体（TP-IgM）
IgM抗体的产生是感染后的早期体液免疫应答反 应。IgM分子比IgG较大，所以IgM抗体不能通过胎盘 屏障。而母亲的IgG抗体可以通过胎盘屏障传给胎儿。 因此若在新生儿血中检测到IgG抗体不能作为先天梅毒 的诊断依据，而IgM抗体可为先天梅毒的诊断依据。
IgM抗体检测其特异性较高，但敏感性较低。因
TPPA试验结果判读
4+： 粒子光滑覆盖整个孔底，有时边缘有折叠 3+： 粒子光滑覆盖大部分底 2+：粒子光滑聚集覆盖孔底，周围有一细胞环 1+： 粒子光滑集聚覆概孔底，周围有一明显细胞环 ±： 粒子沉集孔底，中央形成一小点 –： 粒子紧密沉积孔底中央
a:均为RPR阳性标本
29
ELISA/ CLIA
给予儿童先天梅毒 规范治疗和随访
婴 儿 3、 6月 龄 进 行 “非 梅 ”定 量 检 测 观 察 临 床 症 状
任 何 一 次 “非 梅 ”检 测 结 果 由阴转阳，或滴度
不下降反而上升
3次 检 测 结 果 均为阴性反应
每 3个 月 同 时 进 行 “非 梅 ”定 量 检 测 和 “TP”检 测
任何一次
疣、黏膜斑等皮损部位组织液或淋巴结穿刺术得 到的组织液，在暗视野显微镜下，光线从聚光器 的边缘斜射到涂片上的梅毒螺旋体而发出亮光， 从而可根据其特殊形态和运动方式进行检测。 ❖ 方法：（1）暗视显微镜检查
（2）镀银染色法 （3）核酸检测（血液标本？） 注：梅毒螺旋体目前体外人工培养还没有获得成功， 仅能通过接种兔睾丸等部位进行有限增殖。
组织病理学检测 白细胞检测 蛋白检测
未经治疗的梅感染毒梅病毒螺人旋的体 自然病程
感染梅毒螺旋体
2-6周
梅毒实验室检测技术及策略的进展
中国艾滋病性病2〇21年3月第27卷第3期Chin J AIDS STD Vol.27 No.3 Mar 2021323DOI: 10.13419/ki.aids.2021.03.30•综述•梅毒实验室检测技术及策略的进展刘经纬，徐文绮，尹跃平(中国医学科学院北京协和医学院皮肤病医院/中国疾病预防控制中心性病控制中心，南京210042)摘要：梅毒螺旋体作为梅毒的病原体，可侵犯人体形成一种慢性的性传播疾病。
本病临床表现复杂，可侵犯人体全身器官，既能产生各种各样的症状和体征，又可多年无症状而呈潜伏状态。
梅毒的实验室检测方法主要有病原学检测法和血清学检测法。
针对不同人群以及疾病的不同进展，应合理选用一种或多种检测方法，提高梅毒实验室检测的准确率。
关键词：梅毒；实验室检测；检测策略中图分类号：K 759.1 文献标志码：A文章编号：1672-5662(2021)03-0323-04Progress of methods and strategies for laboratory syphilis detection LIU Jingwei, XU Wenqi, YIN Yueping.(Institute o f Dermatology, Chinese Academy o f Medical Sciences & Peking Union Medical College, National Center for STD Control, China CDC, Nanjing 210042, China)Correspondingauthor:YINYueping,Email:*****************Supported by the National Science and Technology Major Project (2018ZX10101001-004-003); the Initiative for Innovative Medicine, Chinese Academy of Medical Sciences (2016-I2M-3-021); Nanjing Incubation Program of the National Clinical Research Center (2019060001)Abstract: Treponema pallidum, as the pathogen of syphilis, can invade the human body and form a chronic sexually transmitted disease. The clinical manifestations are complex and can invade almost all organs of a body. It can not only produce various symptoms and signs, but also be latent without symptoms for many years. The laboratory detection methods mainly include pathogenic methods and serological methods. According to different groups or different progress of the disease, one or more methods should be appropriately selected to improve the accuracy of syphilis detection.Keywords: syphilis; laboratory detection; strategy梅毒是由梅毒螺旋体(7V e/K>n e m« p a//i W u m，T p)引起的一■种慢性感染性疾病，多发于低收入的国家和地区，通过性传播或者母婴传播途径感染。
梅毒的实验室检测与技术规范..
②生物学假阳性
– 是由于患者有其他疾病或生理状态发生变化，使梅毒 血清试验出现阳性
某些疾病：结核、疟疾、肝病、红斑狼疮、流感、肺炎、类风 湿性关节炎、风湿性心脏病、风疹、系统性硬化症等，疾病发 展过程中释放心磷脂到血液中呈假阳性。老年人。 生理机能发生变化：少数孕妇也可发生生物学假阳性。
梅毒假阳性反应的处理
技术性假阳性反应一般是由于操作错误引起的 假阳性反应，经过重复试验即可除外。 对生物学假阳性反应，应做TPHA（TPPA） 等试验进行排除。
前带现象
指非梅毒螺旋体抗原血清试验中，有时血清中存在高浓度 的抗体时出现的弱阳性、不典型或阴性反应的结果，而临 床上又象二期梅毒，此时将血清稀释后再进行试验，出现
在早期梅毒、神经梅毒和先天梅毒等诊断，以及螺旋体现
症感染和既往感染鉴别诊断中具有一定的价值
可应用于梅毒螺旋体的耐药性监测、菌株流行病学分型。
第五章 实验室生物安全
梅毒的生物危害 梅毒螺旋体属第三类病原微生物，一般情况下对人、动物或者环 境不构成严重危害，传播风险有限，实验室感染后很少引起严重疾病，
试验特点
原理和成分与试验相同
血清不需要灭活 不需要显微镜观测结果 可作定量试验 有现成的试剂盒携带方便 操作简单 价格便宜
操作要点
1. 仪器：水平旋转仪。 2. 定性实验
加样：吸取50ul血清(浆)放在卡片圈中，并均匀地涂布在整个圈内 加抗原：将抗原轻轻摇匀，用9号针头加1滴抗原 反应：将卡片置水平旋转仪旋转8分钟，立即在亮光下观察结果 稀释夜准备：在圈内加入50uL生理盐水
梅毒检测
基本成分是心磷脂 卵磷脂和胆固醇 抗原抗体结合形成复合物，凝集成网状沉淀颗粒被肉 眼所见 上述方法的敏感性和特异性都基本相似
非梅毒螺旋体抗原血清学原理
VDRL试验→USR→RPR/TRUST VDRL试验 USR试验
抗原组成：0.03%心磷脂 0.21%卵磷脂 0.90%胆固醇 抗原需新鲜配制 不能保存 待检血清需灭活 目前主要用于脑脊液检查
人数
常州 扬州 深圳 广州 合计 413 495 533 310 1751 62 165 152 20 399
率%
15.0 33.3 28.5 6.5 22.8
人数
10 28 19 5 62
率%
16.1 17.0 12.5 5/20 15.5人数Βιβλιοθήκη 10 73 41 13 137
率%
13.3 14.7 7.7 4.2 7.8
患者血清形成抗原抗体复合物，再加入荧光素（ FTIC）标记的抗人免疫球蛋白，与抗梅毒螺旋体抗 体结合，形成荧光的抗原抗体复合物。在荧光显微镜 下，螺旋体显出苹果绿色的荧光，即为阳性反应。
FTA-ABS试验示意图及结果
TP—ELISA试验原理
TP—ELISA试验是用重组梅毒螺旋体抗 原包被固相板条，加上梅毒血清和单克隆 抗体酶标记物，形成抗原抗体复合物与酶 标记物结合，用酶联检测仪判定试验阳性 反应。本法可用于大规模血清检测。
非梅毒螺旋体抗原血清学试验特点
耐血清性（血清固定） 指经抗梅毒治疗后，非梅毒螺旋体抗原血清试验 在一定时期内不阴转。早期的耐血清性常与治疗
量不足或不规则治疗、复发、再感染或有神经系
统梅毒等因素有关。
梅毒螺旋体抗原血清学试验
梅毒螺旋体抗原血清学试验原理
简述梅毒血清学检查的方法和临床意义
梅毒血清学检查的方法和临床意义1. 介绍梅毒是一种由螺旋体梅毒螺旋体（Treponema pallidum）引起的性传播疾病，它可以通过直接接触感染者的皮肤或黏膜传播。
梅毒血清学检查是一种用于诊断梅毒的重要方法，其基于对患者血清中特定抗体的检测。
2. 方法2.1 补体结合试验（RPR）补体结合试验是最常用的梅毒血清学检查方法之一。
该方法基于Treponema pallidum抗原与患者血清中非特异性抗体（如IgM和IgG）之间的反应。
在试管中将Treponema pallidum抗原与待测血清混合，然后加入兔源性抗人Globulin（取代人免疫球蛋白），如果有特异性抗体存在，会发生免疫复合物形成，导致溶解度改变。
最后通过凝集度或沉淀度的变化来判断阳性或阴性。
2.2 螺旋体纯化颗粒凝集试验（TPPA）螺旋体纯化颗粒凝集试验是一种高度特异性的梅毒血清学检查方法。
该方法使用Treponema pallidum抗原颗粒与待测血清中的特异性抗体相互作用，形成可见的颗粒凝集。
通过观察颗粒凝集的程度和形态来判断阳性或阴性。
2.3 荧光抗体吸附试验（FTA-ABS）荧光抗体吸附试验是一种高度敏感和特异的梅毒血清学检查方法。
该方法利用荧光染料标记的Treponema pallidum抗原与待测血清中的特异性抗体结合，通过荧光显微镜观察是否有荧光信号来判断阳性或阴性。
此方法通常用于对RPR和TPPA结果不确定或存在疑问的情况进行进一步确认。
3. 临床意义3.1 诊断梅毒梅毒血清学检查是诊断梅毒最常用和可靠的方法之一。
通过检测患者血清中对Treponema pallidum抗原产生的特异性抗体，可以明确梅毒的感染情况。
不同的血清学检查方法具有不同的敏感性和特异性，因此常常需要综合使用多种方法来确诊。
3.2 监测治疗效果梅毒血清学检查还可以用于监测患者接受治疗后的疗效。
在治疗过程中，通过定期检测患者血清中对Treponema pallidum抗原产生的特异性抗体水平的变化，可以评估治疗效果。
梅毒诊断研究进展
梅毒诊断研究进展He who knows syphilis,knows medicine----Sir William Osler一、概述二、梅毒螺旋体三、梅毒四、梅毒的实验室诊断五、我国梅毒诊断试剂的现状六、中国药品生物制品检定所简介一、概述名词梅毒（Syphilis）由梅毒螺旋体感染引起的一种慢性全身性性传播疾病是我国卫生部规定的8种重点防治性病之一《中华人民共和国传染病防治法》规定的乙类传染病世界卫生组织列为世界上最常见的50种传染病之一梅毒螺旋体（Treponema pallidum，TP ）是梅毒的病原体，因其透明，不易着色，故又称苍白螺旋体溯源关于梅毒(syphilis)的起源和传播有很多争执梅毒来源于美洲：有记载，1493年哥伦布发现新大陆，其水手从西印度群岛上感染了梅毒，1497年回到欧洲，其水手带回去的梅毒很快在欧洲广泛流行。
亦有考证在美洲印地安人的骨骼上留有梅毒病损的遗迹1498年梅毒传到印度1510年传入日本，随后蔓延全世界。
大约于1505年由印度传入我国广东，当时称为“广东疮”、“杨梅疮”，此后梅毒向内地传播解放前梅毒在我国的传播甚为广泛，一些大城市的发病率达４．５－１０．１％，某些少数民族地区高达４８％解放后，我国政府采取措施，只花费了十几年时间就控制了梅毒等性病的流行。
尔后，撤销了大部分性病防治机构，医学院校也取消了性病课程，许多中青年医务人员压根儿就没见到过早期梅毒，至于一般年轻人甚至还没听说过这种病。
80年代初，梅毒和其他性传播疾病一样在我国死灰复燃，而且迅速蔓延二、梅毒螺旋体分类螺旋体目（Spirochaetales）螺旋体科（Spirochaetaceae）密螺旋体属（Treponema）苍白螺旋体种（Treponema pallidum）分几个亚种生物学特性—形态学1细长，5～15×0.1～0.2um，形似细密的弹簧，螺旋弯曲规则，平均8～14个，两端尖直电镜下显示结构复杂，从外向内分为：外膜（主要由蛋白质、糖及类脂组成）、轴丝（主要由蛋白质组成）、圆柱形菌体（包括细胞壁、细胞膜及胞浆内容物）生物学特性—形态学2透明不易染色，姬姆萨染色则可染成桃红色在暗视野显微镜下观察，螺旋体浮游于组织中有三种特征性的运动方式：①旋转式，依靠自己的长轴旋转，向前后移动②伸缩螺旋间距离活动，不断地拉长身体，使一端附着，再收缩旋距而前进；③蛇行式，弯曲，像蛇爬行，是常见的方式生物学特性—形态学3细胞质外有三层细胞质膜，有柔软而较坚固的粘蛋白包绕，以维持其一定的结构，外膜含有丰富的脂类及少量的蛋白6条内鞭毛围绕其内层细胞壁和外层细胞膜之间的空间旋转，是负责运动的收缩成分表面有特异性抗原，能刺激机体产生特异性的凝集抗体及密螺旋体制动或溶解抗体繁殖繁殖方式与其生活环境有关近年来电子显微镜观察，在培养条件下或在体内适宜环境中为横断分裂，分裂时将躯干分裂成长短两段分裂增代时间为30—33小时当条件不利时，以分芽子繁殖生活发育周期:颗粒期、球形体期及螺旋体期，与所致疾病周期、隐伏发作及慢性病程有关培养一般不能人工培养Nichols株（有毒株）能接种在家兔睾丸中或眼前房内繁殖，能保持毒力转种至加有多种氨基酸的兔睾丸组织碎片的特殊培养基中，25℃厌氧环境下能使螺旋体保持运动能力4-7天1981年Fieldsteel等采用棉尾兔单层上皮细胞在1.5%氧的大气环境进行培养，经9-12天孵育后，螺旋体数比接种数平均增加49倍，对兔仍保持毒力Reiter株能生长繁殖，已丧失致病力Nichols株和Reiter株已广泛用作多种梅毒血清学的诊断抗原生存条件厌氧寄生物，在人体内可长期生存，体外不易生存干燥、肥皂水及一般消毒剂如1：1000苯酚、新洁尔灭、稀酒精均可于短时间将其杀死在血液中4℃经3日可死亡，故在血库冰箱冷藏3日以上的血液就无传染性温度的影响：41-42℃时可生活1-2小时，在48℃仅半小时即失去感染力，100℃立即死亡。
4种梅毒检测的血清学方法比较
梅毒螺旋 体抗体吸收试验） Ｐ Ａ （ 、Ｔ Ｈ 梅毒螺旋 体
０Ｏ 血球凝集试验 ） Ｐ Ａ （ 、Ｔ Ｐ 梅毒螺旋体 明胶凝集 试 验 ，Ｐ ＜ ． ５为差异 有统 计学 意义 。 验 ） Ｐ Ｅ ＩＡ （ 毒 螺 旋 体 酶 联 免 疫 吸 附 试 、Ｔ － ＬＳ 梅 ２ 结 果 验） Ｐ Ｒ （ 毒 螺旋 体快 速诊 断 试验 ）等。 、Ｔ — Ｔ 梅 其 中，Ｔ Ｐ 的原 理 与 Ｔ Ｈ ＰＡ Ｐ Ａ基 本相 同 ，它 以人 工 ２ １ ３种 常用 梅 毒 血 清 学 检 验 方 法 的敏 感 性 、特 ．
合成的惰性明胶颗粒代替 Ｔ Ｈ Ｐ Ａ试验 中的红细胞作
为载体 ，克服 了红 细胞稳 定性差 、大 小不 均一 、不
可控 的不 足 ，是 Ｔ Ｈ Ｐ Ａ的升级 产 品 ，可 以作 为检 测 梅毒 的确诊 试验 。为 了验 证分析 方法 的灵 敏度 和特
异性 以及 诊断 效率 比较 见表 １ 。
摘 要 ：目的 法
通过 对梅毒检测 的 ４种 方 法进行 分 析 ，总 结 出各 种 方 法的诊 断效 率及 灵敏度 和特 异性 。方 ３ １份标 本 Ｔ Ｐ ３ Ｐ Ａ法
通过 ４种 不 同方 法对本院 ３ １份标本进行 梅毒检 测 ，并对 结果进 行 比较 分析 。结果 ３
阳性 １ １ （ ９ ６ ） Ｐ 法 阳性 ７ ３ 份 ３ ． ％ ，Ｒ Ｒ ０份 （ １ １ ） ２ ． ％ ，金 标 法 阳性 １９份 （ ８ ９ ） ＬＳ 法 阳性 １７份 ２ ３ ． ％ ，Ｅ ＩＡ １
（５３ ） Ｐ ３ ． ％ 。Ｒ Ｒ的诊 断符合率较低 ，其 他 ３种 方法的诊 断符合 率较 高。结论
Ｒ Ｒ法灵敏度 和特 异性 均低 于 Ｐ
Ｅ ＩＡ、Ｔ Ｐ ＬＳ Ｐ Ａ法，存在 一定 的假 阳性 和假 阴性 Ｊ １Ｐ 。１ＰＡ法 特异 性 和灵 敏 度都 高，是 临床 常 用的梅 毒 确诊 试 验 ，只是操作 烦琐 ，试 剂成 本高。金 标 法灵 敏度 高，但 特 异性 差 ，适 合做初 筛。Ｅ ＩＡ 法特 异性 和 灵敏度 都 ＬＳ
梅毒特异性抗体的两种血清学检测方法比较
产生。
编辑／ 贺丽
梅毒特异性抗体 的两种血清学检测方法 比较
莫凤 明
（ 西 河 池 市人 民 医 院 ． 西 河池 广 广 ５７０） ４０ ０
摘 要 ： 本 文 比较 梅 毒 螺 旋 体 明 胶 颗 粒 凝 集 试验 法（ Ｐ 与 酶联 免 疫 吸 附 试 验 法 （ Ｐ — Ｅ Ｓ 两 种 方 法 的 敏 感 性 和 特 异 性 ， 价 两种 方 法在 ＴＰ Ａ） Ｔ Ｌ ＩＡ） 评
医学信 息 ２ １ 年 ８月第 ２ ０１ ４卷第 ８ Ｍｅｉａ Ｉｆｒ ｔ ｎ Ａ ｇ ２ １． ｏ．４ Ｎ ． 期 ｄｃｌｎｏ ｉ ． ｕ ． ０ １ Ｖ １２ ． ｏ ８ ｍａ ｏ
途径和合理 的间隔 时间， 同时必 须采用 各种 综合措施 。① 给药途径： 应根据感染 严重程度及药 物动力 学特 点决定给药途径， 轻症感染尽 量选用生物利用度高 的口服制剂 ； 多种 药物可供选用 时， ②有 应以窄 谱 ， 良反应少， 不 价廉者优先 。注意剂量和 间隔时间； 抗菌药物的更 ③
１ 资料 与 方 法
９ ．％， ４０ 酶联免疫 吸附试验法 （ Ｐ—Ｅ Ａ） Ｔ Ｌ ｔ 检测敏感性 ９ ％，Ｐ Ａ Ｓ ６ ＴＰ 及 Ｅ ＩＡ这两种检测方法 经统计 学分析 ，显示 比较无显著差异 ， ＬＳ 螺 旋体 明胶颗粒凝集试验法检测 的特异性 ９ ％， ５ 而酶联免疫 吸附试验 法检测高达特异度 １０ ０ ％，经统计学分析 Ｅ ＩＡ检测法的特异性高 ＬＳ
毒性 ， 可引起永久 陛耳聋 。
５ ． ２四环素类抗生素， 能与新生长牙齿中的钙结合形成黄色结合物沉 着， 俗称” 四环素牙” 此类药物还能与骨中的钙结合抑制婴儿的骨骼 。
梅毒检测方法分类、结果临床意义、临床检查优缺点、试验筛查策略及检测结果解释
梅毒检测方法分类、结果临床意义、临床检查优缺点、试验筛查策略及检测结果解释在医学上梅毒常用的检测方法主要分为两类，一类是病原学检测；另一类是血清学检测。
病原学检测法：以直接观察病原体为目的的检测，目前在临床上应用的较少，能够开展的医院也不多。
病原学检测1、暗视野显微镜检查2、镀银染色检查血清学检测血清学检测则又包括两大类：1、以非梅毒螺旋体抗原的血清试验：（1）VDRL(性病研究实验室试验)（2）USR（不加热血清反应素试验）（3）RPR(加速血浆反应素环状卡片试验)（4）TRUST(甲苯胺红不加热血清试验)目前RPR和TRUST是我国主要采取的两种非梅毒螺旋体抗原血清检测方法。
2、以梅毒螺旋体抗原的血清试验：（1）FTA-ABS（密螺旋体荧光抗体吸收）（2）TPPA/ TPHA(梅毒密螺旋体凝集试验)（3）TP-ELISA(酶联免疫吸附试验)（4）CIA（发光法）（5）GICA（胶体金免疫层析法）（6）WB（蛋白印迹试验）（7）PCR聚合酶链反应（8）梅毒螺旋体IgM抗体检测通过检查血液中的抗体来判断是否感染的检测，是在临床上广泛被采用的检验梅毒的手段，血清学检查主要有以下几点优点：1、实验过程更为方便，更利于用于普遍的筛查，部分实验可以实现自动化。
2、实验结果更为稳定，更为直观，可作为梅毒的确诊实验。
3、实验结果临床意义更丰富，不仅可以作为梅毒的确诊标准，也可以用于观察疗效，复发等。
缺点：由于使用的不是梅毒的特异性抗原，非特异性抗原（心磷脂）可以和很多疾病产生交叉的阳性反应，导致结果出现假阳性结果，大部分的假阳性滴度小于1:4。
梅毒血清学试验较容易出现生物学假阳性反应，可分为急性及慢性两类。
急性生物学假阳性反应见于很多非梅毒的感染性疾病，如：风疹、麻疹、水痘、传染性单核细胞增多症、病毒性肝炎、牛痘疹、活动性肺结核、丝虫病、回归热及钩端螺旋体病等。
随着疾病的消退，在6个月内一般都转为阴性。
慢性生物学假阳性反应见于系统性红斑狼疮、麻风、干燥综合征、系统性硬化症、慢性肝脏疾病、类风湿性关节炎、老年等。
四种梅毒血清学检验方法的比较
四种梅毒血清学检验方法的比较摘要】目的了解梅毒快速血浆反应素试验（RPR）、梅毒甲苯胺红不加热血清试验（TRUST）、酶联免疫吸附试验（ELISA）和梅毒螺旋体抗体被动颗粒凝集试验（TPPA）的敏感性和特异性。
方法采用RPR、TRUST、ELISA和TPPA同时对202份梅毒患者血清标本进行检测，以TPPA作为参考标准，分别统计RPR、TRUST和ELISA的敏感性和特异性。
结果 RPR、TRUST、ELISA诊断梅毒的敏感性分别为84.16%、88.12%、98.51%；特异性均为96.67%；ELISA与TPPA检测阳性率差异无统计学意义,RPR、TRUST与TPPA法检测阳性率差异有统计学意义。
结论 ELISA法具有较高的敏感性和特异性法，可用于临床筛查和梅毒感染的确证试验。
【关键词】梅毒抗体血清学试验方法比较梅毒是一种由梅毒螺旋体感染引起的性传播疾病,其病程漫长,症状复杂,病变几乎累及全身各个脏器,并可由受感染的孕妇传染给胎儿,威胁下一代健康。
近年来,我国梅毒发病率呈上升趋势,严重危害人们的健康[1]。
梅毒血清学实验是目前国内外诊断梅毒的主要实验室检查方法。
本文用RPR、TRUST、ELISA、TPPA四种方法同时对202份梅毒患者血清和90份正常人血清进行检测，并对四种检测方法的优缺点进行分析比较。
1 资料与方法1.1 标本来源202份血清标本均来自本中心防艾科、结防科和皮肤性病门诊科2010年－2012年11月间确诊的梅毒患者（TPPA确证均阳性）。
其中男107例，女95例。
年龄16～75岁。
90份正常人血清均来自卫生科从业人员健康体检者。
1.2 试剂与仪器RPR试剂盒由上海科华生物有限公司提供，TRUST试剂盒由北京万泰生物药业股份有限公司提供，ELISA试剂盒由珠海丽珠试剂股份有限公司提供；TPPA试剂盒由日本富士珠式会社提供。
所有试剂盒均在有效期内使用。
fIuido型洗板机和Anthos2010型酶标仪由郑州安图生物技术有限公司生产。
梅毒检测及策略
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梅毒螺旋体抗原血清试验
用活的或死的梅毒螺旋体或其成分来作抗原 测定抗螺旋体抗体
敏感性和特异性均高，一般用作确证试验 检测血清中抗梅毒螺旋体IgG抗体，即使患者
经过足够治疗，仍能长期存在，甚至终身不 消失，血清反应仍持续存在阳性，不能用于 观察疗效
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文献报道
昆明医科大学附属第一医院（2013） 326例患者和200例健康体检者 ELISA法、TPPA 法和RPR 法的灵敏度分别为95.1、
96.3和83.4，特异性分别为96.0、 98.0和88.0。结 论 ELISA法是门诊、住院患者初筛梅毒的理想方法； TPPA法为目前公认最好的梅毒血清学确证试验； RPR滴度试验对评价梅毒疗效和判断是否再感染等 有重要临床价值。
4．由于采用EIA法，梅毒治愈多年后仍能检测到梅 毒 IgG 。因此，对确证活动性梅毒，监测疗法，发 现治疗失败的病例和再感染方面使用RPR是有必要 的。
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6．曾经治疗过梅毒的妇女在怀孕期间，RPR检测 效价通常增长1或2倍。由此提出需要对这类孕妇进 行治疗或再治疗。
7．新生儿梅毒筛查：在没有确定母亲梅毒血清检 测结果前，新生儿应该留院。因为存在假阴性和假 阳性，不能只做筛查检测（ RPR ）。梅毒IgG检测 阳性不能确定新生儿感染梅毒，因为母体抗体可以 通过胎盘被动传播，同时满足RPR和IgG检测阳性 因此新生儿梅毒阳性必须。新生儿和母亲必须采用 相同的检测方法，以保证两者效价结果可比性。
WHO推荐同时采用非梅毒螺旋体和梅毒螺 旋体抗原血清试验用于筛查和诊断
梅毒血清学检测方法的选择策略
功能 ， 只 有 ２次 取 针 和 吸 液 步 骤 ， 不 仅 又 省 去 了 一 次 取 针 和 吸 液步骤 ， 而且少取了 １ Ｏ 根针 ， 节 约 了实 验 成 本 。然 而 这 两 种 新 的加 样 模 式 又 有 各 自 的特 点 。 加 样 模 式 Ⅱ在 第 １次 分 配 过 程 中就 把 ＨＩ Ｖ 试 剂全 部 加 完 （ 河 南 省 红 十 字 血 液 中 心 复 检 组
式 Ｉ节 省 了 ４ ３ ． ５ ０ Ｓ ， 比 模 式 Ⅱ节 省 了 ３ ７ ． ３ ０ Ｓ 。另外 ， 后 两 种 模式均节约 了 １ ０根 一 次 性 加 样 针 。 表 １ ３ 种 分 配模 式 所 需 时 间 和 加 样 针 数
一
板速度时 ， 选 这 种 模 式 可 暂 时 缓 解 加 样 压 力 。模 式 Ⅲ 的优 点 在 于 比第 ２种 模 式 少 了 ２ 个 分 配步 骤 ， 时 间 更 短 。而 且 由于 一 般 情 况 下 试 剂分 配 次 数 越 多 吸 液 量 也 就 越 大 ， 吸液 量 越 大所 需 时
间越 长 ， 所 以该模式下将需 多次分 配 ， 吸液量 大的试剂 编到 同 序列 ， 从 而 进 一 步 节 省 了时 问 。
随着 实 验 室仪 器 自动 化 的 普 及 ， 熟 练 操 作 和 使 用 仪 器 已是 实 验 技 术 人 员 工 作 中 非 常 重 要 的一 部 分 。 只要 掌 握 了 一 定 的 仪器使用技巧 ， 就 能 在 实 际工 作 中根 据 自身 特 点 设 计 出最 合 适 的程 序 以获 得 最 大 的工 作 效 率 。
虽然 Ｓ Ｔ ＡＲ 全 自动 加 样 器 英 文 程 序 的 编 辑 比 较 复 杂 ， 但 与 中 文 程 序 相 比其 功 能 更 多 ， 灵活性更强口 ］ 。作 者 在 分 析 了 老 加样 程 序 （ 即分 配模 式 Ｉ） 和所用试 剂的特点后 ， 设 计 了两 种 新 的加 样 模 式 。这 两 种 新 模 式 共 同 优 点 在 于 把 单 加 一 孔 ＨＣ Ｖ 稀 释 液 放 到 对 照 品 和质 控 品 中 一 块 加 ， 省 去 了一 次单 独 的 分 配 过程 ， 从 而 缩 短 了加 样 时 间 。而 且 新 模 式 应 用 了等 份 连续 分 配
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EIA/CIA 与 TPPA 结果的一致性？ EIA/CIA + TPPA- 是否感染梅毒？
内容
一，梅毒血清学试验： 1）非梅毒螺旋体血清学试验 2）梅毒螺旋体血清学试验
二，梅毒筛查策略及进展
一、梅毒血清试验
1. 非梅毒螺旋体抗原血清学试验：
• 原理：梅毒螺旋体破坏宿主细胞释放以及其螺旋体 细胞表面释放的类脂物质，刺激机体产生抗类脂抗 体（反应素）。在体外该抗体与心磷脂、卵磷脂和 胆固醇组成的抗原反应，形成凝集反应。
梅毒血清学过程
非特异性抗体：出现晚，检测漏检：治疗后效价降低，判断现状与疗效
• 随着高敏感性EIA/CIA发展，逆向检测。
• CDC. Syphilis testing algorithms using treponemal tests for initial screening--four laboratories， New York City，2005-2006. MMWR. Morbidity and mortality weekly report，2008，57(32): 872.
梅毒血清学检测策略
南方医科大学皮肤病医院 广东省皮肤性病防治中心
广东省皮肤病医院 郑和平
“广东疮”
1995-2014年广东及全国梅毒发病趋势比较
1995-2014年广东省各期梅毒发病趋势
2014年，全省21个地市共报告梅毒55,936例，报告数占全国报告总数的 12.27%，位居全国第一 。
其中隐性梅毒报告41,857例，占全省梅毒总报告数的74.83%。
Prevalence EIA/CIA EIA/CIA+ EIA/CIA+RPR-
Group
%
RPR-
TPPA认证—
High Low
14.5% 2.3%
50.6% 60.6%
14.1% 40.8%(2.9times）
• That the percentage of patients with nonreactive screening treponemal tests in the low-prevalence population was 2.9 times that of the high-prevalence population suggests that these EIA/CIAs were false-positive results.
• 微粒子化学发光免疫分析
（microparticle chemicluminescence immunoassay，MCIA）
• 电化学发光免疫分析
(electro chemicluminescence immunoassay，ECLIA)
临床：用于梅毒筛查 注意：高敏感性，特异较（抗原种类？？）
• 临床：最可靠确证试验 • 特点：高度特异，
3）ELISA：
• 原理：TP特异性抗原包备酶标板，与血 清中TP抗体结合，加入酶标抗体，底物 显色。
• 临床：用于梅毒筛查 • 注意：
高敏感性，特异较（抗原种类？？）
4）化学发光法
• 化学发光酶免疫分析
( chemiluminescenct enzyme immunoassay，CLEIA )
5）TP-RT胶体金法：
• 原理（见图）
• 临床：筛查 • 注意：
敏感性？ 特异较（抗原种类？
中国CDC评估结果
4) WB-Ig• 临床： • IgG：梅毒确证
IgM：早期梅毒 先天梅毒
二、梅毒血清学检测策略
1.美国 CDC推 荐策略
2006年美国CDC梅毒传统筛查策略
• The clinical interpretation complicated • the lack of standardized testing algorithms • the lack of an evidence to judge the merits
of each algorithm. • Consequently, • Reversed testing might result in high FBR
血清中抗TP抗体结合，发生凝集反应。
• 临床：梅毒确证 • 注意 • 存在交叉（1：80） • 低滴定时候，确证
2）FTA-ABS(fluoresent treponemal
antibody absorption test)
• 原理：
血清经吸收剂（Reiter)去非特异性抗体 + T.palludam + TITC-抗人IgG/IgM 荧光镜：TP呈苹果绿色荧光。
•
方法：VDRL (venereal disease research laboratory test)
USR (unheated serum reagin test)
RPR (rapid plasma reagin circle card test)
TRUST (tolulized red unheated serum test)
EIA/CIA RPR
Lab1 Lab2 Lab3 Lab4
+
→-
→
+
→-
→ TPPA/ FTA-
ABS
+
→ +/- →
+
→ +/-
No
• 1 lab 有结果解释，3 labs没有结果解释 • 比传统方法多检出+3,664 (3%) of 116,822
比传统方法多检出+3,664 (3%) of 116,822
overdiagnosis and overtreatment。
CDC. Discordant results from reverse sequence syphilis screening--five laboratories，United States，2006-2010.
MMWR. Morbidity and mortality weekly report，2011，60(5): 133.
2、梅毒螺旋体抗原血清试验
• 原理：基于TP特异性抗原，检测TP抗体 • 方法： 1.凝集法：TPHA， TPPA
2.FTA－ABS 3.ELISA 3.CIA 4.TP-RT（胶体金法） 5.WB-19sIgM
1）TPPA/TPHA
• 原理： • 超声裂解TP抗原，致敏明胶颗粒/家禽RBC，与