盐酸克伦特罗酶联检测试剂盒使用说明书
克伦特罗说明书一步法
盐酸克伦特罗酶联免疫检测试剂盒使用说明书一、概要克伦特罗（clenbμterol，CLE）是一种 －肾上腺受体激动剂，此类药品在临床上用于治疗支气管哮喘、慢性支气管炎和肺气肿等疾病。
因为该药可以提高瘦肉率，减少脂肪沉积和促进动物生长，被一些畜牧养殖企业作为养殖促进剂非法使用。
人食用了饲喂克伦特罗作为添加剂的动物所产生的畜产品后，残留的克伦特罗可导致人体肌肉震颤、心悸、神经过敏、头痛、目眩、恶心、呕吐、发烧、战栗等症状，对消费者的健康造成极大危害。
我国农业部第235号文件规定不得检出。
本试剂盒是应用ELISA技术研发的药物残留检测产品,与仪器分析技术比较，能经济、快速地检测出尿样、肌肉、肝脏及饲料等中的克伦特罗。
二、测定原理本试剂盒是利用竞争ELISA方法，在酶标板微孔上预包被抗克伦特罗抗体。
检测时，加入标准品或样品溶液及克伦特罗酶结合物，他们竞争性地与克伦特罗抗体结合，形成抗原抗体复合物；用TMB底物显色；加入反应终止液后在450nm波长酶标仪下进行检测，样品中的克伦特罗浓度与吸收光强度成反比。
三、试剂盒组成酶标板1块(包被抗克伦特罗抗体)标准液6瓶（1ml/瓶）：0、0.1ppb、0.3ppb、0.9ppb、2.7ppb、8.1ppb。
酶结合物…………………………7ml显色剂A …………………………7ml显色剂B …………………………7ml终止液…………………………7ml10×浓缩洗涤液…………………50ml说明书……………………………1份四、需要但试剂盒中不提供的器材和试剂（1）设备……微孔板酶标仪(450nm)……振荡器……离心机……微量移液器：20μl～200μl,100μl~1000μl……容量瓶：100ml，500ml，1000ml（2）试剂……三氯乙酸……氢氧化钠……叔丁基甲醚色谱级……浓HCl……氯仿……磷酸……Tris……乙酸乙酯……乙腈五、样本前处理步骤样本处理前须知处理任何样本时，都须注意：（1）实验中必须使用一次性吸头，在吸取不同的试剂时要更换吸头。
盐酸克伦特罗快速检测卡说明书（尿液）
北京百泰克生物技术有限公司百泰克生物电话：400-678-8982 传真：************BioTeke Corporation网址：E-mail：****************盐酸克伦特罗快速检测卡使用说明书（尿液）一、试剂盒组成产品编号产品规格检测卡滴管TC1001 20次 20份 20份TC1002 40次 40份 40份保存和稳定性4-30℃阴凉干燥处保存，不可冷冻，避免阳光直晒，生产日期起12个月内有效。
二、原理盐酸克伦特罗(Clen)快速检测试纸基于竞争法胶体金免疫层析技术，通过检测样品中的Clen与固定在检测线上的Clen-BSA偶联物竞争标记胶体金颗粒的Clen抗体，达到抑制检测线显色的效果。
因此，当样品中的Clen浓度超过一定量后，检测线将不显色；而当样品中Clen浓度低于一定量或者不含Clen时，检测线将显色。
由于质控线由二抗组成，识别并结合Clen抗体，因此无论样本中是否含有Clen，质控线都将显色，以示检测产品有效。
三、灵敏度3ppb四、所需容器塑料尿杯或玻璃容器五、注意事项1.如果购买时发现过期，破损，污染，无效的产品，请在购买处进行更换。
2.所有试纸启封后1小时内使用。
3.本品为一次性产品，请勿重复使用。
4.样品不需要放入冰箱冷藏，避光室温保存即可。
六、检测步骤1.取尿液直接进行测试，如有浑浊请先离心取上清液。
﹡注：尿液必须收集在洁净、干燥不含有任何防腐剂的塑料尿杯或玻璃容器内。
2.取出试纸，开封后平放在桌面，用滴管向试纸孔缓慢而准确地逐滴加入3滴检测液。
3.3-5分钟判断结果，10分钟后的结果无效。
七、结果解释阳性：C线显色，T线不显色，判为阳性。
表示样品中盐酸克伦特罗浓度高于3ppb。
阴性：C线显色，T线肉眼可见，无论颜色深浅均判为阴性。
表示样品中盐酸克伦特罗浓度低于3ppb。
无效：C线不显色，无论T线是否显色，该试纸均判为无效。
未出现C线，表明不正确的操作过程或试剂卡已变质失效。
盐酸克伦特罗残留物的定性定量检测方法
的生 物传 感器技术 。 它是 酶标 免疫技 术与光 电分析 技术相 毛细 管 区 带 电泳 法 （ ＣＥ）、气相 色 谱 一 立 叶红 外联 用 傅
结合 而产 生 的一种 电化学 免疫 分析技 术 。其原 理与 Ｅ ＩＡ 法 （ Ｃ— ＴＲ 及 薄层色 谱法（Ｌ ） ，其 中前３ 方法较 ＬＳ Ｇ Ｆ Ｉ） Ｔ Ｃ等 种 几 乎 相 同 ，只 是将 酶 与 底物 反 应 的化 学 变 化 用换 能 器 转 常用 阳。Ｌ ｙ ｓ ｎ 等人 用气 相色 谱一 谱联用 法对动 物毛 】 ｅ ｓｅｓ 质 化 为 电信 号 输 出 ，从 而 可得 待 测物 质 的 含 量 。刘 国艳 等 发和尿 液及组织 中的盐 酸克伦 特罗进 行定性定 量分析 ，回
岛
圈
检测 带不显 色 ，参 照带显 色 ，说 明样 品 中的盐酸克 伦特 罗 发展 ，特 别是 杂交瘤技 术 的发展 ，使 得各种化 合物都 可能 质量浓 度高于５ ｇｍＬ ｎ ／ ，结果 为阳性（ ｂ 。 阴性判定 为： 图２ ） １） 条带都 显色 ，但检 测带颜 色浅于 参照 带颜色（ ｃ ， ２ 图２ ） 说 明检 测样 品中盐酸 克伦特 罗质量 浓度超 过 １ ｇｍＬ ／ 。２） ｎ 产生相应 的抗体 。这 将会使免 疫测试 有着更 加广泛 的应 用 前 景 ，酶 免疫传 感技术 检测盐酸 克伦特 罗也将 得到广泛 的
（ ０ ４）４ ２０ ［ 】 酶免疫传 感技 术研 制成 功 的检 测盐 酸克伦 收率 为７ ．％，检 测限 为０５ｌｇ ｋ ［。对气相 色谱 一 基于 ５５ ． ａ ／ ｇｇ 】 质谱
特罗 的酶 免疫 传感器检测 限０３ｕｇｋ ． ／ｇ，可在 １ 分钟 内完成 联 用法 的预处理 进行 调整 ，缩 短 了分 析时 间 ，回收率达 到 ０ 检测全过程 ，且传感器体积小 ，便于携带和实现现场检测＿ ５ 】 。
酶联免疫吸附法（ELISA）检测猪肉中盐酸克伦特罗
BB 0×100%百分吸光度值（%）=酶联免疫吸附法（ELISA ）检测猪肉中盐酸克伦特罗薛金英（山东省诸城市畜牧兽医管理局山东诸城262200）盐酸克伦特罗（俗称瘦肉精）为一种人工合成的β-肾上腺素兴奋剂，具有扩张支气管的作用，常用来防治哮喘、肺气肿等肺部疾病。
当其应用量达到治疗量的5～10倍时，其有能量重分配作用，可使肌肉合成增加，脂肪沉积减少，因此俗称为“瘦肉精”。
在畜牧业生产中一些非法使用者将其作为一种和生长促进剂添加到动物饲料中，用以改善胴体的品质，同时也造成食品中盐酸克伦特罗（瘦肉精）的残留。
当人们食用盐酸克伦特罗残留的产品后会出现一系列的中毒症状。
动物源性食品药物残留问题逐渐引起人们的重视。
本法用于定量、定性检测猪肉中盐酸克伦特罗的残留。
1试验原理采用间接竞争ELISA 法，在微孔板上包被抗盐酸克伦特罗检测抗原，样品中的盐酸克伦特罗将和酶标板上的盐酸克伦特罗检测抗原竞争结合盐酸克伦特罗抗体，盐酸克伦特罗检测抗原结合的盐酸克伦特罗抗体再与同时加入的酶标二抗结合，洗涤后，用TMB 底物系统显色，微孔板吸光值与样品中盐酸克伦特罗含量成负相关，与标准曲线比较再乘以浓度比值即可得出盐酸克伦特罗在样品的实际含量。
2试验方法（稀释倍数为4倍）称取1.0g （±0.05g ）均质样品于50mL 聚苯乙烯离心管中，加入1mL 0.1M 盐酸，再加入2mL 提取工作液，充分振荡混匀5min ，4000rpm （20～25℃）离心10min 。
取1mL 上清液加入约25μL 1M 氢氧化钠调节pH 至6.5～7.5之间，充分振荡混匀，取50μL 用于分析。
如果上层中存在白色脂肪层，取样时应避开。
试剂准备：将10×浓缩洗涤液和蒸馏水（或去离子水）按1∶9充分混匀，即为1×洗涤液。
编号：将盐酸克伦特罗标准溶液和待测样品对应微孔按序编号，建议每个标准溶液和待测样品均做重复孔。
酶联免疫分析试剂盒说明书
人chemerin酶联免疫分析试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用预期应用ELISA法定量测定人血清、血浆或其它相关液体中chemerin含量。
实验原理本试剂盒应用双抗体夹心酶标免疫分析法测定标本中chemerin水平。
用纯化的抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入chemerin抗原、生物素化的抗人chemerin抗体、HRP标记的亲和素，经过彻底洗涤后用底物TMB显色。
TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的chemerin呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），计算样品浓度。
试剂盒组成及试剂配制1.酶联板：一块（96孔）2.标准品（冻干品）：2瓶，每瓶临用前以样品稀释液稀释至1ml，盖好后静置10分钟以上，然后反复颠倒/搓动以助溶解，其浓度为20,000pg/ml，做系列倍比稀释后，分别稀释10,000pg/ml，5,000pg/ml，2,500pg/ml，1,250pg/ml，625pg/ml，312.5pg/ml，156pg/ml，样品稀释液直接作为标准浓度0pg/ml，临用前15分钟内配制。
如配制10,000pg/ml标准品：取0.5ml20,000pg/ml的上述标准品加入含有0.5ml样品稀释液的Eppendorf管中，混匀即可，其余浓度以此类推。
3.样品稀释液：1×20ml/瓶。
4.检测稀释液A：1×10ml/瓶。
5.检测稀释液B：1×10ml/瓶。
6.检测溶液A：1×120ul/瓶（1:100）临用前以检测稀释液A1:100稀释，稀释前根据预先计算好的每次实验所需的总量配制（每孔100ul），实际配制时应多配制0.1-0.2ml。
如1ul检测溶液A加99ul检测稀释液A的比例配制，轻轻混匀，在使用前一小时内配制。
7.检测溶液B：1×120ul/瓶（1:100）临用前以检测稀释液B1:100稀释。
农业部公告2005年第558号——准予克仑特罗等14种酶联免疫检测试剂盒备案
农业部公告2005年第558号——准予克仑特罗等14种酶联
免疫检测试剂盒备案
【法规类别】兽医兽药
【发文字号】农业部公告2005年第558号
【发布部门】农业部
【发布日期】2005.10.21
【实施日期】2005.10.21
【时效性】现行有效
【效力级别】部门规范性文件
农业部公告
（2005年第558号）
根据我部《关于加强兽药残留检测试剂（盒）管理的通知》（农办医[2005]3号）要求，为加强兽药残留检测试剂管理，保证兽药残留检测质量可靠和动物性食品安全，我部组织残留专家委员会对中国兽医药品监察所等单位申请备案的克仑特罗等14种酶联免疫检测试剂盒进行了审查。
经审查，该14种酶联免疫检测试剂盒符合有关规定，准予备案，允许生产和用于全国兽药残留监控计划的检测。
现将该14种酶联免疫检测试剂盒（附件1）及其质量标准与使用说明书予以公布（附件2）。
特此公告
中华人民共和国农业部
二〇〇五年十月二十一日
附件1
备案酶联免疫检测试剂盒名单。
盐酸克伦特罗,莱克多巴胺,沙丁胺醇联合检测卡.
瘦肉精三联检测卡(盐酸克伦特罗、莱克多巴胺和沙丁胺醇联合检测卡说明书【简介】瘦肉精是一类人工合成的β-受体激动剂,根据结构差异分为盐酸克伦特罗、莱克多巴胺和沙丁胺醇。
因该类药物可以提高瘦肉率,减少脂肪沉积和促进动物生长,被一些畜牧养殖户和养殖企业作为养殖促进剂使用。
人食用了饲喂瘦肉精的禽畜产品后,残留的瘦肉精可引起食物中毒,牲畜产品中瘦肉精残留已成为公众关注的社会问题。
因此,世界许多国家禁止在饲料中使用瘦肉精。
瘦肉精三联快速检测卡可同时测定猪尿中的盐酸克伦特罗、莱克多巴胺和沙丁胺醇,提供生猪饲养时是否使用瘦肉精的依据。
【检测原理】瘦肉精三联快速检测卡是采用免疫竞争法分析原理结合胶体金标记技术设计的一种快速检测试剂,可同时检测尿液样品中的盐酸克伦特罗、莱克多巴胺和沙丁胺醇三类瘦肉精。
具有简单、快速、无需特殊的仪器设备等特点,既可以在实验室进行,也可在养猪场、屠宰车间等实地进行测定。
由于样本需要量少、简便快速、适用于大量样本的筛查。
结果准确,检测盐酸克伦特罗灵敏度为3ppb、莱克多巴胺灵敏度为5ppb、沙丁胺醇的灵敏度为10ppb,准确率大于95%。
【样品处理】尿液可直接用于检测。
若尿样呈浑浊状,需先用滤纸过滤或离心,取清亮部分用于检测。
【操作步骤】1、从检测卡袋中取出所需的检测卡,放置室温复温,在卡上做好样品编号标记。
2、用一次性取样滴头吸取样品,滴入加样孔,每孔3滴(75ul,在加液过程中勿使液体溢出加样孔。
3、5-10分钟内观察结果,15分钟后的结果无效。
【结果】对照线(C和检测线(T同时出线,表明尿液样品中【储存条件】1、在4-30℃阴凉避光干燥处储存,忌冷冻。
2、在4-30℃下的环境温度操作。
3、有效期见包装盒侧面。
4、保存期间应避免光照、潮湿和过热。
检测卡保质期为12个月。
5、检测线T出现,产品失效。
【结果判断】泳道1:克伦特罗泳道2:莱克多巴胺泳道3:沙丁胺醇阴性(-:质控线出现、检测线清晰出现,表示样品中不含有瘦肉精或其浓度低于检测限。
瘦肉精
竞争酶联免疫吸附法测定猪肉中的瘦肉精（试剂盒）盐酸克伦特罗俗名“瘦肉精”欧美等发达国家纷纷严禁此类药物在畜牧生产中的应用，FDA和WTO还制定了畜产品中瘦肉精的最高残留限量。
检测瘦肉精常用的方法有高效液相色谱法(GC-MS)、气质联机法(HLPC)和酶联免疫吸附法(ELISA)，其中酶联免疫吸附法是目前最佳的检测方法。
ELISA检测方法有双抗体夹心法测抗原、间接法测抗体、竞争法测抗体等。
该次试验利用的是酶联免疫吸附法中的竞争法测抗体。
一、目的：限制瘦肉精在畜牧生产中的使用，对肉品卫生安全进行较好的监督。
二、原理：利用多克隆抗体既能与盐酸克伦特罗结合，也能与包被抗原结合。
这些包被抗原被固定在酶标板孔壁上，当样品中含有瘦肉精时，它与包被抗原竞争结合抗体中有限量的结合位点。
由于每一个孔中抗体的结合位点位点数相同，当样品中瘦肉精浓度低时，就有更多抗体的位点与包被抗原结合，更多的抗体被固定在酶标板壁上，就会与更多的酶标二结合，所以结果就呈现深蓝色。
相反，样品的瘦肉精浓度高，结果就呈现浅蓝色。
加入终止液后，蓝色相应变成黄色，然后用酶标仪进行测定。
三、实验材料与方法原料：无皮猪肉（易剔除杂质、脂肪）试剂：盐酸克伦特罗—酶联免疫试剂盒仪器：电热恒温水浴锅、DSY-1-2孔、酶标仪、离心机、匀浆机、微量加样器方法：1原料的处理：将精肉用高速捣碎机捣碎混合均匀，放置冰箱冷冻备用。
取捣碎的样品5g，加入25ml，50mmlHCL震动1.5h，以达到均质。
称取5g 均质物(相当于1g肝脏或肌肉），加入离心管中，1000r/min离心15min.取上清液至令一个离心管中，加1mol NaOH 300ul,混合15min.加入4ml,500mmolKH2PO4(pH3.0),迅速混匀置于4摄氏度的冰箱内保存至少1.5h.1000r/min，离心15min，分离上清液。
2洗板：所有试剂回温至室温。
将浓缩洗涤液用蒸馏水稀释10倍。
肉原料肉中激素(盐酸克伦特罗、莱克多巴胺)的测定—酶联免疫快速测定法
2 酶联免疫法检测瘦肉精 2.2操作 2.2.1 国标-酶联免疫法（ELISA) )实验方法与步骤
(1)主要试剂： 高氯酸、异丙醇+乙酸乙酯(40+60)、克伦特罗酶联免疫试剂盒等
(2)主要仪器:匀浆器、离心机微量移液器：单道20ul、50ul、100ul和多道50ul- 250ul 可调、 酶标仪（配备450nm滤光片）
2.2操作 2.2.2 克伦特罗快速检测卡检测步骤
（1）取5 g匀浆去脂肪肉样（或肉泥）于50 mL离心管中，盖紧管盖。 （2）将装有样品的离心管放入沸水中加热10 min，用微量移液器或滴管取出管中 液体移至干净离心管中，冷却至室温（注意：样品温度应控制在20±5℃）。 （3）取出检测卡，开封后平放于桌面，使用本产品附带滴管，吸取离心管中的上 清液加3-4滴于样品孔中。 （4）加样后3-5min，观察显色区，判断结果，其他时间判断无效。
2 酶联免疫法检测瘦肉精
2.2.1酶联免疫法（ELISA) )实验方法与步骤
(3)测定 ① 提取肌肉、肝脏及肾脏试样 ② 准备竞争酶标记物、克伦特罗抗体、包被有抗抗体的微孔板条试样；
准备试样：提取物取20ul进行分析。高残留的试样用蒸馏水进一步稀释。
测定：详细过程参考实训指导书或国标GB-T5009.192-2003。
酶联免疫法测定激素（盐酸克伦 特罗、莱克多巴胺）-初筛Fra bibliotek目录页
检测依据 酶联免疫法检测瘦肉精
1 检测依据
检测标准： GB-T5009.192-2003动物性食品中克伦特罗残留量的
测定第三法酶联免疫法（ELISA筛选法）
2 酶联免疫法检测瘦肉精
2.1酶联免疫法（ELISA)原理
基于抗原抗体反应进行竞争性抑制测定。微孔板包被有针对克仑特罗IgG的包被抗体。 克伦特罗抗体被加入，经过孵育及洗涤步骤后，加入竞争性酶标记物、标准或试样溶液。 克仑特罗与竞争性标记物竞争克仑特罗抗体，没有与抗体连接的克伦特罗标记酶在洗涤步 骤中被除去。将底物（过氧化尿素）和发色剂（四甲基联苯胺）加入到孔中孵育，结合的 标记酶将无色的发色剂转化为蓝色的产物。加入反应停止液后使颜色由蓝转变为黄色。在 450nm处测量吸光度值，吸光度比值与克伦特罗浓度的自然对数成反比。
盐酸克伦特罗—违禁药品
盐酸克伦特罗—违禁药品
张桂才
【期刊名称】《湖南饲料》
【年(卷),期】2001(000)003
【摘要】根据农业部和国家药品监督管理局《关于查处非法生产、销售和使用盐酸克伦特罗等药品的紧急通知》精神,为便于各地了解情况,知晓其危害性,现将盐酸克伦特罗的有关资料简要说明如下。
一、什么叫盐酸克伦特罗能与机体血管、支气管。
【总页数】1页(P11)
【作者】张桂才
【作者单位】湖南省畜牧水产局
【正文语种】中文
【中图分类】S816.7
【相关文献】
1.猪肉中盐酸克伦特罗和盐酸菜克多巴胺残留量检测气质联用法探讨 [J], 黄义彬
2.反相高效液相色谱法同时测定氨溴特罗口服液中盐酸氨溴索和盐酸克伦特罗的含量 [J], 胡东梅;孙银华
3.HPLC法测定盐酸克伦特罗膜中盐酸克伦特罗的含量 [J], 朱晶;陈庆先;刘鹏飞
4.盐酸克伦特罗的酶联免疫分析试剂盒的研制—Ⅰ克伦特罗人工抗原及抗体的制备[J], 李利东;宓晓黎;袁建兴;潘荣生
5.盐酸克伦特罗的酶联免疫分析试剂盒的研制——Ⅱ克伦特罗酶联免疫检测方法的研究 [J], 宓晓黎;李利东;丁贵平;成恒嵩;潘荣生;李平
因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
应用酶免疫法检测盐酸克伦特罗
Ｅ需 饲 料 款 ： ３～３ ８ 元 ， 头 每 Ｅ利 润 ： ２ ５—３ 元 ， ｌ （ ．） 每 ｌ （． ）
经（ ４～５ 个 月 催 肥 ， 获 利 （０ ） 可 ３ ０～４ ０ 元 ／ 。 本 文 探 ０） 头 讨 闽 南 黄 牛 肥 育 技 术 １ 肥 育 牛 分 类 牛 的 肥 育 分 为 肉 牛 肥 育 和 退 役 牛 肥
２ ３ 向 酶 联 板 条 微 孔 中 加 入 １ ０ ｌ 缓 冲 液 稀 释 的 ． ０ｕ 用 抗 体 （ １： １ 释 ， 释 前 轻 轻 摇 匀 抗 体 ， 免 猛 烈 振 按 １稀 稀 避 荡 ） 用 封 口膜 封 好 ， 温 孵 育 １ ｍｉ。 ， 室 ５ ｎ ２ ４ 将 酶 结 合 物 浓 缩 液 仔 细 摇 匀 ，用 缓 冲 液 以 １：１ ． １
ｋ ／ ， 格 ： ６ ６— ． ） ／ ｇ 重 （ 行 价 ） 每 头 每 ｇ头 价 （． ６ ８ 元 ｋ 毛 现 ，
重 点对 生 猪屠 宰场 和生产 基地 场 的猪 只进行 抽检 。 １ 仪器 设 备和材 料 酶标 仪并 带 ４０ ｍ波 长滤光 片 ； ５ｎ 德 国生产检 测 盐酸 克伦特 罗试 剂盒 ； 鲜 猪尿 样 品 。 新 ２ 操 作 步 骤 ２ １ 因 平 时 试 剂 盒 是 冷 冻 保 存 ， 验 ． 实
积 ２１ ． ３×ｌ ｈ 农 林 间 隙 地 ３ ３ ０ ｍ， ． ７×１ ｍ 。 草 场 载 ０ｈ
畜 量达 １ 黄 牛单 位 ， 年还 生产 ４ １万 每 ０万 ｔ 种 农 作 物 各
WB02 胶体金法快速检测瘦肉精说明书概要
瘦肉精快速检测法-盐酸克仑特罗快速检测卡【简介】盐酸克仑特罗（Clenbuterol Hydrochloride，简写Clen）俗称瘦肉精，为一种人工合成的β-肾上腺素能兴奋剂，具有扩张支气管的作用。
当人食用含有盐酸克仑特罗（瘦肉精）残留的产品后的中毒症状为心动过速，低血钾，低磷酸盐血症，肌肉震颤，头晕，口干，失眠甚至瘫痪等。
国家已经明令禁止盐酸克仑特罗在动物饲养中使用。
本试纸用于猪和牛尿液、肉、酱肉及其食用饲料中的盐酸克仑特罗残留的快速筛选检测。
【检测原理】本试纸采用竞争抑制免疫层析技术的原理来测定动物尿液、组织和饲料中的盐酸克仑特罗。
试剂含有被预先固定于膜上检测带（T）的盐酸克仑特罗偶联物和被胶体金标记的抗盐酸克仑特罗单克隆抗体。
检测时样品和标记抗体竞争结合偶联物。
检测限为3ng/ml（3ppb）。
【样品制备】1.尿液：样本必须用洁净、干燥不含有任何防腐剂的塑料尿杯或玻璃容器收集。
可直接检测，如有浑浊请先离心（3000rpm,5min）取上清。
若不能及时检测送检，尿样样本在2-8℃冷藏可以保存48小时。
长期保存需冷冻于-20℃，忌反复冻融。
2.肉：装入大约4克碎的肉样本（肉泥）于离心管中（酱猪牛肉加2ml水或PBS），盖紧管盖，在80℃左右的水浴锅中水浴10 分钟；吸取煮出的溶液到1.5ml的离心管中。
如有明显黄色浑浊请离心（3000rpm,5min），取上清检测。
如果检测牛肉请吸出肉汤离心(3000rpm,5min)，取上清检测。
3.饲料：取1g样品粉末于离心管中，加入5ml水，混匀，置于超声波水浴中超声30min（每10min取出混匀1次），超声提取后冷却至室温，于3000rpm离心5min，取上清液进行测试。
【操作步骤】1.在进行测试前先仔细阅读使用说明书，使用前将本品和待检样本溶液恢复至室温。
2.从原包装中取出试剂，打开后平放在桌面上，请在1小时内尽快使用。
3.吸取待检样品溶液，缓慢滴加80~100μl(约2~3滴）于加样孔中，加样后开始计时。
瘦肉精(盐酸克伦特罗)快速检测卡
猪瘟抗体快速检测试剂盒——（胶体金法）使用说明书一、原理：本试纸采用酶联免疫原理和胶体金层析技术制成快速检测猪血清中的猪瘟抗体。
将猪瘟抗原包被在硝酸纤维素膜的检测线（T）上，兔抗猪瘟抗体包被在硝酸纤维素膜的质控线（C）上，用胶体金标记的猪瘟抗原干燥后置于玻璃纤维素膜下端。
当血清加入加样孔内，由于层析的原理，血清开始沿纸条移动，当遇上干燥的金标抗原，将其溶解，并带着金标抗原继续往上移动，至硝酸纤维素膜的检测线。
如果样品中有猪瘟抗体存在时，会与玻璃纤维素上的金标猪瘟抗原和包被在检测线上的猪瘟抗原，在检测上形成一个夹心的免疫复合物，呈一条紫红色线。
样品中的抗体越高，色线颜色越深，判定为阳性。
如果样品中没有猪瘟抗体，检测线（T）线上没有色带出现，判定为阴性。
样品和金标抗原继续往上移至质控线时，此处的兔抗猪瘟抗体将会同金标猪瘟抗原结合，在质控线（C）上形成一条紫红色线，证明本试纸有效。
整个试验仅需20分钟。
操作简便、快速、准确、灵敏度高，直观、结果容易判定。
二．产品组成：1、检测卡(1个)：由一特制的塑料检测卡将猪瘟抗体检测试纸条夹于卡内，卡面上设有加样孔和观察孔。
加样孔作为加入待检血清，观察孔内为试剂检测线（T），试剂质控线（C）。
一个检测试剂卡用一个铝箔袋包装，内装干燥剂。
2、吸样管1个；3、5份塑料手套；4、使用说明书一份。
三．操作方法：1．用1.5ml样品管，采血0.5~1ml待检测血清自然析出或用离心机离心10分钟左右，使血清析出。
2．将检测卡平置于桌面上，用吸样管吸取被检血清，在检测卡的椭圆形加样孔内加入2滴约80~100ul。
在室温下反应20分钟判定结果。
（检测卡如在4℃保存，必须恢复至室温后方可进行检测）四．结果判断：1．阳性：在检测线（T）处，质控线（C）处，各出现一条紫红色条带，判定为阳性；检测线（T）处条带色泽的深浅，依检测样品中猪瘟抗体效价的高低而变化，效价越高色带越深，反之越浅。
盐酸克伦特罗(瘦肉精)快速检测卡说明书
盐酸克伦特罗（瘦肉精）快速检测卡说明书【产品名称】产品名称：盐酸克伦特罗快速检测卡（胶体金法）英文名称：Clenbuterol Rapid Test Card(Colloidal Gold)【产品简介】盐酸克伦特罗（瘦肉精主要成分）是为提高猪肉瘦肉率而使用的兴奋剂药物，在动物可食性组织中蓄积，危害食用者的健康，我国已经禁止用其做动物饲料添加剂。
本产品用于快速检测猪肉和其他肉类肌肉组织中盐酸克伦特罗残留，检测过程只需20分钟，适用于家庭、超市、食堂、食品企业及检测机构快速筛查。
【产品组成】盐酸克伦特罗快速检测卡（5条）；200μL刻度吸管（5支）；提取瓶（内含盐酸克伦特罗提取液0.5mL，5瓶）；小勺（1个）。
【检测原理】本产品采用了竞争抑制免疫层析的原理。
【检测限】本产品检测方法对肌肉组织中盐酸克伦特罗的检出限为5 μg/kg。
【使用方法】1、取一小块瘦肉，用刀切成碎肉，用小勺将碎肉装入提取液的瓶盖内，高度与瓶盖相平（约2.0g）。
2、将瓶盖量取的碎肉转移到提取瓶内，盖紧瓶盖后振荡，使碎肉与提取液充分混匀，放入盛有热水(>80℃)的容器中热水浴10分钟后取出，冷却至室温。
3、从包装袋中取出检测卡，平放在桌面，用吸管从提取瓶中吸取肉品提取液，垂直滴加2-3滴于加样孔（S孔）中。
4、室温环境计时5分钟，对照结果判断示意图判定检测结果，其他时间判定无效。
【结果判断】阴性（-）：C线和T线都显色，表示样品中盐酸克伦特罗浓度低于检出限。
阳性（+）：C线显色，T线不显色，表示样品中盐酸克伦特罗浓度等于或高于检出限。
无效：C线未出现，表明操作过程不正确或检测卡已失效。
在此情况下，应再次仔细阅读说明书，并用新的检测卡重新测试。
【注意事项】1、请按照使用方法进行测试，检测卡打开包装后1小时内使用，检测前将检测卡恢复至室温。
2、尽量不要触摸检测卡中央的白色膜面，检测时避免阳光直射。
3、本检测卡为一次性产品，请勿重复使用。
盐酸克伦特罗检测标准
盐酸克伦特罗检测标准盐酸克伦特罗是一种常用的药物成分，广泛应用于医药和化工领域。
为了确保盐酸克伦特罗产品的质量和安全性，需要进行严格的检测和监管。
本文将介绍盐酸克伦特罗的检测标准，以及相关的检测方法和技术要求。
一、盐酸克伦特罗的检测标准。
1.外观和性状检测。
盐酸克伦特罗的外观和性状是其质量的重要指标之一。
在检测过程中，需要对其外观、颜色、气味、溶解性等进行全面的检验，确保符合相关标准要求。
2.纯度检测。
盐酸克伦特罗的纯度直接影响其药效和安全性。
常用的检测方法包括高效液相色谱法（HPLC）、气相色谱法（GC）等，通过检测其主要成分的含量来评估其纯度。
3.杂质检测。
杂质是影响盐酸克伦特罗质量的重要因素之一。
常见的杂质包括重金属、有机物和微生物等，需要通过相关的检测方法进行分析和鉴定，确保符合卫生标准和药品质量要求。
4.稳定性检测。
盐酸克伦特罗在储存和运输过程中容易受到光、热、氧等因素的影响，导致其稳定性下降。
因此，需要对其在不同条件下的稳定性进行测试，确保其在规定的有效期内保持稳定。
二、盐酸克伦特罗的检测方法和技术要求。
1.样品的制备。
在进行盐酸克伦特罗的检测前，需要对样品进行适当的制备和前处理工作，以确保检测结果的准确性和可靠性。
2.检测设备和仪器。
常用的盐酸克伦特罗检测设备和仪器包括高效液相色谱仪、气相色谱仪、紫外-可见分光光度计等，需要保证其性能稳定、准确度高，符合相关的检测标准和要求。
3.操作规程和方法。
在进行盐酸克伦特罗的检测过程中，需要严格按照操作规程和方法进行操作，确保检测过程的准确性和可重复性。
4.质量控制和数据处理。
在检测过程中，需要建立严格的质量控制体系，对实验数据进行及时、准确的处理和分析，确保检测结果的可靠性和准确性。
三、结论。
盐酸克伦特罗的检测标准是保障其质量和安全的重要手段，通过严格的检测和监管，可以有效地控制产品质量，保障人民群众的用药安全。
我们应该不断完善相关的检测方法和技术要求，提高检测的准确性和效率，为盐酸克伦特罗产品的质量和安全提供有力的保障。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
2. 测定原理
本试剂盒采用间接竞争 ELISA 方法，在微孔条上预包被恩诺沙星卵清蛋白的偶联物。检测时，加入恩诺沙星标准 品或待测样品溶液及特异性的抗恩诺沙星抗体，包被在微孔板上的恩诺沙星蛋白偶联物和标准品或样品中的恩诺沙星 竞争性地与抗体结合。再加入酶标二抗, 形成抗原抗体复合物；洗涤后加入显色剂，结合的酶将无色的显色剂转化为蓝 色的产物；加入反应终止液后使颜色由蓝色变为黄色；在 450nm 波长进行检测，样品中的恩诺沙星浓度与吸收光强度 成反比，与标准曲线比较即可得出相应残留物恩诺沙星的含量。
11. 灵敏度
恩诺沙星检测试剂盒的检测限： 鸡肉、鱼、虾：0.6ng/g
3
深圳市易瑞生物技术有限公司 Tel：0755-29744527
Fax：0755-27948417
%Maximum Absorbance
100
80
60
40
20
0
0
0.5 1.5 4.5 13.5 40.5
ENR(ng/ml)
Calibration Curve of ENR ELISA Kit
4. 需要但试剂盒中不提供的器材和试剂
（1）设备 …均质器 …天平，精度 1mg …15ml、50ml 塑料离心管 …5、10ml 刻度移液管 …振荡器 …恒温水浴锅 …离心机 …氮吹仪或旋转蒸发仪 …恒温箱
1
深圳市易瑞生物技术有限公司 Tel：0755-29744527
Fax：0755-27948417
8. 免疫分析时试剂的准备
注意事项
a) 使用之前将所需试剂在室温放置至少半小时, 让温度回升至室温，特别是测试板孔、稀释抗体的洗涤液、
稀释浓缩酶结合物的洗涤液、标准品溶液、样品液等。
b) 使用之后立即将所有试剂放回 2-8பைடு நூலகம்。
2
深圳市易瑞生物技术有限公司 Tel：0755-29744527
Fax：0755-27948417
12. 特异性
与类似物的交叉反应率：
恩诺沙星:
100%
环丙沙星:
107.89%
诺氟沙星:
67.61%
培氟沙星:
43.25%
氧氟沙星:
23.27%
洛美沙星:
6.01%
沙拉沙星:
<0.5%
甲磺酸达氟:
<0.5%
13. 回收率
鱼、虾、鸡肉等: 80±15%
4
深圳市易瑞生物技术有限公司 Tel：0755-29744527
恩诺沙星酶联免疫检测试剂盒使用说明书
1. 用途
恩诺沙星，是喹诺酮类抗菌药，因其能抑制细菌DNA螺旋酶，抗菌谱广、高效、低毒、组织穿透力强，已成为兽 医临诊和水产养殖中最重要的抗感染药物之一，被大量用于治疗、预防和促进生长。但由于其耐药性和潜在的致癌性， 欧盟、日本及我国均制定了在组织中的最高残留限量为100ppb。目前对恩诺沙星的检测方法主要有荧光分光光度法、 酶联法（ELISA）和液相色谱法等。ELISA方法具有灵敏度高、特异性强、不需要贵重仪器和样本前处理相对简单等优 点，适于现场监控和大量样本筛查。
3. 试剂盒组成
（1） 酶标板(已包被恩诺沙星卵清蛋白偶联物的微量反应板):1 块（8 孔 X 12 条）。 （2） 恩诺沙星标准液:6 瓶（1ml/瓶），浓度分别为 0、0.5ng/ml、1.5ng/ml、4.5ng/ml、13.5ng/ml、40.5ng/ml （3） 浓缩酶结合物( 羊抗鼠 IgG-辣根过氧化物酶结合物溶液): 1 瓶（10 倍, 1.6ml） （4） 浓缩抗体：1 瓶（10 倍, 0.8 ml） （5） 显色剂 A：1 瓶（8ml） （6） 显色剂 B：1 瓶（8ml） （7） 终止液：1 瓶（8ml） （8） 浓缩洗涤液：1 瓶（10 倍, 50ml/瓶）,用于浓缩酶结合物和浓缩抗体的稀释以及微孔板的洗涤 （9） 使用说明书：1 份。
c) 在使用中不要让微孔干燥。 d) 在 EIA 分析中的重复性，很大程度上取决于洗板的一致性，仔细按照推荐的洗板顺序操作是 EIA 测定程
序中的要点。 e) 在所有恒温孵育过程中，避免光线照射，用膜盖住微孔板。 （1）配制洗涤液:浓缩洗涤液为浓缩 10 倍的溶液，使用前应根据所需量进行 10 倍稀释，即按 1ml 浓缩洗涤液加 入 9ml 蒸馏水的比例进行稀释。 （2）配制恩诺沙星抗体应用液：提供的恩诺沙星抗体为浓缩液。按照 1：10 稀释（1μl 浓缩抗体加 9μl 洗涤液）。 在吸取浓缩液之前，要仔细地摇动，剩余的放置于 2-8℃保存。每次抗体应用液应现配现用。 （4）配制酶结合物应用液：提供的酶结合物为浓缩液。按照 1：10 稀释（1μl 浓缩酶结合物加 9μl 洗涤液）。在 吸取浓缩液之前，要仔细地摇动，剩余的放置于 2-8℃保存。每次酶结合物应用液应现配现用。
9. 测定程序
（1） （2）
（3） （4） （5）
（6）
（7） （8）
将标准液、样品所需微量反应板（均需 2 个平行试验）放在反应架上。 加 50μl 的标准液或处理好的样品液到相应的微孔中，然后加 50μl 稀释好的抗体应用液，用膜盖好，37℃ 下反应 30 分钟。 弃去孔中液体，并将微孔板剩余残液在吸水纸上拍干。每孔注满稀释好的洗涤液， 轻轻振荡，放置 2 分钟，弃去孔中液体，并在吸水纸上拍干，重复洗涤 4 次，或洗板机洗五次。 加 100μl 酶结合物应用液（已稀释 10 倍的羊抗鼠 IgG-辣根过氧化物酶结合物溶液）到微孔板中，用膜盖 好，37℃下反应 30 分钟。 弃去孔中的液体，并将微孔板剩余残液在吸水纸上拍干，每孔注满稀释好的洗涤液，轻轻振荡，放置 2 分钟，弃去孔中液体，并在吸水纸上拍干，重复洗涤 4 次，或洗板机洗五次。 显色剂 A 和 B 以 1：1 充分混合后，加 100μl 到微孔中，并在 37℃暗处孵育 15 分钟。 加 50μl 终止液到微孔板中，在 450nm 处测量吸光度值。
（1） 2-8℃保存，切勿冷冻。 （2） 将不用的酶标板放进原袋中重新密封。 （3） 酶结合物和显色剂对光敏感，因此要避免直接暴露在光线下。
7. 样品处理
样品处理： 鱼、虾和鸡肉： (1) 鱼虾、鸡肉等去皮、脂肪，用均质器均质样本，称取 2±0.05g 均质物，加入 15ml 离心管; (2) 加入 5ml 乙腈，1ml 0.1M NaOH，充分混合 10min，3000 转/分以上，离心 10min; (3) 取出 4ml 上清液，加入 PB 缓冲液 2ml，混合均匀； (4) 加入二氯甲烷 5ml，充分混匀 10min，3000 转/分以上，离心 10min。去上层，取下层有机相 4ml 到 15ml 离心 管中（清亮无杂质）； (5) 50℃用氮气吹干； (6) 0.5ml PB 缓冲液溶解干燥的残留物，加入正己烷 1ml 混合 2min，3000 转/分以上，离心 5min。 (7) 取下层 50ul 溶液。 样本稀释倍数 1 倍。
10. 结果
计算百分吸光度值： 标准品（或样品）的吸光度平均值 -----------------------------------×100 = %吸光度值 0 标准品的吸光度平均值 以标准品浓度的 10 为底的对数为 X 轴， 百分吸光度值为 Y 轴，绘制标准曲线。将测得的样本的百分吸光度值代 入标准曲线，从标准曲线上读出样本所对应的值，作为 10 的幂，乘以稀释倍数，即为样品中所含恩诺沙星的量。
Fax：0755-27948417
…微孔板酶标仪(450nm) …20μl, 200μl, 1000μl，八道 100 或 200μl 移液枪 （2）试剂 …二氯甲烷 …双蒸水 …正己烷 …乙腈 …0.1M NaOH 溶液：0.4gNaOH 溶于 100ml 双蒸水 …PB缓冲液：0.52gNa2HPO4 , 0.088gNaH2PO4 溶于 100ml 双蒸水
5. 注意事项
（1）终止液为 2M 硫酸，避免接触皮肤。 （2）不要使用过了有效日期的恩诺沙星检测试剂盒，不同批次、不同试剂盒之间的试剂等内容不可混用，以免降 低灵敏度。 （3）0 标准液的A450nm<0.6 时，表示试剂可能变质，请勿使用。 （4）显色剂变蓝，表明已变质，请勿使用。
6. 储存条件