公卫执业医师考试辅导：免疫比浊法的原理
免疫比浊检验技术原理与进展 ppt课件
PPT课件
26
3、免疫学检测技术
凝集放射性核素标记 酶标记、荧光标记和胶 体金标记 化学发光物标记或偶联 化学发光反应
27
标记免疫检测技术
PPT课件
二、免疫沉淀
凝集：细菌、螺旋体和红细胞等颗粒抗原，在适当电解质 参与下可直接与相应抗体结合出现凝集，称为凝集反应 （agglutination）是最经典的免疫学检测技术。
PPT课件
8
半抗原 +
载体
完全抗原
B B B
B Th
Th
抗体
半抗原—载体效应示意图
PPT课件 半抗原 + 蛋白质（载体） ＝ 完全抗原 9
1、抗原与抗体
抗原决定簇：抗原分子存在的能TCR/BCR或抗体Fab片 段特异性结合的特殊化学基团，是免疫应答特异性的 物质基础。 构象决定簇 ：构象决定簇（conformational determinant） 由空间构象形成的决定簇，序列上不连续。 顺序决定簇：顺序决定簇（sequence determinant），又 称线性决定簇（linear determinant），序列相连续的 氨基酸肽片段构成的决定簇。 抗原结合价：抗原结合价（antigenic valence）是指能够 与抗体分子结合的决定簇数目。
免疫比浊分析技术原理与进展
PPT课件
1
免疫比浊检验技术原理与进展
一、免疫学基本原理 二、免疫沉淀 三、免疫比浊技术原理
PPT课件
2
一、免疫学基本原理
1、抗原与抗体 2、抗原抗体的结合——免疫学反应 3、免疫学反应的检测技术
PPT课件
3
1、抗原与抗体
抗原（Antigen, Ag）是刺激机体产生免疫应 答的物质。 “应” 是指抗原刺激机体产生免疫应答产物-抗体或免疫效应细胞 “答” 是指相应抗原与免疫应答产物结合并 将其排除体外） 抗原的免疫原性和免疫反应性 完全抗原与半抗原 抗原表位与抗原结合价位
免疫比浊法检测免疫球蛋白
本实验中应用聚乙二醇的生理特性 聚乙二醇是中性、无毒且具有独特理化性质和良好的 生物相溶性的高分子聚合物，聚乙二醇即PEG具有高度 的亲水性，在水溶液中有较大的水动力学体积，并且 没有免疫原性。当藕联到药物分子或药物表面时，可 以将其优良性质赋予修饰后的药物分子，改变它们在 水溶液中的生物分配行为和溶解性，在其修饰的药物 周围产生空间屏障，减少药物的酶解，避免在肾脏的 代谢中很快消除，并使药物能被免疫系统的细胞识别 。
光通量是每单位时间到达、离开或通过曲面 的光能数量
散射比浊法
• 原理 在入射光的一定角度检测粒子发出的散 射光，散射光的强度与IC的含量呈正比。
散射比浊法测定原理
聚集形成
诱导剂
增 加 散 透 率 : 660nm 测 定 散 射 光
散射光测定
检测器 (LED) 样品
光电计 散射光强度
100 %
0%
免疫浊度法测定中应注意的问题 1、伪浊度的影响 伪浊度形成原因很复杂，主要是抗血清含有非特 异性的交叉反应性杂抗体成分；增浊剂浓度和反应时间 掌握不当；样品本身的浊度处理不当；试剂的污染和变 质；器材尤其是比色杯等不够清洁等因素。 2、非特异性散射光的影响 免疫浊度法经常受内源性光散射的干扰，为避免这 些非特异性光散射的影响，应用透射比浊法时需保证抗 体组分在3％以下，散射比浊法需保证在 0.5％以下。
时间
速率散射比浊法
（一）基本原理
— 是测定抗原抗体结合反应的动态过程。 — 所谓速率，是在单位时间内抗原抗体结合形成 复合物的速度。将各单位时间内形成复合物的 速率及测定的散射信号连接在一起，即是动态 的速率比浊分析。 — 当仪器测定到某一时 间内形成速率下降时， 即出现速率峰，该峰 值的高低，即代表所 测抗原的量。
免疫比浊检验技术原理
自动化检测
免疫比浊检验技术可以与自动化仪器配合使用， 提高检测效率和准确性。
免疫比浊检验技术的原理
在免疫比浊检验技术中，检测物质与特异性抗体结合形成免疫复合物，这些 复合物会在溶液中形成可见的浑浊度，浑浊度与物质浓度呈正相关。
免疫比浊检验技术的步骤
3
样本准备要求高
样本的预处理对测量结果有一定影响，样本准备要求较高。
免疫比浊检验技术的未来发展方向
未来，免疫比浊检验技术有望进一步发展，结合新的成像和数据处理技术，实现更高的灵敏度和准确度，以满 足更多领域的需求。
在药物研发过程中，可以 用于评估药效和药代动力 学。
3 环境监测
用于检测环境中的毒性物 质，保护人类健康和环境 安全。
免疫比浊检验技术的优点
准确度高
相对传统的比色法和酶联免疫吸附法，免疫比浊检 验技术具有更高的准确度。
快速得出结果
免疫比浊检验技术通常只需要几分钟到几小时，可 以得到快速的检测结果。
免疫比浊检验技术原理
免疫比浊检验技术是一种基于光学原理的生化分析方法，通过测量溶液中悬 浮颗粒的浑浊度来确定其对应的分析物浓度。
免疫比浊检验技术的定义
快速、灵敏
通过相对简单的操作流程，可以快速检测样本 中微量物质的浓度。
数量测定
可以准确测定血液、尿液、唾液等生物样本中 的特定分析物的浓度。
广泛应用
1
样本预处理
将待测样本进行预处理，如离心、稀释等，以提高结果的准确性。
2
免疫反应
将样本与特异性抗体一起反应，允许免疫复合物形成。
3
测量浑浊度
利用光学仪器测量样品溶液的浑浊度，得到测量结果。
免疫比浊法检测免疫球蛋白
材料
1.免疫球蛋白试剂A,M,G 2.免疫球蛋白试剂A,M,G校准品，蒸馏水 3.微量加样枪 4.分光光度仪
结果计算方法
样本管吸光度 Ig浓度（g/L）= 校准管浓度 × Ig校准浓度（g/L）
光通量是每单位时间到达、离开或通过曲面 的光能数量
散射比浊法
• 原理 在入射光的一定角度检测粒子发出的散 射光，散射光的强度与IC的含量呈正比。
散射比浊法测定原理
聚集形成
诱导剂
增 加 散 透 率 : 660nm 测 定 散 射 光
散射光测定
检测器 (LED) 样品
光电计 散射光强度
100 %
0%
在速率峰基础上完成的标准曲线
RATE
CONCENTRATION
方法评价：
敏感度高 快速(不必达平衡）
抗原抗体结合的动态测定，理论上测定不
受本底散射信号的影响
可检测微量样品
2.终点散射比浊法
• 原理
让抗原抗体作用一定时间，使其反应达到平衡后， 测定其IC形成的量。IC的浊度不再受时间的影响，但 反应IC聚合产生絮状沉淀之前，进行浊度测定。
免疫浊度法测定中应注意的问题 1、伪浊度的影响 伪浊度形成原因很复杂，主要是抗血清含有非特 异性的交叉反应性杂抗体成分；增浊剂浓度和反应时间 掌握不当；样品本身的浊度处理不当；试剂的污染和变 质；器材尤其是比色杯等不够清洁等因素。 2、非特异性散射光的影响 免疫浊度法经常受内源性光散射的干扰，为避免这 些非特异性光散射的影响，应用透射比浊法时需保证抗 体组分在3％以下，散射比浊法
光 源
诱 导 剂
透射比浊法测定原理
样品
光电计
滤光片 光源
透射比浊法的缺陷：
免疫比浊法原理
免疫比浊法原理
免疫比浊法是一种常用的实验方法，用于测定物质的浓度。
其原理基于免疫学中的抗原-抗体反应。
在免疫比浊法中，首先需要准备一个已知抗原浓度的溶液作为标准溶液。
然后，将待测抗原溶液与相应的抗体溶液混合，使抗原与抗体发生特异性结合。
接着，加入一种适当的染色剂，使得结合后的抗原-抗体复合物形成可见的沉淀。
测定过程中，通过测量混合液的比浊度，即溶液中悬浮颗粒的密度与大小，可以确定抗原的浓度。
比浊度与溶液中悬浮颗粒的聚集程度成正比，浓度越高，颗粒越多，聚集程度越大。
因此，比浊度的增加反映了抗原浓度的增加。
为了确保测定结果的准确性，通常需要进行空白对照实验。
空白样品中不添加抗原，但同样进行抗体结合和染色剂反应，以消除其他非特异性反应的干扰。
免疫比浊法在生物医学领域广泛应用于疾病诊断、药物监测和研究等方面。
由于其简便、快速、灵敏度高等优点，成为了免疫学研究中不可或缺的重要工具之一。
实验测试方法免疫比浊法原理
实验测试方法免疫比浊法原理免疫比浊法（immunoturbidimetry）是一种常用的实验测试方法，用于测定血清或尿液中特定分析物质的浓度。
它基于免疫学原理，通过测量可见光的散射程度来获得目标物质的浓度信息。
在实验中，样品中的目标物质与专门设计的抗原抗体反应，形成可见性沉淀物，从而引起溶液的浑浊程度的变化。
免疫比浊法的原理可以概括为以下几个步骤：1.抗原抗体反应：在实验开始前，需要将抗原抗体组分预先混合。
抗原可以是目标物质的衍生物或合成物，而抗体是特异性识别和结合抗原的蛋白质。
2.沉淀形成：向样品中加入混合的抗原抗体溶液，使其与样品中的目标物质相互作用。
当目标物质存在于样品中时，抗体会识别并与其结合，形成可见性沉淀物。
3.光散射测量：实验中使用的光散射测量器可以测量光线通过沉淀物混浊的溶液时的散射程度。
目标物质的浓度越高，形成的沉淀物越多，溶液的浑浊程度越高，从而引起更强的散射。
4.标准曲线计算：为了准确测量目标物质的浓度，需要根据已知浓度的标准品制备一条标准曲线。
标准品的浓度范围一般从低浓度到高浓度逐步增加。
通过测量标准品和待测样品的散射程度，并使用标准曲线进行外推和内推，可以得出待测样品中目标物质的浓度。
免疫比浊法的优点包括操作简单、结果快速、成本较低和高灵敏度。
然而，它也存在一些限制和注意事项。
由于光散射测量主要基于理论计算，因此需要确保实验中的测量条件如温度、光源强度和检测器的响应都是稳定和准确的。
另外，免疫比浊法在样品中可能存在其他干扰物质时可能会失去灵敏度和特异性。
因此，在进行免疫比浊法实验时，需要进行一系列的控制实验来检测和排除干扰因素。
除了免疫比浊法，还有其他一些常用的免疫学方法，如酶联免疫吸附试验（ELISA）和放射免疫分析（RIA）。
这些方法在分析物质浓度的测量范围、特异性和精确度方面可能略有不同。
因此，在选择适当的实验方法时，需要考虑样品性质、目标物质的特征和实验室的设备和技术条件。
免疫比浊法名词解释
免疫比浊法名词解释
嘿，朋友们！今天咱来聊聊免疫比浊法。
这免疫比浊法啊，就好比是一场“战斗”！
想象一下，身体里有好多小“敌人”，也就是各种抗原啦。
而我们要怎么发现这些“敌人”呢？免疫比浊法就闪亮登场啦！它就像是一个超级厉害的“侦探”，能把这些抗原给揪出来。
它的原理呢，其实也不难理解。
就是让抗原和专门对付它的抗体相遇，然后它们俩一结合，就会形成一些复合物。
这些复合物可不是普通的东西哦，它们会让溶液变得浑浊起来。
就好像原本清澈的水里突然多了很多杂质，变得不那么透明了。
然后呢，我们就可以通过一些仪器，去测量这种浑浊度。
浑浊度越高，说明抗原越多呀！这是不是很神奇？
你说这免疫比浊法是不是很厉害？它能帮我们检测好多东西呢！比如说一些疾病的标志物，这样医生就能更快更准确地判断我们的身体状况啦。
而且啊，免疫比浊法还挺“聪明”的呢！它可以分为透射比浊法和散射比浊法。
这就像是有两个不同“性格”的侦探，各有各的本事。
透射比浊法呢，就像是一个老老实实一步一个脚印的侦探，它通过直接测量透过溶液的光的强度来判断。
而散射比浊法呢，就像是一个更机灵一点的侦探，它通过测量散射光的强度来发现线索。
你看，这免疫比浊法多有意思啊！它在医学领域可是发挥了大作用呢。
没有它，我们怎么能那么快那么准确地知道自己身体里的情况呢？
免疫比浊法真的是医学检测的好帮手啊！它就像是一道光，照亮了我们了解身体内部世界的道路。
它让我们对疾病有了更及时的发现和应对，难道不是吗？所以啊，可别小瞧了这免疫比浊法，它可是守护我们健康的重要一环呢！。
免疫比浊检验技术原理与进展
新型免疫比浊法研究动态
纳米颗粒增强免疫比浊法
01
利用纳米颗粒的高比表面积和光学性质，提高抗原抗体复合物
的浊度变化，从而提高检测灵敏度。
均相免疫比浊法
02
在反应体系中直接加入抗原抗体复合物，通过浊度变化检测待
测物，无需分离步骤，简化实验操作。
多重免疫比浊法
03
同时检测多个目标物，提高检测通量和效率，满足临床多样化
需求。
存在问题与挑战分析
抗原抗体复合物稳定性
复合物在反应体系中的稳定性直接影响浊度变化的准确性和可重复性，需要优化复合物制备和保 存条件。
非特异性干扰
血清等样本中的非特异性物质可能干扰免疫比浊反应，导致结果误差，需要采取相应措施降低干 扰。
自动化与标准化
当前免疫比浊法操作仍较为繁琐，需要进一步提高自动化程度，同时推动标准化进程，以确保结 果的准确性和可比性。
肿瘤标志物检测中的应用
01
肝癌
通过检测甲胎蛋白（AFP）等肿 瘤标志物，可辅助诊断肝癌及判 断其预后。
卵巢癌
02
03
前列腺癌
免疫比浊法可检测癌抗原125 （CA125），用于卵巢癌的诊断 和病情监测。
通过检测前列腺特异性抗原 （PSA），有助于前列腺癌的早 期发现和诊断。
05 免疫比浊法研究进展及挑 战
探讨了免疫比浊检验技术在临床实验室中的应用，如特定蛋白的 测定、药物监测等，并强调了质量控制的重要性和实施方法。
对未来发展趋势的展望
自动化与智能化
多项目联合检测
随着科技的进步，未来免疫比浊检验技术 将更加自动化和智能化，提高检测效率和 准确性。
开发能够同时检测多个项目的免疫比浊试 剂盒，以满足临床实验室对于高通量、高 效率的检测需求。
自动化分析 (免疫比浊)
自动化分析 (免疫比浊)自动化分析 (免疫比浊)一、引言免疫比浊是一种自动化分析方法，通过测量免疫反应中形成的免疫复合物的浊度来检测样品中特定抗原或抗体的存在或浓度。
本文档旨在提供关于自动化分析 (免疫比浊)的详细信息和操作指南。
二、背景1. 免疫比浊的原理：免疫比浊基于免疫反应导致的免疫复合物形成的特性，即抗原和抗体相互结合产生可见的浊度。
测量这种浊度可以提供关于抗原或抗体的定量信息。
2. 仪器设备：免疫比浊分析通常使用细菌二联体仪器或其他具有浊度测量功能的仪器进行测量。
3. 样品处理：样品在进行免疫比浊分析之前需要进行适当的处理，如稀释、去除干扰物质等。
三、方法1. 样品准备：根据需要的抗原或抗体浓度范围，选取适当的稀释倍数来稀释样品。
确保样品中不含有干扰物质。
2. 试剂准备：准备好所需的抗体或抗原溶液，并按照说明书中的指导来配制试剂。
3. 仪器操作：将稀释后的样品和配制好的试剂加入到测量池中，按照仪器操作指南进行测量。
4. 数据分析：根据仪器的测量结果，结合相应的标准曲线或计算方法，计算出样品中抗原或抗体的浓度。
四、注意事项1. 严格按照操作指南进行操作，避免出现误差；2. 样品稀释倍数要根据实际情况选择，确保在仪器的测量范围内；3. 遵循试剂的储存和使用要求，确保试剂的活性；4. 仪器的保养和校准要定期进行，以保证数据的准确性。
五、附件本文档涉及的附件详见附件清单。
六、法律名词及注释1. 免疫反应：免疫系统对抗原的特异性应答，包括抗体的和细胞免疫反应等。
2. 免疫复合物：抗原和抗体结合形成的复合物，通常可导致可视的浊度。
3. 抗原：能够诱导免疫反应的物质，通常为细菌、病毒、蛋白质等。
4. 抗体：免疫系统产生的一种特异性蛋白质，能够与特定的抗原结合并参与免疫反应。
免疫比浊分析
（三）技术要求
• 待测的抗原抗体复合物分子量足够大。
• 抗原抗体复合物数量足够多。 • 具有充分的反应时间，只能测定抗原抗 体反应的第二阶段。 • 高亲和力的抗体，并保证抗体过量。
（四）方法评价
优点: 灵敏度高，稳定性好，操作简便，结果准确 不足: ①抗体用量较大； ②溶液中存在的抗原－抗体复合物分子应足够大 ③透射比浊测定在抗原－抗体反应的第二阶段，检 测需在抗原抗体反应达到平衡后进行，耗时较长。
1．抗原抗体比例 抗原抗体比例要适当。 诊断试剂应尽可能 溶液中免
颗粒上的抗体与抗原特异结合，引起胶乳颗粒凝
聚 ，使透射光和散射光即出现显著变化。
三、免疫胶乳比浊法
（一）原理：
第二节 自动化免疫比浊分析
一、主流免疫比浊设备概况
（一）BN特种蛋白分析测定系统 1.测定原理 该系统的测定方法是透射免疫比浊法的 一种改良。以发光二极管作为光源，检测前
向角13～24度的散射光，然后利用硅化光电
二、免疫散射比浊法
(一) 原理 粒子对光线的散射作用是溶液中的微粒子受到 光线照射后，微粒子对光线产生反射和折射而形成 散射光。 悬浮微粒对光散射形成的散射光强度与微粒的 大小、数量、入射光的波长和强度、测量角度等因 素密切相关。
不同大小的微粒形成的散射光分布不同。
当微粒直径小于入射光的波长的十分之一时，
(二) 技术要求 应选择适当的光源强度、反应时间、测量角 度及光源的波长。 另外，要注意保证抗原浓度合适。 此外，还要选择适宜的离子强度、pH值等。
(三)速率散射比浊法（rate nephelometry） 速率散射比浊法是抗原抗体结合反应的一种动 态测定方法。
所谓速率是指抗原抗体反应在单位时间内形成免
免疫球蛋白G(IgG) 免疫比浊法
项目免疫球蛋白G（IgG）方法免疫比浊法目录1．检测原理2．标本采集与处理2.1 受检者的准备2.2 静脉采血2.3 抗凝剂2.4 标本处理3．试剂3.1 试剂3.2 校准血清3.3 试剂与校准血清的稳定性4．仪器5．操作6．计算7．操作性能7.1 精密度7.2 准确度7.3 灵敏度7.4 可报告范围7.5 特异性7.6 干扰8．参考值9．临床意义附录A: 参数1. 检测原理405nm样本中IGG + 试剂中的IGG抗体-----------------大分子免疫复合物在405nm监测生成的复合物的浊度变化，与样本中IGG含量成正比。
2. 标本采集与处理2.1 受检者的准备：病人空腹12h，不饮酒24h后采集血样。
体检对象抽血前应有两周的的正常状况记录。
注意有无应用影响测试项目的药物。
此外，对于体检者，采血的季节都应做相关记录，因为样本中各项目的含量有季节性变动，为了前后比较应在每年同一季节检验。
应嘱体检对象在抽血前24小时内不做剧烈运动。
2.2 静脉采血：除非是卧床的病人，一般在采血时取坐位。
体位影响水分在血管内外的分布，会影响测试项目的浓度。
在采血前至少应静坐5分钟，一般从肘静脉取血，使用止血带的时间不超过1分钟，穿刺成功后立即松开止血带。
2.3 抗凝剂：不使用抗凝剂。
2.4 标本处理：血标本室温放置30min～45min后离心分离血清，在两小时内检测完毕；如两小时内不能检测完毕，将离心分离血清置洁净试管加盖2-8℃保存。
3．试剂3.1 试剂：R1：PEG4 缓冲液：包含高分子强化剂的磷酸盐缓冲液。
含有0.095%的叠氮化钠。
R2：IgG抗血清，含0.095%的叠氮化钠。
3.2：校准血清使用湖南永和阳光科技有限责任公司提供的多项免疫类标准液。
其中包含免疫球蛋白G的定值。
校准频次：全点定标：试剂换批号使用时或质控结果超过规定的2SD范围，需要全点定标。
3.3 试剂与校准血清的稳定性：原包装试剂储存在2-8℃至标签所示失效日期。
crp免疫比浊法 原理
crp免疫比浊法原理哎呀，说起CRP免疫比浊法原理，你可能会觉得这玩意儿太专业，太枯燥了，对吧？但别急，让我给你慢慢道来，咱们用点大白话，就像聊天一样，说不定你会觉得这事儿还挺有意思的。
首先，CRP是啥？CRP，全称C-反应蛋白，它是一种蛋白质，在我们身体里，当有炎症发生的时候，CRP的水平就会升高。
所以，医生们经常用它来检测身体里有没有炎症。
那么，免疫比浊法又是啥呢？这其实是一种检测方法，就像是用一种特殊的“放大镜”来观察CRP。
这个“放大镜”其实就是一种特殊的抗体，它能够和CRP结合在一起。
当CRP和抗体结合后，它们会形成一种叫做“复合物”的东西，这个复合物在光线照射下会产生一种叫做“浊度”的现象。
想象一下，你把一滴墨水滴进清水里，那清水是不是就变浑浊了？对，CRP和抗体形成的复合物就像那滴墨水，让原本清澈的溶液变得浑浊。
这个浑浊的程度，就和CRP的浓度有关。
CRP越多，形成的复合物就越多，溶液就越浑浊。
那我们怎么测量这个浑浊程度呢？这时候就需要用到一种叫做“比浊仪”的设备了。
这个设备能够发出一束光，穿过含有CRP和抗体的溶液，然后测量光线被散射的程度。
散射得越多，说明溶液越浑浊，CRP 的浓度就越高。
我记得有一次，我去医院做体检，医生就给我做了CRP的检测。
那时候我正感冒，喉咙痛得要命。
医生给我抽了一管血，然后拿去化验。
我等了一会儿，结果就出来了。
CRP的值有点高，医生跟我说，这说明我身体里有炎症，需要好好休息，吃点消炎药。
你看，CRP免疫比浊法虽然听起来高大上，但其实它的原理挺简单的，就是利用抗体和CRP结合后产生的浑浊现象来检测炎症。
这种方法快速、准确，对医生来说是个很好的帮手。
所以啊，下次你再听到CRP免疫比浊法，可别觉得它遥不可及，其实它就在我们身边，帮助我们更好地了解自己的身体状态。
就像我那次感冒，如果不是CRP检测，我可能还不知道自己身体里有炎症呢。
这就是CRP免疫比浊法，一个听起来复杂，实则简单，而且对我们生活大有裨益的小秘密。
公卫执业医师考试辅导：免疫比浊法的注意事项
公卫执业医师考试辅导：免疫比浊法的注意事项
抗体（Ab)与可溶性抗原（Ag)反应，形成一定结构的免疫复合物，成为悬浮于反应溶液中的微粒。
在沉淀反应中形成的复合物微粒具有特殊的光学性质，可用仪器检测，提高了检测的速度、灵敏度和易操作性。
免疫比浊测定注意事项：
1、抗原或抗体量大大过剩，可出现可溶性复合物，造成误差；
2、应维持反应管中抗体蛋白始终过剩；
3、易受到脂血的影响。
公卫执业医师考试频道为大家推出【年公卫执业医师考试课程！】考生可点击以下入口进入免费试听页面！足不出户就可以边听课边学习，为大家的取证梦想助力!
【电脑用户】→点击进入免费试听>>。
免疫比浊法检测免疫球蛋白
随着技术的进步，免疫比浊法的检测过程将更加自动化和标准化，提高检测效率和准确 性。
多项目联合检测
未来免疫比浊法有望与其他免疫分析方法联合使用，实现多项目同时检测，提高诊断效 率。源自未来发展趋势及新技术应用前景
• 拓展应用领域：随着对免疫球蛋白研究的深入，免疫比浊 法的应用领域将进一步拓展，如疾病预后评估、免疫治疗 监测等。
力。
质评样本处理
02
按照质评计划要求处理质评样本，确保结果的准确性和可比性
。
结果分析与反馈
03
对室间质评结果进行认真分析，及时发现问题并采取改进措施
。
问题分析与解决策略
问题识别
通过室内质控和室间质评结果 分析，识别存在的问题。
原因分析
针对问题进行深入的原因分析 ，包括试剂、仪器、操作等方 面。
改进措施
影响。
06
总结与展望
免疫比浊法检测免疫球蛋白优势与局限性
灵敏度高
免疫比浊法能够检测到非常低浓度的 免疫球蛋白，具有较高的灵敏度。
特异性强
该方法使用的抗体具有高度的特异性 ，能够准确识别并定量目标免疫球蛋 白。
免疫比浊法检测免疫球蛋白优势与局限性
• 操作简便：免疫比浊法检测步骤相对简单 ，易于自动化和标准化，适用于大规模样 本检测。
分为血清型和分泌型两 种。血清型IgA主要存在 于血液中，而分泌型IgA 主要分布于呼吸道、消 化道等黏膜表面，是黏 膜免疫的主要抗体。
正常血清中含量极低， 主要参与I型超敏反应和 抗寄生虫免疫。当机体 发生过敏反应时，血清 中IgE水平会显著升高。
主要存在于B淋巴细胞表 面，作为B细胞分化发育 成熟的标志。在血清中 含量很低，其功能尚不 完全清楚。
免疫比浊法原理
免疫比浊法原理
免疫比浊法是检测类风湿因子的方法，是利用抗原和抗体相互结合，动态测定类风湿因子的方法，基本原理是抗原、抗体在特定稀释系统中反应，比例合适的时候形成可溶性免疫复合物，在稀释系统中的促凝剂作用下，从液体状态析出形成微粒，使反应液混浊，抗体浓度固定的时候形成的免疫复合物量，会随检测样中抗原量增加，反应液混浊度也会随之增加。
通过测定反应液的浊度，与一系列标准品进行对比，可以计算出检测样品中抗原含量。
所以，免疫比浊法是检测类风湿因子的定量检查，有时候在测定类风湿因子的时候会将检测方法写在检查结果后面，有利于临床医生对结果做出比较规范的判断。
在临床上也会采用其他检测方法进行类风湿因子的检测，有的是定性检测，报告只出现阴性、阳性结果，没有具体数值。
免疫比浊法是一种检测类风湿性因子的方法，是利用抗原抗体相互结合，动态测定类风湿因子的方法，其基本原理是：抗原、抗体在特定稀释系统中反应，适当比例后形成可
溶性免疫复合物，在稀释系统中的促凝剂作用下，从液体状态析出形成微粒，使反应液混浊，当抗体浓度固定时，所形成的免疫复合物量，就会随检测样中抗原量增加，反应液混浊度也会随之增加。
用该反应液测定浊度，并与标准系列产品对比，可计算出检测样品中抗原含量。
免疫透射比浊法 透射免疫比浊法检测的原理是
免疫透射比浊法一、原理当光线通过一个浑浊介质溶液时，由于溶液中存在混浊颗粒，光线被吸收一部分，吸收的多少与混浊颗粒的量成正比，这种测定光吸收量的方法称为透射比浊法。
这一方法早于1959 年Schultre 和Schuick 等报道应用于血浆蛋白与其抗体结合后形成复合物，导致浊度的改变，再进行透射比浊测定，一般采用抗体对抗原定量的透射比浊法，称为免疫透射比浊法。
其原理是，利用抗原和抗体的特异性结合形成复合物，通过测定复合物形成量的多少对抗原或抗体进行定量的方法。
在介质溶液中，抗原与特异性抗体在一定条件下才能形成复合物，一定的条件包括：①对抗体的要求，作为体液或组织中蛋白质种类很多，若要快速特异检测，要求有单价特异抗体才能与抗原形成复合物。
某一种蛋白质，有其特异抗体才能与该抗原结合，形成免疫复合物进行定量，若抗体不纯混杂有另一种或两种少量的抗体，这种免疫复合物就不是单一复合物而是大杂烩，结果偏高；②抗原抗体比例适当，因免疫复合物形成有三个阶段，第一阶段是复合物形成抗原抗体复合物；第二阶段是初步形成抗原抗体复合物，此阶段是复合物交联成大的网格状结构；第三阶段是复合物聚合产生絮状沉淀。
只有在抗原与抗体等价时即无过剩抗体，此时，复合物的结合与解离处于平衡状态，其混浊程度达高峰。
在抗体过量时，随抗原量的增加而复合物形成也增加，其测定只能在反应曲线的左侧进行（见图18-4 ）;3—般要求溶液中有非离子性亲水多聚体促进免疫复合物的形成，如聚二乙醇6000等。
溶液pH为6.5〜8.0之间为宜。
载脂蛋白有形成两性螺旋片（amphipathic helix ）的特性, 对脂质（特别是磷脂）有高度亲和力，与脂质结合后有时会掩盖抗原位点或构象改变，可以部分或完全丧失对抗血清的特异反应。
为此，载脂蛋白检测过程中有必要先暴露抗原位点，所用试剂有表面活性剂，尿素，盐酸胍和吐温等解离蛋白剂，或用四甲基脲脱脂或有机溶剂脱脂等暴露抗原决定簇等方法，血清脂蛋白颗粒中的载脂蛋白，能在短时间内形成抗原抗体复合物进行定量；④抗原不能过量，因为抗原过量，抗原抗体复合物形成不但不增加，反而会减少，光散射或光吸收减少，检测结果反而偏低。
免疫比浊法检测免疫球蛋白
诱导剂
增 加 散 透 率 : 660nm 测 定 散 射 光
散射光测定
检测器 (LED) 样品
光电计 100 % 散射光强度 0% 时间
速率散射比浊法
（一）基本原理 — 是测定抗原抗体结合反应的动态过程。 是测定抗原抗体结合反应的动态过程。 — 所谓速率，是在单位时间内抗原抗体结合形成 所谓速率，是在单位时间内抗原抗体结合形成 单位时间内 复合物的速度。 复合物的速度。将各单位时间内形成复合物的 速率及测定的散射信号连接在一起， 速率及测定的散射信号连接在一起，即是动态 的速率比浊分析。 的速率比浊分析。 — 当仪器测定到某一时 间内形成速率下降时， 间内形成速率下降时， 速率峰， 即出现速率峰 即出现速率峰，该峰 值的高低， 值的高低，即代表所 测抗原的量。 测抗原的量。
光通量是每单位时间到达、 光通量是每单位时间到达、离开或通过曲面 的光能数量
散射比浊法
• 原理 在入射光的一定角度检测粒子发出的散 在入射光的一定角度检测粒子发出的散 一定角度 射光，散射光的强度与IC的含量呈正比。 射光，散射光的强度与IC的含量呈正比。 IC的含量呈正比
散射比浊法测定原理
聚集形成 聚集形成
材料
1.免疫球蛋白试剂A,M,G 1.免疫球蛋白试剂A,M,G 免疫球蛋白试剂 2.免疫球蛋白试剂A,M,G校准品， 2.免疫球蛋白试剂A,M,G校准品，蒸馏水 免疫球蛋白试剂A,M,G校准品 3.微量加样枪 3.微量加样枪 4.分光光度仪 4.分光光度仪
结果计算方法
样本管吸光度 Ig浓度（g/L）= 校准管浓度 × Ig校准浓度（g/L）
透射比浊法和散射比浊法光路
IC I
透射比浊法 检测器A 检测器
I0
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
公卫执业医师考试辅导：免疫比浊法的原理
免疫比浊法是抗原抗体结合动态测定方法。
其基本原理是：当抗原与抗体在特殊稀释系统中反应而且比例合适（一般规定抗体过量)时，形成的可溶性免疫复合物在稀释系统中的促聚剂（聚乙二醇等)的作用下，自液相析出，形成微粒，使反应液出现浊度。
当抗体浓度固定时，形成的免疫复合物的量随着检样中抗原量的增加而增加，反应液的浊度也随之增加。
通过测定反应液的浊度与一系列标准品对照，即可计算出检样中抗原的含量。
公卫执业医师考试频道为大家推出【年公卫执业医师考试课程！】考生可点击以下入口进入免费试听页面！足不出户就可以边听课边学习，为大家的取证梦想助力!
【电脑用户】→点击进入免费试听>>。