阿莫西林胶囊含量测定

实验四H P L C法测定阿莫西林胶囊的含量实验目的：1.熟练掌握安捷伦1100液相色谱仪的操作

2.对液相色谱仪出现的一些故障和维护会进行简单维护

3.通过外标一点法计算药物浓度

4.采用高效液相色谱法对阿莫西林胶囊主成分阿莫西林进行含量测定

实验原理：利用高效液相色谱仪的高选择性、高灵敏度等特点，通过记录已知浓度的阿莫西林对照品的色谱峰面积，并测定未知浓度的阿莫西林胶囊的色谱峰面积，根据外标一点法计算胶囊中阿莫西林的标示量的百分含量。

实验背景：阿莫西林(Amoxicillin)为β-内酰胺类抗生素,临床疗效好,可口服且不易引起过敏。2010年中国药典二部收载阿莫西林胶囊剂的含量测定采用HPLC法（页码

401-404），方法操作简便、快速、准确、专属性好。

1.仪器与试药

Agilent1100高效液相色谱仪:G1310泵,G2280进样器,G1314A紫外波长检测器。阿莫西林对照品由中国食品药品检定研究院提供（纯度为％）,乙腈为色谱纯,磷酸二氢钾为分析纯，阿莫西林胶囊由国内某药厂提供。50ml容量瓶，小镊子；棉花；无水乙醇

2.色谱条件

色谱柱:ZorbaxSB-C18色谱柱×150mm,5μm);流动相:50mmol/L磷酸二氢钾溶液:乙腈:,v/v),流速min;检测波长254nm，进样量20μl，柱温室温。

3.实验方法及结果

参照2010年中国药典二部收载阿莫西林胶囊剂的含量测定采用HPLC法（页码

401-404），阿莫西林峰与杂质峰的分离度需大于。

3.1流动相的配制称取磷酸二氢钾固体粉末，用1L纯水溶解；量筒精密量取975mL磷酸二氢钾水溶液于试剂瓶中，精密量取25mL乙腈溶液，两相混合，超声10min后用于流动相；

对照品溶液的制备精密称取阿莫西林对照品适量,置50mL量瓶中，用流动相溶解并稀释至刻度，摇匀，配制成mL的标准溶液,备用。

样品溶液的制备取阿莫西林胶囊5粒，准确称量后取出内容物，研匀。精密称粉末25mg,置50mL量瓶中,用流动相溶解并稀释至刻度,备用。用少许棉花将胶囊壳中残留

药物拭尽，准确秤取空胶囊壳的重量，并算出5粒胶囊内容物的重量，进一步算出平均装量。

样品测定吸取标准溶液20μL注入液相色谱仪,记录峰面积和保留时间；取样品20μL 注入液相色谱仪,以外标法一点法进行含量测定。

计算

4.实验注意事项

高效液相色谱仪在进样之前需打开purge阀，加大泵流量（流速为2－3ml/min）并开启泵，排除管路中的气泡。

进样前需用流动相平衡色谱柱15min，按照色谱柱几何体积5－10倍流动相冲洗色谱柱，确保色谱柱平衡良好。

进样前所填写的sampleinformation文件名和进样瓶位置是否填写正确，确保进样的正确性。

待基线稳定后进样，在采集色谱图过程中注意柱压变化，若柱压有显着增加或降低，说明管路有堵塞或漏液现象，应立即停止进样，关掉泵流速，仔细检查排除故障。

所有进样结束后，需对管路进行用色谱甲醇或乙腈进行冲洗，色谱柱也用色谱甲醇或色谱乙腈进行冲洗至少10min后，保存色谱柱待下次使用。

5.实验解答题

采用HPLC－UV法进行含量测定对化合物结构的要求？如何确定紫外最大吸收波长？简答采用HPLC法对某一药物进行含量测定的基本思路。