核蛋白提取试剂盒使用说明
核蛋白提取试剂盒说明书
核蛋白提取试剂盒说明书货号：R0050规格：50T/100T 产品内容：保存：核/浆蛋白抽提试剂2-8℃保存，PMSF 于-20℃保存。
产品简介：本试剂盒提供了一种简单、方便的从培养细胞或新鲜组织中抽提核蛋白的方法。
整个过程只需约60分钟就可以将核蛋白和浆蛋白从细胞中分离出来。
得到的蛋白可以用于Western blot 等实验。
本试剂盒通过浆蛋白抽提试剂使细胞膨胀破裂，释放出胞浆蛋白，再通过离心得到细胞核。
然后通过核蛋白抽提试剂抽提得到细胞核蛋白。
本试剂盒可以抽提50/100个样品（每个样品约2×106个Hela 细胞或40mg 组织）。
操作方法（仅供参考）：*裂解蛋白的所有步骤都需在冰上或4℃进行。
一、对于体外培养细胞：1．根据用量取适当的浆蛋白抽提试剂和核蛋白抽提试剂加入PMSF ，使PMSF 的最终浓度为1mM 。
PMSF 需现用现加，若目标蛋白含有丰富的半胱氨酸，可以在两种蛋白抽提液中加入DTT 至终浓度0.5mM 。
2．对于贴壁细胞，去除培养液，用PBS 洗一遍，用细胞刮刀收集细胞，或用EDTA 消化后吹打下细胞（最好不用胰酶硝化，以免胰酶消化目的蛋白）。
500g 离心2～3分钟收集细胞，吸尽上清留下沉淀备用。
3．对于悬浮细胞：用PBS 洗一遍，500g 离心2～3分钟收集细胞，吸尽上清，留下细胞沉淀备用。
4．每20μL 细胞沉淀加入200μL 浆蛋白抽提试剂（2×106个细胞沉淀的体积约20μL 或40mg ）。
5．用移液器吹打或高速涡旋15秒（可适当延长），必须使细胞沉淀完全分散开成单细胞悬液。
细胞沉淀分散不完全会导致蛋白产量降低。
6．冰浴10分钟。
7．最高转速剧烈涡旋10秒，4℃12000～16000g 离心10分钟。
8．上清即为抽提得到的细胞浆蛋白，立即吸取上清至预冷的样品管中备用，进行后续的PAGE 、Western 等实验，但蛋白浓度较低，可根据需要进行相应浓缩。
凯基核蛋白和胞浆蛋白提取试剂盒
凯基核蛋白和胞浆蛋白提取试剂盒Cat Number：For Research Use OnlyStore at -20℃for one yearExpire date：一、试剂盒说明本试剂盒用于从哺乳动物组织和培养细胞中提取核蛋白和/或胞浆蛋白，提取制备过程简便。
制备的核蛋白和胞浆蛋白能保持天然活性，并且纯度较高。
提取的蛋白可用于进一步的转录因子活性分析、凝胶阻滞实验(gel shift assay)、免疫共沉淀、Western Blotting、酶活性测定等后续蛋白质研究。
二、试剂盒组份组份KGP150 （50 test）KGP1100 （100储存温度test）Buffer A 25 mL 25 mL ×24℃Buffer B 1.5 mL 3．0 mL 4℃Buffer C 12.5 mL 25 mL 4℃DTT 50μL100μL-20℃蛋白酶抑制剂250μL500μL-20℃PMSF（100mM）400μL800μL-20℃三、操作步骤Ⅰ 实体组织蛋白的提取1、组织样本，将组织剪切成小块，加入适量的冰冷PBS均浆后，静置5 min ，弃沉淀，小心吸取上清转移至另一离心管中；2、上清4℃离心500×g，3 min，弃上清，估计细胞压积PCV（离心后的紧实细胞体积）；3、每20μL细胞压积中，加入200μL预冷的Buffer A【使用前每mL BufferA加入1μL DTT，5μL 100mM PMSF，5μL蛋白酶抑制剂】，最大转速涡旋剧烈振荡15s，放置冰上10～15min；4、加入11μL冷Buffer B，最大转速涡旋剧烈振荡5s，放置冰上1min；5、再次最大转速涡旋剧烈振荡5s后，4℃离心，16000×g,5min；6、尽快将上清转入另一预冷的洁净微量离心管，置于冰上，即得胞浆蛋白；7、在离心沉淀物（细胞核）中加入100μL预冷的Buffer C (使用前每mLBuffer C加入1μL DTT，5μL 100mM PMSF，5μL蛋白酶抑制剂)，最大转速涡旋剧烈振荡15s，放置冰上40min，每间隔10 min涡旋剧烈振荡15 seconds；8、4℃离心，16000×g,,10min，尽快将上清转入一预冷的洁净微量离心管，即得核蛋白；9、上述提取的胞浆蛋白和核蛋白进行蛋白定量（Braford法或BCA法），分装并保存于-80℃，避免反复冻融。
NMP-22,核基质蛋白22ELIS试剂盒使用说明书
NMP-22,核基质蛋白22ELIS试剂盒使用说明书NMP - 22, nuclear matrix protein 22 -were kit instructions核基质蛋白22(NMP-22)ELISA试剂盒货号:GD-8209规格:96T/48T保质期：6个月，所有试剂盒均提供最新批次。
用途科实验。
NMP-22,核基质蛋白22ELIS试剂盒使用说明试剂盒性能1. 准确性：标准品线性回归与预期浓度相关系数R值，大于等于0.9900。
2. 灵敏度：最低检测浓度小于0.1 U/L。
3. 特异性：不与其它可溶性结构类似物交叉反应。
4. 重复性：板内、板间变异系数均小于15%。
5. 贮藏：2-8℃，避光防潮保存。
6. 有效期：6个月NMP-22,核基质蛋白22ELIS试剂盒使用说明书标本的处理：（1）细胞培养上清液根据需要用试剂盒中的标准稀释液稀释样品，然后按NMP-22,核基质蛋白照说明书所述方法检测。
推荐稀释浓度是稀释5倍。
（2）脑脊液根据需要用试剂盒中的标准稀释液稀释样品，然后按照说明书所述方法检测。
推荐稀释浓度是5倍。
（3）血浆①用EDTA2K离心收集在真空血液收集管中的血液，5,000×g，15分钟，4℃，分离血浆样品，然后储存在零下80℃直到使用。
②用试剂盒中的标准稀释液5倍稀释血浆以避免血浆中的干扰物质影响检测，按照说明书指定方法检测。
NMP-22,核基质蛋白22ELIS试剂盒使用说明试剂盒相关产品：Reorganization of the enhanced green fluorescent antibodyThe rabbit (C3a) ELISA kit priceCortex phellodendri alkali standard cas: 6873-13-8Fragments of the rabbit complement 3 aelisa kit priceRabbit Complement fragments of 3 a, C3a ELISA KitFragments of the rabbit complement 3 aelisa kit(3 r and 3 ar, 6 s, 7 ar) - four hydrogen - 6 - hydroxy - 3, 6-2-2, 5 (3 h, 4 h) - and furan diketone standard 35354-74-6 Dehydration paniculta lactone succinate half ester (786593-06-4)FITC labeled rabbit anti bovine IgG antibodyPeople (ANG - 2) ELISA kit price472-15-1 birch fatty acidPeople angiogenin 2 elisa kit priceThe Human uncomplicated 2, ANG - 2 ELISA KitPeople angiogenin 2 elisa kitEucalyptus standard 3122-88-1People anti neutrophil cytoplasm antibody ELISA kit priceThe human anti - neutrophil cytoplasmic antibody, cANCA ELISA KitPeople anti neutrophil cytoplasm antibody ELISA kitStandard 28587-43-1NMP-22,核基质蛋白22ELIS试剂盒使用说明试剂盒HuaChan poison it ling (1108-1108-5)Citrulline cyclic peptide antibodies(GnRH) ELISA kit price34168-56-4 catalpa phenol NMP-22,核基质蛋白People gonadotropin-releasing hormone ELISA kit priceThe human gonadotropin - releasing hormone, GnRH ELISA Kit People gonadotropin-releasing hormone ELISA kitThe dog bit alkali D standard 157528-81-9Root bark contain cudrania tricuspidata goo of B (84955-05-5) NMP-22,核基质蛋白。
胞浆蛋白—核蛋白抽提试剂盒说明书
胞浆蛋白—核蛋白抽提试剂盒产品编号产品名称包装SINP001 胞浆－核蛋白抽提试剂盒50×产品简介：细胞核和细胞浆目前成为研究细胞组分的两个热点，获得高浓度的细胞核蛋白和细胞浆蛋白成为得到好的研究结果的重要实验过程。
本试剂盒主要原理是在低渗透压条件下，使细胞充分膨胀，然后破坏细胞膜，释放出细胞浆蛋白，离心得到细胞核沉淀。
最后通过高盐的细胞核蛋白抽提试剂抽提得到细胞核蛋白。
本试剂盒是本公司非放射性EMSA试剂盒（cat; SIDET001, SIDET003, SIDET004,）实验成功的重要部分，经BCA测定24cm2贴壁细胞(或50ml规格培养瓶养的悬浮细胞)抽提物，核蛋白浓度约为 2.5ug/ul或更高。
抽提得到的蛋白可以用于Western，EMSA，footprinting，报告基因检测以及酶活力测定等后续操作。
本试剂盒可足够您进行50次抽提操作！包装清单：试剂包装总量5X Buffer A 1瓶35ml/瓶2X Buffer B1支 1.5ml/支Solution I（溶液I）1支 1.75ml/支Solution II（溶液II）1支 1.75ml/支Solution III（溶液III）1支 1.5ml/支PMSF Solution 1支0.85ml/支User Manual (说明书)1份1份/Kit保存温度： 4℃保存。
Ⅰ.准备抽提试剂：按照下列方法制备胞浆－核蛋白抽提液：1.制备3ml胞浆蛋白裂解液I ：试剂体积5X Buffer A0.6mlSolution I（溶液I）30ulSolution II（溶液II）30ulPMSF Solution 15uldd-H2O 2.325ml总体积 3.0ml注：PMSF Solution须在抽提试剂加入到样品中前2-3分钟内加入。
2.制备1.02ml胞浆蛋白裂解液II：试剂体积Solution III（溶液III）20ul胞浆蛋白裂解液I 1.0ml总体积 1.02ml3.制备1ml核裂解液：试剂体积2X Buffer B25ulSolution I（溶液I）0.5ulSolution II（溶液II）0.5ulPMSF Solution0.25uldd-H2O23.75ul总体积 50ul注：PMSF Solution须在抽提试剂加入到样品中前2-3分钟内加入。
生工 细胞核蛋白提取试剂盒
细胞核蛋白质提取试剂盒 Nucleoprotein Extraction Kit产品编号：C500009 包装规格：50 Assays 产品简介本试剂盒提供独特的组份，采用特殊的非离子型去污剂，以及焦磷酸钠等数种蛋白磷酸酶和蛋白酶抑制试剂，能够在非变性和低渗的条件下裂解细胞，经过洗涤去除大部分胞质蛋白和膜蛋白，释放的细胞核能够保持完整，再用Lysis Buffer 对细胞核蛋白质进行抽提的同时可以保持核蛋白质的活性，因此该产品可合适用于SDS-PAGE 电泳、Western Blot 、免疫共沉淀、EMSA 、Pull Down 和转录调控等后续蛋白质或分子生物学相关实验的研究，每次可以从107个培养细胞或200 mg 动物组织提取核蛋白质，本试剂盒可以使用50次。
产品特点 1. 提取的核蛋白质可以最大限度的保持蛋白质的活性，可以用于EMSA ，转录因子分析的实验。
2. 可以从50x107个培养细胞或50x200 mg 动物组织提取核蛋白。
3. 整个实验过程只需要45分钟左右。
4. 在提取的过程中，最大限度的减少了膜和胞质蛋白对核蛋白的污染。
5.不需要超速度离心，可以同时处理多个样品。
运输和保存条件常温下运输，在收到后，将磷酸酶抑制剂，PMSF 和DTT 在-20℃的环境中保存，其余2-8℃保存，保质期一年。
产品组成 成分 C500009 Lysis Buffer 10 mL Hypotonic Buffer 50 mL 磷酸酶抑制剂 300 μL PMSF 600 μL DTT60 μL操作步骤A 实体组织蛋白的提取 1. 在每1mL 冷Hypotonic Buffer 加入5 μL 磷酸酶抑制剂，10 μL PMSF 和1 μL DTT 混匀。
冰上保存数分钟待用。
2.将100-200mg 固体组织置于培养皿中，手术剪将小块充分剪碎，尽量去除脂肪组织和结缔组织等非目的组织，用PBS 洗涤两次，离心，取沉淀后加入0.6 mL 冷Hypotonic Buffer 混匀， 4℃下玻璃匀浆器上下手动匀浆30-50 次。
核酸提取试剂盒说明书
核酸提取试剂盒说明书标题：核酸提取试剂盒说明书一、产品概述本产品是一款适用于各种生物样本的核酸提取试剂盒，能够高效、快速地从各种类型的样本中提取出高质量的DNA/RNA。
广泛应用于基因检测、分子生物学研究、疾病诊断等领域。
二、产品组成1. 核酸提取液A：用于裂解细胞和溶解核酸。
2. 核酸提取液B：用于去除蛋白质等杂质。
3. 洗涤液：用于洗涤核酸。
4. 乙醇溶液：用于沉淀核酸。
5. RNA酶抑制剂：防止RNA降解。
6. DNA/RNA分离柱：用于核酸的吸附和洗脱。
三、操作步骤1. 样本处理：根据样本类型进行相应的前处理。
2. 核酸提取：将处理后的样本加入到核酸提取液A中，涡旋混合后静置，然后加入核酸提取液B，再次涡旋混合并静置。
3. 细胞破碎与核酸释放：将混合液离心，取上清液转移到新的离心管中。
4. 去除杂质：向上述上清液中加入洗涤液，涡旋混合后离心。
5. 核酸吸附：将上清液转移到DNA/RNA分离柱中，离心吸附核酸。
6. 洗涤核酸：使用洗涤液对DNA/RNA分离柱进行洗涤，以去除剩余的杂质。
7. 核酸洗脱：加入适量的无菌水或TE缓冲液到DNA/RNA分离柱中，离心洗脱核酸。
8. 核酸保存：将提取出的核酸立即使用或-20℃保存。
四、注意事项1. 所有操作应严格遵守实验室生物安全规定。
2. 核酸提取过程中应避免产生气溶胶，以防交叉污染。
3. 提取后的核酸应尽快使用，长期保存时要避免反复冻融。
4. 试剂盒中的所有成分都应在室温下回温至室温后再使用。
五、质量保证我们承诺该产品经过严格的质量控制，如有任何质量问题，请联系我们的客户服务部。
六、联系方式感谢您选择我们的产品，如有任何问题或需要进一步的信息，请随时联系我们。
人核基质蛋白-22ELISA检测试剂盒使用说明书
人核基质蛋白-22ELISA检测试剂盒使用说明书提供商：上海乔羽生物科技有限公司本试剂仅供研究使用标本：尿液试验原理：NMP-22试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验（ELISA）.已知NMP-22浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。
先将NMP-22和生物素标记的抗体同时温育。
人核基质蛋白-22ELISA检测试剂盒洗涤后，加入亲和素标记过的HRP。
再经过温育和洗涤，去除未结合的酶结合物，然后加入底物A、B，和酶结合物同时作用。
产生颜色。
颜色的深浅和样品中NMP-22的浓度呈比例关系。
自备材料蒸馏水。
加样器：5ul、10ul、50ul、100ul、200、500ul、1000ul。
振荡器及磁力搅拌器等。
安全性避免直接接触终止液和底物A、B。
一旦接触到这些液体，请尽快用水冲洗。
实验中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。
不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。
操作注意事项试剂应按标签说明书储存，使用前恢复到室温。
稀稀过后的标准品应丢弃，不可保存。
实验中不用的板条应立即放回包装袋中，密封保存，以免变质。
不用的其它试剂应包装好或盖好。
不同批号的试剂不要混用。
保质前使用。
使用一次性的吸头以免交叉污染，吸取终止液和底物A、B液时，避免使用带金属部分的加样器。
使用干净的塑料容器配置洗涤液。
使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。
洗涤酶标板时应充分拍干，不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
底物A应挥发，避免长时间打开盖子。
底物B对光敏感，人核基质蛋白-22ELISA 检测试剂盒避免长时间暴露于光下。
避免用手接触，有毒。
实验完成后应立即读取OD值。
加入试剂的顺序应一致，以保证所有反应板孔温育的时间一样。
按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
样品收集、处理及保存方法血清-----操作过程中避免任何细胞刺激。
使用不含热原和内毒素的试管。
收集血液后，1000×g离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
大圣宠医核酸提取试剂盒说明书
大圣宠医核酸提取试剂盒说明书大圣宠医核酸提取试剂盒说明书尊敬的用户，感谢您选择使用大圣宠医核酸提取试剂盒。
本说明书将为您提供详细的使用指导，以确保您能正确操作并获得最佳的实验结果！一、产品简介大圣宠医核酸提取试剂盒是一种高效、可靠的实验工具，用于从样本中提取宠物体内的核酸！该试剂盒采用先进的技术和优质的材料制造而成，能够快速、准确地提取出高质量的核酸样品，为后续的分析和研究提供坚实的基础。
二、试剂盒组成本试剂盒包含以下几个部分：1.核酸提取缓冲液：含有特定的试剂和缓冲剂，可有效溶解细胞膜并保护核酸的完整性。
2.溶解液：用于溶解样本中的蛋白质和其他杂质，从而纯化核酸。
3.洗涤缓冲液：用于去除样本中的杂质和残留的试剂。
4.纯化溶液：用于纯化提取出的核酸，去除残留的污染物。
5.稀释缓冲液：用于将纯化后的核酸溶解并稀释至适当的浓度。
三、使用步骤1.准备样本：根据实验需求，选择合适的样本并收集。
确保样本的新鲜度和完整性，避免受到外界污染。
2.样本裂解：将样本加入核酸提取缓冲液中，充分混合并裂解细胞膜。
3.溶解：加入适量的溶解液，使样本中的蛋白质和其他杂质溶解。
4.洗涤：将样本溶液经过洗涤缓冲液的处理，去除杂质和残留的试剂。
5.纯化：加入纯化溶液，将提取出的核酸纯化并去除残留的污染物。
6.稀释：使用稀释缓冲液将纯化后的核酸溶解并稀释至适当的浓度。
四、注意事项1.请按照说明书中的步骤和比例操作，确保实验的准确性和可重复性。
2.在操作过程中，请注意个人的安全防护，避免接触到试剂的皮肤和眼睛。
3.请妥善保存试剂盒，避免暴露在高温、潮湿或阳光直射的环境中。
4.本试剂盒仅限于科研用途，不得用于临床诊断或治疗。
五、技术支持如果在使用过程中遇到任何问题或需要进一步的技术支持，请随时与我们联系。
我们的专业团队将竭诚为您提供帮助和解答。
感谢您选择大圣宠医核酸提取试剂盒，我们将持续不断地努力提供更优质的产品和服务，为您的研究工作提供有力支持。
人α突触核蛋白αSYNELISA试剂盒使用说明书
人α-突触核蛋白(α-SYN)ELISA试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用目的：本试剂盒用于测定人血清，血浆及相关液体样本中人α-突触核蛋白(α-SYN)含量。
实验原理：本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人α-突触核蛋白(α-SYN)水平。
用纯化的人α-突触核蛋白(α-SYN)抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入α-突触核蛋白(α-SYN)，再与HRP标记的α-突触核蛋白(α-SYN)抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。
TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的α-突触核蛋白(α-SYN)呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中人α-突触核蛋白(α-SYN)浓度。
试剂盒组成：样本处理及要求：1.血清：室温血液自然凝固10-20分钟，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。
仔细收集上清，保存过程中如出现沉淀，应再次离心。
2.血浆：应根据标本的要求选择EDTA、者柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂，混合10-20分钟后，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。
仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应该再次离心。
3.尿液：用无菌管收集，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。
仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。
胸腹水、脑脊液参照实行。
4.细胞培养上清：检测分泌性的成份时，用无菌管收集。
离心20分钟左右（2000-3000转/分）。
仔细收集上清。
检测细胞内的成份时，用PBS（PH7.2-7.4）稀释细胞悬液，细胞浓度达到100万/ml左右。
通过反复冻融，以使细胞破坏并放出细胞内成份。
离心20分钟左右（2000-3000转/分）。
仔细收集上清。
保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。
5.组织标本：切割标本后，称取重量。
加入一定量的PBS，PH7.4。
胞浆蛋白核蛋白膜蛋白抽提试剂盒（真核细胞）
胞浆蛋白核蛋白膜蛋白抽提试剂盒（真核细胞）第一篇：胞浆蛋白核蛋白膜蛋白抽提试剂盒(真核细胞)胞浆蛋白/核蛋白/膜蛋白抽提试剂盒(真核细胞)(Catalog #DBI-1021;DBI-1022;Store kit at 4℃)描述: 本试剂盒提供了蛋白抽提试剂A，蛋白抽提抽提试剂B，蛋白抽提试剂C 三种具有独特组分的缓冲液。
所有试剂采用PIPES缓冲系统。
通过实验，可以得到：细胞胞浆蛋白（其中含有含有可溶性的骨架蛋白）；细胞膜蛋白（其中包含细胞质膜蛋白和细胞器膜蛋白）；细胞核蛋白；其最后剩余的沉淀为难溶性的胞质骨架和纤维蛋白。
提取方法简单，可靠，快速。
获得的各种部分蛋白纯度高，可用于PAGE 电泳、Western Blot、免疫共沉淀、EMSA等后续研究。
该试剂盒所得到的蛋白溶液适合用Bradeford法（DBI生物产品：DBI-1045,1046）蛋白定量和BCA方法（DBI生物产品：DBI-1047,1048）进行定量。
II 试剂盒组分: III.蛋白质抽提步骤: A.注意事项和试剂准备: • 打开试剂盒后，于4度保存蛋白抽提液；于-20度保存蛋白酶抑制剂，样品缓冲液（6×）。
• 使用前, 加10ul的蛋白酶抑制剂于1ml蛋白抽提试剂A中，使成为蛋白抽提混合试剂(该混合物被称为Extraction Buffer Mix ——A)；加2ul的蛋白酶抑制剂于200ul蛋白抽提试剂B中，使成为蛋白抽提混合试剂(该混合物被称为Extraction Buffer Mix ——B)；加2ul 的蛋白酶抑制剂于200ul蛋白抽提试剂C中，使成为蛋白抽提混合试剂(该混合物被称为Extraction Buffer Mix ——C)；试剂盒组分DBI-1021 DBI-1022 包装 50 次100 次颜色蛋白抽提试剂A 蛋白抽提试剂A-1 蛋白抽提试剂B 蛋白抽提试剂C 混合型蛋白酶抑制剂(100×)SDS-PAGE 样品缓冲液(6×)50ml 500ul 50ml 25ml 1支 5支100ml 1000ul 100ml 50ml 1支 10支棕色棕色棕色棕色棕色绿色• 在试验过程中确保抽提混合物始终保存在在碎冰中。
胞质蛋白或核蛋白提取方法
胞质蛋白或核蛋白提取方法实验目的从细胞和动物组织制备核蛋白和胞浆蛋白。
实验试剂核蛋白/胞质蛋白提取试剂盒。
实验步骤（一）细胞蛋白提取（1）取5-10×106个细胞，在4℃，500×g条件下离心2-3 min，小心吸取培养基，尽可能吸干，收集细胞。
（2）用冷PBS洗涤细胞2次，每次洗涤后尽可能吸干上清。
（3）每20 μL冷的Buffer A，2 μL蛋白酶抑制剂混合物，高速涡旋振荡15 s，置冰上10 min。
（4）再次高速涡旋振荡5 s，然后在4℃，16000×g条件下离心5 min。
（5）快速将上清吸入另一预冷的干净离心管，即可得到胞浆蛋白，请置于冰上或-80℃冰箱保存备用。
（6）在沉淀中加入200 μL冷的Buffer B，2 μL蛋白酶抑制剂混合物，高速涡旋振荡15 s。
（7）置冰上40 min，每隔10 min高速涡旋振荡15 s。
（8）在4℃，16000×g条件下离心10 min。
（9）快速将上清吸入另一预冷的干净离心管，即可得到核蛋白。
（二）组织蛋白提取（1）取适量组织样本剪碎，加冷PBS，用组织匀浆器匀浆至无明显肉眼可见固体（或用液氮研磨），置冰上5 min，小心将上清吸入另一预冷的干净离心管。
（2）在4℃，500×g条件下离心2-3 min，弃上清。
（3）按照细胞蛋白的提取方法的第三步骤往下操作即可。
（4）上述蛋白提取物请分装后于-80℃冰箱保存备用。
注意事项（1）实验过程中的所有试剂须预冷；所有器具须放-20℃冰箱预冷。
（2）整个过程须保持样品处于低温状态。
核蛋白和胞浆蛋白提取试剂盒
凯基核蛋白和胞浆蛋白提取试剂盒Cat Number：For Research Use OnlyStore at -20℃ for one yearExpire date：一、 试剂盒说明本试剂盒用于从哺乳动物组织和培养细胞中提取核蛋白和/或胞浆蛋白，提取制备过程简便。
制备的核蛋白和胞浆蛋白能保持天然活性，并且纯度较高。
提取的蛋白可用于进一步的转录因子活性分析、凝胶阻滞实验(gel shift assay)、免疫共沉淀、Western Blotting、酶活性测定等后续蛋白质研究。
二、 试剂盒组份组份 KGP150 （50 test） KGP1100 （100 test） 储存温度Buffer A 25 mL 25 mL ×2 4℃Buffer B 1.5 mL 3．0 mL 4℃Buffer C 12.5 mL 25 mL 4℃DTT 50μL 100μL -20℃蛋白酶抑制剂 250μL 500μL -20℃PMSF（100mM）400μL 800μL -20℃三、操作步骤Ⅰ 实体组织蛋白的提取1、组织样本，将组织剪切成小块，加入适量的冰冷PBS均浆后，静置5 min ，弃沉淀，小心吸取上清转移至另一离心管中；2、上清4℃离心500×g，3 min，弃上清，估计细胞压积PCV（离心后的紧实细胞体积）；3、每20μL细胞压积中，加入200μL预冷的Buffer A【使用前每mL Buffer A加入1μL DTT，5μL 100mM PMSF，5μL蛋白酶抑制剂】，最大转速涡旋剧烈振荡15s，放置冰上10～15min；4、加入11μL冷Buffer B，最大转速涡旋剧烈振荡5s，放置冰上1min；5、再次最大转速涡旋剧烈振荡5s后， 4℃离心，16000×g,5min；6、尽快将上清转入另一预冷的洁净微量离心管，置于冰上，即得胞浆蛋白；7、在离心沉淀物（细胞核）中加入100μL预冷的Buffer C (使用前每mL Buffer C加入1μL DTT，5μL 100mM PMSF，5μL蛋白酶抑制剂)，最大转速涡旋剧烈振荡15s，放置冰上40min，每间隔10 min涡旋剧烈振荡15 seconds；8、4℃离心，16000×g,,10min，尽快将上清转入一预冷的洁净微量离心管，即得核蛋白；9、上述提取的胞浆蛋白和核蛋白进行蛋白定量（Braford法或BCA法），分装并保存于-80℃，避免反复冻融。
快速核酸提取试剂盒说明书1
快速核酸提取试剂盒
1、产品介绍
本裂解液具有样本用量少，步骤简单，不需要特殊仪器，而且能够沉淀样本血清中的杂蛋白及其他影响PCR反应的大分子有机物，是目前快速检测中较理想的选择之一。
该技术将标本直接加入到PCR 扩增管，不需振荡、无需开管盖和移液等操作，可采用与标准质控品和标本同步进行处理和扩增，实现全程监控，具有无污染、操作简单、快速、准确等独特优点。
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3、适用范围
适用于血清，无抗凝的血浆或者全血，病毒培养液，尿液，唾液，咽拭子浸提液等标本。
4、实验步骤
（1）用200ul PCR管加入5ul Buffer1 溶液，再加入5ul样本，轻柔混匀，短离；
（2）新的200ul PCR管中，加入3ul MB裂解液，再加入3ul（1）中的混合液，10000转离心1min；
（3）将加好MB 裂解液的PCR管置于PCR仪（带热盖）中，99℃，10min；（4）取出样本后再室温平衡2-3min，10000转离心1min，PCR管底可见白色沉淀物，说明裂解完全；
（5）直接进行PCR扩增程序；
※注：若样本为血清或者无抗凝血浆，可跳过步骤（1），直接从步骤（2）开始。
其他样本（非组织），需要加Buffer1预混，从步骤（1）开始。
5、注意事项
※尽量避免多次冻融，可置于4℃保存，长期保存于-20℃。
※血浆样品不能含有任何抗凝剂，会影响后续实验。
※MB裂解液使用体积为PCR总体积的1/8。
microRNA快速提取试剂盒使用手册
1、组织处理：将组织于液氮内研磨，每50-100mg加1mL裂解液MRL后匀浆，组织样品容积不能超过MRL的10%；2、将匀浆剧烈混匀，在15-30℃条件下孵育5min，是核蛋白体完全分解；3、可选步骤：4℃的条件下12000rpm离心10min，小心取上清转入一个新的RNase free的离心管中。
4、每1ML加0.2ml氯仿。
剧烈震荡15s，并将其在室温下孵育3min；5、于4℃12000rpm离心10分钟，样品会分3层，上层为水相，RNA存在于水相中，水相层的容量大约为锁甲MRL体积的60%，把水相转移到新管仲，进行下一步操作；6、加入0.6倍体积70%乙醇，混匀，转移至RA中；7、（10000rpm离心45秒，收集下滤液，准确估计下滤液的体积，加入2/3倍体积的无水乙醇，混匀，将混合液倒入RB中，每次最多700ul,10000rpm离心30秒弃掉废液。
）滤出小RNA.8、加入700ul漂洗液RW，12000rpm离心60秒，弃掉废液（下液）；9、加入500ul漂洗液RW，12000rpm离心60秒，弃掉废液（下液）；10、空液离心2min，1200rpm；11、取出吸附柱RB，放入RNase free离心管中，根据预期RNA产量，在吸附膜中间部位加入60-80ul，RNase free water事先在65-70℃水浴加热，室温放置2min，12000rpm 离心1min，收集得到microRNA,保存于-20摄氏度或更低。
1、组织+裂解液每50-100mg加1mL 15-30℃条件下孵育5min2、每1ML加0.2ml氯仿剧烈震荡15s，并将其在室温下孵育3min 4℃12000rpm离心10分钟3、把水相转移到新管仲加入0.6倍体积70%乙醇，混匀，转移至RA中4、（10000rpm离心45秒，收集下滤液，准确估计下滤液的体积，加入2/3倍体积的无水乙醇，混匀，将混合液倒入RB中，每次最多700ul,10000rpm离心30秒弃掉废液。
酵母核蛋白提取方法
核蛋白提取试剂盒
BB-3102
膜蛋白提取试剂盒
BB-3103
Bradford 蛋白定量试剂盒
BB-3411
BCA 蛋白定量试剂盒
BB-3401
ECL 化学发光检测试剂盒
BB-3501
蛋白 Marker
BB-3721
细胞蛋白提取试剂盒
BB-3121
细菌膜蛋白提取试剂盒
BB-3151
组织蛋白提取试剂盒
BB-3122
BB-3703
植物总蛋白提取试剂盒
BB-3124
细菌蛋白提取试剂盒
BB-3123
植物膜蛋白提取试剂盒
BB-3152
酵母蛋白提取试剂盒
BB-3125
蛋白酶抑制剂混合物
BB-3301
磷酸化蛋白提取试剂盒
BB-3105
磷酸酶抑制剂混合物
BB-3311
SDS-PAGE 凝胶配制试剂盒
BB-3702
SDS-PAGE 上样 Buffer
14. 在 4℃，16000×g 条件下离心 10 分钟。 15. 快速将上清吸入另一预冷的干净离心管，即可得到酵母核蛋白。 16. 将上述蛋白提取物定量②后分装于-80℃冰箱保存备用或直接用于下游实验③。 相关产品盒
BB-3101
磷酸化蛋白富集试剂盒
BB-3108
储存条件： 蛋白提取液 2-8℃保存； 蛋白酶抑制剂-20℃保存。
有效期： 一年。
产品简介： 贝博酵母核蛋白提取试剂盒提供全套试剂，适用于从各种酵母中提取核蛋白。提取过
程简单方便。制备的核蛋白纯度高，保持天然活性，绝少交叉污染。提取的蛋白可用于 Western Blotting、转录活性分析、Gel shift 凝胶阻滞实验、免疫共沉淀、酶活性测定等蛋白研究。
EMSA说明书
Nuclease-Free Water
4µl
EMSA/Gel-Shift 结合缓冲液(5X) 2µl
细胞核蛋白或纯化的转录因子 2µl
目的蛋白特异抗体
1µl
标记好的探针
1µl
总体积
10µl
(2) 按照上述顺序依次加入各种试剂，在加入标记好的探针前先混匀，并且室温（20-25℃）放置10分钟，从而消除可能
Free Probe
图1. 一个典型的EMSA/Gel-Shift分析图 1, 阴性对照反应(标记探针)；2, 常规反应(含激活的目的转录因子的核蛋白＋标记探针)；3, 探针冷竞争反应(含激活 的目的转录因子的核蛋白＋标记探针+标记探针100倍量的未标记探针)；4, 突变探针的冷竞争反应(含激活的目的转录因 子的核蛋白＋标记探针+标记探针100倍量的未标记突变探针)；5, Super-shift反应(含激活的目的转录因子的核蛋白＋标记 探针+目的转录因子的特异抗体)。
T4 Polynucleotide Kinase (5-10u/µl)
1µl
总体积
10µl
按照上述反应体系依次加入各种试剂，加入同位素后，Vortex混匀，再加入T4 Polynucleotide Kinase，混匀。 (2) 使用水浴或PCR仪，37℃反应10分钟。 (3) 加入1微升探针标记终止液，混匀，终止探针标记反应。 (4) 再加入89微升TE，混匀。此时可以取少量探针用于检测标记的效率。通常标记的效率在30％以上，即总放射性的30%
5. 电泳分析： (1) 用0.5XTBE作为电泳液。按照10V/厘米的电压预电泳10分钟。预电泳的时候如果有空余的上样孔，可以加入少量稀 释好的1X的EMSA上样缓冲液(蓝色)，以观察电压是否正常进行。 (2) 把混合了上样缓冲液的样品加入到上样孔内。在多余的某个上样孔内加入10微升稀释好的1X的EMSA/Gel-Shift上样 缓冲液(蓝色)，用于观察电泳进行的情况。 (3) 按照10V/厘米的电压电泳。确保胶的温度不超过30℃，如果温度升高，需要适当降低电压。电泳至EMSA/Gel-Shift 上样缓冲液中的蓝色染料溴酚蓝至胶的下缘1/4处，停止电泳。 (4) 剪一片大小和EMSA胶大小相近或略大的比较厚实的滤纸。小心取下夹有EMSA胶的胶板，用吸水纸或普通草纸大 致擦干胶板边缘的电压液。小心打开两块胶板中的上面一块(注：通常选择先移走硅烷化的那块玻璃板)，把滤纸从 EMSA胶的一侧逐渐覆盖住整个EMSA胶，轻轻把滤纸和胶压紧。滤纸被胶微微浸湿后(大约不足1分钟)，轻轻揭起
BIOG核酸提取试剂盒操作步骤说明
BIOG核酸提取试剂盒操作步骤说明步骤一：准备工作1.1核酸提取试剂盒应存放在4℃下，在使用前将其置于室温下恢复至常温。
1.2检查试剂盒包装是否完好，如有损坏应立即更换，避免试剂受污染。
1.3在操作前，准备好所需的所有材料和试剂，确保严格遵守实验室操作规范。
步骤二：准备样品2.1根据需要提取核酸的样品类型，选择适当的样品收集和保存方法。
2.2样品应储存在干燥、暗处，并确保避免与其他试剂的污染。
如果需要保存较长时间的样品，应将其置于冷冻设备中。
步骤三：样品处理3.1取出待处理的样品，根据所需的核酸类型，选择适当的处理方法，如细胞培养、脱落细胞、血液等。
3.2 样品处理过程中，应注意避免任何可能导致核酸降解和污染的步骤，如使用RNase-free试剂、避免RNA酶等。
步骤四：核酸提取4.1取出BIOG核酸提取试剂盒，按照使用说明书上的方法，使用适量的核酸提取试剂。
4.2依据样品的类型和体积，将所需的样品转移到离心管中，加入适量的核酸提取试剂。
4.3使用离心机将混合物离心至样品沉淀到离心管的底部。
4.4轻轻倾倒剩余溶液，丢弃上清液。
4.5加入适量的洗涤缓冲液，混匀后离心，将上清液倒掉。
4.6重复上述洗涤步骤2-3次，确保核酸质量的纯净度。
4.7加入适量的洗涤缓冲液，离心并将上清液倒掉。
4.8脱水：将离心管处于开盖状态，放置在70℃烘箱中，使其脱水。
4.9添加适量的稳定剂，溶解核酸。
步骤五：核酸质量检测5.1 取少量核酸样品，使用NanoDrop光谱仪或PCR检测仪等设备测量核酸浓度和纯度。
5.2检测核酸是否完整且无外源性污染，如DNA断裂、RNA酶污染、DNA降解等。
步骤六：存储和使用6.1核酸提取完成后，可以根据需求将其保存在干燥、暗处，并确保避免与其他试剂的污染。
6.2存储期限根据试剂盒的规格和要求来决定，应严格遵守试剂盒的说明书中的存储和使用方法。
这些即是关于BIOG核酸提取试剂盒的操作步骤的详细说明，使用者可根据实际需求和试剂盒的说明书进行操作。
GENMED组织可溶性总核蛋白制备试剂盒 产品说明书(中文版)
GENMED SCIENTIFICS INC. U.S.A GMS30023.2 v.A GENMED组织可溶性总核蛋白制备试剂盒产品说明书（中文版）主要用途GENMED组织可溶性总核蛋白制备试剂是一种旨在使用物理和化学方法快速充分裂解组织，并在蛋白酶抑制混合剂的帮助下，充分溶解组织细胞核，然后通过超速离心，收集所有细胞核内可溶性蛋白质的权威而经典的技术方法。
该技术由大师级科学家精心研制、成功实验证明的。
其适用于各种组织（动物、人体）等样品。
可直接用于转录因子动态监测、核酸蛋白结合凝胶迁移电泳分析（EMSA）、特定核蛋白后续纯化、蛋白电泳、西方杂交、免疫抗体和质谱分析等。
产品即到即用，性能稳定，操作便捷，收集效果好。
技术背景通过特殊裂解液和蛋白酶抑制混合剂可以防止裂解后细胞核内各种活性蛋白成分遭到活化的内源性蛋白酶的破坏，充分保留细胞核内蛋白质的免疫和生物学活性。
产品内容GENMED清理液（Reagent A）毫升GENMED胞解液（Reagent B）毫升GENMED裂解液（Reagent C）毫升GENMED活性液（Reagent D）微升产品说明书1份保存方式保存GENMED活性液（Reagent D）在-20℃冰箱里，其余的保存在4℃冰箱里，有效保证6月用户自备液氮管：用于组织冻存处理15毫升锥形离心管：用于组织收集后离心1.5毫升离心管：用于样品操作4℃台式离心机：用于组织收集和去除杂质4℃微型台式离心机：用于收集蛋白DOUNCE匀浆器：用于组织裂解实验步骤实验开始前，将试剂盒里的GENMED活性液（Reagent D）从－20℃的冰箱里取出，放进冰槽里冻融，然后移出微升GENMED裂解液（Reagent C）到毫升离心管，加入微升GENMED活性液（Reagent D），充分混匀，放进冰槽里，标记为GENMED裂解工作液。
然后进行下列操作。
方法一：组织液氮处理1.手术取出动物组织，并秤重以确定组织重量2.（选择步骤）放进预冷的 毫升锥形离心管3.（选择步骤）加入适量的（ 毫克组织需要 毫升）GENMED清理液（Reagent A）清洗1次4.移入到一个液氮冻存管5.即刻放进液氮罐过夜6.次日从液氮罐里取出，即刻（最快速度）用研磨棒碾碎组织成粉末状（注意：切莫使组织冻融）7.放进一个新的预冷的 毫升锥形离心管8.加入 微升预冷的GENMED胞解液（Reagent B）9.强力涡旋震荡 秒，充分混匀10.放进冰槽里孵育 分钟，期间强力涡旋震荡 秒一次11.即刻放进 ℃台式离心机离心 分钟，速度为g12.小心抽去上清液（注意：如果需要制备胞浆总蛋白，保存上清液至－70℃的冰箱里备用）13.加入 微升预冷的GENMED清理液（Reagent A）14.移入到预冷的 毫升离心管15.放进 ℃微型台式离心机离心 分钟，速度为g（或RPM，例如eppendorf 5415D）16.小心抽去上清液，确保无液体残留17.重复实验步骤 至 一次（略去实验步骤14）18.（选择步骤）如果暂时停止，可放进－70℃冰箱里储存备用19.（选择步骤）如继续操作，放进冰槽里20.加入 微升含有GENMED裂解液（Reagent C）和GENMED活性液（Reagent D）的GENMED裂解工作液21.强力涡旋震荡 秒22.放进冰槽里孵育 至 分钟，期间每 分钟强力涡旋震荡 秒一次23.即刻放进 ℃微型台式离心机离心 分钟，速度为g（或RPM，例如eppendorf 5415D）24.小心移取上清液到新的 毫升离心管25.放进－70℃的冰箱里备用26.或放进冰槽里，继续后续操作方法二：组织匀浆处理1.手术取出动物组织，并秤重以确定组织重量2.（选择步骤）放进预冷的 毫升锥形离心管3.（选择步骤）加入适量的（ 毫克组织需要 毫升）GENMED清理液（Reagent A）清洗1次4.即刻用刀片切碎组织5.放进一个新的预冷的 毫升锥形离心管6.加入 微升预冷的GENMED胞解液（Reagent B）7.强力涡旋震荡 秒，充分混匀8.即刻放进预冷的DOUNCE匀浆器，在冰槽里用研磨棒匀化组织（约80下）9.将所有组织匀浆物移入 毫升锥形离心管，10.即刻放进4℃台式离心机离心 分钟，速度为g11.小心抽去上清液（注意：如果需要制备胞浆总蛋白，保存上清液至－70℃的冰箱里备用）12.加入 微升预冷的GENMED清理液（Reagent A）13.移入到预冷的 毫升离心管14.放进4℃微型台式离心机离心5分钟，速度为g（或RPM，例如eppendorf 5415D）15.小心抽去上清液，确保无液体残留16.重复实验步骤12至15一次（略去实验步骤13）17.（选择步骤）如果暂时停止，可放进－70℃冰箱里储存备用18.（选择步骤）如继续操作，放进冰槽里19.加入 微升含有GENMED裂解液（Reagent C）和GENMED活性液（Reagent D）的GENMED裂解工作液20.强力涡旋震荡15秒21.放进冰槽里孵育30至60分钟，期间每10分钟强力涡旋震荡15秒一次22.即刻放进4℃微型台式离心机离心5分钟，速度为g（或RPM，例如eppendorf 5415D）23.小心移取上清液到新的 毫升离心管24.放进－70℃的冰箱里备用25.或放进冰槽里，继续后续操作注意事项1．本产品为20次操作2．所有操作均须在无菌和4℃状态下进行3．操作时须戴手套4．建议一次操作的组织重量不少于100毫克，不超过5克5．碾碎组织步骤：可以将液氮处理的组织放进15毫升锥形离心管，然后用针筒挤压塞研磨6．1克组织通常可以获得20毫克可溶性总核蛋白7．如果放在－70℃冰箱里储存备用，避免反复冻融8．本公司提供系列蛋白制备试剂产品质量标准1．本产品经鉴定性能长期稳定2．本产品经鉴定无蛋白酶污染使用承诺杰美基因秉着“信誉至上、客户满意、质量承诺”的宗旨为我们的用户提供优质产品和服务。
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核蛋白提取试剂盒使用说明
货号：R0050
规格：50T/100T
产品内容：
试剂盒组成50T100T
浆蛋白抽提试剂25ml50ml
核蛋白抽提试剂5ml10ml
PMSF300ul1ml
保存：核/浆蛋白抽提试剂4℃保存，PMSF于-20℃保存。
产品简介：
核蛋白提取试剂盒提供了一种简单、方便的从培养细胞或新鲜组织中抽提核蛋白的方法。
整个过程只需约60分钟就可以将核蛋白和浆蛋白从细胞中分离出来。
得到的蛋白可以用于Western blot等实验。
本试剂盒通过浆蛋白抽提试剂使细胞膨胀破裂，释放出胞浆蛋白，再通过离心得到细胞核。
然后通过核蛋白抽提试剂抽提得到细胞核蛋白。
本试剂盒可以抽提50/100个样品（每个样品约2×106个Hela细胞，40mg）。
操作方法：
裂解蛋白的所有步骤都需在冰上或4℃进行。
一、对于体外培养细胞：
1．根据用量取适当的浆蛋白抽提试剂和核蛋白抽提试剂加入PMSF，使
PMSF的最终浓度为1mM。
PMSF需现用现加，若目标蛋白含有丰富的半胱氨酸，可以在两种蛋白抽提液中加入DTT至终浓度0.5mM。
2．对于贴壁细胞，去除培养液，用PBS洗一遍，用细胞刮刀收集细胞，或用EDTA消化后吹打下细胞（最好不用胰酶硝化，以免胰酶消化目的蛋白）。
500g离心2～3分钟收集细胞，吸尽上清留下沉淀备用。
3．对于悬浮细胞：用PBS洗一遍，500g离心2～3分钟收集细胞，吸尽上清，留下细胞沉淀备用。
4．每20ul细胞沉淀加入200ul浆蛋白抽提试剂（2×106个细胞沉淀约20ul或40mg）。
5．用移液器吹打或高速涡旋15秒（可适当延长），必须使细胞沉淀完全分散开成单细胞悬液。
细胞沉淀分散不完全会导致蛋白产量降低。
6．冰浴10分钟。
7．最高转速剧烈涡旋10秒，4℃12000～16000g离心10分钟。
8．上清即为抽提得到的细胞浆蛋白，立即吸取上清至预冷的样品管中备用，进行后续的PAGE、Western等实验，但蛋白浓度较低，可根据需要进行相应浓缩。
9．沉淀即为细胞核，要完全吸尽残余的上清（避免细胞浆蛋白的污染），加入50-100ul核蛋白抽提试剂。
10．用移液器吹打或高速涡旋15秒（可适当延长）至沉淀完全分散，冰浴10分钟。
11．最高转速剧烈涡旋10秒，4℃12000～16000g离心10分钟。
12．立即吸取上清至预冷的样品管中，此即为抽提得到的细胞核蛋白。
可进行后续实验或-70℃冻存。
对于组织样品：
把组织称重后，尽可能切成非常细小的碎片，按每50mg组织加入200ul-500ul PBS，用匀浆器冰上匀浆制成细胞悬液，500g离心2～3分钟收集细胞，吸尽上清，收集沉淀。
加入200ul浆蛋白抽提试剂后接上述步骤5。
注意事项：
1．裂解得到的蛋白样品，由于含有较高浓度的去垢剂干扰，不能用Bradford法测定蛋白浓度，可以选用BCA蛋白定量试剂盒(货号PC0020)测定蛋白浓度。
2．对于组织样品，本试剂盒适用于新鲜组织，对冻存组织抽提效果较差。
3．为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
相关试剂：
P10201×PBS，PH7.2-7.4，0.01M
S101010%SDS
PR1400低分子量蛋白MARKER
PC002BCA法蛋白浓度测定试剂盒
PC0030Lowry法蛋白浓度测定试剂盒。