Agilent 1260 基本操作方法
Agilent1260液相色谱仪联用柱后衍生标准操作规程
Agilent 1260液相色谱仪+Vector柱后衍生仪标准操作规程一、Agilent 1260液相色谱仪1 操作程序1.1 操作前准备1.1.1 样品过滤1.1.1.1 用流动相或比流动相弱的溶剂溶解。
1.1.1.2 过滤样品确保样品中不含固体颗粒。
1.1.1.3 进样量尽量小。
1.1.2 流动相过滤不干净的溶剂或在溶剂瓶中长菌的溶剂会阻塞溶剂过滤器，降低泵的性能。
遵从下列建议可以提高性能，延长溶剂过滤器的寿命。
1.1.2.1 使用无菌溶剂瓶避免溶剂长菌。
1.1.2.2 流动相使用HPLC级。
1.1.2.3 用滤膜过滤溶剂去除微生物（滤膜最大0.45μm，最好0.22μm）。
1.1.2.4 每二天更换或过滤。
1.1.2.5 避免溶剂瓶直接日照。
1.2 仪器组成1.2.1 Agilent 1260高效液相色谱系统主要由工作站、在线脱气机、输液泵、自动进样器、柱温箱和检测器等部件组成。
1.2.2 各部分的操作及数据处理均由工作站计算机控制完成，其操作系统为Windows 7，工作站软件名称为Control Panel。
1.3 开机操作1.3.1 接通电源，打开计算机及工作站其他各部件开关，约30s后，各部件预热完毕，进入待机状态，指示灯为黄色。
1.3.2 打开Agilent ChemStations，进入仪器1联机状态，约30s后，计算机进入工作站的操作页面。
该页面主要由以下几部分组成：1.3.2.1 最上方为命令栏，依次为文件，运行控制，仪器等；命令栏下方为快捷操作图标，如多个样品连续进行分析、单个样品进样分析、调用文件、保存文件……等；1.3.2.2 左边为样品信息栏；1.3.2.3 中部为工作站各部件的工作流程示意图，依次为进样器——输液泵——柱温箱——检测器——数据处理——报告；1.3.2.4 中下部为动态监测信号；1.3.2.5 右下部为色谱工作参数：进样体积、流速、分析停止时间、流动相比例、柱温、检测波长等。
Agilent1260液相色谱仪操作规程
Agilent 1260 液相色谱仪操作规程一、准备工作a)启动计算机：打开计算机,登陆windows操作系统。
b)启动工作站：开启Agilent 1260各模块电源，待Agilent 1260各模块自检完成后(各模块右上角指示灯为黄色或者无色)，点击LC1260(联机)。
c)开启工作站：进入工作站，点击“方法和运行控制”或者在“视图”中选择“方法和运行控制”。
打开仪器控制视图：选择“视图->系统视图”，即可显示仪器控制视图。
d)配置流动相：将流动相装入溶剂瓶中。
设置溶剂瓶参数，在溶剂瓶图形上单击鼠标左键，点击“溶剂瓶填充量”设置溶剂瓶中流动相实际体积，也可设定低体积关泵；溶剂要求：色谱级纯或优级纯乙腈或甲醇，二次蒸馏水。
e)冲洗流动相管路：反时针旋开泵模块上的溶液排空阀。
右键单击泵视图的空白处，选择“方法”，设置“流速”为5ml/min。
对于G1311X(四元泵)分别将A,B,C,D 四个通道设置“溶剂”为100%，冲洗至管线内无气泡为止; 设置溶剂比例为初始比例，“流速”为1ml/min，关闭Purge阀。
f)开启模块：开启模块：鼠标右键点击每个模块的空白处都会弹出提示框，选择“控制”即可在新的窗口中选择打开或者关闭各个模块。
也可在仪器视图中选择“打开”。
g)监视基线：点击“视图->在线信号”打开“在线图谱”。
h)平衡色谱柱、进样分析：监视压力和信号基线等待平稳后，可以进样采集分析。
二、数据采集方法编辑a)方法编辑：在“方法和运行控制”状态下，单击“方法”菜单，选择菜单中“新建方法”，调用化学工作站的默认方法DEF-LC.M ，选择“方法”菜单下的“编辑完整方法”，设置好泵参数、进样方式、柱箱温度、波长、积分参数等，即可开始编辑一个完整地方法。
b)方法存贮：在“方法和运行控制”状态下，单击“方法”菜单，选择菜单中“方法另存为”选项，方法以检测项目名存贮。
三、样品信息编辑a)运行单个样品：在“方法和运行控制”状态下，单击“运行控制”菜单，选择“样品信息”进行样品信息编辑。
Agilent1260高效液相色谱仪操作规程
Agilent1260高效液相色谱仪操作规程1开机前准备1.1根据实验要求配制流动相，须经0.45μm滤膜过滤，之后再进行脱气处理，使用前必须用超声波振荡l0-15min，按无机相和有机相分开别装入溶剂瓶A（装有洗盐装置，最好固定盛放无机盐水相）、B 中；对照品和样品溶液进样前要经0.45μm滤膜过滤。
1.2若流动相中含有缓冲盐,则必须以每分钟2～3滴的速度虹吸10% 的异丙醇水冲洗seal-wash，以防有盐结晶在泵头产生而损坏泵头。
2 开机2.1打开电源，打开计算机，进入Windows 系统，从上到下依次打开各模块电源。
2.2待各模块自检完成后，双击桌面上的“仪器1联机”图标，将自动进入化学工作站画面。
2.3从“视图”菜单中选择“方法和运行控制”画面,也可单击工作站画面左侧的“方法和运行控制”项，进入方法和运行控制窗口。
2.4打开Purge阀（逆时针），右击“泵”图标出现参数设定菜单单击“设定泵”选项进入泵编辑画面。
2.5设“流量”逐步增大流速至5ml/min ，A通道设到100%，单击“确定”。
2.6单击“泵”图标，出现参数设定菜单，单击“泵控制“选项选中“开”单击“确定”则系统开始Purge，直到管路内由溶剂瓶A到泵入口无气泡为止；切换B通道（B通道设到100%）继续Purge直到所有通道管路内均无气泡为止。
（查看柱前压力，若大于10Bar，则应更换排气阀内滤芯/过滤白头。
）2.7将泵的流量设到0.5ml/min，若使用双泵则应设定溶剂配比，如A=80%，B=20%；关闭排气阀（顺时针）；再将流量设到0.8ml/min ，2分钟后设定至方法所需流速，冲洗色谱柱20-30min。
2.8单击泵下面的瓶图标，输入溶剂瓶A、B内流动相的实际体积（为保护泵和色谱柱，请按实际体积输入）和停泵的体积单击“确定”，如果各溶剂瓶溶剂体积小于停泵体积，泵将自动停止。
2.9把缓冲液（用于柱子过渡的，与流动相等比例的乙腈/水、甲醇/水或10%的水溶液）换成流动相，排气后，逐步增加至所需流速，待柱压基本稳定后，打开检测器等，监视基线。
安捷伦1260高效液相色谱仪操作规程
安捷伦1260高效液相色谱仪操作规程一、仪器介绍二、前期准备1.打开仪器电源，待仪器自检完成后，确保所有指示灯都亮起。
2.检查溶剂瓶的液位，确保足够的溶剂供给。
3.清洁好色谱柱并连接到系统中。
三、仪器启动1.打开色谱软件，选择相应的方法。
2.点击“系统”菜单，选择“启动系统”命令，系统开始进行初始化。
3.在系统初始化完成后，点击“准备”菜单，选择“准备系统”命令，系统开始进行一系列的自动化准备工作，比如冲洗和平衡柱子。
4.检查系统的压力和温度，确保在正常范围。
四、样品进样1.准备好待测样品和标准品。
2.将样品装入进样瓶中，注意不要超过瓶口。
3.将进样瓶插入样品进样系统中，按照方法设置的条件进行进样。
4.点击软件界面上的“进样”按钮，开始进样。
五、色谱柱选择1.根据待测样品的性质和分离特点，选择合适的色谱柱。
2.将色谱柱连接到色谱仪系统中。
3.检查色谱柱的压力和温度，确保在正常范围。
六、色谱条件设置根据分析方法的要求，设置好色谱条件，包括流量、温度、柱温等参数。
七、检测器设置1.根据需要选择合适的检测器，比如紫外检测器、荧光检测器等。
2.设置检测器的工作参数，如波长、增益、基线噪声等。
八、开始分析1.在样品进样后，点击软件界面上的“开始”按钮，开始进行色谱分析。
2.监控检测器输出的信号，根据需要可以对信号进行放大或调整。
九、结果解析1.根据所用方法的要求，对分析结果进行解析。
2.可以通过软件导出结果并进行后续处理。
十、仪器关机1.关闭色谱仪软件。
2.关闭色谱柱进样系统。
3.关闭色谱仪电源。
此为安捷伦1260高效液相色谱仪的操作规程，希望能对使用者提供一定的参考和帮助。
在操作过程中，应严格按照安全操作规范进行，并及时进行维护和保养，以保证仪器的正常运行。
Agilent-1260-基本操作方法
2
1.327 1.570
1.814
2.514 2.901 3.246
4.027 4.513
3
4
5
7.205
7
6
5.692 6.256
200
mAU 250
min
9
8
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0
0
50
100
150
200
1.814 7.205
mAU 250
设置文字标注的字体、样式 在图谱上添加文字标注 在图谱上添加线形标注 移动谱图上所添加的文字标注、线形标注或EMF图形标注 删除谱图上所添加的文字标注、线形标注或EMF图形标注 在图谱上添加EMF格式的图形标注 多张色谱图分开显示或重叠显示的切换键 多张色谱图使用同一尺寸显示或各自满量程显示的切换键 是否显示化合物名称的切换键 是否显示化合物保留时间的切换键 是否显示图谱基线的切换键 是否显示图谱标题信息的切换键 是否显示图谱坐标轴的切换键 打印当前窗口中的谱图 将当前窗口中的谱图拷贝到剪贴板中
※设置基线 ※校正基线
是否自动使用手动积分参数 对所有信号均适用的积分事件初始值
贯穿
无贯穿
是否自动使用手动积分参数 对所有信号均适用的积分事件初始值
设置未达到基线分离的峰积分方式
峰谷比=
矮峰峰高 谷高
峰谷比低于 峰谷比高于
设定值
设定值
基线校正选“高级”峰谷比才生效
是否自动使用手动积分参数 对所有信号均适用的积分事件初始值
数据分析界面
调用数据文件
重叠调用一组数据 调用一个数据
信号窗口
选择最佳测定条件
最高峰满刻度显示
自行规定显示的时 间轴和响应值量程
第二高峰满刻度
Agilent1260高效液相色谱仪操作规程
Agilent1260⾼效液相⾊谱仪操作规程1、⽬的确保Agilent 1260⾼效液相⾊谱仪的正确使⽤及管理。
2、范围研发分析中⼼实验室Agilent 1260⾼效液相⾊谱仪。
3、责任仪器使⽤者对本标准的实施负责。
4、内容4. 1 开机4.1.1打开计算机，进⼊Windows 画⾯。
4.1.2⾃下⽽上打开1260LC各模块电源，待各模块⾃检完成后，双击电脑桌⾯上LC1260-1(Online)图标，化学⼯作站⾃动与1260LC通讯，进⼊⼯作站画⾯。
4.1.3单击【View】菜单选择【Method and Run control】项，也可单击⼯作站画⾯左下⾓【Method and Run control】项，进⼊⽅法和运⾏控制窗⼝。
4.2 安装⾊谱柱正确安装实验所需的⾊谱柱，注意⾊谱柱流速箭头⽅向，试验过程中需检查是否存在漏液。
4.3 溶剂瓶体积设置把事先配好的流动相倒⼊相应的溶剂瓶中，单击【instrument】菜单,选择【More Quat Pump】项下【Bottle filling】，在参数设置处输⼊各溶剂瓶（A、B、C、D）内溶液实际体积和停泵体积，单击【OK】键，即可。
4.4 设置【Seal wash】单击【instrument】菜单,选择【More Quat Pump】项下“control”, 在seal wash这栏中选择“On”, 清洗功能开始运⾏，并设置清洗时间，每隔5min清洗0.1min。
4.4 脱⽓逆时针旋开Purge阀，单击【instrument】菜单,选择【More Quat Pump】项下“control”, 在“pump”这栏中选择“On”,泵开始运⾏。
设置“solvents”⼀栏中相应参数，将试验中所⽤到的管道逐⼀脱⽓，直⾄管内（由溶剂瓶到泵⼊⼝）⽆⽓泡为⽌所需时间，3ml/min冲洗⼤约需5min～10 min ,,完成后选择“off” , 单击OK键关泵，顺时针旋紧Purge阀。
安捷伦1260操作规程
安捷伦1260操作规程安捷伦（Agilent）1260操作规程一、仪器概述安捷伦1260高效液相色谱仪是一种用于液相色谱分析的仪器，具有高灵敏度、高分辨率和高效率的特点。
该仪器由进样器、色谱柱、色谱泵、检测器等组成。
二、仪器准备1. 确保仪器的电源已连接并接通。
2. 检查进样器、色谱柱和检测器是否安装正确。
3. 检查液相色谱仪的液相系统是否已进行适当的液相填充，以及是否有足够的溶剂。
三、方法设置1. 打开色谱软件，并选择合适的方法模板。
2. 根据分析需求，在方法设置中输入样品信息、进样量、流速等参数。
3. 设置检测器的波长、增益和测量范围。
四、进样操作1. 打开进样器的盖子，将待测样品加入样品瓶中。
2. 点击软件中的进样按钮，设置样品名称和进样量。
3. 将样品瓶放入进样器，并关闭盖子。
4. 点击软件中的进样按钮，开始进样。
5. 进样完成后，从进样器中取出样品瓶，并将它放入垃圾桶中。
五、色谱柱操作1. 打开色谱柱的阀门，并将柱端与色谱柱连接。
2. 检查色谱柱是否没有泄漏，如果有泄漏，则需重新连接。
3. 检查色谱柱的温度，确保它处于合适的温度范围内。
六、液相泵操作1. 打开液相泵的电源，并连接到电脑上。
2. 设置合适的流速和梯度梯度。
3. 点击软件中的启动按钮，开始进行分析。
七、数据分析1. 使用色谱软件进行数据采集和分析。
2. 根据需要选择适当的数据处理方法，如峰面积计算、定量分析等。
3. 导出分析结果并保存。
八、仪器维护1. 分析结束后，关闭液相泵、进样器、色谱柱和检测器等设备的电源。
2. 清洗色谱柱和进样器，保持其清洁。
3. 定期检查仪器的连接线和电源线是否有松动或损坏。
九、安全操作1. 在操作仪器时，注意安全，避免接触到有害化学品。
2. 在操作过程中，严禁随意触摸仪器或移动连接线。
3. 在操作过程中，如遇到异常情况，请及时停止分析并向管理员报告。
通过以上操作规程，可以有效地使用安捷伦1260高效液相色谱仪进行样品分析。
Agilent1260液相色谱仪器操作规程(新)
Agilent1260液相色谱仪器操作规程一.生产厂家：美国Agilent二.到货日期：2011年1月三.附件：电脑、打印机四.使用范围：用于三聚氰胺，维生素A、D、E,β-胡萝卜素，牛磺酸，山梨酸、苯甲酸，乳糖、蔗糖等的检测五.工作环境：温度15℃~30℃，湿度20%~80%六.操作步骤:1.开机前准备：1.1.打开仪器室的空调。
1.2.配制流动相（按国标）,准备好蒸馏水、乙腈和甲醇。
2.开机：2.1.打开1260液相色谱仪器的进样器、泵、柱温箱和检测器的电源。
2.2.打开计算机。
2.3.打开“仪器1联机”图标，各模块完成自检。
2.4.点击“打开”图标，进入化学工作站。
3.设置运行模块和方法3.1.进样器（自动进样器）3.1.1.设置进样量，在“进样器”的模块中，点击鼠标右键，在“方法”中，按照国标，检测不同物质，设定不同的进样量。
反相：最大进样量为100ul，抽取速度一般设定200ul/min。
正相：最大进样量为500ul，抽取速度一般设定200~500ul/min。
3.1.2.设置进样器停止时间，在“进样器”的模块中，点击鼠标右键，在“方法”中，如标样的出峰时间为7分钟，停止时间可以设置为8分钟以上。
3.2.泵（四元泵或单泵）3.2.1.泵的流速：在“泵”的模块中，点击鼠标右键，点击“方法”，按照国标要求，如设置1.00ml/min。
3.2.2.如果是四元泵，可选择溶剂瓶，输入需要使用的各溶液的比例，如B 蒸馏水90%，C乙腈10%，点击“确认”。
3.2.3.在“泵”的模块中点击鼠标右键，点击“控制”，选择“泵”（打开），确认。
3.2.4. 设置泵停止时间：在“泵”的模块中，点击鼠标右键，点击“方法”，一般选择“与进样器一致/无限制”。
3.2.5. 压力限值：最小值一般设0bar，最大值一般设100bar。
3.3.柱温箱3.3.1.设置柱温箱的温度：在“柱温箱”模块中，点击鼠标右键，点击“方法”，左边按照国标要求可设置，比如35度，一般右边设置同左边。
agilent 1260高效液相色谱仪标准操作规程
标准操作规程STANDARD OPERATING PROCEDURE的准确性，特制定此规程。
2 范围：本规程适用于Agilent 1260高效液相色谱仪的使用、维护和保养。
3 责任者：化验员4 程序：4.1 开机4.1.1 打开计算机，输入用户名和密码，进入Windows 7画面。
4.1.2 打开1260 LC 各模块电源(不分先后)。
待各模块自检完成后，双击“仪器1联机”图标，化学工作站自动与1260 LC通讯，进入工作站。
（注意：在“仪器1脱机”关闭的情况下，“仪器1联机”方能打开。
）4.1.3 从“视图”菜单中选择“方法和运行控制”画面，来调用所需的界面，正常情况会默认进入此界面。
4.1.4 保对应溶剂瓶装入所要使用的流动相，左击“四元泵”模块下的“溶剂瓶”图标或右击“四元泵”下选择“瓶填充”，输入溶剂的实际体积和瓶总体积，可输入停泵的体积。
单击“确定”。
（注意：此操作很重要，以免气泡进入系统）。
4.1.5 轻轻旋开泵上的冲洗阀（缓缓旋开约1/4即可，不可用力太过）。
右击“四元泵”图标，出现参数设定菜单，单击“方法”选项，进入泵编辑画面。
设流量，从0 ml/min 逐渐变为3ml/min，溶剂A设到100%；单击“确定”。
右击“四元泵”图标，选择“控制”选项，选中“打开”，单击“确定”，则系统开始排气，直到管线内（由溶剂瓶到泵入口）无气泡为止；切换到通道同法继续排气，直到所有要用通道无气泡为止（只需排所用到的通道即可）。
4.1.6 右击“四元泵”图标，出现参数设定菜单，单击“方法”选项，进入泵编辑画面。
设流量为：0ml/min，单击“确定”，轻轻关闭排气阀（旋紧即可）。
4.2 数据采集方法、系列编辑：4.2.1 编辑完整方法：4.2.1.1 从“方法”菜单中选择“编辑完整方法”项，选中除“数据分析”外的三项，单击“确定”，进入下一界面“方法注释”。
4.2.1.2 方法信息：在“方法注释”中写入方法的相关信息。
Agilent 1260液相简明操作规程
1260液相色谱仪操作规程
一． 仪器的操作
1.开机：电脑→液相→工作站图标
2.新建方法（或调用已有方法）
3.设置参数：
自动进样器:进样量、标准进样/洗针进样（洗针位） 泵:流速→溶剂比例（等度/梯度）→采集时间→打开泵 柱温箱:温度→打开柱温箱
检测器:波长→打开紫外灯
4.等待系统平衡：（打开系统）→系统就绪→基线平
5.设置单针进样：
操作者→子目录→前缀/计数器→样品位置→运行方法 6.设置序列进样：
序列参数：操作者→子目录→前缀/计数器
序列表：样品瓶→方法名称→进样次数→（数据文件）→运行序列
7.冲柱：
10%有机溶剂（甲醇或乙腈）+90%水 20分钟→100%有机有机溶剂（甲醇或乙腈）20分钟
8.关机：
关闭模块→关闭仪器电源→关闭工作站→关闭电脑
二． 数据的分析
1.调用方法
2.调用信号
3.图形优化：
信号选项→范围（时间范围、响应范围）
4.积分优化：
积分事件→积分开/关→斜率灵敏度、峰宽→最小峰面积、最小峰高→保存退出
5.校正：
新建校正表→化合物→含量→确定
6.报告：
设定报告→定量结果（百分比法/外表法）→报告类型
（简短报告/性能报告）→色谱尺寸（时间80，响应20）→预览报告→打印
7.保存方法：方法另存为
三． 仪器的维护
1.泵 :
过滤白头、被动阀、泵杆和密封圈
2.脱气机 ：
冲洗、保存在有机相、交替使用AD路
3.自动进样器 ：
洗针进样、更换针、更换针座、更换密封垫
4.检测器：
更换氘灯、流通池
5.溶剂：需要抽滤
6.样品：需要过滤。
Agilent 1260 HPLC 操作规程
Agilent 1260 HPLC 操作规程1 开机1.1 打开电脑1.2 打开液相色谱各个模块的电源1.3 双击桌面“LC1260(Online)”，进入联机界面1.4 排气：1.4.1 手动旋开泵处冲洗阀（逆时针旋转约1圈）1.4.2 右键单击“Pump”图标区域，选择“Method”选项，进入泵编辑画面，设流速：5ml/min，点击“确定”；1.4.3 右键单击“Pump” 图标区域，点击“Control”选项，选中“ON”，点击“确定”，则系统开始冲洗，直到管线内（由溶剂瓶到泵入口）无气泡为止（一般为5分钟），切换通道继续冲洗，直到所有要用通道无气泡为止；1.4.4 右键单击“Pump” 图标，点击“Method”选项，设流速：0ml/min，手动旋紧冲洗阀；1.4.5 右键单击“Pump”图标，点击“Method”选项，按照方法要求选择合适比例的流动相，设流速：1.0ml/min；（不一定是1）1.4.6 同理右键单击“Column Comp”，“DAD”图标，点击“Method”选项，按照方法的要求设置温度，波长，点击“控制” 选项，“ON”打开柱温箱和检测器。
2 编辑方法2.1 点击“Method”——“Edit EntireMethod”开始编辑完整方法；2.2 选中除“Data Analysis ”外的三项，进入下一选项卡，选择“Als”（自动进样），点击“OK”，进入下一选项；2.3 选择“Method”菜单下“Method Information”选项，在“Method Comments”中加入方法的信息（如：This is for test!），选择“OK”，进入下一选项；2.4 泵参数设定：右键单击“Pump”图标，点击“Method…”选项，设置“Flow”：如1.0ml/min；“Stop Time”：如10 min（该停止时间仅为做一个样品需要的时间），按照要求选择合适比例的流动相配比，选择“OK”，进入下一选项；2.5 自动进样器参数设定：右键单击“Sampler”图标，点击“Method”选项，选择“Injection volume”，输入进样体积，选择“OK”，进入下一选项；2.6 柱温箱参数设定：右键单击“Column Comp”，点击“Method”选项，设置“Left”温度（可设置温度范围：低于室温10℃-80℃），一般“Left”和“Right”温度一致，选择“Combined”绑定即可，“Stop Time”选择“As Pump /Injector”，选择“OK”，进入下一选项；2.7 UV检测器参数设定: 右击“DAD” ，点击“Method…”选项，下方的空白处输入所需的检测波长（可根据需要选择多个波长，最多可选8个波长）；“Stop Time”选择“As Pump /Injector”；“Spectrum” ——“Store”选项下，根据需要选择“None”或“All（全波长扫描）”等选项，选择“OK”，进入下一选项；2.8 编辑方法完毕，从“Method”菜单中，选中“Save Method As”，输入一方法名，选择“OK”，保存方法成功。
Agilent1260简易操作步骤
Agilent1260简易操作步骤1260化学工作站开机步骤(自动进样器)1打开计算机；2打开主机各模块电源（不分先后），双击仪器1 联机图标,进入化学工作站；3旋开泵上的排气阀，将工作站中的泵流量设到5ml/min，溶剂A设到100%；4在工作站中打开泵，排出管线中的气体数分钟；5若是多元泵，则依此切换到B、C、D溶剂分别排气；6将工作站中的泵流量设到1ml/min，多元泵则再设定溶剂配比，如A=80%，B=20%；7关闭排气阀，检查柱前压力；8待柱前压力基本稳定后,打开检测器灯，观察基线情况；9点击VWD 图标，点击设置VWD信号，设定波长(例如254nm)；10点VWD 图标下的开关，打开氘灯；11点击视图/ 在线信号/ 信号窗口1，打开监视窗口；。
12点击改变，选定信号，如：VWD A ，信号=254...设定横、纵坐标，确定；（调整=细调，平衡=粗调）；13所有参数设置好后，点击主菜单中方法/方法另存为，保存方法文件。
14 由主菜单上的序列进入序列参数，输入操作者姓名、数据文件名等；15 由主菜单上的序列进入序列表，编辑样品分析序列，分别输入样品位置，方法文件名，进样量等；16 由主菜单上的序列进入部分序列，选定想要运行的序列，选好后按下方的运行序列按钮，仪器自动运行。
注意事项：1氘灯是易耗品，应最后开灯，不分析样品即关灯；2仪器使用后，应用95%水冲洗柱子和系统0.5-1小时，流量0.5—1ml/min，再用100%甲醇冲0.5小时；3.开机时，打开排气阀，100%水，泵流量5ml/min，若此时显示压力>10bar，则应更换排气阀里的过滤白头。
Agilent 1260高效液相色谱仪操作规程
1、目的确保Agilent 1260高效液相色谱仪的正确使用及管理。
2、范围研发分析中心实验室Agilent 1260高效液相色谱仪。
3、责任仪器使用者对本标准的实施负责。
4、内容4. 1 开机4.1.1打开计算机，进入Windows 画面。
4.1.2自下而上打开1260LC各模块电源，待各模块自检完成后，双击电脑桌面上LC1260-1(Online)图标，化学工作站自动与1260LC通讯，进入工作站画面。
4.1.3单击【View】菜单选择【Method and Run control】项，也可单击工作站画面左下角【Method and Run control】项，进入方法和运行控制窗口。
4.2 安装色谱柱正确安装实验所需的色谱柱，注意色谱柱流速箭头方向，试验过程中需检查是否存在漏液。
4.3 溶剂瓶体积设置把事先配好的流动相倒入相应的溶剂瓶中，单击【instrument】菜单,选择【More Quat Pump】项下【Bottle filling】，在参数设置处输入各溶剂瓶（A、B、C、D）内溶液实际体积和停泵体积，单击【OK】键，即可。
4.4 设置【Seal wash】单击【instrument】菜单,选择【More Quat Pump】项下“control”, 在seal wash这栏中选择“On”, 清洗功能开始运行，并设置清洗时间，每隔5min清洗0.1min。
4.4 脱气逆时针旋开Purge阀，单击【instrument】菜单,选择【More Quat Pump】项下“control”, 在“pump”这栏中选择“On”,泵开始运行。
设置“solvents”一栏中相应参数，将试验中所用到的管道逐一脱气，直至管内（由溶剂瓶到泵入口）无气泡为止所需时间，3ml/min冲洗大约需5min～10 min ,,完成后选择“off” , 单击OK键关泵，顺时针旋紧Purge阀。
4.5 平衡色谱柱单击【instrument】菜单,选择【Set up Instrument Method】项下“Quat Pump”, 在“solvents”一栏将试验中要用到的有机相通道（甲醇/乙腈）设置为100%，并将“Flow”从低流速逐级设为1ml/min，在“pump”这栏中选择“On”,泵开始运行，冲洗约10min钟后，设定与测试方法相同的柱流速和流动相比例平衡色谱柱(梯度采用起始流动相比例)，冲洗色谱柱，直至基线走平，一般需要30 min ～60 min。
Agilent 1260 LC型高效液相色谱仪标准操作规程
Agilent 1260 LC型高效液相色谱仪标准操作规程一、目的：建立Agilent 1260 LC型高效液相色谱仪标准操作规程，保证正确使用。
二、适用范围：适用于Agilent 1260 LC型高效液相色谱仪标准操作。
三、职责：研发部对本标准的实施负责。
四、正文：1 仪器组成及电源：1.1 仪器组成：本仪器由四元泵、真空脱气机、DAD检测器、安捷伦化学工作站组成。
1.2 电源：泵为110V稳压电源，检测器为220V稳压电源，工作站为220V稳压电源。
1.3开机运行前，更换溶剂瓶中的流动相，若管道为第一次使用，先用针管排空各管道中的气泡。
2 仪器硬件开启：自上而下或自下而上顺序开启各模块（真空脱气机、四元泵、自动进样器、VWD检测器、荧光检测器），打开电源指示灯，指示灯亮，显“绿色”；状态指示灯指示当前的状态，各模块进行自检（自动进样器的门板必须关上）。
3安捷伦化学工作站的操作：3.1开机运行步骤3.1.1 待各模块自检完成后，双击“仪器1联机”图标，化学工作站自动与1260LC通讯，进入工作站画面，各模块的软件图标均为绿色。
3.1.2从“视图”菜单中选择“方法和运行控制”画面，点击”视图”菜单中的”样品视图”、”系统视图”、“命令行”，来调用所需界面（或直接从“视图”菜单中选择“全部菜单”来调用全部界面。
3.1.3把流动相放入溶剂瓶中。
3.1.4打开“Purge”阀，点击泵图标，点击“设置泵”，进入泵编辑画面，设置流速为3-5ml/min，点击“确定”，则系统开始排空管道内的气泡，切换通道继续排空，直至所有要用的通道无气泡为止。
3.1.5点击泵图标，选“控制”选项，选中“关闭”关泵，关闭“Purge”阀。
3.1.6点击泵图标，设置流速冲洗柱子。
3.1.7点击泵下面的瓶图标，输入溶剂的实际体积和瓶体积，点击“确定”。
3.2数据采集方法编辑3.2.1从“方法”菜单中选择“编辑完整菜单”项，选中除“数据分析”外三项，点击“确定”，进入下一画面。
(完整word版)Agilent1260高效液相色谱仪操作规程
四川中安检测有限公司作业指导书Agilent1260高效液相色谱仪操作规程1.目的正确使用仪器，确保化验结果的准确度、精密度，延长仪器使用寿命。
2.范围适用于Agilent1260高效液相色谱仪及色谱数据工作站的操作。
3.职责3.1操作人员：按照本操作规程操作仪器，对仪器进行自检，作使用登记。
3.2负责人：负责监督仪器操作是否符合规程，对仪器进行定期自检、仪器综合管理。
4.要求4.1开机4.1.1溶剂准备按要求准备所需流动相，每瓶均超声10min排气，将原来浸泡在甲醇中的滤头取出对应放在各个流动相中（A：二次蒸馏水；D:缓冲溶液；B:色谱纯甲醇C：色谱纯乙腈）。
4.1.2开启工作站4.1.2.1启动计算机打开计算机电源，登陆windows 操作系统。
4.1.2.2启动工作站打开Agilent 1260 各模块电源，待Agilent 1260 各模块自检完成后(各模块右上角指示灯为黄色或者无色)，点击屏幕桌面图标“HPLC -1260（联机）”，则进入工作界面。
模块右上角状态灯颜色说明：无色：未开电源或者模块准备就绪；黄色：模块未准备就；绿色：正在进样分析；红色：模块出错；所有模块红色：仪器有漏液工作站图形颜色说明：绿色：模块准备就绪；黄色：模块未准备就绪；蓝色：正在进样分析；红色：出错或者不能联机；灰色：此模块没启用。
将鼠标移至系统或各个模块的状态指示栏，系统会自动显示未就绪或出错的原因。
4.1.3冲洗流动相管路反时针旋开泵模块上的溶液排空阀，右键单击泵视图的空白处，选择“方法”，设置“流速”为5ml/min。
将实验中需要的各个通道分别设置“溶剂”为100%，点击确定开始冲洗，每个通道冲洗3-5分钟，若冲洗通道时压力显示超过10 bar，则可换过滤白头。
4.1.4平衡柱子冲洗完柱子，按要求调整流动相速率及流动相比例，顺时针旋转排空阀，关闭溶液排空阀(确认泵流量为1ml/min)，然后右键点击需用检测器模块视图的空白处，选择“方法”进入检测器的参数设置界面，按要求设置参数（停止时间与泵一致），后点击右键，选择“控制”，在弹出的窗口选择打开，开始平衡柱子，监视信号基线和压力，等待平稳后即可进样（若用缓冲溶液和有机相作为流动相，先用水和有机相平衡30 min，比例与所要求的缓冲溶液和有机相比例一致），待基线平稳后换用所要求的缓冲溶液和有机相按比例混合平衡柱子30 min）。
Agilent 1260 HPLC 简明操作步骤
Agilent 1260 HPLC 操作规程开机：打开电脑，打开液相色谱各个模块的电源，双击桌面“LC1260(联机)”,进入联机界面排气：手动旋开泵处冲洗阀（逆时针旋转约1圈），调节流速，开始冲洗，直到管线内（由溶剂瓶到泵入口）无气泡为止（一般为5分钟），切换通道继续冲洗，直到所有要用通道无气泡为止；设置流速为0，旋紧冲洗阀；按照方法的要求设置温度，波长；打开柱温箱和检测器。
参数设置：新建或调用方法，设置泵参数，流速，流动相比例，停止时间等；设置自动进样器参数，设置其他参数保存方法文件设置数据保存方案上样：待基线平稳后选择单针进样或序列进样关机：样品分析完成后，冲洗色谱柱和系统，让色谱柱中充满有机相，两端封闭保存。
退出化学工作站及其它窗口，关闭计算机；关闭Agilent 1260各模块电源开关数据处理：调出样品谱图，进行分析仪器使用注意事项1. 用棕色的溶剂瓶盛放水溶液或磷酸盐缓冲液.光照影响瓶中藻类的生长会堵塞溶剂过滤器,从而影响泵的运行.勿使用多日存放的蒸馏水.2. 在比例阀的混合点,重力作用使盐颗粒沉淀下来,通常,下面阀A/D接水相/盐溶液,C/B 接有机溶剂.使用盐时脱气机易堵,可将管路入口与出口反接,用60摄氏度的温水反冲,用针筒缓慢吸200mL左右.3. 流动相瓶中的滤头脏.压力波动,可将滤头拔下,检查是否与滤头有关.滤头污染,可用30%-35%的稀硝酸泡1-2h或过夜,看污染程度,最后用水冲洗干净,重新装好.4. seal-wash 用10%的异丙醇.使用缓冲盐时要加seal-wash选项,周期清洗.5. LAN与CAN不能串联,LAN接仪器,PC.CAN为模块间通讯.6. 柱温箱选择3uL,减少死体积,延迟体积.7. 液相上各种灯颜色.电源打开后,四个模块左侧灯亮绿色.状态指示灯位于各自模块的右上方：呈黄色：该仪器在未准备好状态(Not-ready) 或正在自检.呈绿色：该仪器正在运行,采集数据(Run).无颜色：该仪器已准备好等待运行(Pre-run).呈红色：该仪器检测到有故障发生,仪器在错误状态,红色多发生于漏液时.8. 过滤白头位于排气阀内,当系统压力有异常增高时,首先需要检查过滤白头是否阻塞了.判断的方法是：打开排气阀,以纯水作流动相,将流速设为5mL/min,如果泵压超过10bar,则说明过滤白头需要更换了.如果过滤芯的颜色发黑,说明是被柱塞密封垫磨损下来的碎屑堵塞的.9. 毛细管线分类：0.17mm内径------绿色;0.12mm内径-------红；0.25mm内径-------蓝PEEK 管线：内径-----0.18mm.10. 灯能量测试,先将灯预热,用水平衡系统.启动Agilent Lab advisor 进行测试.启动软件connect（界面右上部分）Service&Diagnostics（左侧导航栏）选择G4212B Intensity Test Run 查看结果.11. 柱子存放：柱子填充乙腈或甲醇,两端堵头封存,每一个月重新使用乙腈或甲醇,填充封存。
安捷伦1260型高效液相色谱仪操作规程
安捷伦1260型高效液相色谱仪操作规程一、开机1、开机前准备：流动相使用前必须过0.45um的滤膜（有机相的流动相必须为色谱纯；水相必须用新鲜注射用水，不能使用超过3天的注射用水，以防止长菌或长藻类）；把流动相放入溶剂瓶中。
A瓶：为水相B瓶：为有机相。
2、打开电脑，选Win 2000，进入Win 2000界面。
3、双击CAG Boodp server图标，放大CAG Boodp server小图标，出现窗口，5min 内打开液相各部件电源开关，等待1100广播信息后，表示通讯成功连接，关闭CAG Boodp serve窗口。
4、双击online图标，仪器自检，进入工作站。
该页面主要由以下几部分组成：——最上方为命令栏，依次为File，Run Control，Instrumen…等；——命令栏下方为快捷操作图标，如多个样品连续进行分析、单个样品进样分析、调用文件保存文件……等；——中部为工作站各部件的工作流程示意图；依次为进样器-输液泵-柱温箱-检测器-数据处理-报告；——中下部为动态监测信号；——右下部为色谱工作参数：进样体积、流速、分析停止时间、流动相比例、柱温、检测波长等。
4、从“View”菜单中选择“Method and control”画面。
二、编辑参数及方法1、开始编辑完整方法：从“Method”菜单中选择“New method”，出现DEF-LC.M，从“Method”菜单中选择“Edit entire method”，选择方法信息、仪器参数及收集参数、数据分析参数和运行时间表等各项，单击OK，进入下一画面。
2、方法信息：在“Method Comments”中加入方法的信息，如方法的用途等。
单击OK，进入下一画面。
3、泵参数设定：进入“Setup pump”画面，在“Flow” 处输入流量，如1ml/min；在“Solvent B”处输入有机相的比例如70.0，（A=100-B），也可在Insert 一行“Timetable”，编辑梯度；输入保留时间；在“Pressure Limits Max”处输入柱子的最大耐高压，以保护柱子。
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设置时间参考点
按照时间参考点进行横轴对齐
纵轴对齐
进行多张谱图三维模拟显示
谱图镜像显示
谱图差减显示（扣空白）
积分参数设置
积分参数设置
积分当前色谱图
自动积分
编辑/设置积分事件表
查找当前色谱图的 合适积分参数
是否自动使用手动积分参数 对所有信号均适用的积分事件初始值
对前延或拖尾峰进行斜切处理 不校正基线
在图谱上添加文字标注
在图谱上添加线形标注
在图谱上添加EMF格式的图形标注
min
9
8
7
6
5
4
3
2
1
0
0
1.327 1.570
2.514 2.901 3.246
4.027 4.513
5.692 6.256
50
100
150
200
1.814 7.205
mAU 250
多张色谱图分开显示或重叠显示的切换键
只有打开才就绪
DAD高级功能
利用等吸收图优化色谱条件
反选后最亮处表示吸收最集中，即最大吸收。 参比波长：选择样品无吸收，且靠近样品吸收处。
DAD高级功能 色谱峰纯度检索
纯色谱峰的纯度因子将高于阈值 不纯峰的纯度因子将低于阈值
④运行时选项表
必选 一般不选
冲柱程序
Agilent 1260 基本操作方法
基本单元
溶剂柜 四元泵
自动进样器 柱温箱
DAD检测器
Agilent 1260 化学工作站
采集参数 泵
自动进样器 DAD检测器
数据参数 积分参数 报告参数
建立文件位置
工作站联机画面
建立新方法
Agilent工作站建立方法是以改写方式建立 建议先调用工作站默认方法DEF_LC.M， 在此基础上进行改写
2
1.327 1.570
1.814
2.514 2.901 3.246
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mAU 250
设置文字标注的字体、样式 在图谱上添加文字标注 在图谱上添加线形标注 移动谱图上所添加的文字标注、线形标注或EMF图形标注 删除谱图上所添加的文字标注、线形标注或EMF图形标注 在图谱上添加EMF格式的图形标注 多张色谱图分开显示或重叠显示的切换键 多张色谱图使用同一尺寸显示或各自满量程显示的切换键 是否显示化合物名称的切换键 是否显示化合物保留时间的切换键 是否显示图谱基线的切换键 是否显示图谱标题信息的切换键 是否显示图谱坐标轴的切换键 打印当前窗口中的谱图 将当前窗口中的谱图拷贝到剪贴板中
MeOH 20 40 40 80
H2O 80 60 60 20
40′
80′ 60′
0′
20′
②仪器/采集-设置进样器
标准：0.1～100μL
前一针样品运行过程中，把 下一针的样品瓶抓取到针座
运行停止前0.5 ～1min
前一针样品运行过程中，把下一 针样品吸入定量环，准备进样
②仪器/采集-设置柱温箱
②仪器/采集-设置检测器
带宽越小，吸收越大，噪音也大，信/噪小 带宽越大，吸收减小，噪音减小，信/噪大
梯度洗脱，基线漂移，参比波长可减轻漂移
影响色谱图的采集频率 应略小于色谱图上最窄的色谱峰的半峰宽
太快：色谱图毛刺；太慢：数据丢失
通过光谱选条件 进行纯度检测 190～950nm 扫描间隔
每次进样前自动平衡→序列进样 每次进样后自动平衡→手动进样
※设置基线 ※校正基线
是否自动使用手动积分参数 对所有信号均适用的积分事件初始值
贯穿
无贯穿
是否自动使用手动积分参数 对所有信号均适用的积分事件初始值
设置未达到基线分离的峰积分方式
峰谷比=
矮峰峰高 谷高
峰谷比低于 峰谷比高于
设定值
设定值
基线校正选“高级”峰谷比才生效
是否自动使用手动积分参数 对所有信号均适用的积分事件初始值
程序打开该文件 HTM：将报告以超文本文件形式输出，可以使用IE浏览器
打开该文件 XLS：将报告以EXCEL文件形式输出
※直接影响峰面积大小 改动要慎重
不影响峰面积大小 根据需要改动
1 234 5 6 78 9
1.选择工具（选中色谱峰）
2.基线连到此点
3.基线维持
4.拖尾峰撇去
5.“积分”开/关 6.斜率灵敏度
谷底基线
7.最小峰面积
8.固定峰宽
9.“检测肩峰”开/关
基线维持
19项参数
基线连到此点
“积分”开/关
设定报告格式
报告格式 需编辑噪音范围
就近计算
PDF：输出可以移植文件格式 TXT：只输出报告的文本内容，以纯文本形式输出 CSV：将报告以逗点分隔数据库文件形式输出，可以用
Excel等程序打开该文件 EMF：将报告以EMF图形文件形式输出 DIF：将报告以数据交换文件形式输出，可以用Excel等
不显示保留时间、基线、图谱标题
归一化 225
200
175
1501Βιβλιοθήκη 51007550
25
0
0
1
2
3
4
5
6
7
8
9
min
1 2 3456 7
1.按照时间参考点进行横轴对齐 2.纵轴对齐 3.谱图复原 4.进行多张谱图三维模拟显示 5.谱图镜像显示 6.谱图差减显示（扣空白）
8 9 10 11
7.进行谱图积分 8.设置时间参考点 9.移动时间参考点 10.删除时间参考点 11.删除当前显示的谱图
编辑完整方法
①方法信息 ww
建议给予注释
②仪器/采集-设置泵
默认：999.99min 色谱柱：4.6mm，5μm
流速：1～2mL/min
一次运行结束后，到第二 样品复杂 次进样泵前输的送等流候动时相间的初始状梯态度洗脱
根据预实验确定采集时间
20min 40min 60min 80min
数据分析界面
调用数据文件
重叠调用一组数据 调用一个数据
信号窗口
选择最佳测定条件
最高峰满刻度显示
自行规定显示的时 间轴和响应值量程
第二高峰满刻度
min
9
8
7
6
5
4
3
2
1
0
0
50
100
150
1.327 1.570
2.514 2.901 3.246
4.027 4.513
5.692 6.256
方法-新建方法→编辑完整方法
lampall off（关灯） Sputamnpdablyl （of待f（机关）泵）
另存为：冲柱.M
进样前准备
检查流动相 设置溶剂瓶填充量 泵的初始化 打开检测器 调出在线信号窗口
排气泡 以流动相置换各通道
DAD或VWD至少预热10min
检查流动相
稍微摇动溶剂瓶，检查是否有悬浮物。 检查各溶剂瓶所在管路是否与待运行方法一致。 新换溶剂需滤过、超声。（乙腈最好新配） 流动相含缓冲盐，要打开泵密封垫清洗组件。
打开密封垫清洗组件
流动相含缓冲盐：10%异丙醇水溶液（循环） 流动相为有机相：有机相
设置溶剂瓶填充量
当重新添加流动相后，必须更改该界面 的实际溶剂值。
调出在线信号窗口
样品采集方案
单针进样
序列进样
加冲柱.M
数据分析参数（脱机）
调用数据文件 建立合适的积分参数 设置报告格式