Agilent 1260 基本操作方法

②仪器/采集-设置检测器
带宽越小，吸收越大，噪音也大，信/噪小 带宽越大，吸收减小，噪音减小，信/噪大
梯度洗脱，基线漂移，参比波长可减轻漂移
影响色谱图的采集频率 应略小于色谱图上最窄的色谱峰的半峰宽
太快：色谱图毛刺；太慢：数据丢失
通过光谱选条件 进行纯度检测 190～950nm 扫描间隔
每次进样前自动平衡→序列进样 每次进样后自动平衡→手动进样
MeOH 20 40 40 80
H2O 80 60 60 20
40′
80′ 60′
0′
20′
②仪器/采集-设置进样器
标准：0.1～100μL
前一针样品运行过程中，把 下一针的样品瓶抓取到针座
运行停止前0.5 ～1min
前一针样品运行过程中，把下一 针样品吸入定量环，准备进样
②仪器/采集-设置柱温箱
不显示保留时间、基线、图谱标题
归一化 225
200
175
150
125
100
75
50
25
0
0
1
2
3
4
5
6
7
8
9
min
1 2 3456 7
1.按照时间参考点进行横轴对齐 2.纵轴对齐 3.谱图复原 4.进行多张谱图三维模拟显示 5.谱图镜像显示 6.谱图差减显示（扣空白）
8 9 10 11
7.进行谱图积分 8.设置时间参考点 9.移动时间参考点 10.删除时间参考点 11.删除当前显示的谱图
Agilent 1260 基本操作方法
基本单元
溶剂柜 四元泵
自动进样器 柱温箱
DAD检测器
Agilent 1260 化学工作站
采集参数 泵
自动进样器 DAD检测器
数据参数 积分参数 报告参数
建立文件位置
工作站联机画面
建立新方法
Agilent工作站建立方法是以改写方式建立 建议先调用工作站默认方法DEF_LC.M， 在此基础上进行改写
程序打开该文件 HTM：将报告以超文本文件形式输出，可以使用IE浏览器
打开该文件 XLS：将报告以EXCEL文件形式输出
数据分析界面
调用数据文件
重叠调用一组数据 调用一个数据
信号窗口
选择最佳测定条件
最高峰满刻度显示
自行规定显示的时 间轴和响应值量程
第二高峰满刻度
min
9
8
7
6
5
4
3
2
1
0
0
50
100
150
1.327 1.570
2.514 2.901 3.246
4.027 4.513
5.692 6.256
编辑完整方法
①方法信息 ww
建议给予注释
②仪器/采集-设置泵
默认：999.99min 色谱柱：4.6mm，5μm
流速：1～2mL/min
一次运行结束后，到第二 样品复杂 次进样泵前输的送等流候动时相间的初始状梯态度洗脱
根据预实验确定采集时间
20min 40min 60min 80min
※设置基线 ※校正基线
是否自动使用手动积分参数 对所有信号均适用的积分事件初始值
贯穿
无贯穿
是否自动使用手动积分参数 对所有信号均适用的积分事件初始值
设置未达到基线分离的峰积分方式
峰谷比=
矮峰峰高 谷高
峰谷比低于 峰谷比高于
设定值
设定值
基线校正选“高级”峰谷比才生效
是否自动使用手动积分参数 对所有信号均适用的积分事件初始值
方法-新建方法→编辑完整方法
lampall off（关灯） Sputamnpdablyl （of待f（机关）泵）
另存为：冲柱.M
进样前准备
检查流动相 设置溶剂瓶填充量 泵的初始化 打开检测器 调出在线信号窗口
排气泡 以流动相置换各通道
DAD或VWD至少预热10min
检查流动相
稍微摇动溶剂瓶，检查是否有悬浮物。 检查各溶剂瓶所在管路是否与待运行方法一致。 新换溶剂需滤过、超声。（乙腈最好新配） 流动相含缓冲盐，要打开泵密封垫清洗组件。
※直接影响峰面积大小 改动要慎重
不影响峰面积大小 根据需要改动
1 234 5 6 78 9
1.选择工具（选中色谱峰）
2.基线连到此点
3.基线维持
4.拖尾峰撇去
5.“积分”开/关 6.斜率灵敏度
谷底基线
7.最小峰面积
8.固定峰宽
9.“检测肩峰”开/关
基线维持
19项参数
基线连到此点
“积分”开/关
在图谱上添加文字标注
在图谱上添加线形标注
在图谱上添加EMF格式的图形标注
min
9
8
7
6
5
4
3
2
1
0
0
1.327 1.570
2.514 2.901 3.246
4.027 4.513
5.692 6.256
50
100
150
200
1.814 7.205
mAU 250
多张色谱图分开显示或重叠显示的切换键
2
1.327 1.570
1.814
2.514 2.901 3.246
4.027 4.513
3
4
5
7.205
7wk.baidu.com
6
5.692 6.256
200
mAU 250
min
9
8
1
0
0
50
100
150
200
1.814 7.205
mAU 250
设置文字标注的字体、样式 在图谱上添加文字标注 在图谱上添加线形标注 移动谱图上所添加的文字标注、线形标注或EMF图形标注 删除谱图上所添加的文字标注、线形标注或EMF图形标注 在图谱上添加EMF格式的图形标注 多张色谱图分开显示或重叠显示的切换键 多张色谱图使用同一尺寸显示或各自满量程显示的切换键 是否显示化合物名称的切换键 是否显示化合物保留时间的切换键 是否显示图谱基线的切换键 是否显示图谱标题信息的切换键 是否显示图谱坐标轴的切换键 打印当前窗口中的谱图 将当前窗口中的谱图拷贝到剪贴板中
设置时间参考点
按照时间参考点进行横轴对齐
纵轴对齐
进行多张谱图三维模拟显示
谱图镜像显示
谱图差减显示（扣空白）
积分参数设置
积分参数设置
积分当前色谱图
自动积分
编辑/设置积分事件表
查找当前色谱图的 合适积分参数
是否自动使用手动积分参数 对所有信号均适用的积分事件初始值
对前延或拖尾峰进行斜切处理 不校正基线
只有打开才就绪
DAD高级功能
利用等吸收图优化色谱条件
反选后最亮处表示吸收最集中，即最大吸收。 参比波长：选择样品无吸收，且靠近样品吸收处。
DAD高级功能 色谱峰纯度检索
纯色谱峰的纯度因子将高于阈值 不纯峰的纯度因子将低于阈值
④运行时选项表
必选 一般不选
冲柱程序
打开密封垫清洗组件
流动相含缓冲盐：10%异丙醇水溶液（循环） 流动相为有机相：有机相
设置溶剂瓶填充量
当重新添加流动相后，必须更改该界面 的实际溶剂值。
调出在线信号窗口
样品采集方案
单针进样
序列进样
加冲柱.M
数据分析参数（脱机）
调用数据文件 建立合适的积分参数 设置报告格式
设定报告格式
报告格式 需编辑噪音范围
就近计算
PDF：输出可以移植文件格式 TXT：只输出报告的文本内容，以纯文本形式输出 CSV：将报告以逗点分隔数据库文件形式输出，可以用
Excel等程序打开该文件 EMF：将报告以EMF图形文件形式输出 DIF：将报告以数据交换文件形式输出，可以用Excel等