反应曲线观察和处理

N
↓N LR HR L NR CA MT ME
结果超出最高正常范围(平均值)
结果超出最低正常范围(平均值) 检测超出线性范围（高或低） 检测超出治疗范围（高或低） 超出最高线性范围 检测超出正常范围（高或低） 校正提示 维护提示 材料错误/报警
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三、凝固曲线的影响因素 一条凝固曲线是整个试验过程的最终产物， 在任意一个时期有任何的影响因素介入都有可 能影响凝固过程，并由此影响到反应曲线的形 状。
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凝固曲线– CASE 2 - PT
5060-最小delta值没有发现
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凝固曲线– CASE 2 - PT
最小DELTA值标准: APTT curve >10 PT curve > 15
正常 PT 凝固曲线形状
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CASE 3 标准时间试验和延长时间试验PT均失败
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凝固曲线– Sample 3 - PT
5056 太多无效的原始数据点
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凝固曲线– Sample 3 – PT (延长)
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凝固曲线形成过程
吸光率增加
时间增加 (seconds)
在规定获取时间内，光电探测器会每秒收集10次测量信号，这些测量通过一个图表的形式表现出 来，Y轴式吸光度的增加，X轴秒数的增加。最终的结果就是可以被回顾的凝固曲线。测量值被转 变成电子信号，ACL TOP的软件通过运算法则的测算，判定凝固点。 Growing Together
错误/报警信息提示
SE HE CE RE 进样错误 硬件错误 凝集错误 结果错误 L ↓L H ↓H 超出最高线性范围 结果超出最低试验范围 结果超出最高治疗范围(平均值) 结果超出最低治疗范围(平均值)
C
↓C HW CW RW QC AR NP T ↓T
结果超出最高定标范围
结果超出最低定标范围 硬件报警 凝集报警 结果报警 质控错误 分析参比超出范围 NPP报警 结果超出最高试验范围 结果超出最低试验范围
5078-检测到试剂不足
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CASE 1 解释 • 试剂不足 • 反应曲线形状可能显示正常，但是如果没有分配 适量的试剂， FAILED 将一直出现。
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CASE 2 标准时间试验PT 失败 延长时间试验得到结果
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CASE 8 D-Dimer失败 显示错误“基线期高”
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反应曲线– Case 8
5053 基线期平均值高
通常反应吸光度值在500 和1200 mAbs之间
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CASE 8 可能的解释
• 吸光度 (1281 mAbs) 超过临界值 • 样本可能浑浊(脂血, 溶血, 过度黄疸) 建议: • 首先1:2稀释 (不是 1:5 稀释应为D二聚体结果可能是正常的)

二阶导数运算法则用来判定除了用一阶导数法和FIB-C外的其他项目的凝固点的判定。当纤维蛋白形成反应到达最大加速度 时，二阶导数法则判定此时为凝固点。二阶导数的最大值那点与最大反应加速度那点是一致的，用红色的垂线标示。 二阶导数法则是用一阶导数法则衍生出来的，这意味着用二阶导数法则判定凝固点的测试项目需要同时满足两种法则。
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3、机械原因 加样针损坏（包括样本与试剂加样针） 读数区有液体溢出 测试杯中有杂质 光路损坏
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4、病人临床状况 凝血因子缺乏 DIC
严重的脂血症
肝脏疾病
抗凝治疗
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• Fib浓度高。
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FIB-C 定标曲线
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Viewing Fib-C High & Low Curves
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反应曲线
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凝固曲线– Case 4 – APTT
5071 一阶导数最大值没有找到
凝固曲线形状可见，但加 速期的捕获时间受限制。
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凝固曲线– Case 4– APTT (延长)
执行延长试验(360 sec)
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一阶导数法则用来判定PT, FII, 和 FVII等用 RecombiPlasTin试剂测试的实验项目。 一阶导数法是将凝固最大速度点判定为凝固点，基于凝固曲线的斜率。曲线上导数最大点与速度最大点是相一致的，用 红色垂直线标示出来。
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二阶导数运算法则
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反应曲线– Case 7 (高稀释度1:25)
在26.250 ng/mL前的结果可 接受
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CASE 7 解释 • 非常高浓度的D-Dimer
• 标准试验= FAILED (饱和曲线形状)
• 1:5稀释 = 超出检测线性(高) • 1:25稀释 = 高稀释度得到结果
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方法学
发色底物法 – 测定硝基苯
运算法则
线性动力学 AT
(pNA) 的释放量 当底物与分
析物反应时 免疫比浊法 – 检测由于抗原/ 终点减起点法 –终点的光学读 数均值减去基线光学读数均 值 DD 抗体复合物形成而导致的吸 光率的变化
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FIB-C 正常凝固曲线
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Delta of Absorbance
凝固时间取决于所有发生的吸光度 DELTA值的37%。
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CASE 1 试剂分配不足
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凝固曲线– Case 1 试剂不足 (PT)
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CASE 6 标准试验Fib失败
源自文库43
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反应曲线– Case 6
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反应曲线– Case 6 Fib C (标准试验- 1:10稀释)
5052基线期SD超过误差范围
快速反应，没有检测到 基线期
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反应曲线– Case 6 Fib C 再检或Fib C High 试验 (1:20稀释)
高 Fibrinogen 671 mg/dL 自动1:20稀释
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CASE 6 可能的解释
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标本的凝固曲线 失败，该怎么办?
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PT 正常凝固曲线
一阶求导 (max)
凝固时间
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APTT 正常凝固曲线
二阶求导 (max)
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一阶求导(purple)
凝固时间
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止凝血产品线移转 技术支持 沃芬中国 唐艳琳 03.08 2013 08 May 2012
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如何观察和处理 凝固/反应曲线
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凝固曲线
浊度或光 散射值 平台期; 所有纤维蛋白原已经全 平台期; 所有纤维蛋 部被水解为纤维蛋白
白原已经全部被水解 为纤维蛋白 纤维蛋白原被水解成纤
维蛋白凝块
纤维蛋白原被水解成纤 纤维蛋白原被水解成纤 Time 维蛋白凝块 维蛋白凝块 Time
最初阶段; 因子被激活
最初阶段; 因子被激活
5056 太多无效的原始数据点
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CASE 3 可能的解释
可能脂类干扰(非常脂浊的样本).
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CASES 4 e 5
标准时间试验 APTT 失败. 延长试验得到结果
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如何查看凝固曲线
(查看样本结果详情)
样本详情
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查看凝固曲线
凝固曲线
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凝固曲线信息
测试信息 报警和错误
结果
凝固曲线
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二、怎么看凝固曲线 ?
典型的曲线像一个大的
S
有一个初始的基线，一个上升阶段和一个终 点 (平台期)
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凝固曲线形成
减速期
mAbs
终点
基线期
加速期
Seconds
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运算法则:
是将光学检测的原始数据转变为凝固时间的一种程序
阈值法 (反应浊度)：FIB-C 一阶导数法 (反应最大速度)：PT、外源
性因子 二阶导数法 (反应最大加速度):APTT、TT、 内源性因子
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一阶导数运算法则
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凝固曲线– Case 5– APTT
5071 一阶导数最大值没有找到
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凝固曲线– Case 5– APTT (延长)
5506高于正常范围
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CASES 4 e 5 可能的解释 • • • • 样本中UFH 肝素浓度升高 因子缺乏(执行纠正试验) 抗磷脂抗体存在 (执行纠正试验) 核实样本采集是否正确，可能的话采集新的样本。
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反应曲线– Case7 D-Dimer“失败”
5076起始斜率超过误差范围
抗原存在,快速凝集
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反应曲线– Case 7 (1:5稀释)
5500 高于检测范围
超出最大检测线性
(5.250 ng/mL)
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Case 2 PT
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凝固曲线– CASE 2 – PT (延长试验)
PT延长
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CASE 2 可能的解释
• 病人口服抗凝药治疗 (OAT)
• 因子缺乏(执行纠正试验)
• 肝素治疗
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DD 反应曲线 (below cut-off)
Delta of absorbance
END POINT
反应DELTA值与抗原浓度成比例
BASE LINE
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CASE 7
D-Dimer 标准试验失败 (执行稀释试验)
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1、标本的质量与采集
有凝块


保存不当
过渡抗凝

过于陈旧的标本
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2、试剂
陈旧的试剂
复融不当
安放试剂的位置不当
在要求放搅棒的地方未放置搅棒 交叉污染
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一、什么是凝固曲线?
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什么是凝固曲线？ 凝固曲线是在试验时加入了“启动”试剂后， 由仪器的分析模块进行数据读取后获得的。读取 到的数据经过收集后被传输到控制模块，经过预
定的数学法则处理后，最终的数据将以原始计数
对时间的图形形式表现出来。
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