无菌操作
无菌操作
(学生操作，或不规范请谅解，以老师教授为准）
治疗巾的折法
内对折右手交左手手移下外折如图
光边对己左折右顺时针旋转如图
（两双边下四单边为折对，放入无菌包内也为光边对己）
无菌包的折法
包碗同上化学指示胶带封包（若经消毒，胶带斜纹指示标记由浅黄色变黑）
3、（摆放从下自上：手套、治疗碗、无菌包）左手上右手下检查无菌包（背正左右看），左手持握，右手向己侧撕化学指示胶带，换右手上左手托，打开部分包布置于无菌治疗盘内，再打开剩下部分（手不要接触内面）剩最后一角时取无菌持物镊夹治疗巾另一手抓包布最后一角外侧协助夹取，左手收拾包布，将治疗巾放于治疗盘内，右手放下镊子并单手关闭容器盖（三指拿镊子直取直进不要接触容器内壁且前端闭合）
打开治疗巾（注意手指不要接触治疗巾内面）
将治疗巾铺开到治疗盘后三折扇形折叠开口向外打开（同时注意不要接触治疗巾内面无菌治疗碗在有效期内，三无待会儿交代，指示胶带已变黑可以使用，包布无破损、无潮湿，物品无外露。包布紧实，可以使用。4、左手上右手下检查无菌治疗碗（背正左右看），左手持握，右手向己侧撕化学指示胶带，打开包布，左手抓住碗边，后将四角抓在手中，随后将治疗碗放入治疗盘内，碗前端与盘子接触后迅速放下（包布不可与治疗盘接触）后撤半步
6、取棉签消毒溶液瓶口，用镊子夹取棉签（打开棉签盖时不要翻转平移即可）夹住头端1/3处，右手放回镊子并单手关闭容器盖，蘸取碘伏时不要过多2/3即可分开棉签（夹在手中的棉签不要头端向上抬起以免碘伏逆流造成污染）消毒瓶口顺时针一根逆时针一根（每根消三圈，消第二根时记得倾斜瓶身）
用完棉签扔于弯盘内（每扔一根说待干）
7、消毒完毕后再次用镊子夹取纱布（打开纱布盖时盖子平移）将纱布放于手心，打开溶液标签向着手心冲洗瓶口，后将溶液倒入治疗碗内（倾倒溶液时距离为10-15公分，注意不要横跨无菌区域）倾倒完毕后盖上盖子，填写开瓶日期。再夹取一块纱布放入治疗盘中。
右手持溶液瓶于弯盘上开始润洗瓶口，倒入治疗碗，再次用镊子夹取一块纱布放于治疗巾内
8、最后铺盘，下方向上两折，左边右边两边分别向下折入（不要横跨无菌区域），写清铺盘时间、日期、有效期、护士签名。将无菌盘置于旁边。
无菌操作流程
无菌操作流程 目的：保持无菌物品无菌溶液无菌盘的无菌状态 洗手：修剪指甲按七步洗手法洗手每步不少于10秒戴口罩 评估环境；操作前30分钟停止轻扫以免尘埃飞扬，环境清洁 宽敞，光线明亮符合无菌操作要求 用物准备齐全，请问各位评委老师是否可以开始 无菌持物钳包布无潮湿无破损在有效期可以使用，无菌治疗巾包布无潮湿无破损在有效期可以使用，无菌治疗碗包布无潮湿无破损可以使用0.9的氯化钠250ml在有效期可以使用擦治疗盘灰2打开无菌持物钳指示卡以变色达标符合灭菌要求可以使用3打开无菌治疗巾，指示卡以变色达标符合灭菌要求可以使用，铺治疗巾上层折成扇形，4打开无菌治疗碗取出指示卡以变色达标符合灭菌要求可以使用，把治疗碗放到治疗盘内5看无菌纱布缸在有效期内可以使用用持物钳取出两块纱布6检查0.9的氯化钠250ml对光照射无沉淀无浑浊无絮状物瓶口无松动瓶身无裂痕可以使用6强力碘在开启有效期内可以使用75%的酒精在开启有效期内可以使用（两碘一酒消毒瓶口到瓶身）拇指食指中指强力碘消毒冲洗瓶口倒入治疗碗内8将上层盖于物品上，上下层边缘对齐，开口向上翻折两次，两侧边缘下翻折一次。9检查无菌手套无漏气在有效期内可以使用打开无菌手套向后退一步擦滑石粉戴手套脱手套按七步洗手法洗手每部不少于10秒操作完毕。
注意事项：1无菌持物钳不能夹取未灭菌的物品，也不能夹取油纱布2打开包布的干镊子罐、持物钳有效期4小时 3戴手套后如发现有破损或污染时，应立即更换脱手套时应翻转脱下 4使用无菌容器时，不可污染盖内面，容器边缘及内面 5无菌容器打开后，记录开启的日期时间，有效期为24小时 6铺无菌盘区域及治疗盘必须清洁干燥，无菌巾避免潮湿 7非无菌物品不可触及无菌面 8注明铺无菌盘的日期时间，无菌盘有效期为4小时。
微生物实验室生物安全操作规程
微生物实验室生物安全操作规程 tiger 一、目的 制订本规则，保证实验室工作人员的健康安全、实验设备安全卫生以及防止对外界环境造成污染。 二、适用范围 适用于微生物实验室人员人身安全、卫生健康安全管理及设备安全。 三、职责 实验室工作人员必需严格遵守安全操作规程。 四、安全操作规程： 1.员工安全操作规程 1.1 实验室入口处须贴上生物危险标志，注明危险因子、生物安全级别、负责人姓名和电话、进入实验室的特殊要求及离开实验室的程序。 1.2 禁止非工作人员进入实验室。参观实验室等特殊情况须经实验室负责人批准后方可进入，做好卫生防护，并在有关人员陪同下方可进入，同时注意做好环境维护及保密工作。 1.3 进行感染性实验时，禁止他人进入实验室，或必须经实验室负责人同意后方可进入。免疫耐受或正在使用免疫抑制剂的工作人员必须经实验室负责人同意方可在实验室工作。 1.4 接触微生物或含有微生物的物品后，脱掉手套后和离开实验室前要洗手。 1.5 禁止在工作区饮食、吸烟、处理隐形眼镜、化妆及储存食物。 1.6 尽量以移液器吸取液体，禁止口吸。 1.7 实验过程中，严格按有关操作规程操作，降低溅出和气溶胶的产生。 1.8 每天至少消毒一次工作台面，活性物质溅出后要随时用75%乙醇或巴氏消毒液消毒。 1.9 工作人员应接受必要的免疫接种和检测(如乙型肝炎疫苗、卡介苗等)。工作人员要接受有关的潜在危险知识的培训，掌握预防暴露以及暴露后的处理程序。每年要接受一次最新的培训。人员暴露于感染性物质时，及时向实验室负责人汇报，并记录事故经过和处理方案。 1.10禁止将无关动物带入实验室。 2.无菌室安全操作规程 2.1无菌培养室每天都要用0.2%的新洁尔灭拖洗地面一次(拖布专用)，紫外线照射消毒30min以上，超净工作台台面每次实验前要用75％酒精擦洗。然后紫外线消毒30min。操作用具如移液器、废液缸、污物盒、试管架等用75%酒精擦洗后置于台内同时紫外线消毒。 2.2无菌室应保持清洁，严禁堆放杂物，以防污染。 2.3无菌室应备有工作浓度的消毒液，如5％的甲酚溶液，75％的酒精，0.1％的新洁尔灭溶液，等等。 2.4无菌室应定期用适宜的消毒液灭菌清洁，以保证无菌室的洁净度符合要求。 2.5需要带入无菌室使用的器械、平皿等一切物品，均应包扎严密，并应经过适宜的方法灭菌。 2.6工作人员进入无菌室前，必须用肥皂或消毒液洗手消毒，然后在缓冲间更换专用工作服，鞋，帽子，口罩和手套(或用75% 乙醇等消毒剂再次擦拭双手)，方可进入无菌室进行操作。 2.7无菌室使用前必须打开无菌室的紫外灯辐照灭菌30分钟，并且同时打开超净台进
无菌技术操作规程
无菌技术操作规程 一、无菌技术操作原则 1、环境要清洁。进行无菌技术操作前半小时，必须停止清扫地面等工作，避免不必要的人群流动，防止尘埃飞扬。治疗是每日用紫外线照射消毒一次。 2、进行无菌操作时，衣帽穿戴要整洁。帽子要把全部头发遮盖，口罩须遮住口鼻，并修剪指甲，洗手。 3、无菌物品与非无菌物品应分别放置，无菌物品不可暴露在空气中，必须存放于无菌包或无菌容器内，无菌包应注明无菌名称，消毒灭菌日期，并按日期先后顺序排放，以便取用，放在固定的地方。无菌包在未被污染的情况下，可保存7 天，过期应重新灭菌。 4、工作人员面向无菌区域，用无菌取无菌物品，手臂须保持在腰部水平以上，不可触及无菌物或跨越无菌区，从无菌容器中取出的物品，虽未使用，也不可放回无菌容器内。 5 进行无菌操作时不可面对无菌区讲话、打喷嚏。怀疑无菌物品被污染，不可使用。 6 进行无菌操作时如器械、用物疑有污染或已被污染，即不可使用可，应更换或重新灭菌。 7、一套无菌物品，只能供一个病人用，以免发生交叉感染
二、准备质量标准 1、工作人员着装整洁，洗手、戴口罩、修剪指甲。 2、备齐用物。 3、治疗盘、无菌持物钳或镊，浸泡于消毒液溶液内，无菌溶液、无菌包布、无菌容器及物品、无菌手套、弯盘、75％酒精、无菌棉签。 4、查对无菌物品、灭菌日期及手套好。 5 用物排放有序，符合无菌操作要求。 三、操作流程质量标准 1、选择清洁、干燥、宽阔的场所进行操作。 2 无菌持物钳使用法： 无菌持物钳须置于无菌容器内，有效期限 4 小时；取、放无菌持物钳时，应将盖打开，钳端闭合，不可在盖孔中取、放；如需取远处物品时，应连同容器一起搬移，就地取出无菌物品。 3、无菌包使用法： 1）、查看无菌包的名称、灭菌日期，查看化学指示胶带粘贴。 2）、将无菌包放在清洁、干燥处，撕开粘贴。 3）、用拇指和食指先揭开左右两角，最后揭开内角，注意手不可触及包布的内
无菌技术操作考试标准
无菌技术操作考试标准
铺无菌盘法之无菌巾一铺一盖法操作考核评分标准 项目考核内容 分 值 扣分及标准 操作准备护士准备：衣帽整洁、修剪指甲、洗手、戴口罩。 2 操作准备： [用物] 治疗盘2个、无菌持物钳、无菌物品、无菌包（内有无菌治疗巾 数块，灭菌指示卡；包外贴化学指示胶带）记录卡2张、弯盘、清洁抹布。 [环境] 1.无菌操作的环境：清洁干燥、通风，操作台面宽敞、高度适宜， 操作前30分钟内不进行环境卫生的打扫，无人员走动； 2.无菌操作用物齐全，台面整洁。 5 用物缺一项或不符合要求扣1 分 操作要点1.操作步骤：88 （1）备齐用物（2分）。 2 （2）备清洁干燥的治疗盘和治疗台（2分），放治疗盘于适当处（1分）。 3 （3）洗手（1分），戴口罩（1分）。 2 （4）检查无菌包灭菌指示胶带有无变色（2分），并核对其名称（2分）、灭菌 日期（2分），有无松散、潮湿、破损等（2分）。 8 （5）开无菌包，解开无菌包系带，挽活结（2分）。 2 （6）用手依次打开无菌包外层包布的外、左、右角（3分）。取无菌钳（2分）， 用手打开外层包布内角（2分），用无菌钳依次打开内层包布的外、左、右、内 角（4分）。 11 （7）检查灭菌指示卡有无变色（2分）。 2 （8）用无菌钳取一块无菌巾置于内层包布左侧缘（2分），以一手一钳将无菌 巾轻轻打开（3分），由远至近铺于治疗盘上（2分）。 7 （9）初步还原无菌包，用无菌钳依次还原内层包布的内、右、左、外角（4 分）。用手还原无菌包外层包布内角（2分）。 6 （10）备无菌盘内物品（投递无菌物品）（3分）。 3 （11）开无菌包。用手打开无菌包外层包布内角（2分）。用无菌钳依次打开内 层包布的外、左、右及内角（4分）。 6 （12）用无菌钳取一块无菌巾依法由近至远盖于无菌物品上（5分），并注意上 下无菌巾对齐（错位不超过2cm）（2分）。7 （13）还原无菌包。用无菌钳依次还原内层包布的内、右、左、外角（4分）， 将无菌持物钳放回容器内（2分） 6 （14）用手还原外层包布内、右、左、外角（4分）。按“一”字形包好无菌包 （2分）。 6
无菌检查操作规程2015 (1)
无菌检查操作规程 1.目的 建立无菌检查标准操作规程，确保检查结果准确、可靠。 2.使用范围 本公司无菌产品的无菌检查 3.职责 质量部QC 4.依据 2015版《中国药典》通则1101 GB/T 19973.2-2005（ISO11737-2:1998） 《疗器械的灭菌微生物学方法第2部分：确认灭菌过程的无菌试验》 GB/T 14233.2-2005 《医用输液、输血、注射器具检验方法第2部分：生物学试验方法》 5.内容 5.1.无菌检查环境保障 5.1.1.无菌检査的所有操作均需在严格控制微生物污染的环境下进行，即无菌检 査应在环境洁净度10000级下的局部洁净度100级的单向流空气区域内或隔离系统中进行。 5.1.2.操作环境的无菌保障程度将直接影响无菌检查结果，为了保证无菌检查用 洁净室（区）环境的稳定性，确保检查结果的可靠性，对洁净室（区）的环境定期监测并采取合理的措施保证洁净环境符合要求。 5.1.3.无菌检查全过程必须严格遵守无菌操作，防止微生物污染。 5.1.4.洁净区的温度、湿度等参数必须符合相应洁净级别的要求。 5.1.5.无菌检查操作还需要对检查环境进行监控， 5.2.培养基、稀释液、缓冲液 5.2.1.硫乙醇酸盐流体培养基，市售培养基干粉。除另有规定，接种后应置 30~35℃培养。 5.2.2.胰酪大豆胨液体培养基，市售培养基干粉。接种后应置20~35℃培养。 5.2.3.中和或灭活用培养基，按上述硫乙醇酸盐流体培养基或胰酪大豆胨液体培
养基的处方及制法，在培养基灭菌或使用前加入适宜的中和剂、灭活剂或表面活性剂，其用量同方法适用性试验。 5.2.4.胰酪大豆胨琼脂培养基，市售培养基干粉。 5.2.5.沙氏葡萄糖液体培养基，市售培养基干粉。 5.2. 6.沙式葡萄糖琼脂培养基，市售培养基干粉。 5.2.7.PH7.0氯化钠蛋白胨缓冲液，市售培养基干粉。 5.2.8.0.9%无菌氯化钠溶液。 5.2.9.培养基使用性检查 无菌检査用的硫乙醇酸盐流体培养基和胰酪大豆胨液体培养基等应符培养基的无菌性检査及灵敏度检査的要求。本检查可在供试品的无菌检査或与供试品的无菌检査同时进行。 5.2.9.1.无菌性检查：每批培养基随机取5支（瓶），按各培养基规定的温度下 培养14天，应无菌生长。 5.2.9.2.灵敏度检查 5.2.9.2.1.菌种：培养基灵敏度检查所用的菌株传代数不得超过5代(从菌种存中 心获得的干菌种第0代），并采用适宜的菌种保藏技术进行保存，以 证试验菌株的生物学特性。 金黄色葡萄球菌[CMCC(B)26 003] 铜绿假单胞菌[CMCC(B)10 104] 枯草芽孢杆菌[CMCC(B)63 501] 生孢梭菌[CMCC(B)64 941] 白色念珠菌[CMCC(F)98 001] 黑曲霉[CMCC(F)98 003] 5.2.9.2.2.菌液制备：接种金色葡萄球菌、铜绿假胞菌、枯草芽孢杆菌的培养物 至胰酪大豆胨液体培养基中或胰酪大豆胨琼脂培养基上，接种生孢梭 菌的培养物至硫乙醇酸盐流体培养基中，30?35℃培养18?24小时； 接种白色念珠菌的培养物至沙氏葡萄糖液体培养基中或沙氏葡萄糖琼 脂培养基上，20?25℃培养24?48小时，上述培养后的新鲜培养物用 PH7.0无菌化钠-蛋白胨缓冲液或0.9%无菌化钠溶液制成每lml菌数小
无菌操作技术规范标准
无菌操作技术规范 无菌技术是在医疗护理操作过程中，保持无菌物品、无菌区域不被污 染、防止病原微生物侵入人体的一系列操作技术。无菌技术作为预防医院感染的一项重要而基础的技术，医护人员必须正确熟练地掌握，在技术操作中严守操作规程，以确保病人安全，防止医源性感染的发生。 、无菌技术的操作原则 1、进行无菌操作的环境应清洁、宽敞。操作前半小时须停止扫地、更换床单等工作，空气清新，无尘埃。 2、无菌操作前，操作人员要穿戴整洁，帽子须遮盖全部头发，口罩须盖住口鼻，并认真彻底洗手（七步洗手法） 洗手方法：1）手掌对手掌; J3）两手指缝相对互擦
摩擦手腕，然后彻底流水冲净指尖对手掌擦洗 4)双手并扣互擦指背；J (7)
认真揉搓双手至少15s,范围为双手、手腕及腕上10cm ,注意指尖、指 缝、拇指、指关节等处清洗干净。 3、实施无菌技术操作必须使用无菌物品。一次性使用的无菌医疗器械、用 品不得重复使用。 4、无菌物品与非无菌物品应分柜放置，并有明显标志。无菌包需标明物品 名称、灭菌日期，按失效期先后顺序摆放。无菌包的有效期按7天计算，过期 或受潮应重新灭菌。无菌柜应定期整理、清洁。 5、在无菌技术操作时，必须明确无菌区和非无菌区。 6、使用无菌物品前必须认真检查无菌包包装完整性、标识有效性、即 无菌包的名称、灭菌时间或失效期、签名等，检查包内外化学指示胶带变色情 况等。 湿包或有明显水渍，密封容器的筛孔被打开，灭菌包掉落在地或误放不洁之处，包装破损或发霉，外包装指示带或包内指示卡变色没有达到标准或有疑问等情况，应视为污染，不能再使用。不得使用过期无菌物品 7、进行无菌操作时，操作者应面向无菌区 域并与无菌区保持一定距离；手 臂应保持在腰部或操作台面以上，操作过 程中不可跨越无菌区，手不可触及无菌 物。操作时不可面对无菌区谈笑、咳嗽、打 喷嚏。 &无菌物品必须一人一用一灭菌。取用无菌物品时应用无菌持物钳/ 镊近距 离夹取。无菌持物镊/钳可用消毒液浸泡或干性保持。湿式无菌持物钳、筒及 筒内消毒液每周更换一次，干式无菌持物筒和钳每4h更换一次，一旦污染随 时更换。 9、无菌物品取出后不可放回无菌容器内。应用无菌巾包（盖）好，超过 4h不得使用。开启的无菌药液须注明时间。开启的无菌溶液须在4h内使用， 其他溶液不得> 24h。注射治疗时，应用无菌盘，抽出的药液不得 > 2h。 10、用于无菌技术操作的棉球、棉签、纱布。根据一次用量的标准，独 立包装。用无菌容器盛放的无菌物品，一经打开，使用时间最长不得>24 h。 11、消毒皮肤用的碘伏、酒清应密闭保存。病区盛放消毒溶液的容器每
微生物实验室生物安全操作规程正式版
Guide operators to deal with the process of things, and require them to be familiar with the details of safety technology and be able to complete things after special training.微生物实验室生物安全操 作规程正式版
微生物实验室生物安全操作规程正式 版 下载提示：此操作规程资料适用于指导操作人员处理某件事情的流程和主要的行动方向，并要求参加施工的人员，熟知本工种的安全技术细节和经过专门训练，合格的情况下完成列表中的每个操作事项。文档可以直接使用，也可根据实际需要修订后使用。 一、目的 制订本规则，保证实验室工作人员的健康安全、实验设备安全卫生以及防止对外界环境造成污染。 二、适用范围 适用于所有进入微生物实验室人员。实验室工作人员必需严格遵守安全操作规程。 三、安全操作规程： 1.员工安全操作规程 1.1 实验室入口处须贴上生物危险标志，注明危险因子、生物安全级别、负责
人姓名和电话、进入实验室的特殊要求及离开实验室的程序。 1.2 禁止非工作人员进入实验室。参观实验室等特殊情况须经实验室负责人批准后方可进入，做好卫生防护，并在有关人员陪同下方可进入，同时注意做好环境维护及保密工作。 1.3 进行感染性实验时，禁止他人进入实验室，或必须经实验室负责人同意后方可进入。免疫耐受或正在使用免疫抑制剂的工作人员必须经实验室负责人同意方可在实验室工作。 1.4 接触微生物或含有微生物的物品后，脱掉手套后和离开实验室前要洗手。 1.5 禁止在工作区饮食、吸烟、处理
无菌技术操作规范要求
无菌技术操作规范要求 1、环境要清洁。进行无菌技术操作前半小时，必须停止清扫地面等工作，避免 不必要的人群流动，防止尘埃飞扬。治疗室应每日用紫外线照射消毒1次。 2、进行无菌操作时，衣帽穿戴要整洁，帽子要把全部头发盖住，口罩须遮住口、 鼻，并要剪指甲、洗手。 3、无菌物和非无菌物应分别放置；无菌物品不可暴露在空气中，须存放于无菌 包或无菌容器内；无菌物品一经使用后，必须经灭菌处理后方可使用；从无菌容器内取出的物品，虽未使用，也不可放入无菌容器内。 4、无菌容器或无菌包外应注明物品名称，消毒灭菌日期，并按日期的先后顺序 排列，放在固定的地方，以便取用。无菌包在未污染的情况下，可保存7—14天，过期后应重新灭菌。 5、取无菌物品时，必须用无菌钳（镊）。未经消毒的手和物品，不可触及无菌 物品或跨越无菌区。 6、进行无菌操作时，如器械、用物疑有污染或已被污染即不可使用，应予以更 换或重新灭菌。 7、一套无菌物品，只能供一个病人使用，以免发生交叉感染。 检验科及实验室的消毒管理制度 1、静脉采血必须一人一针一管一巾一带，微量采血应做到一人一针一管一片， 对每个病人操作前洗手或手消毒。 2、开启的无菌物品，如棉签、棉球在24小时内使用，过期不得再用，使用后 的废弃物，进行无害化处理。 3、试管架应每周定期以2%“84”浸泡消毒；各种废弃标本，分类处理（焚烧 或倒入2%“84”消毒液消毒后倒入污水池内）。 4、细菌室报告单用微波消毒后发放。 5、检验人员结束操作后，及时洗手，毛巾专用，每天消毒处理。 6、室内保持清洁，每天紫外线消毒60分钟，物体表面用0.5%“84”擦拭。在 进行特殊传染病检验后，如有场地工作服或体表被污染时，应立即以4%“84” 液进行处理防止扩散。 7、菌种、毒种按《中华人民共和国传染病防治法》有关规定处理。
无菌操作规程
无菌操作规程 （一）无菌技术操作原则 1、环境要清洁。进行无菌技术操作前半小时，须停止清扫地面等工作，避免不必要的人群流动，防止尘埃飞扬。治疗室每日用紫外线照射消毒一次。 2、进行无菌操作时，衣帽穿戴要整洁。帽子要把全部头发遮盖，口罩须遮住口鼻，并修剪指甲，洗手。 3、无菌物品与非无菌物品应分别放置，无菌物品不可暴露在空气中，必须存放于无菌包或无菌容器内，无菌物品一经使用后，必须再经无菌处理后方可使用，从无菌容器中取出的物品，虽未使用，也不可放回无菌容器内。 4、无菌包应注明无菌名称，消毒灭菌日期，并按日期先后顺序排放，以便取用，放在固定的地方。无菌包在未被污染的情况下，可保存7-14天，过期应重新灭菌。 5、取无菌物品时，必须用无菌钳（镊）。未经消毒的物品不可触及无菌物或跨越无菌区。 6、进行无菌操作时如器械、用物疑有污染或已被污染，即不可使用，应更换或重新灭菌。 7、一套无菌物品，只能供一个病员使用，以免发生交叉感染。（二）准备质量标准 1、工作人员着装整洁，洗手、戴口罩、修剪指甲。 2、备齐用物。
3、治疗盘、无菌持物钳或镊，浸泡于消毒溶液内，无菌溶液、无菌包布、无菌容器及物品、无菌手套、弯盘、75%酒精、无菌棉签。 4、查对无菌物品、灭菌日期及手套号。 5、用物排放有序，符合无菌操作要求。 （三）操作流程质量标准 1、选择清洁、干燥、宽阔的场所进行操作。 2、解开无菌包系带卷放在包布下边。 3、用拇指和食指先揭左右两角，最后揭开内角，注意手不可触及包布的内面。用无菌钳（镊）取出一块无菌巾放于治疗盘内，剩余部分按原折痕包起扎好，并注明开包时间。 4、铺无菌盘： 单巾铺盘：双手拇、食指捏住治疗巾两上角外面，轻轻抖开，双折铺于治疗盘上，内面为无菌区，盖的半幅成扇形折到对面无菌盘上，开口边向外，放入无菌物品后，边缘对齐盖好。将开口处向上翻折两次，两侧边缘向下翻一次，以保持无菌。 双巾铺盘：双手捏住无菌巾的左右两上角的外面，轻轻抖开，由远向近铺于治疗盘上，无菌面向上，放入无菌物品。依上法夹取另一块无菌巾，由近侧向对侧覆盖于治疗盘内上，边缘多余部分反折，不应暴露无菌区。 5、打开无菌容器盖，必须把盖的无菌面（内面）向上，放在稳妥处，夹取所需物品放入无菌盘内后立即盖严。 6、倒无菌溶液，仔细检查核对溶液后，面对瓶签两拇指将橡皮
实验室无菌操作规章制度.docx
实验室无菌操作规章制度 导语：实验室里对于环境要求很高，而且一些实验也会被细菌影响，下面小编整理了实验室无菌操作规章制度，欢迎大家阅读! 实验室无菌操作规章制度 1.洁净区内器械消毒灭菌要求 1.1无菌区外的器械清洁消毒 1)配平天平：每周至少消毒1次，表面用蘸84消毒液的无尘纸擦拭，再用75%医用酒精擦拭。 2)台式冷冻离心机内腔及适配器：每日操作结束时用75%医用酒精对离心机内腔以及适配器内外表面进行充分消毒，并整齐摆放于实验台晾干备用。 3)光学显微镜及倒置显微镜：每周对显微镜至少清洁消毒1次，用无尘纸擦拭显微镜台面及外表面，用镜纸蘸95%乙醇擦拭镜头和目镜。 4)疫苗箱洗涤消毒：对于用过的疫苗箱应每天用配制的84消毒液浸泡过夜，再用自来水冲洗表面，无尘纸擦拭箱内表面。 1.2无菌操作区内的器械清洁消毒 1)手动移液器消毒：手动移液器表面应每周用75%医用酒精清洁消毒，将手动移液器吸头取下，更换过滤膜后再装上吸头;将手动移液器放于试验台充电，充电并消毒后放回无菌操作台原位，使用前还应开启无菌台内紫外消毒30min。 2)剪刀、镊子、止血钳及不锈钢器械：不锈钢器械每处理一份标本都应更换，使用过的器械应用戊二醛浸泡2h，此后用自来水冲洗至少20遍，再用去离子水冲洗3遍，用纱布擦干后经包布包裹放入干净的消毒盒中，贴上灭菌标签并标记日期，采用湿热灭菌121℃/30min，灭过的器械放洁净储物箱备用。 3)无菌枪头的灭菌消毒：无菌枪头至少每周灭菌1次，戴PE手套将待灭枪头装入枪头盒，盖好后用灭菌胶带封口并标注日期后，进行湿热灭菌，灭菌完成后放烘箱烘干，经传递窗放入洁净区待用。 2操作过程的无菌操作要求 2.1无菌操作要求 1)无菌操作时应穿无菌洁净服、戴口罩、鞋套、手套，进入无菌操作区前对手套，手腕、前臂、胸部等部位的洁净服进行75%酒精消毒;无菌操作过程中应每隔15min对手套，手腕、
无菌技术操作规程及评分标准
无菌技术操作规程 【评估】 无菌技术操作条件（环境、物品） 【准备】 护士：着装整洁，剪短指甲、取手表、卷袖过肘、洗手并擦手，戴口罩。 物品：治疗车、治疗盘2个，无菌持物钳包、手消液、无菌注射器、无菌巾包，无菌溶液、安尔碘、无菌棉签、无菌有盖缸内盛纱布、无菌治疗碗包、号码合适的无菌手套一副、橡皮筋、标签纸、书写笔、污物缸、抹布、锐器盒。 环境：清洁、干燥。 【方法】 擦桌面→治疗盘→手消。 无菌持物钳的使用： 检查无菌包→开无菌持物钳容器包→取出无菌持物缸→取下包外3M消毒条书写开启时间及责任者贴于无菌缸外壁。 铺无菌盘法（单层铺巾法）： 检查无菌包→打开无菌包→用无菌持物钳夹取一块治疗盘内→未污染的剩余治疗巾按原折痕包好→捏住治疗巾上层两角外面打开→双折铺于盘上→扇形折叠打开→放无菌物品→双手捏翻折治疗巾两个角的外面向下覆盖，覆盖时将各边缘对整齐→将开口处向上折两次→两侧边缘分别向下折一次→露处治疗盘边缘→治疗盘即备好待用→注明开包→铺盘时间及责任者。 无菌碗的使用法： 检查无菌包→打开包（外层用手，内层用手或无菌持物钳均可，原则不污染）→扭转放无菌碗于治疗盘内→整理包布。 取用无菌溶液法： 核对瓶签，检查溶液→拉开输液瓶拉环盖→注射器抽取溶液→将溶液推入无菌碗内→消毒瓶口并贴瓶口贴或用无菌纱布盖好→注明开瓶时间及责任者（已打开的溶液24小时内有效）。无菌容器使用法：检查无菌容器→打开容器，盖的内面朝上→持无菌容器时手指不可触及容器的边缘及内面→用无菌持物钳取出无菌物品→将容器盖严。 戴无菌手套法： 戴手套：检查手套的号码、有效使用期及包装袋有无潮湿、破损→打开手套袋→两手同时掀开手套开口处，分别捏住两只手套翻折部分，取出手套→将两手套五指对准→先戴一只手，再以戴好的手指插入另一只手套的翻折面内，同法戴好→调整手套位置。 脱手套：一手捏住另一手的手套口外面翻转脱下→已脱手套的手伸入另一只手套内将其脱下→将手套的里面翻套在外面→将用过的手套放医用垃圾袋内备处理。 【评价】 1、操作准确、轻巧、熟练，物品放置合理，不影响操作。 2、注明开包、开瓶、铺盘日期及时间。 3、无菌观念强，手臂未跨越无菌区，操作过程无污染。 【注意事项】 1、开包后的无菌包和开封后的无菌溶液有效期均为24小时，无菌盘有效期限不超过4小 时。 2、无菌持物钳取时不可触及容器口边缘及溶液以上的容器内壁。使用时应保持钳端向下， 不可倒转向上，用后立即放回容器中。如到远处夹取物品时，无菌持物钳应连同容器一
无菌技术操作流程及评分标准
无菌技术操作流程 开始：各位老师下午好，我操作的项目是无菌技术操作。 1. 无菌技术操作的目的：保持无菌物品无菌区域不被污染，防止一切微生物侵入机体，避免给患者带来不应有的损失和危害 2. 环境评估：操作前30分钟停止清扫，操作中减少人员走动，开窗、通风、换气，操作台宽敞、平坦、整洁、干燥。 3. 用物准备：治疗盘无菌包：包内置无菌巾若干无菌容器内置无菌持物钳棉签无菌包：内置治疗碗一个，镊子两把，弯盘一个无菌纱布罐无菌棉球罐无菌生理盐水一次性无菌手套 铺无菌盘 1. 洗手戴口罩。 2. 治疗盘清洁，干燥。铺无菌换药盘。 3. 开无菌包：（化学指示胶带有变色，在有效期内，无潮湿、无破损。）斜角打开（打开无菌包内角时，手不可触及包布内面，不得跨越无菌区域）看化学指示卡，有变色。用无菌持物钳夹取一块无菌巾放入治疗盘内，将无菌包按原折痕“一字”包好后，看时间：记录日期、时间、并签名、24 小时内有效。 4. 铺无菌巾：双手捏住无菌巾一侧两角外面轻轻抖开，由近及远的将治疗巾一半铺于治疗盘上，将上下对齐后上层扇形折三次，开口外边向外，使治疗巾内面构成一无菌区。 5. 开无菌包，（指示胶带变色，在有效期内，侧孔、底孔闭合） 1）打开无菌包，看化学指示卡变色 2）用无菌钳分别取治疗碗（内含两把镊子）、弯盘放入无菌盘内。 3）打开无菌纱布罐夹取纱布置无菌盘内；同法夹取无菌棉球置治疗碗内（手不可触及容器边缘或内侧），无菌容器盖内面朝下直接盖上。 6. 倒无菌溶液：（拿起溶液瓶，看瓶签）口述：瓶身干净，标签完整、字迹清楚， 0.9%Nacl500ml，在有效使用期内，瓶盖无松动，瓶身瓶底无无裂缝，对光检查：（溶液澄清、无杂质）。除盖：查棉签（无漏气，在有效试用期内）写好开包日期，消毒瓶盖、手指，开瓶盖。倒溶液于治疗碗内，再次消毒瓶口，盖回瓶盖看时间：记录日期、时间、签名，（24 小时有效）。 7. 铺完盘，看时间口述：记录名称、时间并签名（小标签贴于盘缘）、4 小时内有效。述：已铺好换药盘，可以给病人进行换药护理。一份无菌物品只供一位病人使用，以防交叉感染。 带无菌手套 1．检查手套：7 号无菌手套，在有效使用期内，无潮湿、破损，将手套放置于操作台，打开手套，戴手套，戴手套时应防止手套外面（无菌面）触及手套内面及非无菌物品或区域。为使手套与手贴合，可双手交叉互推。边做边口述：手套完好无破损，可进行无菌操作。3．脱手套，置于医疗垃圾桶内，将用物推至处置室归类处理。 无菌技术操作原则：
无菌操作技术经验操作规范
无菌操作技术经验操作 规范 Document serial number【KK89K-LLS98YT-SS8CB-SSUT-SST108】
无菌技术操作流程 1、尊敬的各位评委老师大家好，我今天操作的项目是：无菌操作技术 2、整理着装、手消毒液已开启在有效期——七步洗手法——戴口罩 3、我准备的用物是：清洁治疗盘——无菌持物钳——镊子筒——无菌治疗巾——无菌治疗包——无菌手 套——无菌生理盐水——无菌治疗缸——碘伏——棉签——弯盘2个——抹布2块——物品已备齐，操作开始 4、评估环境：治疗室环境宽敞、光线充足，治疗车、治疗台清洁干燥符合无菌操作 5、拿盘、擦盘——快速洗手——无菌持物钳及镊子筒在有效期、包布无潮湿、无破损、3m胶带变色均 匀，灭菌合格——去3m胶带贴桌上——打包——镊子筒放好夹出化学指示卡（化学指示卡变色均匀，灭菌合格）——写开启时间于3m胶带上——贴标签于缸缘下2cm处（已开启的持物筒有效期为4个小时）——无菌治疗巾在有效期、包布无潮湿、无破损、3m胶带变色均匀——打开治疗巾——镊子夹出化学指示卡（化学指示卡变色均匀，灭菌合格）——镊子夹治疗巾放入治疗盘中——打开——铺巾——检查无菌治疗包——打包（化学指示卡变色均匀，灭菌合格）—夹治疗碗放于无菌治疗巾上——无菌治疗缸已开启在有效期—夹取纱布——0.9%氯化钠注射液250ml在有效期——清洁瓶身——快速洗手——检查溶液——打开铝盖——消毒瓶盖（棉签、碘伏已开启在有效期——消毒瓶盖，打开瓶盖——瓶签在掌心，冲洗瓶口——向碗内倒入生理盐水，盖好瓶盖，消毒瓶周2遍，记录开启时间（已开启的生理盐水有效期为24小时）——铺好无菌盘——记录铺盘人及时间，已铺好的无菌盘，有效期为4个小时——七步洗手法——选择合适的无菌手套，检查手套（无菌手套在有效期，包装完好，挤压无漏气）——取出无菌手套——戴手套（按照规范方法戴手套）——手套戴好后双手交叉（调整手套位置），双手放于胸前——脱手套（按规范方法脱手套）——放入黄色垃圾袋中——医疗垃圾分类处理——七步洗手法——操作结束。 无菌技术是指在医疗护理操作过程中，保持无菌物品不被污染，防止一切微生物侵入或传播给他人的一系列操作技术和管理方法，是预防医院内感染的一项重要的基本措施。 无菌操作原则 1.环境清洁进行无菌技术操作前30分钟，停止清扫工作，减少走动，防止尘埃飞扬。 2.工作人员要求修剪指甲、戴好口罩、帽子。必要时穿无菌衣，戴无菌手套。 3.物品保管无菌物品和非无菌物品应分别放置，并有明显标志。无菌物品必须存放在无菌容器或无菌包内，不可暴露在空气中，无菌包或无菌容器外要注明物品名称、灭菌日期，物品按有效期先后顺序摆放。 4.操作时要求工作人员面向无菌区，用无菌持物钳取无菌物品，手臂须保持在腰部水平或治疗台以上，注意不可跨越无菌区。操作时不可面向无菌区讲话、咳嗽、打喷嚏。无菌物品怀疑被污染时，给予更换。 5.一人一物一份无菌物品，仅供一位患者使用，防止交叉感染。 一无菌持物钳的使用 目的：用于取放或传递无菌物品 注意事项：1无菌持钳使用时，取出和放入时必须垂直提起和放入，不可触碰到筒壁和边缘。夹取物品时也是垂直夹取。不可倒置和横置。 2取远处物品时，应当连同容器一起移至物品旁进行操作。 3无菌持物钳不能夹取未灭菌的物品，也不能夹取油纱布（条、球）。 4无菌钳使用时不能低于腰部。 5打开包后的干持物筒、持物钳使用的有效期，≤4小时。 6不可直接从盖孔中取、放无菌持物钳。 7避免无菌持物钳在空气中暴露过久。 二无菌容器的使用 目的：无菌容器是用于盛放无菌物品并保持其无菌状态的容器。 注意事项：1.夹取无菌容器内物品时，无菌持物钳及无菌物品不可触及容器的边缘 2.移动无菌容器时，应托住底部，手不可触及无菌容器边缘 3.从无菌容器内取出的无菌物品，虽未使用，也不得在放回无菌容器内。
无菌实验室操作规程
无菌实验室操作规程 一日常管理 1 准备工作 实验前，准备齐当天所用物品（包括废液缸），并置2%新洁尔灭溶液（3000ml）及空盆于无菌间，开操作台和无菌室紫外灯30min。放臭氧15分钟后，再进无菌间操作。 2 无菌间操作 进无菌间后换拖鞋、穿工作服、戴口罩、帽子、手套，然后用新洁尔灭洗手； 将所用的试剂用新洁尔灭或75％酒精擦拭后放入操作台，撕封口膜，用酒精棉球擦拭瓶口，再在酒精灯火焰上烤，之后用止血钳夹住瓶塞取下； 在操作台内，瓶口尽量不应直立向上，在盖塞前烤塞子与瓶口（除酒精棉球瓶外），再盖严加封口膜取出； 做完实验，清理操作台，用新洁尔灭擦拭台面及操作台上的物品。 3 无菌间清扫 无菌室每周要彻底打扫一次，用新洁尔灭擦墙、门、仪器及桌面等；75%酒精擦窗、玻璃等；过氧乙酸擦操作台、出问题或准备要用的培养箱。 4 无菌服 冬天时一周一洗；夏天时一天一洗。按实验室值日生顺序轮流洗涤，并由上一人及时通知下一人。洗涤晾干，高压灭菌后放入无菌间紫外杀菌。 5 臭氧发生器 每晚最后离开实验室的，关电器、门窗等，并打开臭氧发生器定时一小时。 二实验室物品处理 1新塞子的处理 新胶塞对细胞有一定的毒害作用，其处理方法为： 新胶塞→洗衣粉洗→洗涤灵洗→晾干→20g/1000ml的NaOH煮30min→水冲洗→去离子水浸泡过夜→双蒸水冲洗→晾干→备用 有水沸腾时算起，煮30min。 2 接触细胞的用品的处理 用品→过氧乙酸浸泡过夜[20ml/10000ml过氧乙酸]→取出→洗涤灵擦洗→水冲→晾干→泡酸[洗液]→自来水浸泡过夜→去离子水冲洗→双蒸水冲洗→晾干→备用 3 未接触细胞的用品的处理 用品→自来水冲洗[可适当用洗衣粉或洗涤灵洗]→去离子水冲洗2~3次→双蒸水冲洗2~3次→晾干→包口→备用 滤器、瓶→自来水冲洗30min→去离子水冲洗→双蒸水冲洗→晾干→备用 三细胞污染时培养瓶及培养箱的处理 1 细胞污染
无菌技术操作流程
无菌技术 一、目的：1、无菌持物钳：取用或者传递无菌敷料、器械等。 2、无菌容器：保持已经灭菌的物品处于无菌状态。 3、取无菌溶液法：保持无菌溶液的无菌状态。 4、铺无菌盘法：将无菌巾铺在清洁干燥的治疗盘内，形成无菌区，放置无菌物 品，以供实施治疗时使用。 5、戴无菌手套法：执行无菌操作或者接触无菌物品时戴无菌手套，以保护患者， 预防感染。 6、使用无菌包法：用无菌包布包裹无菌物品用以保持物品的无菌状态，供无菌 操作用。 二、用物：无菌溶液、无菌手套、无菌治疗碗包、无菌治疗巾包、无菌持物钳包、无菌敷料 容器、消毒溶液、棉签、弯盘、治疗盘、另备小标签 三、操作流程：评估环境（环境清洁、宽敞、光线充足、定期消毒，适合操作），操作前室 内停止清扫，减少走动避免尘埃飞扬，操作台面清洁、干燥、平坦，物品布局合理（操作前用消毒毛巾擦拭治疗台面及治疗盘）——无菌操作前着装整洁，修剪指甲，洗手，戴口罩（必要时戴无菌手套及穿隔离衣）——检查用物（1、无菌溶液对光照射无浑浊、变色、无絮状物，瓶口无松动，瓶身无裂痕，在有效期内可以使用。2、无菌手套包装完好、干燥、在有效期内，型号合适。3、无菌治疗碗包无破损、无潮湿，消毒条码变色，在有效期内。4、无菌治疗巾包无破损、无潮湿，消毒条码变色，在有效期内。5、无菌持物钳包无破损、无潮湿，消毒条码变色，在有效期内。6、无菌敷料容器消毒条码变色，在有效期内。7、消毒溶液在有效期内。8棉签在开包时间内，可以使用。9、弯盘清洁干燥.9治疗盘清洁干燥。10、另备小标签）——打开无菌持物钳包，取出无菌持物筒直立于桌面，将包布折好放于桌面下层，检查消毒试纸变色，弃于医疗垃圾桶，记录开包时间、日期并签名，将持物筒放于合适位置——打开无菌治疗巾包，打开存放无菌持物钳容器盖，手持无菌持物钳上1/3处，闭合钳断，垂直取出，关闭容器盖，保持钳端向下，在腰部以上视线范围内活动，用无菌持物钳打开内层包布，检查消毒试纸变色，取一块治疗巾置于治疗盘内，用后闭合持物钳钳端，快速垂直放回容器内，将包布折好放于桌面下层——铺无菌盘，双手捏住无菌治疗巾外面，轻轻抖开，双层平铺于治疗盘上，将上层呈扇形折于对侧，开口向外——打开无菌治疗碗外包布，用持物钳打开内包布，检查消毒试纸变色，用无菌持物钳夹取治疗碗放在治疗盘内，将包布折叠放妥于桌面下层——取出无菌敷料：去持物钳，打开无菌敷料容器盖，内面向上置于稳妥处或拿手中，用无菌持物钳在无菌容器内夹取无菌敷料防于治疗碗中——倒取无菌溶液前消毒瓶塞，待干后打开瓶塞，手持溶液瓶，瓶签朝下于掌心，倒出少量溶液旋转冲洗瓶口，再由原处倒出溶液致无菌容器中，倒好溶液后立即盖好瓶塞，再次消毒瓶塞——覆盖无菌盘，双手捏住扇形折叠的治疗巾外面，遮盖于物品上，对折上下层边缘，将开口处向上折叠两次，两侧边缘分别向下折叠一次，露出治疗盘边缘，在小标签上注明铺盘日期、时间、签全名，放于无菌盘左上方——在无菌溶液瓶上注明开瓶日期、时间、用法并签名——将无菌盘置于治疗车上，携至病房——戴无菌手套：将无菌手套袋平放于治疗车上，打开外包装，两手同时掀开手套袋开口处，用一手拇指和食指同时捏住手套的反折面部位取出手套，将两手套拇指对准，先戴一只手，再以带好手套的手插入另一手套的反折面内面，戴好另一只手套，若操作者工作服为长袖，应将手套的翻边扣在
无菌取样操作规程
取样阀的无菌取样操作 1.目的 进行微生物分析时，需要从取样阀或管道口取样品。 2. 原则 取样时将取样管路中存有的样品充分放出, 以便所取的样品均匀且具有代表性。用酒精及火焰灭菌保证取样口无菌，同时避免取样口及其附近的微生物对样品造成污染。 3. 安全和环境说明 3.1遵守实验室常规安全制度。额外的预防参看化学品MSDS。 3.2遵守工厂例行、规定的安全需要。进入有二氧化碳存在或可能存在的狭窄容器或区域时要特别小心。在可能开始运转的机器里面或周围取样时要遵守工厂安全方针，如：包装灌酒机、压盖机、卷封机、传送带等。在相应区域取样时关注安全。 4.操作 4.1仪器和设备 4.1.1盛装70%酒精的洗瓶。 4.1.2无菌的接收样品装置：带塞（螺旋盖）的瓶、试管。 4.1.3用于包扎带塞瓶口、试管口的牛皮纸及线绳，锡箔纸。 4.1.4火源。 4.1.5 70%酒精棉。 4.1.6洁净的取样筐。 4.1.7收集废液的容器。
4.1.8无菌取样针 4.2 试剂 4.2.1 70%酒精：用1000 ml量筒量取95%酒精750 ml，再用蒸馏水补充至 1000ml，充分混匀。(如酒精浓度大于或小于95%，酒精量需计算后量 取) 用酒精计对酒精进行标定，标定范围70+2%，记录标定结果。室温密闭贮存，有效期3个月。 4.3程序 4.3.1大取样口 4.3.1.1打开取样阀，使样品流出约10-20秒。用废液桶接收流出的液体，防止样品污染环境。注意控制流速, 避免使液体飞溅出来。 4.3.1.2关闭取样阀，用70%酒精喷洒取样阀内外，冲净阀内残留物,并让其接触至少25 秒。点燃、灼烧取样口。注意不要过度灼烧，取样阀上残余的酒精烧完即可。 4.3.1.3如果该取样阀的使用频次较低，如周检或者月检，可以先用70%酒精棉擦拭取样阀内外， 再同4.3.1.2操作。 4.3.1.4打开取样阀，排放掉样品约10秒。使待取样品有足够的流出速度，但不会回流接触取样口下边的外表面。 4.3.1.5 迅速打开接收样品的装置，根据样品量接收适量的样品，迅速塞紧塞封口，关闭取样阀。做样品标识（注明取样时间、样品名称）。接收样品时不要将瓶口、试管口靠在取样阀上。
无菌室标准(含《洁净室沉降菌测试标准操作规程》)
无菌室标准 (含《洁净室沉降菌测试标准操作规程》) 1.目的 本规程旨在为无菌操作及无菌室的保护提供一个标准化规程。 2.适用范围 生测实验室 3.责任者 QC主管生测员 4.定义 无 5.安全注意事项 严格无菌操作，防止微生物污染；操作人员进入无菌室应先关掉紫外灯。 6.规程 6.1.无菌室应设有无菌操作间和缓冲间，无菌操作间洁净度应达到10000级，室内温度保持在20-24℃，湿度保持在45-60%。超净台洁净度应达到100级。 6.2.无菌室应保持清洁，严禁堆放杂物，以防污染。 6.3.严防一切灭菌器材和培养基污染，已污染者应停止使用。 6.4.无菌室应备有工作浓度的消毒液，如5％的甲酚溶液，70％的酒精，0.1％的新洁尔灭溶液，等等。 6.5.无菌室应定期用适宜的消毒液灭菌清洁，以保证无菌室的洁净度符合要求。 6.6.需要带入无菌室使用的仪器，器械，平皿等一切物品，均应包扎严密，并应经过适宜的方法灭菌。 6.7.工作人员进入无菌室前，必须用肥皂或消毒液洗手消毒，然后在缓冲间更换专用工作服，鞋，帽子，口罩和手套(或用70%的乙醇再次擦拭双手)，方可进入无菌室进行操作。
6.8.无菌室使用前必须打开无菌室的紫外灯辐照灭菌30分钟以上，并且同时打开超净台进行吹风。操作完毕，应及时清理无菌室，再用紫外灯辐照灭菌20分钟。 6.9.供试品在检查前，应保持外包装完整，不得开启，以防污染。检查前，用70％的酒精棉球消毒外表面。 6.10.每次操作过程中，均应做阴性对照，以检查无菌操作的可靠性。 6 .11.吸取菌液时，必须用吸耳球吸取，切勿直接用口接触吸管。 6.12.接种针每次使用前后，必须通过火焰灼烧灭菌，待冷却后，方可接种培养物。 6.13.带有菌液的吸管，试管，培养皿等器皿应浸泡在盛有5%来苏尔溶液的消毒桶内消毒，24小时后取出冲洗。 6.14.如有菌液洒在桌上或地上，应立即用5%石碳酸溶液或3％的来苏尔倾覆在被污染处至少30分钟，再做处理。工作衣帽等受到菌液污染时，应立即脱去，高压蒸汽灭菌后洗涤。 6.15.凡带有活菌的物品，必须经消毒后，才能在水龙头下冲洗，严禁污染下水道。 6.16.无菌室应每月检查菌落数。在超净工作台开启的状态下，取内径90mm的无菌培养皿若干，无菌操作分别注入融化并冷却至约45℃的营养琼脂培养基约15ml，放至凝固后，倒置于30～35℃培养箱培养48小时，证明无菌后，取平板3～5个，分别放置工作位置的左中右等处，开盖暴露30分钟后，倒置于30～35℃培养箱培养48小时，取出检查。100级洁净区平板杂菌数平均不得超过1个菌落，10000级洁净室平均不得超过3个菌落。如超过限度，应对无菌室进行彻底消毒，直至重复检查合乎要求为止。 7.参照 参照《药品卫生检验方法》《中国药品检验标准操作规范》中(无菌检查法)章节中华人民共和国医药行业标准YY/T0188.6-1995《药品检验操作规程》 8.分发部门 质量管理部 无菌室技术指导说明 在获得了无菌环境和无菌材料后，我们还要保持无菌状态，才能对某种特定的已知微生物进行研究或利用它们的功能，否则外界的各种微生物很容易混入。外界不相干的微生物混入的现象，在微生物学中我们叫做污染杂菌。防止污染是微生物学工作中十分关键的技术。一方面是彻底灭菌，另一方面防止污染，是无菌技术的两个方面。另外，我们还要防止所研究的微生物，特别是致病微生物或经过基因工程改造了的本来自然界不存在的微生物从我们
1.3.11无菌室操作技术基本注意事项及要求
标准管理程序 STANDARD MANAGEMENT PROCEDURE 1目的建立无菌操作要求，保证工作人员安全 2范围无菌检测 3责任无菌检测人员 4正文内容 4.1所有操作中均不应有大幅度的快速运动、快速行走，以免搅动空气。 4.2使用玻璃器皿应轻取轻放，避免破损，以防培养基扩散。 4.3用金属接种器皿时，用前、用后均需灼烧灭菌，待次冷却后方可接种培养物。接种石蜡、油质培养物时，不应立即在火焰上灼烧，应先在内焰里将油质培养物烘干后再烧灼灭菌，以免外溅污染环境。 4.4用吸管、注射器接种样品为菌液时用后置入消毒液缸内或消毒桶内灭菌，切勿用嘴直接吸吹吸管。 4.5注射器吸取样品、培养物时，注射器内应充空气，装卸针头时应用灭菌的钳子；从密封容器内抽取液体时切勿注入空气；带液体的针筒针头应向上倾斜，必要时用75%的酒精棉球（挤干）保护针头根部；注射时勿用力过猛，以免针头脱落流出液体污染灭菌器材或环境。 4.6开启菌瓶塞或其它供试品安瓶之前，应用碘酒或75%乙醇棉球消 毒容器，刻痕用的砂轮也应消毒，折断时要防止污染。
4.7灭菌瓶塞或试管塞掉在工作台上，禁止再用，应另换无菌塞。 4.8戒除操作中或洗手后摸口、鼻、眼、脸、头发、挖鼻孔、搔痒等 不卫生习惯，以防止自身感染和交叉感染。 4.9操作中不准在无菌室内敞开洁净工作服。 4.10按规定穿好无菌服（衣、裤、帽、鞋、口罩等）。 4.11在观察平板培养物时，一般不宜开盖观察，如取菌落或菌苔涂片、染色或做玻片凝集试验时，在离火焰三寸以内操作，平皿上下盖可适当开缝。 4.12应将所有用过的玻片置0.5 —1%新洁乐灭中浸泡24小时，再洗刷清洁，凉干备用。 4.13当无菌衣受污染，应脱下翻转包裹，使污染部分包在内部送往消 毒，经清洁灭后再用。 4.14因偶然打破盛有培养物的器皿致使病原性菌种外溢，污染了工作 室及操作者的衣服和身体，当事人应冷静，切勿乱动以免扩大污染面，对小面积污染可自行处理，较大范围时则请人协助，用浸透消毒液（5% 来苏水、石碳酸溶液）的毛巾或纱布覆盖于碎片上，在将消毒剂倒在污染区，待30分钟从外围至内逐步清理污染源，最后将衣物彻底高压灭菌；清理时应避免用手指收集玻璃碎片，以防损伤皮肤，发生病原性微生物或流行事故。 4.15凡带有活菌的物品必须消毒后才能进行冲洗，严禁污染下水道。