小鼠肺癌模型

LSL-KRas G12D小鼠肺癌or胰腺癌模型-华夏凯奇

LSL-KRas G12D小鼠肺癌or胰腺癌模型Copyright@华夏凯奇生物技术有限公司大致如下图：在k-ras locus上敲入了LSL-KrasG12D, 并在前面加上了一下stop codon, 通过小鼠鼻腔注入Adeno-Cre病毒，诱导肺中的K-rasG12D表达，从而产生肺癌。

K-rasG12D的表达是被内源性的启动子调节的。

如果全身性用Cre诱导的话，小鼠会得胰腺癌。

(小鼠由Tyler Jacks实验室制作)。

LSL=Loxp-Stop-Loxp重要的参考文献：Genes Dev. 2001 Dec 15;15(24):3243-8.we used a Lox–Stop–Lox K-ras conditional mouse strain (referred to as LSL-K-ras G12D), in which expression of oncogenic K-ras is controlled by a removable transcriptional termination Stop element.( /pubmed/11751630 ).这里有比较详细的信息/available_details.asp?ID=01XJ6The endogenous K-ras locus is targeted in the LSL-K-ras G12D strain and, therefore, endogenous levels of oncogenic K-Ras G12D protein are expressed following removal of the Stop element. Removal of the Stop element from the LSL-K-ras G12D allele was achieved by the use of an AdenoCre, which allows control of the timing, location, and multiplicity of tumor initiation.Strain Description:These mice carry a latent point-mutant allele of Kras2 (K-rasG12D). Cre-mediated recombination leads to deletion of a transcriptional termination sequence (Lox-Stop-Lox) and expression of the oncogenic protein.Intranasal infection with an adenovirus encoding Cre resulted in a very high frequency of lung tumors. Homozygotes die in utero.Husbandry: Breeder pairs are supplied as a heterozygote (male or female) x wildtype C57BL/6 mate. This Kras allele is non-functional in its germline configuration, therefore the mice are maintained by backcrossing heterozygousanimals to C57BL/6. Average litter size is 9.DonatingInvestigator:Dr. Tyler JacksKey Reference: Jackson EL, Willis N, Mercer K,Bronson RT, Crowley D, Montoya R, Jacks T, and Tuveson DA. 2001. Analysis of lung tumor initiation and progression using conditional expression of K-ras. Genes and Development 15: 3243-3248PMID: 11751630 [PubMED Abstract]Related References: Johnson L, Mercer K, Greenbaum D, Bronsont RT, Crowley D, Tuveson DA, and Jacks T. 2001 Somatic activation of the K-ras oncogene causes early onset lung cancer in mice. Nature 410:1111-1116 PMID: 11323676 [PubMED Abstract]Tuveson DA, Shaw AT, Willis NA, Silver DP, Jackson EL, Chang S, Mercer KL, Grochow R, Hock H, Crowley D, Hingorani SR, Zaks T, King C, Jacobetz MA, Wang L, Bronson RT, Orkin SH, DePinho RA, Jacks T. 2004. Endogenous oncogenic K-ras(G12D) stimulates proliferation and widespread neoplastic and developmental defects. Cancer Cell 5, 375-378. PMID:15093544 [PubMED Abstract]。

llc细胞形态

llc细胞形态LLC细胞形态LLC细胞，全称为Lewis肺癌细胞，是一种常见的小鼠白血病/淋巴瘤模型。

该模型广泛应用于肿瘤学、免疫学、药理学等领域的研究。

本文将从LLC细胞的来源、形态特征、生长特点和应用等方面进行详细介绍。

一、来源LLC细胞最初是由美国肿瘤学家Dorothy H. Andersen于1951年从一只C57BL/6小鼠的肺部分离出来的。

该小鼠是由美国生物学家Clarence Cook Little在20世纪30年代末期选育出来的，因此也被称为“Little小鼠”。

目前已经建立了许多LLC细胞株，其中以LLC1和LLC2较为常见。

二、形态特征1. 组织来源：LLC细胞起源于小鼠肺部。

2. 形态：LLC细胞为悬浮在培养基中的单个或聚集的圆形或椭圆形细胞，直径约为10-20μm。

其表面光滑，无突起或伸展。

3. 核形态：LLC细胞呈卵圆形或椭圆形，核质比较丰富，染色质分布较均匀，核仁明显。

4. 细胞器：LLC细胞的内质网、高尔基体、线粒体等细胞器发达，与正常细胞相似。

三、生长特点1. 生长速度：LLC细胞具有较快的生长速度，在适宜的培养条件下，每24-48小时可翻倍一次。

2. 营养需求：LLC细胞对营养物质需求较高，需要含有丰富氨基酸和葡萄糖的培养基，并且需要添加10%的胎牛血清作为生长因子。

3. 传代稳定性：LLC细胞在传代过程中具有一定的稳定性，但也存在着一定的变异性。

因此，在进行实验时需要注意选择同源性较高的细胞株。

四、应用1. 肿瘤学研究：LLC细胞是肺癌模型中最常用的小鼠肺癌模型之一。

通过该模型可以研究肺癌发生机制、肿瘤生长、转移等问题。

2. 免疫学研究：LLC细胞可以用于免疫学相关的实验，如肿瘤免疫治疗、细胞毒性试验等。

3. 药理学研究：LLC细胞可以用于药物筛选和药效评价，为肺癌治疗提供一定的参考价值。

结语总之，LLC细胞是一种常见的小鼠白血病/淋巴瘤模型，具有较快的生长速度和较高的营养需求。

小鼠早期肺腺癌模型的病理学研究

小鼠早期肺腺癌模型的病理学研究肖时满;李勇爱;强金伟;邓林;张友元【摘要】目的研究小鼠早期肺腺癌的病理学表现,重点观察肿瘤生长类型和肿瘤-支气管关系.方法 KM小鼠10只每周皮下注射诱癌剂亚硝基胍(MNNG,浓度2.0 mg/mL)0.2 mg,连续4周.喂养至第100天时处死,解剖肺叶并肉眼计数肿瘤,甲醛固定后,随机选择100个肿瘤石蜡包埋、3μm切片、HE染色、光镜下观察和测量肿瘤的组织病理学类型、大小、形态、边缘、生长方式以及与支气管的关系.结果肉眼共见187个肿瘤,随机选取的100个病理证实均为肺腺癌.肿瘤大小0.19～1.33mm,平均0.48 mm.镜下见三种生长方式:匍匐性、膨胀性和混合性,数量分别为6个、28个和68个;平均大小分别为0.34、0.54 mm和0.47 mm.100个肿瘤中96个与支气管形成直接关系,其中13％和96％的肿瘤分别与通气支气管和换气支气管有关.肿瘤中心部、周边部和外周部支气管的显示率分别为19％、49％和96％;平均直径分别为67、91 μm和110 μm.肿瘤生长遇支气管阻挡或沿支气管间扩展可形成分叶(33％)或毛刺(35％).结论小鼠早期肺腺癌生长方式及肿瘤-小支气管关系的病理学研究有助于我们加深对人早期肺腺癌相应CT表现的认识.【期刊名称】《中国实验动物学报》【年(卷),期】2016(024)001【总页数】6页(P1-6)【关键词】肺癌;支气管;小鼠;病理学;动物模型;CT影像学【作者】肖时满;李勇爱;强金伟;邓林;张友元【作者单位】复旦大学附属金山医院影像科,上海201508;复旦大学附属金山医院影像科,上海201508;复旦大学附属金山医院影像科,上海201508;复旦大学附属金山医院影像科,上海201508;复旦大学附属金山医院病理科,上海201508【正文语种】中文【中图分类】Q95-33肺癌的发病率及死亡率居各类癌症之首[1]。

肺腺癌为最常见的病理组织学亚型，占所有肺癌近一半，尤其是女性[2, 3]。

小鼠Lewis肺癌胸腔移植模型的建立

小鼠Lewis肺癌胸腔移植模型的建立【摘要】目的：通过胸腔移植的方法建立晚期肺癌的动物模型。

方法：经C57BL/6小鼠的腋后线第6肋间胸腔(胸腔模型组)或小鼠腋部皮下(皮下模型组)分别移植鼠源性Lewis肺癌细胞0.2ml （5×106ml-1），观察小鼠的生存时间、小鼠体重、饲料消耗量、游泳试验、常压耐缺氧试验，大体观察胸腔、纵隔、胸水等肺癌细胞浸润和转移情况。

结果：胸腔模型组小鼠中位数生存时间13.5（8～18）d，皮下模型组小鼠中位数生存时间45（25～71）d，胸腔模型组的生存期范围离散程度较皮下模型组小（Ｐ<0.05）。

病程中胸腔模型组小鼠体重下降、摄食减少等恶病质体征较皮下模型组明显（Ｐ<0.01），胸腔模型组小鼠活动减少、睡眠时间缩短、蜷曲、毛发脱落等现象较皮下模型组多见，胸腔模型组小鼠游泳实验及耐缺氧实验时间较皮下模型组明显缩短（Ｐ<0.01），胸腔模型组小鼠早期可出现胸水和肿瘤转移，而皮下模型组小鼠早期未见胸水和肿瘤转移。

结论：胸腔移植模型可作为晚期肺癌动物模型。

【关键词】 Lewis肺癌胸腔移植模型皮下移植模型晚期肺癌小鼠肺癌动物模型与临床结果一直存在差距，尤以晚期模型更为明显。

我们在进行动物实验研究中发现，目前使用的肿瘤皮下移植模型中，动物生存时间差异很大，不利于生存期观察。

肿瘤发展到晚期也可以出现转移，但是发生率很不一致。

另外，模型的肿瘤负荷和产生的症状、并发症、生存状态也很不一致。

为了克服皮下移植模型缺陷，有学者采用将人类癌组织或肿瘤细胞悬液直接植入支气管的方法，可以很好模拟支气管肺癌的临床特征，但是其技术要求较高，成功率较低［12］。

另外，也有人采用外科手术移植方法，同样也是成功率低于10%［3］。

这些模型都需要无胸腺裸鼠或SCID小鼠，饲养条件高，实验费用昂贵。

鉴于肺癌模型的建立现状，至今未见有经胸腔直接移植建立晚期肺癌模型的报道，因此，作者采用清洁级小鼠C57BL/6胸腔种植鼠源性Lewis肺癌细胞的方法，进一步比较该模型和皮下移植模型肿瘤生长状况，观察治疗前后小鼠生存时间、生存状态及其相互关系，研究该模型稳定性和实用性。

小鼠肺癌原位模型的建立

小鼠肺癌原位模型的建立Establishment of orthotopic lung cancer model in mice XU Zihang LIU Fei ZOU Chunpu ZHU Shiguo CHEN XiaoSchool of Basic Medical Science ，Shanghai University of Traditional Chinese Medicine ，Shanghai 201203 ，China[] Objective Morbidity and mortality remain high in lung cancer ，but the animal lung cancer models used for the experimental research are limited ，so to establish an orthotopic lung cancer model，which is stable and similar to the human tumor microenvironment ，is a foundation for the further study of lung cancer research. Methods Luciferase-expressed LLC cells and matrigel matrix were directly injected into the left lung of C57BL/6 mice after cutting open a incision of the skin ，which about 1 cm ，and there was no need to open the chest. Small animal in vivo bioluminescence imaging system was used to monitor tumor growth and metastasis. At different time points ，mice were sacrificed and the lung tissues were isolated and imbedded with paraffin. Pathological diagnosis was madebysliced and HEstained. Results LLC cells (0.5 x 105) were enough to form an orthotopic pulmonary tumor ，and the success rate wasabove 90%. The metastases to contralateral thoracic ，contralateral lung ，bilateral axillary and inguinal lymph nodes were monitored by bioluminescence technique. Conclusion The orthotopic tumor models of lung cancer can successfully built by injection ofluciferase-expressed LLC cells and matrigel matrix mixture. Furthermore ，a few LLC cells are needed ，and the tumor formation rate is high ，besides there is no operation death risk. It has good metastases and high repeatability ，in addition it's easy to operate and easy to be monitored ，which provides a good method for the establishment of mouse models for further study of lung cancer.目前，肺癌动物模型的构建方法有化学诱导法、转基因法、异位移植法、原位移植法等。

用于活体成像的人肺腺癌白发骨转移小鼠模型

病理检查可见肺腺癌细胞! 其外周血可成功分离 7 其中 7 鼠肺部和骨骼出现转移灶! 0P 癌细胞! 0P 癌细胞阳性小鼠骨转移发生率较高&结论本研究成功构建了可用于活体成像的人肺腺癌骨转移小鼠模型!并可从其外周血中分离 7 为肿瘤生长转移机制的研究及抗肿瘤药物的研发提供 0P 癌细胞! 了重要工具&
摘要初步探讨由模型动物中分离上皮间 E 8 '细胞株骨转移模型! 8 目的建立小鼠人肺腺癌 R 癌细胞的可行性&方法采用肺原位注射法对低' 中' 高浓度组的雄性 T ) 质细胞转化* 7 0P+ N I T 2裸
*' *' $ 个对照组注射鼠分别注射 !.! ) " $.! " !.! " ) "2 I 的高骨亲和性的人肺腺癌 R E 8 ' 细胞悬液! * ) 空白组注射 ) 观察小鼠的生存时间' 体 $ . ! " ) "2 I 的原始人肺腺癌 R E 8 '细胞! "2 I 空白混合胶体!
国际骨科学杂志 !0 ! ! ! ! " # $年 %月第 % &卷第 !期 ' ( ) *+ , ) . 1 , 2 -! $ ! " # $ 3 . 4 5 % & 6 . 5 ! /
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" 实验研究 "
用于活体成像的人肺腺癌自发骨转移小鼠模型
韩帅杨兴海万宗淼周旺姜东杰尹华斌王霆肖建如
c基因与re8细胞试图通过肺原位注射法构建高骨转移率的肺癌动物模型以研究肺癌的生长转移机制活体成像结果提示高浓度组小鼠肺原位肺癌造模成功率为后高浓度组小鼠开始出现肺外转移灶后对照组和低中高浓度组小鼠出现活动频率降低进食量减少对外界刺激迟钝皮肤松弛等恶病质表现原位注射的小鼠可检测到骨转移病灶大体解剖显示高浓度组小鼠肺部可见灰白色硬质癌结节组织切片结果证实为肺癌细胞对照组和低中高浓度组小鼠肺脏系数高于空白组与病理检查结果一致受累骨组织骨质破坏可检出肿瘤细胞活体成像及大体解剖结果显示肝脏脾脏等主要器官未见明显转移灶在生存状态上此模型小鼠的表现与临床癌症患者消瘦乏力食欲不振等症状类似卡方检验结果表明与对照组相比高骨亲和性re8细胞在原位肺癌成模率方面与原始re8细胞无统计学差异但高骨亲和性re8细胞发生自发性骨转移的能力显著高于原始re8细胞研究表明以浓度的高骨亲和性re8造模成功率较高本模型的优势在于较好地模拟了肺癌自发体内转移的过程既往肺癌异位移植模型常采用左心室注射法或特定组织器官注射法如将肿瘤细胞经横突椎弓根注射至新西兰兔椎体内操作较为繁65

肺癌动物造模实验报告

#### 一、实验背景肺癌是全球范围内发病率和死亡率最高的恶性肿瘤之一。

为了深入研究肺癌的发病机制、评估治疗效果和寻找新的治疗方法，建立可靠的肺癌动物模型至关重要。

本实验旨在通过二乙基硝胺（DEN）诱导小鼠肺癌，构建一种可靠的肺癌动物模型，并对其进行详细观察和分析。

#### 二、实验材料与方法##### 1. 实验动物选用SPF级C57BL/6小鼠，雄性，体重18-22g，购自某实验动物中心。

##### 2. 实验药物二乙基硝胺（DEN），纯度≥98%，购自某化学试剂公司。

##### 3. 实验方法（1）动物分组：将小鼠随机分为实验组和对照组，每组10只。

（2）实验组：每周对实验组小鼠进行1次皮下注射1% DEN水溶液，每次剂量为56mg/kg，连续注射12周。

（3）对照组：每周对对照组小鼠进行1次皮下注射等体积的生理盐水。

（4）观察指标：观察小鼠的生长状况、行为表现、体重变化等，并在实验结束后进行病理学检查。

#### 三、实验结果##### 1. 小鼠生长状况实验期间，实验组小鼠生长状况与对照组无明显差异，体重变化无显著性差异。

##### 2. 小鼠行为表现实验组小鼠在实验过程中出现不同程度的咳嗽、呼吸困难等症状，而对照组小鼠无明显异常。

##### 3. 病理学检查实验结束后，对实验组和对照组小鼠进行病理学检查，结果显示：（1）实验组小鼠肺组织出现明显的病理改变，表现为肺泡壁增厚、肺泡腔内细胞增生、肺泡结构破坏等；（2）部分实验组小鼠肺组织中出现肿瘤细胞，呈浸润性生长，符合肺癌的特征；（3）对照组小鼠肺组织无异常。

#### 四、讨论与分析本实验通过二乙基硝胺诱导小鼠肺癌，成功构建了一种可靠的肺癌动物模型。

实验结果显示，实验组小鼠在实验过程中出现咳嗽、呼吸困难等症状，病理学检查发现肺组织出现明显的病理改变，符合肺癌的特征。

与对照组相比，实验组小鼠的肺组织出现肿瘤细胞，表明本实验构建的肺癌动物模型具有可靠性。

肺癌小鼠模型研究进展

肺癌小鼠模型研究进展
于国兴;刘翠兰;张鑫;杜静
【期刊名称】《现代肿瘤医学》
【年(卷),期】2024(32)7
【摘要】肺癌是世界上发病率和死亡率最高的恶性肿瘤之一,明确其病因、发病机制及药物防治方法是目前研究热点。

小鼠是肺癌临床前研究中最常用的实验动物,根据不同的研究策略和目的选择合适的小鼠模型。

目前常用的小鼠肺癌模型包括诱发性模型、移植物模型及基因工程模型等,根据研究目的选择不同的小鼠模型。

回顾国内外肺癌小鼠模型相关文献报道,归纳总结常用肺癌小鼠模型的研究进展,为肺癌研究提供参考。

【总页数】6页(P1361-1366)
【作者】于国兴;刘翠兰;张鑫;杜静
【作者单位】滨州医学院附属医院血液内科;滨州医学院附属医院医学研究中心【正文语种】中文
【中图分类】R734.2
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(完整)小鼠肿瘤模型

肿瘤模型我们一般常用的就是小鼠模型和人肿瘤裸小鼠移植瘤模型。

其中用得最多的是皮下模型，另外还有腹水（或者尾静脉注射）以及原位模型,其他的模型很少用，就不提他们了。

小鼠模型分三大类:第一类是以S180、EAC、H22等为代表的，他们的宿主小鼠多选用KM，可产生腹水,也可在皮下成瘤。

多以腹水传代，实验时抽取腹水,经过一定稀释后皮下接种构建模型,接踵后第二天开始给药，给药7到10天,接种10天后结束试验，剥取肿瘤称瘤重.1。

关于构建瘤种可以用体外细胞株培养后，用PBS悬浮至1～3×106/0。

1ml/mouse,i.p接种即可，最好用6号左右的针头,就是常用的2ml一次性注射的针头.2. 关于腹水传代观察到第一代的种鼠肚子较大后（一般约8～9天左右),可以传代，传代时取1ml注射器，用2ml注射器的针头，种鼠腹部消毒后直接将针头插入抽取腹水即可，注意不要把针头插得很深，尽量浅一点，还可以把老鼠拎起来，利用重力，让腹水集中在某处便于抽取，一般抽个0.5ml就可以了，不用离心，直接用PBS3~6倍稀释后,接种到新的老鼠腹腔，腹水颜色为白色或者略有发黄都是正常的，但是血性腹水说明不好,需要注意调整,第二代以后，尽量6～7天的时候传代，不要等的时间太久,否则腹水容易血性。

三代后可用于试验。

3. 关于接种进行试验这个时候抽取的腹水需要量比较多，一般需要处死种鼠后，小心地用消毒眼科剪刀镊子剥开腹部皮肤，注意不要弄破肌肉，然后，用镊子（最好是哪种前面有倒勾的镊子，学名好像是唇型镊）拎起腹部的肌肉,用剪刀剪开一个小口,然后用玻璃滴管或者去掉针头的注射器吸取腹水。

然后进过一定的稀释后，接种到小鼠的腋下.关于稀释量，各个实验室的情况都不一样,最好摸索一下，开始的时候可以适当的计数,但是要用台盼兰染色后计活细胞数。

接种部位在小鼠腋下，但是不要深入到腋窝里面,会给以后的操作带来麻烦。

接种时的进针处离接种处远一点，让针头在皮下多走一段，不容易污染。

LSL-KRas G12D小鼠肺癌or胰腺癌模型-华夏凯奇

LSL-KRas G12D小鼠肺癌or胰腺癌模型Copyright@华夏凯奇生物技术有限公司大致如下图：在k-ras locus上敲入了LSL-KrasG12D, 并在前面加上了一下stop codon, 通过小鼠鼻腔注入Adeno-Cre病毒，诱导肺中的K-rasG12D表达，从而产生肺癌。

K-rasG12D的表达是被内源性的启动子调节的。

如果全身性用Cre诱导的话，小鼠会得胰腺癌。

(小鼠由Tyler Jacks实验室制作)。

LSL=Loxp-Stop-Loxp重要的参考文献：Genes Dev. 2001 Dec 15;15(24):3243-8.we used a Lox–Stop–Lox K-ras conditional mouse strain (referred to as LSL-K-ras G12D), in which expression of oncogenic K-ras is controlled by a removable transcriptional termination Stop element.( /pubmed/11751630 ).这里有比较详细的信息/available_details.asp?ID=01XJ6The endogenous K-ras locus is targeted in the LSL-K-ras G12D strain and, therefore, endogenous levels of oncogenic K-Ras G12D protein are expressed following removal of the Stop element. Removal of the Stop element from the LSL-K-ras G12D allele was achieved by the use of an AdenoCre, which allows control of the timing, location, and multiplicity of tumor initiation.Strain Description:These mice carry a latent point-mutant allele of Kras2 (K-rasG12D). Cre-mediated recombination leads to deletion of a transcriptional termination sequence (Lox-Stop-Lox) and expression of the oncogenic protein.Intranasal infection with an adenovirus encoding Cre resulted in a very high frequency of lung tumors. Homozygotes die in utero.Husbandry: Breeder pairs are supplied as a heterozygote (male or female) x wildtype C57BL/6 mate. This Kras allele is non-functional in its germline configuration, therefore the mice are maintained by backcrossing heterozygousanimals to C57BL/6. Average litter size is 9.DonatingInvestigator:Dr. Tyler JacksKey Reference: Jackson EL, Willis N, Mercer K,Bronson RT, Crowley D, Montoya R, Jacks T, and Tuveson DA. 2001. Analysis of lung tumor initiation and progression using conditional expression of K-ras. Genes and Development 15: 3243-3248PMID: 11751630 [PubMED Abstract]Related References: Johnson L, Mercer K, Greenbaum D, Bronsont RT, Crowley D, Tuveson DA, and Jacks T. 2001 Somatic activation of the K-ras oncogene causes early onset lung cancer in mice. Nature 410:1111-1116 PMID: 11323676 [PubMED Abstract]Tuveson DA, Shaw AT, Willis NA, Silver DP, Jackson EL, Chang S, Mercer KL, Grochow R, Hock H, Crowley D, Hingorani SR, Zaks T, King C, Jacobetz MA, Wang L, Bronson RT, Orkin SH, DePinho RA, Jacks T. 2004. Endogenous oncogenic K-ras(G12D) stimulates proliferation and widespread neoplastic and developmental defects. Cancer Cell 5, 375-378. PMID:15093544 [PubMED Abstract]。

小鼠肺癌模型
小鼠肺癌模型
小鼠肺癌模型
将小鼠平放，与左右侧腋下中部以碘伏消毒并备皮，剪开膈肌，沿两侧肋骨剪开胸腔暴露肺脏、心脏
首先观察肺脏是否存在出血或充血，其次观察是否存在水肿或气肿，剪开上下俩端气管，将部分肺组织置在离心管中，注入 PBS缓冲液并密封标记，随后存放在冰箱中
取部分肺组织进行常规组织石蜡包埋步骤，最后进行HE 染色
小鼠肺癌模型
4、病理学报告：形态与原代体外细胞形态相似 ,程长梭形 ,核幼稚 ,细胞核深染 ,核异型性明显 ,排列
杂乱紧密 ,与邻近肺组织特征完全不同
5、评估肺癌模型：通过观察肿瘤的生长情况、组织学检测、免疫组化染色等方法对肺癌小鼠模型进行评估
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谢
谢
小鼠肺癌模型
小鼠肺癌模型
目录
小鼠肺癌模型
1、实验动物 :无特定病原体(SPF) 级 C57BL/6 小鼠 ,6 ~8 周 ,雌性 ,体重约 22 g ,共10只。实验动物使用的 3R原则给予人道主义关怀
1
2、体内移植肺癌细胞：将体外培养的肺癌细胞注射到小鼠体内，形成移植瘤模型
2
小鼠肺癌模型
3、实验方法细胞复苏 1、将水浴锅预热至37℃，准备好干净的一次性PE手套，置于含 10%血清、 1%双抗的 DMEM/HIGHGLUCOSE 基础培养基中 2、将细胞从液氮罐中取出放入PE手套中，迅速没入水浴锅，摇晃冻存管加速溶解，以1 分钟内全部溶解为宜 3、在超净台中将复苏好的细胞液加入到装有新鲜培养基的离心管内，1200rpm/min 离心3分钟，离心完毕去掉上清 4、用适量与细胞对映的完全培养基重悬细胞，接入到无菌容器中(培养瓶或培养皿)，补充培养基到适宜，放入培养箱培养 5、每天镜下观察细胞生长状态,每 2 天换液处理,约每 3 d 进行消化传代一次。细胞汇合率达 80%进行传代培养

一种小鼠肺癌脑转移细胞株llc-bmt3及其构建方法和应用

一种小鼠肺癌脑转移细胞株llc-bmt3及其构建方法和应
用
小鼠肺癌脑转移细胞株（Lewis lung carcinoma brain metastasis cells，LLC-BMT3）是一种经过构建的小鼠肺癌转移模型，主要应用于研究肺癌脑转移的发生、发展机制以及筛选潜在的治疗靶点和药物。

构建LLC-BMT3细胞株的方法如下：
1. 合成肺癌细胞株：通过体外培养的方法，将小鼠肺癌细胞株（Lewis lung carcinoma cells，LLC）培养至富含血管生成特性的LLC-BV2细胞株。

2.体内移植：将培养好的LLC-BV2细胞株注射到小鼠的侧脑室内，通过建立肺癌脑转移模型。

3.分离和培养：在小鼠脑组织形成转移瘤后，取出脑转移瘤组织，将其分离并培养成新的肺癌脑转移细胞株，即LLC-BMT3
LLC-BMT3细胞株的主要应用包括：
1.肺癌脑转移机制研究：LLC-BMT3细胞株作为研究肺癌脑转移的模型，可以用来探究肺癌细胞如何穿过血脑屏障进入脑组织，以及相关细胞和信号通路的参与。

2.靶点筛选与药物开发：利用LLC-BMT3细胞株可以筛选和评估针对肺癌脑转移的潜在治疗靶点和药物。

研究人员可以通过体外实验，评估候选药物对LLC-BMT3细胞的抑制作用，进而选择具有潜在抗肺癌脑转移活性的化合物。

3.治疗药效评估：LLC-BMT3细胞株可以用于评估候选治疗药物对肺癌脑转移的疗效。

例如，将药物直接注射到小鼠脑组织内，观察治疗后的瘤体大小和肺癌脑转移程度，从而判断药物的治疗效果。

总之，LLC-BMT3细胞株的构建与应用为研究肺癌脑转移提供了一个理想的模型系统，有助于深入了解肺癌脑转移的机制、新药研发和治疗方案的评估。

小鼠肺癌模型研究进展

小鼠肺癌模型研究进展肺癌目前是世界范围内发病率和病死率最高的恶性肿瘤，并且肺也是惡性肿瘤最容易发生远处转移的器官之一。

加大肺癌的科研力度势在必行，建立合适的肺癌动物模型可为肺癌的发病原因、发病机制、预防策略及临床早期诊断和药物疗效评价等提供研究基础。

其中，又因小鼠是科研中最常使用的实验动物，故本文旨在介绍目前最常用的各种小鼠肺癌模型，如化学诱导小鼠模型、转基因小鼠肺癌模型、异位移植小鼠模型、原位移植小鼠模型及小鼠肺转移模型等构建方法，以及其在科研领域中的应用。

分析表明，小鼠肺癌模型不仅需要多学科的交叉渗透以拓展其研究宽度，而且也需要将各种现有模型进行更灵活的运用和更深入的探索，这样才能有所突破。

[Abstract] Currently，lung cancer is one of the most common malignant tumors，and it has the highest morbidity and mortality rate all over the world. Besides，lung is also the most prone to distal metastasis organs among a variety of malignant tumors. In this case，it is critical to put more effort in lung cancer research. Aproper animal lung cancer model provides research foundation on etiology，pathogenesis，prevention strategies，the early clinical diagnosis and efficacy evaluation research. Because mice are the most commonly used experimental animals in research，this paper introduced different methods and applications of mouse lung cancer models，such as chemical inducing model，transgenic mouse model，xenograft tumor model，orthotopic tumor model，and tumor metastatic model. According to previous reports，multidisciplinary research，versatility and in-depth exploration should be the focus to achieve breakthroughs in mouse lung cancer models.[Key words] Lung cancer；Mouse tumor models；Application世界肿瘤流行病学研究资料显示，在我国肺癌的发病率和死亡率已跃居恶性肿瘤之首[1]。

小鼠肺癌模型的建立及其在顺铂、恩度对比试验中的应用

小鼠肺癌模型的建立及其在顺铂、恩度对比试验中的应用张国明;庞作良;罗洞波【摘要】目的:构建Lewis肺癌C57BL/6小鼠皮下移植瘤模型,研究恩度与顺铂及联和用药对Lewis肺癌C57BL/6小鼠皮下移植瘤的生长抑制作用.方法:使用C57BL/6小鼠作为实验动物.培养小鼠Lewis肺癌细胞,收集对数生长期的肿瘤细胞,调整细胞悬液浓度至1×107/ml.于小鼠右侧腋部皮下注射细胞悬液0.2 ml(细胞总数为2×104).建立Lewis肺癌小鼠皮下移植瘤动物模型.待接种后第8天,能扣及肿瘤时(约8 mm)开始实验.将40只荷瘤小鼠随机分为四组.A组:生理盐水组;B组:顺铂组;C组:恩度组;D组:恩度与顺铂联用组.C组、D组每日给予恩度3 mg/kg,腹腔注射给药,每日1次,连续14 d;B组、D组腹腔注射顺铂0.2 ml(按照1 mg/kg给药),每天1次,连续2周.A组给予生理盐水0.2 ml/只腹腔注射,每日1次,连续二周后处死.观察各组小鼠的生存质量情况,每3天称取体重一次并测量肿瘤长短径,描绘肿瘤生长曲线;称量瘤重,计算抑瘤率.结果:各治疗组小鼠移植瘤生长较生理盐水组相对缓慢.联合治疗组肿瘤体积明显小于生理盐水组、顺铂组和恩度组;顺铂组、恩度组和联合治疗组抑瘤率分别为32.19%、21.96%、55.08%.顺铂与恩度联用对小鼠移植瘤具有协同抑制作用(Q>1.15).结论:在实验条件下,恩度与化疗药物顺铂均对Lewis肺癌皮下移植瘤生长有明显抑制作用.恩度与顺铂对Lewis肺癌移植瘤具有较好的协同抑制作用,同时能够改善小鼠的生存质量,在肺癌治疗中具有一定潜力.【期刊名称】《新疆医科大学学报》【年(卷),期】2009(032)007【总页数】4页(P946-948,951)【关键词】Lewis肺癌;恩度;顺铂【作者】张国明;庞作良;罗洞波【作者单位】新疆医科大学附属肿瘤医院胸外科,新疆,乌鲁木齐,830011;新疆医科大学附属肿瘤医院胸外科,新疆,乌鲁木齐,830011;新疆医科大学附属肿瘤医院胸外科,新疆,乌鲁木齐,830011【正文语种】中文【中图分类】R-332;R734.2;R730.53支气管肺癌(bronehiogenic. areinoma)简称肺癌(lungeaneer)，目前是发病率和死亡率增长最快、对人类健康和生命威胁最大的恶性肿瘤[1]。

小鼠肺癌肺部病理

小鼠肺癌肺部病理小鼠肺癌是一种常见的实验动物模型，被广泛应用于肺癌的研究中。

肺癌是一种恶性肿瘤，起源于肺组织中的上皮细胞，具有高度的浸润性和转移性。

小鼠肺癌模型可以帮助科研人员更好地了解肺癌的发生机制、治疗方法以及预后评估等方面的问题。

小鼠肺癌模型的建立通常采用多种方法，包括基因敲除、基因突变、化学诱导和移植等方式。

其中，基因敲除和基因突变是最常用的方法之一。

通过敲除或突变特定的基因，可以模拟出人类肺癌中存在的一些突变情况，从而更好地研究肺癌的发生机制。

在小鼠肺癌模型中，病理学检查是非常重要的一步。

通过对小鼠肺部组织进行病理学检查，可以观察到肿瘤的形态学特征、组织学结构以及细胞学特点等信息。

常见的病理学检查方法包括组织切片染色、免疫组化染色和原位杂交等技术。

这些技术可以帮助科研人员对小鼠肺癌进行详细的观察和分析。

在小鼠肺癌模型中，肿瘤的形态学特征通常表现为肿块或结节状，大小不一。

肿瘤组织呈灰白色或黄白色，质地较硬。

切面可见出血、坏死和囊变等变化。

组织学结构上，小鼠肺癌通常表现为不规则增生的上皮细胞，排列紊乱，核分裂活跃。

细胞学上，小鼠肺癌细胞核大而深染，染色质呈颗粒状或颗粒块状分布，胞浆丰富。

除了形态学和组织学特征外，小鼠肺癌模型中还可以通过免疫组化染色来检测特定蛋白的表达情况。

免疫组化染色可以通过对标本中特定蛋白进行染色，并观察染色结果来判断该蛋白在肿瘤组织中的表达水平。

常用的免疫组化标记物包括细胞增殖标记物Ki-67、上皮标记物CK7和CK19等。

原位杂交是另一种常用的病理学检查方法。

原位杂交可以用来检测特定基因在肿瘤组织中的表达情况。

通过对标本进行原位杂交反应，可以观察到特定基因在肿瘤组织中的信号分布情况，从而了解该基因在肿瘤发生发展过程中的作用。

总之，小鼠肺癌模型是一种重要的实验动物模型，可以帮助科研人员更好地了解肺癌的发生机制和治疗方法。

通过对小鼠肺部组织进行病理学检查，可以获取关于肿瘤形态学特征、组织学结构以及分子表达情况等信息，为肺癌的研究提供重要依据。