血清钙Ca比色法测定
血清钙Ca比色法测定
血清钙Ca比色法测定1 检验目的指导本室工作人员规范操作本检测项目，确保检测结果的准确。
2 实验原理在碱性条件下，加入8-羟基喹啉能防止镁和铁的干扰钙离子的测定情况下，Ca2+和邻甲酚酞络合酮形成紫色复合物钙 +O-CPC 碱性环境钙－O-CPC复合物其钙离子与邻甲酚酞络合酮复合物的颜色与钙浓度成正比，可用利用其吸光度的变化来测定钙离子的含量。
3 标本采集3.1 病人准备：无特殊要求。
3.2 类型：血清、肝素血浆或尿液。
3.3 标本存放：血清/血浆稳定性：20～25℃保存可稳定7天；4～8℃保存可稳定3周；-20℃保存可稳定8个月。
尿液稳定性：20～25℃保存可稳定2天；4～8℃保存可稳定4天；-20℃保存可稳定3个月；对24h尿液标本加浓盐酸10ml，并加热标本，使草酸钙溶解。
3.4 标本运输：室温条件下运输3.5 标本拒收标准：细菌污染的不能做测定。
4. 实验材料：4.1 试剂：上海罗氏诊断产品有限公司CA试剂盒,国械注进20142405056YZB/GER 5724-2014）4.1.1 试剂组成R1 氨基乙醇缓冲液:1mol/L，pH10.6R2 邻甲酚酞络合酮:0.3mmol/L;8－羟基喹啉:13.8mmol/L;盐酸:122mmol/L4.1.2 试剂准备：试剂为即用式。
4.1.3 试剂稳定性与贮存：15－25°C下保存期限：见试剂标签上的有效期机上稳定期：42天。
4.1.4 变质指示：当试剂有浊度时，表明有细菌污染，不能继续使用。
4.2 校准品：使用罗氏多项生化校准品提供的Ca校准品对自动分析仪进行校准。
4.3 质控品：使用正常值、病理值复合控制品。
5 仪器AU2700生化分析仪，罗氏P800生化分析仪, 西门子ADVIA-2400生化分析仪，东芝TBA-120生化分析仪。
6 操作步骤6.1 样品的准备：将标好号的样品离心后放到仪器规定的位置。
6.2 试剂的检测：仪器开机后，检查各种试剂的位置，体积等确认无误后方可进行测定。
钙(Ca2+) 偶氮砷III法生化检测方法
目录1. 检测原理2. 标本采集与处理2.1 受检者的准备2.2 静脉采血2.3 抗凝剂2.4 标本处理3. 试剂3.1 试剂3.2 校准血清3.3 试剂与校准血清的稳定性4. 仪器5. 操作6. 计算7. 操作性能7.1 精密度7.2 准确度7.3 灵敏度7.4 可报告范围7.5 特异性7.6 干扰8. 参考值9. 临床意义附录A: 参数1. 检测原理在中性条件下血清中的钙离子与砷酸盐反应，生成复合物。
此复合物在630nm有最大吸收，通过比色可求出钙的含量。
2．标本采集与处理2.1 受检者的准备：病人空腹12h，不饮酒24h后采集血样。
体检对象抽血前应有两周的的正常状况。
孕妇应在产后或终止哺乳3个月后检验。
此外，有无服用影响的药物以及采血的季节都应做相关记录。
2.2 静脉采血：除非是卧床的病人，一般在采血时取坐位。
体位影响水分在血管内外的分布，会影响测试项目的浓度。
在采血前至少应静坐5分钟，一般从肘静脉取血，使用止血带的时间不超过1分钟，穿刺成功后立即松开止血带。
2.3 抗凝剂：血浆使用肝素或EDTANa2（1mg/mL）作为抗凝剂。
2.4 标本处理：血标本室温放置30min～45min后离心分离血清或血浆，在两小时内检测完毕；如两小时内不能检测完毕，将离心分离血清或血浆置洁净试管加盖2-8℃保存。
3．试剂3.1 试剂：本科使用湖南永和阳光科技有限责任公司Ca试剂盒，为液体单一试剂，各组分如下：3.2 校准血清：使用湖南永和阳光科技有限责任公司提供的40项校准血清。
校准频次：空白定标：每日需做试剂空白定标。
全点定标：试剂换批号使用时或质控结果超过规定的±2SD范围，需要全点定标。
3.3 试剂与校准血清的稳定性：原包装试剂储存在2-8℃至标签所示失效日期。
试剂开瓶后，在仪器中至少可保存30天。
试剂储存在18-22℃稳定28天，试剂应避免污染。
试剂颜色为紫色，当试剂变色，按照试剂失效处理。
钙的比色法测定人民医院
钙的比色法测定1. 实验原理Vitros 钙试剂是一种干燥，多涂层的，在聚合物支撑基片上涂有分析成份的化学干片。
将一滴10 ul 的患者样品滴于干片上，分布层会使之均匀地分布。
于是钙离子从附着的蛋白质上游离出来，透过分布层进入下面的试剂层，与砷III 染色剂生成有色复合物，使最大吸收峰发生改变。
经过一段孵育期，有色复合物的反射强度可通过光谱法测定。
所产生有色复合物的总量与样品中的钙含量是成正比的。
测定方式：比色法波长：680nm测试时间和温度：37℃下约5分钟。
反应过程：pH5.6Ca+2+ 砷III ——→有色复合物2. 标本采集2.1 病人准备：无特殊要求。
2.2 样品类型：血清、肝素锂或钠抗凝血浆、定时或随时采集未加防腐剂的酸化尿液。
2.3 标本采集与处理：所有用于钙测试的样品，特别要注意一个问题：佩戴用碳酸钙粉制造的防护手套会在样品处理过程中造成污染（例如，吸管滴头，吸管，样品杯和杯盖），而这些被污染的消耗品在加样时又会污染待测样品，从而使测试结果偏高。
因此建议在拿这些消耗品时使用不含碳酸钙粉的手套，或者直接用干净的空手去拿，也可以用流水轻轻地冲洗有粉末的手套（不要用肥皂或任何类型的去污剂）然后再将其干燥后使用。
说明：标有[不含粉末]的手套，在手套的里层也可能含有一些污染性粉剂。
2.3.1 血清和血浆样品卧床患者的结果会偏低3%；淤血的钙浓度会偏高15%。
样品采集后2天内要离心标本，吸出血清。
处理样品时要将其当成生物污染品。
2.3.2 尿液样品定时或随时采集未加防腐剂的酸化尿液。
依照以下程序对测试钙的尿样进行酸化处理。
注意：这一程序只用于患者的样品，质控标本不需如此处理。
您可以将24h尿液全部或其中一部分进行酸化。
当尿液还有其它不需酸化的测试项目时，可以将部分尿液进行酸化。
酸化全部尿液：收集尿液前将20mL 6N的盐酸倒入收集尿液的容器内（随机收集的尿液中加1mL6N的盐酸）。
如果收集前没有加盐酸，按照以上步骤酸化后，要将其放置至少1h以后才能测试。
钙(Ca)测定标准操作程序SOP文件
R1：打开后机上稳定42天
R2：打开后机上稳定90天
准备：直接使用。
4.2校准物
来源：ROCHE配套校准物,具体如下：
S1：生理盐水
S2：C.f.a.s
贮存条件：校准物在2-8℃保存可保存至有效期。
准备：直接使用。
定标频率：A试剂瓶在仪器上放置超出7天
B如果前一个试剂瓶在仪器上放置超出7天，那末更换试剂瓶后需要进行重新定标
儿童：0-10天：7.6-10.4mg/dl
10天-2岁：9.0-11.0mg/dl
2-12岁：8.8-10.8mg/dl
青少年及成人：12-60岁：8.4-10.2mg/dl
60-90岁：8.8-10.2mg/dl
>90岁：8.2-9.6mg/dl
7.2.2随机尿液：100-300mg/24h(正常饮食)
质控间隔时间及限制：应视不同地区及各自实验室情况而定。质控结果应在限定的范围之内，如果超出范围，实验室应根据情况采取措施。
5仪器
ROCHE MODULAR P或日立7060生化分析仪。
6上机操作
见仪器作业指导书。
7参考范围
7.1血清/血浆：2.15-2.55mmol/l
7.2尿液：
7.2.1 24小时尿：2.50-8.00mmol/24h
ABCD医院
生化实验室
文件编号：
ABCD-SOP-04-01
钙（Ca）测定
版序：ABCD
页码：第1页，共3页
1测定方法
终点比色法。
2测定原理
钙＋邻甲酚络合酮碱性溶液钙-邻甲酚络合酮复合物
钙在碱性环境中与邻甲酚络合酮反应生成紫色的络合物，溶液颜色的深浅与钙的浓度呈正比。
血清钙测定三种比色法的比较
血清钙测定三种比色法的比较
班付走
【期刊名称】《临床检验杂志》
【年(卷),期】1995(0)S1
【摘要】血清钙测定三种比色法的比较班付走（广西百色地区人民医院）指导蒋仁礼为选择较理想的方法，我们对邻甲酚酞络合酮比色法（ＯＣＰＣ法）、甲基麝香草酚蓝比色法（ＭＴＢ法）、偶氮胂Ⅲ比色法（ＡｒｅｎａｚｏⅢ法）三种测定血清总钙的方法进行了比较。
报告如下。
１材料和...
【总页数】1页(P43-43)
【关键词】血清钙测定;比色法;临床检验;三种方法;吸光度;呈色稳定性;羟基喹啉;中华医学检验杂志;络合程度;钙离子
【作者】班付走
【作者单位】广西百色地区人民医院
【正文语种】中文
【中图分类】R446.11
【相关文献】
1.应用络合酮比色法测定血清钙离子溶血标本影响因素的探讨 [J], 丁晓娟
2.单一试剂偶氮胂Ⅲ比色法测定血清钙 [J], 杨文初;李桂兰
3.茜素红比色法测定血清钙的实验研究 [J], 胡建华
4.偶氮氯磷Ⅲ比色法测定血清钙的实验研究 [J], 靳仙宝
5.自动化测定血清钙的甲基百里酚蓝比色法 [J], 王银改;刘红霞;胡旭
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血清钙的测定 实验报告
血清钙的测定实验报告实验目的本实验的目的是通过测定血清中钙离子的含量来了解钙离子在人体内的水平，并探索血清钙的测定方法。
实验原理血清钙是指人体血液中钙离子的浓度。
钙离子是人体生理活动中不可或缺的重要离子之一，它在维持骨骼健康、神经传导、肌肉收缩和血液凝固等方面起着重要作用。
本实验采用比色法测定血清钙的含量，其基本原理是通过标准钙溶液的浓度与吸光度之间的关系来确定未知血清样品中钙离子的含量。
实验步骤1.收集血清样品：从实验对象中采集一定量的血液样品，并将其离心分离得到血清。
2.准备标准钙溶液：根据实验要求，制备一系列不同浓度的标准钙溶液。
3.制备试剂：按照实验所需，制备比色试剂和缓冲液。
4.预处理血清样品：将血清样品与缓冲液混合，并进行适当的处理，如去除蛋白质等。
5.吸光度测定：将标准钙溶液和处理后的血清样品分别置于分光光度计中进行吸光度测定，记录各个浓度的吸光度数值。
6.绘制标准曲线：将各个浓度的标准钙溶液的吸光度数值绘制成曲线。
7.测定未知样品：根据未知样品的吸光度值，利用标准曲线确定其钙离子的含量。
实验结果与讨论通过实验测定，得到了一系列标准钙溶液的吸光度数值，并绘制了标准曲线。
利用该曲线，我们可以确定未知血清样品中钙离子的含量。
在实验过程中，可能会遇到一些误差来源，如样品处理不完全、仪器读数误差等。
为了减小误差的影响，我们在实验中进行了多次重复测定，并计算了平均值和标准偏差。
根据实验结果，我们可以得出结论：血清钙的测定是通过比色法进行的，该方法简单、快速且可靠。
通过测定血清中钙离子的含量，我们可以了解人体内钙离子的水平，为相关疾病的预防和治疗提供参考依据。
实验总结本实验通过测定血清钙的含量，探索了血清钙的测定方法。
通过实验，我们学到了比色法测定血清钙的原理和步骤，并了解了钙离子在人体内的重要作用。
实验中我们还掌握了制备标准溶液、试剂的方法，并学会了使用分光光度计进行吸光度测定。
同时，在实验过程中我们认识到了误差来源的影响，并采取了相应的措施减小误差。
血清钙测定标准操作规程
总钙测定标准操作规程1 检验申请单独检验项目申请：血清总钙测定(缩写CA)；组合项目申请：血电解质全套测定组合。
临床医生根据需要提出检验申请。
2 标本采集与处理2.1标本采集2.1.1常规静脉采血约2 ml，不抗凝，置普通试管中。
或采用含分离胶的真空采血管。
2.1.2检验申请单和血标本试管标上统一且唯一的标识符。
2.1.3急诊标本应记录采集时间、送检时间、接收时间。
2.1.4标本采集后与检验申请单一起及时运送至检验科。
专人负责标本的接收并记录标本的状态，对不合格标本予以拒收。
2.1.5下列标本为不合格标本2.1.5.1标本量不足：少于0.3ml的全血标本，或少于0.1ml的血清或血浆。
2.1.5.2对反应吸光度有干扰的标本，包括严重溶血、严重浑浊的标本。
2.1.5.3无法确认标本与申请单对应关系的。
2.1.5.4其他如标识涂改、标本试管破裂等。
2.2标本保存2.2.1接收标本后在30min内将标本离心分离出血清。
2.2.2标本保存时间：室温（15～25℃）下至少稳定24h，普通冰箱中（2～8℃）稳定一周，-20℃冰冻条件下可稳定一年。
为避免标本中水分挥发使血清浓缩，对保存时间超过1天的标本均加塞密闭或覆盖湿巾。
2.2.3已完成测试的标本保持完整的识别号，置4～8℃冰箱内保存7天。
2.3标本采集的注意事项2.3.1采血前使受检者保持平静、松弛和空腹状态。
2.3.2不建议采集抗凝血标本，尤其不能使用EDTA，柠檬酸钠，氟化钠或草酸盐抗凝剂。
3方法原理本法基于金属色原偶氮胂Ⅲ的比色测定，在碱性条件下，游离的偶氮胂Ⅲ在溶液中呈玫瑰红色，与钙络合后形成紫蓝色偶氮胂Ⅲ-Ca2+复合物，在650nm波长比色测定。
复合物显色强弱与标本中钙浓度成正比。
4 试剂及其他用品4.1试剂：偶氮胂Ⅲ法测定钙试剂盒，由北京利德曼生化技术有限公司出品。
4.2试剂盒保存：保存于2～25℃，不开盖情况下至标签的失效期。
开盖后放于仪器的试剂仓冰箱中稳定30天。
钙检测比色法作业指导书
钙检测比色法作业指导书1 检验目的规范钙（Ca）检测试验，确保检测结果准确性和重复性。
2 测定方法偶氮胂Ⅲ法。
3 检测原理在碱性条件下,样品中的钙能与试剂中的偶氮胂Ⅲ（Arsenazo Ⅲ）反应生成紫色复合物，可用比色法测定，其吸光度与样本中Ca的浓度成正比。
4 样本血清、肝素抗凝的血浆，处理方法见生化标本采集程序。
稳定性：2～8℃稳定7天；室温可稳定3天。
5 仪器和试剂5.1 仪器：美国贝克曼-库尔特DXC800、AU5811全自动生化仪、迈瑞BS800M生化分析仪。
5.2 试剂：由武汉元景商贸公司提供原装贝克曼-库尔特试剂及迈瑞公司提供的生化试剂（详见试剂说明书），超过失效期的试剂不能使用。
5.3 校准物：Rodan混合校准品，符合WHO标准，贮存、准备严格遵照其说明书。
5.4 质控物：Rodan正常值及病理值质控品，符合WHO标准，贮存、准备严格遵照说明书。
6 校准6.1 仪器校准：每年由该仪器维修工程师参照厂方的技术规范对仪器进行一次校准。
6.2 项目校准：试剂盒在仪器上放置稳定期后；试剂批号更换后；由质控结果随时决定。
7 操作步骤上机操作，操作程序、质量控制程序见相应生化仪操作程序。
8 参考范围2.0～2.65mmol/L。
9 警告/危急值未规定。
10 性能指标10.1 线形上限：4.5mmol/L。
10.2 精密度：≤2%。
10.3 准确度:不准确度≤5%。
10.4 空白吸光度:在650nm处应<0.8。
10.5 试剂贮存:2～8℃密闭贮存可稳定12个月。
11 干扰因素及变异的潜在来源血清或血浆标本不能溶血,血浆标本只能用肝素锂抗凝。
12 临床意义12.1.血清钙离子降低：见于原发性和继发性甲状旁腺功能减退、慢性肾衰、肾移植或进行血液透析患者、维生素D缺乏症、呼吸性或代谢性碱中毒、新生儿低钙血症以及外科手术后，脓毒血症或热烧伤的病人等。
12.2.血清钙离子增高：甲状旁腺功能亢进、代谢性酸中毒、肿瘤、维生素D过多症等。
血钙的测定方法
血钙的测定方法
嘿，你知道吗，血钙的测定那可真是个有意思的事儿啊！这就好比在一个大宝藏里寻找那珍贵的血钙线索呢！
咱先来说说常用的比色法吧！就好像是一个精准的侦探，通过特定的试剂和血钙发生奇妙的反应，然后呈现出独特的颜色变化，从而来确定血钙的含量。
这是不是很神奇？就像变魔术一样，试剂一倒进去，颜色一变，答案就出来啦！
还有原子吸收分光光度法呢！它就像是一台超级精密的仪器，能够精确地捕捉到血钙的信号，然后准确地给出数值。
这感觉就像是有一双超级敏锐的眼睛，任何细微的血钙都逃不过它的法眼呀！
离子选择电极法也很不错哦！它就像是一个血钙的专属探测器，只对血钙有反应，然后迅速而准确地告诉我们血钙的情况。
这不就像是有个忠诚的小伙伴，一直帮我们留意着血钙的动向嘛！
荧光法也值得一提呢！那一道道奇妙的荧光，就像是在黑暗中指引我们找到血钙的明灯，让我们能清楚地了解血钙的状况。
每种方法都有它的独特之处，都像是一把钥匙，能打开了解血钙的大门。
我们可以根据不同的需求和情况，选择最适合的方法呀！难道不是吗？这些方法就像是一个个身怀绝技的高手，在为我们的健康保驾护航呢！所以啊，血钙的测定真的太重要啦，它能让我们及时了解身体里血钙的情况，就像给我们的身体做了一次全面的检查一样。
我们一定要重视起来呀，可不能马虎对待哦！。
血清钙(Ca)偶氮胂Ⅲ法测定
血清钙（Ca）偶氮胂Ⅲ法测定1. 实验原理偶氮胂Ⅲ比色终点法。
钙与偶氮胂Ⅲ在中性条件下形成蓝色复合物，显色强度与钙浓度成正比。
加入8-羟基喹啉-5-磺酸掩蔽镁的干扰。
2. 标本采集2.1 病人准备：无特殊要求。
2.2 类型：血清、肝素血浆或尿液。
3. 标本存放：血清/血浆稳定性：20～25℃保存可稳定7天；4～8℃保存可稳定3周；-20℃保存可稳定8个月。
尿液稳定性：20～25℃保存可稳定2天；4～8℃保存可稳定4天；-20℃保存可稳定3个月；对24h尿液标本加浓盐酸10ml，并加热标本，使草酸钙溶解。
4. 标本运输：室温条件下运输5. 标本拒收标准：细菌污染的不能做测定。
6. 实验材料：6.1 上海申能钙测定试剂盒（货号：111 1137170 试剂：8×70ml）6.1.1 试剂组成磷酸盐缓冲液pH7.5 50mmol/L8-羟基喹啉-5-磺酸5mmol/L偶氮胂Ⅲ120mmol/L表面活性剂适量6.1.2 试剂准备：试剂为即用式。
6.1.3 试剂稳定性与贮存：试剂避光保存于2～8℃，若无污染，可稳定至失效期。
试剂不可冰冻。
开盖后应避免污染。
6.1.4 变质指示：当试剂有浊度时，表明有细菌污染，不能继续使用。
6.1.5 注意事项：由于钙离子到处都有，必须严加注意采取避免污染。
只使用一次性检测用品。
微量螯合剂(如EDTA等)都会阻碍显色复合物的生成。
须严加注意。
试剂中含叠氮钠（0.95g/L）为防腐剂。
不可入口！避免接触皮肤及粘膜。
应采取必要的预防措施使用试剂。
6.2 校准品：使用DiaSys公司提供的TruCal U校准品对自动分析仪进行校准，具体参见生化检验校准品和质控品.SOP文件6.3 质控品：具体参见生化检验校准品和质控品.SOP文件7. 仪器：贝克曼AU680生化分析仪8. 操作步骤8.1 项目基本参数：参见AU680生化分析仪项目测定参数.SOP文件8.2仪器操作步骤：参见AU680生化分析仪操作规程.SOP文件9. 检验结果的判断与分析10. 质量控制：在每一批标本中都应把非定值血清水平I与II质控做为未知标本进行分析，以2S为质控警告限，3S为失控限，绘制质控图，判断是否在控。
血清钙测定实验报告
一、实验目的1. 了解血清钙测定的原理和方法。
2. 掌握离子选择电极法测定血清钙的实验操作步骤。
3. 学会运用实验数据进行计算和分析。
二、实验原理血清钙是维持人体生理功能的重要离子，参与多种生理活动。
血清钙的测定方法有比色法、原子吸收法、离子选择电极法等。
本实验采用离子选择电极法测定血清钙，通过测定钙离子在电极上的电位变化，间接计算出血清中的钙离子浓度。
三、实验材料1. 仪器：离子选择电极仪、电子天平、离心机、移液器、比色皿等。
2. 试剂：钙离子标准溶液、去离子水、pH缓冲液、离子强度调节液、电极清洗液等。
四、实验步骤1. 准备工作（1）开启离子选择电极仪，预热30分钟。
（2）用去离子水清洗电极，然后用pH缓冲液清洗电极，最后用离子强度调节液清洗电极。
（3）将电极插入待测血清中，调整电极位置，使其稳定。
2. 标准曲线的绘制（1）取不同浓度的钙离子标准溶液，分别加入比色皿中。
（2）将比色皿放入离子选择电极仪中，读取电极电位。
（3）以钙离子浓度为横坐标，电极电位为纵坐标，绘制标准曲线。
3. 血清钙的测定（1）取血清样本，用移液器吸取适量血清，加入比色皿中。
（2）将比色皿放入离子选择电极仪中，读取电极电位。
（3）根据标准曲线，计算出血清中的钙离子浓度。
4. 结果计算与分析（1）计算各实验组的钙离子浓度平均值。
（2）分析实验数据，得出结论。
五、实验结果1. 标准曲线的绘制根据实验数据绘制标准曲线，如图1所示。
图1 钙离子标准曲线2. 血清钙的测定根据实验数据，得出各组血清钙离子浓度如下表所示：表1 血清钙离子浓度测定结果组别 | 钙离子浓度（mmol/L）----|---------------------1 | 2.452 | 2.583 | 2.504 | 2.605 | 2.55六、结论本实验采用离子选择电极法测定血清钙，通过绘制标准曲线和测定血清样本的电极电位，计算出血清中的钙离子浓度。
实验结果表明，该方法具有较高的准确性和可靠性，可用于临床血清钙的测定。
血清钙的测定思考与讨论
血清钙的测定思考与讨论血清钙的测定主要通过化学方法进行，常用的方法包括比色法、螯合滴定法和离子选择电极法。
比色法是一种常见且简单的方法，通过与钙离子形成彩色复合物来测定血清钙的浓度。
螯合滴定法是利用螯合剂与血清中的钙离子产生定量反应，通过滴定剂的用量计算出血清钙的浓度。
离子选择电极法则是通过测量电极与血清中钙离子浓度的电位差来确定血清钙水平。
这些方法各有优劣，临床上根据需要选择适合的测定方法。
血清钙的测定受到多种因素的影响，其中包括血清蛋白浓度、血pH 值、甲状旁腺激素（PTH）水平等因素。
血清蛋白与钙离子结合形成蛋白钙复合物，这部分复合物无法被测定方法检测到，从而影响测定结果。
血pH值的改变也会影响血清钙的测定，例如酸中毒会使血清钙升高，碱中毒则会使血清钙降低。
此外，甲状旁腺激素的分泌与降解也会调节血清钙的水平，因此在测定血清钙时需要考虑这些因素的影响。
临床上，血清钙的测定常用于骨质疏松症、甲状旁腺功能异常、肾功能不全等疾病的诊断和治疗监测。
血清钙水平的异常可以提供重要的诊断线索，帮助医生确定疾病的类型和程度。
例如，骨质疏松症患者的血清钙水平常常降低，而甲状旁腺功能异常患者的血清钙水平可能升高或降低。
通过定期测定血清钙的水平，可以监测疾病的进展和治疗效果，指导临床治疗。
总结而言，血清钙的测定对于维持骨骼健康、神经传导、肌肉收缩等生理功能具有重要作用。
准确测定血清钙的水平需要选择适合的测定方法，并考虑多种影响因素。
临床上，血清钙的测定对于诊断和监测多种疾病具有重要意义。
通过血清钙的测定，可以提供重要的诊断线索，指导临床治疗。
因此，我们需要重视血清钙的测定，以保障患者的健康。
血清钙检测试剂盒(甲基麝香草酚蓝比色法)
仅供科研版本号：171227 血清钙检测试剂盒(甲基麝香草酚蓝比色法)【产品组成】【保存条件】4℃,室温，避光，12个月【产品概述】钙(Calcium)是一种金属元素，常温下呈银白色晶体，动物的骨骼、蛤壳、蛋壳都含有碳酸钙。
检测生命体钙含量，主要通过检测钙离子浓度实现的。
用分光度法检测钙较为常见，该法需要合适的金属指示剂或选择性结合钙离子后引起变色的染料化合物，目前较为常用的染料有邻-甲酚酞络合铜(OCPC)、偶氮砷Ⅲ、甲基麝香草酚蓝等。
血清钙检测试剂盒(甲基麝香草酚蓝比色法)是利用溶液中钙离子在碱性条件下能与甲基麝香草酚蓝(MTB)结合，生成蓝紫色的复合物，加入镁离子螯合剂，去除镁离子背景干扰，通过分光光度计检测610nm 处吸光度，根据公式计算出总钙含量。
本试剂盒仅用于科研领域，不宜用于临床诊断或其他用途。
【使用方法】1、制备样品：①血浆、血清样品：血浆、血清按照常规方法制备，可以直接用于本试剂盒的测定，-20℃冻存，用于Ca的检测。
②细胞或组织样品：取恰当细胞或组织进行匀浆，低速离心取上清，-20℃冻存，用于Ca的检测。
③高浓度样品：如果样品中含有较高浓度的Ca，可以使用ddH2O稀释，不宜使用普通蒸馏水稀释。
④(选做)样品准备完毕后可以用BCA蛋白浓度测定试剂盒测定蛋白浓度，以便于后续计算单位蛋白重量组织或细胞内的Ca含量。
2、配制Ca显色工作液：临用前，取Ca Assay buffer和MTB显色液等量混合，即配即用，4℃避光保存，不宜久置。
3、Ca加样：选用经稀盐酸处理及去离子水清洁的干燥试管或者一次性无菌聚乙烯离心管，按照下表设置空白管、标准管、测定管，溶液应按照顺序依次加入，并注意避免产生气泡。
如果样品中的钙离子含量过高，可以减少样品用量或适当稀释后再进行测定，样品的检测最好能设置平行管。
南京森贝伽生物科技有限公司网址：/第1页4、Ca测定：混匀，室温静置5min，以空白管调零，比色杯光径1cm，分光光度计测定标准管、测定管610nm处吸光度。
血清总钙(Ca)—生化检测项目
血清总钙（Ca）一、检测原理血清中钙在PH5.9时与试剂中偶氮胂III反应生成紫色的复合物，其在658nm或694nm波长处的吸光度与样品中钙的浓度成正比，从而求得血钙的浓度。
二、参考区间血清：2.03—2.54mmol/L三、临床意义1、血清钙升高：1）原发性甲状旁腺功能亢进，产生过多的甲状旁腺素，多见于甲状旁腺腺瘤，X线检查可见骨质疏松等情况。
2）甲状旁腺素异位分泌：某些恶性肿瘤可以分泌甲状旁腺素，如肾癌、支气管癌等。
但此种情况如未发现原发癌瘤，则很难诊断。
3）恶性肿瘤骨转移：是引起血钙升高最常见的原因。
恶性肿瘤伴有骨转移时有大量骨质破坏，而肾和肠又不能及时清除过多的钙，遂引起高血钙。
4）维生素D中毒长期大量服用维生素D引起，但此种情况是可以避免的。
5）其他：高血钙还可见于类肉瘤病、肾上腺功能不全、急性肾功能不全、酸中毒、脱水等情况。
2、血清钙减低：①甲状旁腺功能低下：见于原发性甲状旁腺功能低下、甲状腺切除手术后、放射性治疗甲状腺癌时伤及甲状旁腺等情况。
血清钙可降到1.75mmol/L以下，血磷可增高。
②维生素D缺乏：食物中缺乏，阳光照射少，消化系统疾患等，使血钙血磷均下降，使得钙、磷乘积下降。
婴幼儿缺乏维生素D可引起佝偻病，成人引起骨软化病。
③新生儿低钙血症：是新生儿时期常见惊厥原因之一。
④长期低钙饮食或吸收不良：严重乳糜泻时，食物中的钙与未吸收的脂肪酸结合，生成钙皂，排出体外，造成低钙。
⑤严重肝病、慢性肾病、尿毒症、远曲小管性酸中毒等时血清钙可下降，血浆蛋白减低时可使非扩散性钙降低。
⑥血pH可影响血清游离钙浓度。
血清钙的测定_实验报告
一、实验目的1. 掌握血清钙测定原理和方法。
2. 学会使用钙测定试剂盒进行血清钙的定量分析。
3. 了解血清钙测定的临床意义。
二、实验原理血清钙测定是通过化学法、原子吸收光谱法或酶联免疫吸附测定（ELISA）等方法，检测血清中钙离子的浓度。
血清钙是维持人体生理功能的重要物质，参与骨骼的形成、神经传导、肌肉收缩等生理过程。
血清钙浓度异常可能导致多种疾病，如佝偻病、骨质疏松、高钙血症等。
因此，血清钙测定对于临床诊断和治疗具有重要意义。
本实验采用钙测定试剂盒，采用酶联免疫吸附测定（ELISA）方法进行血清钙的定量分析。
三、实验材料1. 实验仪器：酶标仪、离心机、微量移液器、吸管、试管等。
2. 实验试剂：钙测定试剂盒（包括标准品、酶联试剂、洗涤液、底物、终止液等）、血清样品等。
3. 实验对象：健康志愿者。
四、实验步骤1. 标准曲线绘制：将标准品按试剂盒说明书要求进行稀释，配制标准系列。
将标准系列、待测血清样品分别加入酶标板孔中，加入酶联试剂，室温孵育。
加入底物，室温孵育。
加入终止液，终止反应。
使用酶标仪在特定波长下测定各孔吸光度值，以标准品浓度为横坐标，吸光度值为纵坐标，绘制标准曲线。
2. 待测血清样品测定：将待测血清样品按试剂盒说明书要求进行稀释，加入酶标板孔中，加入酶联试剂，室温孵育。
加入底物，室温孵育。
加入终止液，终止反应。
使用酶标仪在特定波长下测定各孔吸光度值。
3. 结果计算：根据标准曲线，查得待测血清样品的钙离子浓度。
五、实验结果1. 标准曲线绘制：根据标准曲线绘制结果，计算出标准曲线的相关系数（R²）为0.999，表明标准曲线拟合良好。
2. 待测血清样品测定：根据标准曲线，查得待测血清样品的钙离子浓度为2.5 mmol/L。
六、实验讨论1. 血清钙测定结果：本次实验测得待测血清样品的钙离子浓度为2.5 mmol/L，处于正常范围内。
表明该受试者血清钙水平正常。
2. 影响血清钙测定的因素：血清钙测定结果受多种因素影响，如样品采集、处理、储存、仪器设备、试剂质量等。
Ca与信号09
DHPR:二氢吡啶受体 RYR1:兰尼碱受体
Regulation of RyR
Activation: caffeine, ryanodine (nM),
CICR,(Ca –induced calcium release)
phosphorylation…
Inhibition: ryanodine (M), ruthenium red(钌红),Mn2+…,
特点 去极化至-50mV时开放
低电导 tiny conductance（5-8pS） 失活快 transient 阻断剂：Ni2＋
mibefradil（咪贝地尔）
IcaT
IcaL
Ica.L和Ica.T的激活与失活曲线
A:I-V曲线 B:激活与失活曲线
Regulation of L-type Ca2+ channels :
?
[Ca2+]o 10-3 M
Two primary sources:
1. External Extracellular Ca2+
2. Internal ER/SR
[Ca2+]i 10-7 M [Ca2+]i 10-5 M
1. External
Ca2+ influx from extracellular fluid through:
(1) Ryanodine receptor (RyR): mediates the efflux of Ca2+ from the SR and plays a central role in excitation-contraction (E-C) coupling.
特点
1.所需钙阈值较低
钙标准操作程序
钙标准操作程序1.目的规范钙（CA）检测试验，确保检测结果准确性和重复性。
2．范围本操作规程适用于生化室工作人员、实习人员、进修人员的操作前培训。
3.术语4．测定原理4.1测定方法：终点法。
4.2测定原理：偶氮胂Ⅲ比色终点法。
钙与偶氮胂Ⅲ在中性条件下形成蓝色复合物，显色强度与钙浓度成正比。
加入8-羟基喹啉-5-磺酸掩蔽镁的干扰5.标本5.1标本种类：新鲜无溶血血清。
5.2标本采集：见生化标本采集程序。
6.试剂6.1试剂来源：宁波瑞源试剂。
6.2宁波瑞源试剂6.2.1组成包装规格：R1 60ml×66.2.2试剂准备试剂为液体单试剂，开瓶即可使用。
6.2.3试剂稳定性原装试剂在2～8℃避光保存，稳定期12个月。
试剂开瓶载机2～8℃稳定18天。
7.仪器参数设定AU2700参数设定：宁波瑞源试剂.仪器参数设定具体参见试剂厂家提供的相应仪器参数说明书.8．校准：具体参见临床生化校准程序8.1 校准条件：8.1.1仪器光路系统经过光路保养或更换光源等重要部件后。
8.1.2仪器经过大保养后。
8.1.3挪动仪器的安装地点。
8.1.4更换试剂批号。
8.1.5室内质控失控。
8．2 AU2700宁波瑞源试剂系统的校准：8.2.1 准备：宁波瑞源配套校准物.8.2.2 保存和稳定性：原校准品在2～8℃保存一个月时间，-20℃稳定使用至有效期8.2.3保存位置：低温冰箱-20℃。
8.2.4操作步骤：蓝色样本架的1号位置放蒸馏水；黄色样本架的9号位置放配套定标液→仪器主画面[USER] →[Calibration] →[选择校准项目]→[START]→[YES]。
9．室内质控及失控纠正：见临床生化室内质控程序9．1质控物来源：柏乐液体指控品（批号：45612/45613）。
9．2质控物储存条件及准备：-15～-20℃保存至有效期，从低温冰箱取出后室温平衡30分钟。
9．3质控规则：见生化室内质量控制程序。
9．4失控纠正：见室内质控失控记录本10．临床标本测定：按生化标本检测程序进行。
比色法测定
比色法测定 生物试样中钙的含量
1.钙在生物中的生理功能及其应用 钙在生物中的生理功能及其应用 2.实验原理简介 实验原理简介 3实验方法及步骤 实验方法及步骤
钙在生物中的生理功能及其应用
钙与磷酸一起存在于骨骼中， 钙与磷酸一起存在于骨骼中，在无机质中它是生 物中含量最多的。作为电解质和钾、 物中含量最多的。作为电解质和钾、钠一起分布在体 液中，维持着各种重要的生理功能. 液中，维持着各种重要的生理功能. 对于细胞渗透压的调节，钙具有使之减小的作用。 对于细胞渗透压的调节，钙具有使之减小的作用。 另外在增加肌肉紧张性的肌肉收缩方面也起着重要作 钙是使神经系统和肌肉兴奋的重要离子之一， 用。钙是使神经系统和肌肉兴奋的重要离子之一，另 作为酶的活性化成份， 外，作为酶的活性化成份，它是起血液凝固和消化作 用的重要成分。在内科领域中，对骨科、消化系统、 用的重要成分。在内科领域中，对骨科、消化系统、 循环系统、 内分泌、代谢、血液、 循环系统、肾、内分泌、代谢、血液、神经等病患的 病态生理起着重要的作用. 病态生理起着重要的作用.
标准曲线的绘制：分别取该浓度为2.5
、5.0、 7.5、10.0、15.0、20.0毫克每分升的标准溶液 10毫升加入2.0毫升缓冲溶液2，加入1.0毫升发 色溶液，摇匀后。放置5分钟，再570毫微米波 长处对照试剂空白，测定吸光度。以纵轴为吸 光度，横轴为钙浓度绘制工作曲线 缓冲溶液，摇匀后，加入1.0毫升发色溶液，摇 匀，在570毫微米波长处，对照试剂空白测定 吸光度。由标准工作曲线求出血清中钙的浓度。
在体液中， 在体液中，钙在达到动态平衡的一定 的狭窄范围里，浓度是一定的， 的狭窄范围里，浓度是一定的，此范围 的微小变化，可作为诊断疾病的标准。 的微小变化，可作为诊断疾病的标准。 如上所述，在体液、生物试样， 如上所述，在体液、生物试样，特别是 血清中，钙浓度的变化， 血清中，钙浓度的变化，在临床上有重 要意义， 要意义，所以它是临床检查上必须测定 的元素。 的元素。
16血清钙测定
16血清钙测定一．目的钙离子的生理功能可概括为降低毛细血管壁和细胞膜的通透性，降低神经肌肉的兴奋性，维持正常的神经冲动，参与肌肉收缩，维持心肌的节律性，参与凝血及激活一些酶。
血液中的钙大约50%处于游离状态，能透过毛细血管进入细胞间液称为扩散钙，扩散钙具有生理效应。
其余50%与蛋白质结合，不能透过毛细血管壁，不具有生理功能，称为非扩散钙。
通常所称血钙是指总钙而言。
二．测定方法邻甲酚酞络合铜（OCPC ）比色法三．原理在PH 为9.7的溶液中,OCPC 在8-羟基喹啉存在下与血清钙作用, 生成紫红色络合物, 与同样处理的钙标准液相比, 计算血钙含量。
四．标本1.静脉抽取病人空腹血，置于洁净干燥试管或含促凝剂的真空管内。
2. 采血后应立即送到检验科生化室。
3. 样品收到后立即分离血清，不能及时测定的血清应于2-80C 保存。
4．严重溶血或脂血的标本不能测定。
五．设备及试剂1．RA —1000全自动生化仪。
2．上海长征公司血清钙试剂。
3．血清钙试剂贮存于2—8℃冰箱。
六．操作步骤1．样本的准备：将编好号的样品离心，取血清加入样品杯放到样品盘的规定位置，再把样品盘放到仪器中相应位置。
2．试剂的检查：每天测定前先检查各种试剂的数量、效期、定标等情况，认无误后方可进行测定。
3．操作方法：详见RA —1000生化仪操作手册。
七．质量控制每天操作过程中应使用Aalto Scientific公司的生化校准品至少做一次室内质控，每年定期参加海南临检中心所组织的室间质评。
八、干扰因素1、本测定不能用EDTA-Na 2及草酸盐作抗凝剂的标本。
2、邻甲酚酞络合铜试剂灵敏度很高，所以试管和器皿如有微量钙污染即会影响测定，故此测定最好使用一次性试管器皿。
九、参考区间成人:2.12--2.75mmol/L儿童:2.50—3.00mmol/L十、实验室解释1、血钙增高常见于:甲亢、骨肿瘤、大量应用VitD 治疗。
2、血钙降低更为常见：甲减、VitD 缺乏症，婴儿手足搐溺及皮质软化症，吸收障碍（如：长期不合理的饮食搭配，乳糜泻等），肾病，大量输入枸橼酸盐抗凝血。
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血清钙Ca比色法测定
1 检验目的
指导本室工作人员规范操作本检测项目，确保检测结果的准确。
2 实验原理
在碱性条件下，加入8-羟基喹啉能防止镁和铁的干扰钙离子的测定情况下，Ca2+和邻甲酚酞络合酮形成紫色复合物钙 +O-CPC 碱性环境钙－O-CPC复合物
其钙离子与邻甲酚酞络合酮复合物的颜色与钙浓度成正比，可用利用其吸光度的变化来测定钙离子的含量。
3 标本采集
3.1 病人准备：无特殊要求。
3.2 类型：血清、肝素血浆或尿液。
3.3 标本存放：血清/血浆稳定性：20～25℃保存可稳定7天；4～8℃保存可稳定3周；-20℃保存可稳定8个月。
尿液稳定性：20～25℃保存可稳定2天；4～8℃保存可稳定4
天；-20℃保存可稳定3个月；对24h尿液标本加浓盐酸10ml，并加热标本，使草酸钙溶解。
3.4 标本运输：室温条件下运输
3.5 标本拒收标准：细菌污染的不能做测定。
4. 实验材料：
4.1 试剂：上海罗氏诊断产品有限公司CA试剂盒,国械注进20142405056
YZB/GER 5724-2014）
4.1.1 试剂组成
R1 氨基乙醇缓冲液:1mol/L，pH10.6
R2 邻甲酚酞络合酮:0.3mmol/L;8－羟基喹啉:13.8mmol/L;盐酸:122mmol/L
4.1.2 试剂准备：试剂为即用式。
4.1.3 试剂稳定性与贮存：15－25°C下保存期限：见试剂标签上的有效期
机上稳定期：42天。
4.1.4 变质指示：当试剂有浊度时，表明有细菌污染，不能继续使用。
4.2 校准品：使用罗氏多项生化校准品提供的Ca校准品对自动分析仪进行校准。
4.3 质控品：使用正常值、病理值复合控制品。
5 仪器
AU2700生化分析仪，罗氏P800生化分析仪, 西门子ADVIA-2400生化分析仪，东芝TBA-120生化分析仪。
6 操作步骤
6.1 样品的准备：将标好号的样品离心后放到仪器规定的位置。
6.2 试剂的检测：仪器开机后，检查各种试剂的位置，体积等确认无误后方可进行测定。
6.3 项目基本参数：参见生化检验AU2700生化分析仪，罗氏P800生化分析仪, 西门子ADVIA-2400生化分析仪，东芝TBA-120生化分析仪项目测定参数。
6.4仪器操作步骤：参见生化检验AU2700生化分析仪，罗氏P800生化分析仪, 西门子ADVIA-2400生化分析仪，东芝TBA-120生化分析仪操作规程。
7 质量控制
在每一批标本中都应把非定值血清水平I与II质控做为未知标本进行分析，以2S为质控警告限，3S为失控限，绘制质控图，判断是否在控。
8 计算方法
以Ca复合校准品校准仪器后，在病人结果可报告范围内，仪器直接报告可靠的检测结果，以mmol/L报告。
9 参考值范围
血清/血浆： 2.15-2.55 mmol/L
尿液： 2.5-8.0mmol/24h（注：各实验室应有自己的参考范围。
）
参考值因性别、年龄、饮食和地域的不同而有所差别。
根据好的实验室经验，每个实验室应建立自己的参考值。
我室参考值2.11-2.70mmol/L
10 临床意义
钙测量用于诊断和治疗副甲状腺病，某些骨病，慢性肾病和手足抽搐（间歇性肌肉收缩或痉挛）等。
尽管体内超过99%的钙存在于骨骼和牙齿，临床上最关心血液里的钙。
骨骼作为一个储存器，通过释放钙防止低血钙和吸收钙防止血清钙水平过高，保持血清钙的相对稳定。
饮食中钙的含量增加，吸收钙的百分比就减少，因此，吸收钙的数量能够保持相对稳定。
在高钙饮食中钙吸收的轻微增加被反映在增加的肾排泄中。
钙在许多细胞功能中起着重要作用，细胞内如肌肉收缩和糖原代谢，细胞外如骨钙化、凝血以及神经冲动传递。
血浆钙有三种不同的形式：游离离子、和蛋白结合以及与阴离子（如磷酸根、柠檬酸根和碳酸氢根等）形成复合物。
总钙水平的降低与多种疾病有关，如骨病（尤其是骨质疏松症），肾病（特别是透析患者），肠道吸收不良以及甲状腺功能减退。
总钙水平升高为甲状旁腺机能亢进，转移性恶性肿瘤及肉瘤样恶性病变。
在预防骨质疏松进行钙的补充时，钙的检测有助于临床监控。
11 操作性能
11.1 线性范围：血清/血浆：0.05-5.00 mmol/L (0.2-20 mg/dL)；尿液：0.12-12 mmol/L (0.48-48 mg/dL)。
11.2按照内部协议使用人样本和质控品检测其可重复性。
血清/血浆：重复性（n=21），中间精密度（每批3 管，每天1批，21天）；尿液：重复性（n=21），中间精密度（每批3 管，每天1批，21天）；下面为得到的结果：
血清/血浆
重复性批间精密度
均值mmol/L，mg/dL 变异系数均值
mmol/L，
mg/dL
变异系
数
Precinor
m U
2.28，9.17 0.7 2.27，9.12 1.6
Precipat h U 3.30，13.26 0.4 3.27，
13.13
0.8。