微生物检验第二十六章 螺旋体及检验讲义

第二十六章螺旋体及检验

本章内容

一、概述

二、疏螺旋体属

（一）伯氏疏螺旋体

（二）回归热螺旋体

（三）奋森螺旋体

三、钩端螺旋体

四、密螺旋体属

梅毒螺旋体

一、概述

螺旋体是一类细长、柔软、弯曲呈螺旋状，运动活泼的原核细胞型微生物。

基本结构与细菌相似：

原浆柱=细菌菌体，由细胞壁，胞质膜及胞质内容物组成，胞质中含有核质（原始核）；

中轴丝=螺旋体的运动器官；

外膜=细菌荚膜相当。

螺旋体革兰染色阴性，但着色较困难。

以二分裂方式繁殖，对抗生素敏感。螺旋体所致疾病主要有性传播疾病和自然疫源性疾病。

螺旋体科有8个属，其中致病性螺旋体主要有3个属：疏螺旋体属，钩端螺旋体属，密螺旋体属。

二、疏螺旋体属

又称包柔螺旋体属。

螺旋稀疏，有3～10个螺旋，不规则呈波纹状，运动活泼。

对人致病的主要有伯氏疏螺旋体、回归热螺旋体和奋森螺旋体。

（一）伯氏疏螺旋体

生物学特性

形态：螺旋稀疏，运动活泼。

染色：G-，不易着色。Giemsa染色呈紫红色，Wright染色呈棕红色。

培养特性

营养要求：高，需长链饱和与不饱和脂肪酸、葡萄糖、氨基酸和牛血清蛋白等。

气体环境：微需氧，5%～10%CO2促进生长；

温度环境：适宜温度35℃；

菌落特征：生长慢；液体培养基中需培养2～3周可观察到生长情况。

微生物检验

标本采集：早期取皮损组织、淋巴结抽出液、血液、关节滑膜液、脑脊液和尿液等。

形态学检查：染色镜检；暗视野显微镜观察标本中螺旋体的形态和运动。

分离培养：改良的Kelly（BSK）培养基，33～35℃孵育。

抗体检测：间接免疫荧光法、ELISA、免疫印迹技术。

核酸检测：PCR

动物实验

致病性及临床意义

莱姆病的病原体。

自然疫源性传染病。储存宿主主要是野生或驯养的哺乳动物。主要传播媒介是硬蜱，叮咬部位出现移形性红斑。未经治疗者发展至晚期主要表现为慢性关节炎、慢性神经系统或皮肤异常。

（二）回归热螺旋体

回归热是一种由节肢动物传播的、有周期性反复发作的急性传染病。

引起该病的疏螺旋体有两种：回归热螺旋体，以虱为传播媒介，引起流行性回归热；赫姆疏螺旋体，以蜱为传播媒介，引起地方性回归热。

（三）奋森螺旋体

革兰染色阴性，专性厌氧。

常与梭杆菌寄生于人类口腔牙龈部。一般不致病，只有当人体抵抗力显著降低时，这两种菌大量繁殖，协同引起咽峡炎、牙龈炎、溃疡性口腔炎等。

三、钩端螺旋体

生物学特性

形态：细长丝状圆柱形，螺旋盘绕细密而规则；在暗视野显微镜下，似细小珍珠排列成的细链，一端或两端弯曲成钩状。运动活泼，沿长轴作旋转、扭转及菌体伸缩匍匐状运动，因而常使菌体呈C、S、8等字形。

染色：G-，不易着色。常用镀银染色法及荧光抗体染色法。Fontana镀银染色法染成深褐色。

培养特性

营养要求：较高；

气体环境：需氧；

温度环境：28～30℃；pH7.2～7.4，低于6.5、高于8.4生长不良。

菌落特征：

液体培养基：表面1cm内的部位生长最佳，28℃培养1周左右，呈半透明云雾状混浊。

含有兔血清（如Korthof培养基）和含白蛋白、脂肪酸的培养基：28℃培养2周后形成菌落。

抵抗力

耐冷，不耐热和干燥。对化学消毒剂极敏感。对青霉素、金霉素及庆大霉素极敏感，但对磺胺类药物耐药。

微生物检验

标本采集：从临床标本、携带者和自然界的水中分离获得。发病1周内血液的阳性率高，1周后尿和脑脊液等的阳性率高。

形态学检查

分离培养

抗体检测：间接免疫荧光法、ELISA、免疫印迹技术。

核酸检测：PCR。

动物实验

致病性及临床意义

钩体病是一种典型的人、畜共患性疾病及自然疫源性疾病。临床常见的有黄疸出血型、流感伤寒型、肺出血型、脑膜脑炎型、肾功能衰竭型、胃肠炎型等。

鼠类和猪是最常见的储存宿主。钩体在感染动物的肾中长期存在，持续随尿排出，污染水源和土壤，人类主要感染途径是接触了疫水。

四、密螺旋体属

螺旋细密，有8～14个规则的螺旋，两端尖。

分致病性和非致病性两大类。对人致病的密螺旋体有苍白密螺旋体和品他密螺旋体两个种。苍白螺旋体又分为3个亚种：苍白亚种、地方亚种和极细亚种，它们分别引起人类梅毒、地方性梅毒和雅司病等。

梅毒螺旋体——生物学特性

形态与结构

形态：密螺旋体，菌体纤细，两端尖直，有8～15个呈锐角弯曲而规则的螺旋；在暗视野显微镜下观察，运动活泼，方式有蜿蜒前进，沿纵轴旋转或前后移行。

染色：不易着色，常用Fontana镀银染色法，染成棕褐色，菌体变粗易于查见。

培养特性

不能在人工培养基上生长繁殖。

抗原

特异性抗原：表面特异性抗原具属特异性，无种特异性。

类属抗原：可刺激机体产生沉淀素抗体或补体结合抗体。

抵抗力：

抵抗力极弱。对温度和干燥特别敏感。离体在外环境中1～2h即死亡。对常用化学消毒剂亦敏感。对青霉素、四环素、红霉素、庆大霉素均敏感。

梅毒螺旋体——微生物检验

标本采集：一期梅毒取硬下疳渗出液，二期梅毒取梅毒疹渗出液。

形态学检查：暗视野显微镜

核酸检测：PCR

血清学检测：

1）非密螺旋体抗原试验：多用牛心类脂质作为抗原，测定患者血清中的反应素（抗脂质抗体）。为非特异性试验。

①性病研究实验室试验（VDRL）；②快速血浆反应素试验（RPR）；③不加热血清反应素试验（USR）。

2）密螺旋体抗原试验：特异性试验。

①荧光密螺旋体抗体吸附试验（FTA-ABS）；②抗梅毒螺旋体抗体的微量血凝试验（MHA-TP）；③ELISA；

④免疫印迹试验。

梅毒螺旋体——致病性及临床意义

梅毒是由梅毒螺旋体引起的慢性传染病。可分为后天性梅毒（性接触或输血）和先天性梅毒（母婴胎盘）两种。