尿有机酸质谱检测方法
于嘉屏：尿有机酸检测的临床意义
AKBM
B6 BHIVA 生物素，B7
甲基丙二酸
亚胺甲基谷氨酸 犬尿氨酸 泛酸 吡哆酸
Methyl Malonate
Kynurenate Pantothenate Pyridoxate
MMA
B12
B6
FIGLU 叶酸 B5 B6
2. B族维生素状态
α-酮异戊酸 α-酮异己酸 α-酮甲基戊酸
甲基丙二酸 β-羟基异戊酸
脂肪酸代谢
1. 线粒体功能评估
肉碱缺乏的影响 从脂肪酸最有效的 产生能量的途径 （ATP）是通过线 粒体中的β-氧化. 肉碱和维生素B2在 运输这些脂肪酸穿 过线粒体膜时是必 需的.
己二酸 辛二酸 乙基丙二酸
如果尿中己二酸、辛二酸和乙基丙二酸升高，则告诉我们脂肪 没有到达线粒体，这样导致能量产生的下降和燃烧脂肪的问题 超重
6/18/2015
32
2. B族维生素状态
B族维生素不足可转化为 • • • • • • • • 疲劳和缺乏活力 降低处理压力的能力 情绪失衡和睡眠失调 降低专心和记忆 血糖调节困难 皮炎和皮肤疾病 贫血 心血管疾病
6/18/2015
33
6/18/2015
34
6/18/2015
35
2. B族维生素状态
2. B族维生素状态
与有机酸相关的辅因子需求
• B12： （升高）MMA、3-HPA • 叶酸： （升高）FIGlu、乳清酸 • 硫辛酸：（降低）戊二酸 （升高）AKIV、AKIC、AKBM、AKAA、丙酮酸 • Vc: （降低）尿黑酸 （升高）2-HPAA • Mg: （降低）焦谷氨酸、戊二酸 （升高）AKIV、AKIC、AKBM、3-HPA、喹啉酸、 AKAA、乳清酸、焦谷氨酸、丙酮酸 • Cu: （降低）尿黑酸 （升高）4-HPPA、MMA、3-HPAA
液相色谱－串联质谱法测定尿酸及与常规检测方法的比较
液相色谱－串联质谱法测定尿酸及与常规检测方法的比较张海晨;李水军;孙贺伟;宋云霄【摘要】Objective To establish a liquid chromatography-tandem mass spectrometry(LC-MS/MS) for serum uric acid, and to compare LC-MS/MS with clinical routine determination methods.Methods Uric acid-15 N2 was added as internal standard, serum samples were precipitated with acetonitrile and dried with nitrogen flow.A reversed-phase chromatographic separation was performed on Capcell C18 MG Ⅲ analytical column by using 5 mmol/L ammonium acetate plus 0.1% acetate acid in w ater and methanol(90 ∶10,v/v) as mobile phase.The flow rate was 0.3 mL/min. Uric acid and internal standard were monitored by a negative electrospray ion-tandem mass spectrometry system using ion transitions of 167 /124 amu (quantitation) and 167 /96 amu (qualitation) for uric acid and 169 /125 amu for uric acid-N2 .After being validated, the LC-MS/MS was compared with the uricase ultraviolet ( UV) method and uricase colorimetric (UC) method.Results The LC-MS/MS was validated over a concentration range of 30-952 μmol/L. Within-run and between-run precisions were 2.01%-6.23% and 4.55%-8.08%, respectively.The accuracy was 96.5%-103.4%.The retention time of uric acid was 1.5 min, and total run time was 3 min.The linear correlation formulas among LC-MS/MS, uricase UV method and uricase UC method were YUV =0.898XLC-MS/MS +2.15, r =0.978 and YUC =0.845XLC-MS /MS +22.15, r =0.983.The average biases were 1.56% ±0.65% between LC-MS/MS and the 15 NationalInstitute of Standards and Technology ( NIST) standard reference material and -0.34%-3.05% between LC-MS/MS and correctness verification samples, 2014 from the National Center for Clinical Laboratory.Conclusions Serum uric acid can be simply and accurately measured by LC-MS/MS.There is good comparability between LC-MS/MS, uricase UV method and uricase UC method.%目的：建立液相色谱－串联质谱（LC－MS／MS）检测血清尿酸的方法，并与临床常规生化方法进行比较，为临床实验室不同检测系统尿酸检测结果的一致性提供参考。
应用串联质谱筛查法诊断遗传代谢病8例分析
应用串联质谱筛查法诊断遗传代谢病8例分析王福顺;赵立明;王红芳;张立荣【摘要】@@ 遗传代谢病也称先天性代谢异常,包括氨基酸、有机酸、糖、脂肪、激素等多种代谢缺陷,系由于遗传性代谢途径缺陷,导致异常代谢物蓄积或生理必需物质的缺乏,从而出现一系列临床症状与体征[1].早期诊断存在一定困难,导致许多患儿不明原因死亡或漏诊误诊.近年来,随着新生儿筛查工作不断完善,特别是串联质谱分析在临床中的应用,使遗传代谢病早发现,早诊断,早干预成为可能.【期刊名称】《河北医科大学学报》【年(卷),期】2011(032)010【总页数】2页(P1224-1225)【关键词】代谢综合征X;串联质谱法;诊断【作者】王福顺;赵立明;王红芳;张立荣【作者单位】河北省迁西县人民医院儿科,河北,迁西,064300;河北省迁西县人民医院儿科,河北,迁西,064300;河北省迁西县人民医院儿科,河北,迁西,064300;河北省迁西县人民医院儿科,河北,迁西,064300【正文语种】中文【中图分类】R589遗传代谢病也称先天性代谢异常，包括氨基酸、有机酸、糖、脂肪、激素等多种代谢缺陷，系由于遗传性代谢途径缺陷，导致异常代谢物蓄积或生理必需物质的缺乏，从而出现一系列临床症状与体征［1］。
早期诊断存在一定困难，导致许多患儿不明原因死亡或漏诊误诊。
近年来，随着新生儿筛查工作不断完善，特别是串联质谱分析在临床中的应用，使遗传代谢病早发现，早诊断，早干预成为可能。
我县地处冀东北部山区，长期处于交通闭塞、经济落后状态，人口流动性差，近亲、区域内小范围婚姻繁衍后代现象较为严重，使得遗传代谢性疾病发病率高于平原地区。
本文拟通过近年来在我院就诊过的遗传代谢病8例阳性患者进行总结，以期为基层儿科医生在遗传代谢病诊治方面提供参考。
1.1 一般资料：2008年10月至今在我院就诊并诊断为遗传代谢性疾病患儿8例，男性6例，女性2例。
首次诊断时间最早为生后5d，最迟3岁。
气相色谱／质谱在有机酸尿症临床诊断中的应用
气相色谱／质谱在有机酸尿症临床诊断中的应用
孙琢琏;董振温
【期刊名称】《分析化学》
【年(卷),期】1991(19)1
【摘要】本文用气相色谱/质谱联用(GC/MS)建立健康幼儿尿中有机酸的正常代谢特征值,并检测出一例高乳酸尿症。
同时探讨了用羊水进行有机酸尿症早期临床诊断的应用前景。
【总页数】3页(P89-91)
【作者】孙琢琏;董振温
【作者单位】不详;不详
【正文语种】中文
【中图分类】R714.54
【相关文献】
1.尿中有机酸的毛细管气相色谱—质谱轮廓分析—用于苯丙酮尿症的诊断 [J], 郭Qing;刘慎如
2.尿素酶预处理-气相色谱-质谱法在甲基丙二酸尿症诊断中的应用 [J], 郝虎;宋元宗;肖昕;张春花;王自能
3.气相色谱-质谱法检测尿液与滤纸尿中有机酸含量的对比 [J], 杨江涛;林珊珊;钟沛强;戴子鹏;赵明;李强;钱俊
4.气相色谱-质谱联用分析在有机酸尿症筛查与诊断中的应用 [J], 宋金青;杨艳玲;孙芳;张月华;包新华;钱宁;王兰凤;秦炯;吴希如
5.干燥尿滤纸-气相色谱法诊断有机酸尿症 [J], 赵世萍;李其
因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
气相色谱-质谱法检测尿液与滤纸尿中有机酸含量的对比
Ｃｏ ｍ ｐａ ｒ ｉ ｓ ｏ ｎ ｏ ｆ ｔ ｈ ｅ ｏ ｒ ｇ ａ ｎｉ ｃ ａ ｃ ｉ ｄｓ ｄ ｅ ｔ ｅ ｃ ｔ ｉ ｏ ｎ ｒ ｅ ｓ ｕ ｌ ｔ ｓ ｏｆ ｕｒ ｉ ｎ ｅ ａ ｎｄ ｆ ｉ ｌ ｔ ｅ ｒ ｐａ ｐ ｅ ｒ ｕｒ ｉ ｎ ｅ ｂ ｙ ｇ ａ ｓ ｃ ｈｒ ｏ ｍａ ｔ ｏ ｇ ｒ ａ ｐｈ ｙ － ｍａ ｓ ｓ ｓ ｐ ｅ ｃ ｔ ｒ ｏ ｍｅ —
ｍａ ｌ ｃ ｈｉ ｌ ｄｒ ｅ ｎ ａｎ ｄ ｍａ ｄ ｅ ｉ ｎｔ ｏ ｔ ｈｅ ｕｒ ｉ ｎｅ ｆ ｉ ｌ ｔ ｅ ｒ ｐ ａ ｐｅ ｒ， ｔ ｈｅ ｎ ｔ ｒ ｅ ａｔ ｍｅ ｎ ｔ ｔ ｏ ｇｅ ｔ ｔ ｈｅ ｆ ｉ ｌ ｔ ｅ ｒ ｐ ａ ｐｅ ｒ ｕｒ ｉ ｎｅ ． Ｔ ｈｅ ｕｒ ｉ ｎａ ｒ ｙ ｍｅ ｔ ａ ｂ ｏｌ ｉ ｔ ｅ ｓ ｗｅ ｒ ｅ ｄ ｅｔ ｅ ｃ ｔ ｅ ｄ ｂｙ ＧＣ— Ｍ Ｓ ａ ｆ ｔ ｅ ｒ ｔ ｈｅ ｅ ｘ ｔ ｒ ａ ｃ ｔ ｉ ｏ ｎ ａ ｎｄ ｄｅ ｒ ｉ ｖａ ｔ ｉ ｚ ａ ｔ ｉ ｏｎ， ｔ ｈｅ ｎ ｃ ｏ ｍ ｐａ ｒ ｅ ｄ ｔ ｈｅ ｉ ｒ ｔ ｅ ｓ ｔ ｒ ｅ ｓ ｕ ｌ ｔ ｓ ．Ｒｅ ｓ ｕｌ ｔ ｓ Ｉ ｎ ６ ｃ ａ ｓ ｅ
检验 医学与临床 ２ ０ １ ５年 第 １ ２卷 增 刊 Ⅱ Ｉ ａ ｂ Ｍｅ ｄ Ｃ ｌ ｉ ｎ ， ２ ０ １ ５ ， Ｖｏ １ ． １ ２ Ｓ ｕ ｐ ｐ ｌ １ Ｉ
・
．
・ ９ ３ ・
论 著 ・
气 相 色谱 一 质 谱 法 检 测 尿 液 与滤 纸 尿 中有 机 酸 含 量 的对 比
（ Ｓｈ ｅ ｎ ｚ ｈ ｅ ｎ Ａｏ ｎ ｅ Ｍｅ ｄｉ ｃ ａ ｌ Ｌａ ｂ ｏ ｒ ａ ｔ ｏ ｒ ｙ Ｃ ｏ ． ＬＴＤ ， Ｓ ｈ ｅ ｎ ｚ ｈ ｅ ｎ， Ｇｕ ａ ｎ Ａｂ ｓ ｔ ｒ ａ ｃ ｔ ］ Ｏｂ ｊ ｅ ｃ ｔ ｉ ｖ ｅ Ｃｏ ｍｐ ａ ｒ ｉ ｓ ｏ ｎ ｏ ｆ ｔ ｈ ｅ ｄ ｉ ｆ ｆ ｅ ｒ ｅ ｎ ｃ ｅ ｏ ｆ ｏ ｒ ｇ ａ ｎ ｉ ｃ ａ ｃ ｉ ｄ ｓ ｃ ｏ ｎ ｔ ｅ ｎ ｔ ｂ ｙ ｇ ａ ｓ ｃ ｈ ｒ ｏ ｍａ ｔ ｏ ｇｒ ａ ｐ ｈ ｙ — — ｍａ ｓ ｓ ｓ ｐ ｅ ｃ — —
串联质谱遗传代谢病检测
结论
遗传代谢病：并不少见，尤其是苯丙酮尿症、Citrin 蛋白缺乏症、甲基丙二酸血症、丙酸血症、异戊酸血 症等，相对常见； 遗传代谢病：可快速诊断（串联质谱、气相色谱质谱 技术）； 遗传代谢病：可治疗，并且一部分疾病治疗效果较好； 遗传代谢病：可以产前诊断，在患儿母亲怀孕四个月 时抽羊水进行串联质谱、气相色谱质谱、基因检测。
2、热敷采血 部位3-5分钟
3、消毒并拭 干采血部位
4、针刺采血， 拭去第一滴血
5、单面轻压 滤纸取血浸透 点样环
6、按采样单 要求连续取血
气相色谱质谱尿液标本检测流程
尿有机酸检测采样要求
空腹晨尿，10-20mL 5*5大小滤纸2-3张，完全浸入尿液中后取出，自然晾干 晾干后装入标本带内，密封送检 若不能及时送检，请置于2-8℃保存
Carnitine Palmitoyltransferase Deficiency type II，
carnitine /Acylcarnitine translocase deficiency
Short Chain Acyl CoA Dehydrogenase Deficiency
Medium Chain Acyl CoA Dehydrogenase Deficiency Very Long Chain Acyl CoA Dehydrogenase Deficiency Short Chain Hydroxyacyl CoA Dehydrogenase Deficiency Long Chain Hydroxyacyl CoA Dehydrogenase Deficiency
Arginemia Hyperornithinemia、Hyperammonemia、
尿液有机酸气相色谱-质谱联用检测方法通则
尿液有机酸气相色谱-质谱联用检测方法通则1. 引言1.1 概述尿液是人体排泄废物的重要组成部分，其中包含了众多的有机酸。
这些有机酸在代谢过程中扮演着关键的角色，并且与许多疾病的发生和发展密切相关。
因此，准确、快速地检测和分析尿液中的有机酸对于疾病诊断、治疗以及健康监测具有重要意义。
1.2 文章结构本文将介绍一种尿液有机酸气相色谱-质谱联用检测方法通则，该方法通过将气相色谱和质谱技术相结合，实现了对尿液中有机酸的高效、灵敏度的定性和定量分析。
本文将围绕以下几个方面进行论述：首先介绍研究背景，概述尿液中有机酸的重要性及其与疾病之间的关系；然后详细阐述气相色谱-质谱联用检测方法的技术原理，包括样品制备与提取、仪器参数设置等；接着描述实验操作步骤，指导读者如何正确地进行样品的处理和分析；最后，从样品准备、方法优化和验证以及实际应用案例分析等方面对该方法进行结果与讨论，以得出结论并展望未来的研究方向。
1.3 目的本文旨在系统地介绍尿液有机酸气相色谱-质谱联用检测方法通则，使读者能够全面了解该方法的技术原理、操作步骤以及其在尿液分析领域中的应用。
通过阐述方法的优势与局限性，并结合具体案例分析，为读者提供参考和指导，以促进尿液有机酸分析领域的进一步发展和应用。
2. 尿液有机酸气相色谱-质谱联用检测方法通则2.1 研究背景尿液中的有机酸是反映人体代谢状态和疾病诊断的重要指标之一。
传统的尿液有机酸检测方法包括高效液相色谱法和紫外光吸收法，但这些方法存在分离效果不理想、准确性不高以及无法同时定性与定量等问题。
因此，开发一种快速、准确、灵敏且可靠的尿液有机酸分析方法具有重要意义。
2.2 技术原理尿液有机酸气相色谱-质谱联用检测方法是基于气相色谱（GC）与质谱（MS）仪器的结合，在样品经过特定前处理后进行分离和检测。
首先，通过适当的前处理步骤，如样品提取、衍生化反应等，将目标成分从尿液基质中提取出来，并转化为易于GC-MS分析的形式；然后，利用气相色谱柱对样品进行分离，将目标成分在柱上按照一定时间顺序逐渐分离出来；最后，通过质谱仪进行检测和定性与定量分析。
尿有机酸气相色谱
尿有机酸气相色谱尿有机酸的气相色谱分析是一种常用的方法，用于确定尿液中有机酸的种类和含量。
下面是一个详细的步骤：1. 样品准备：收集尿液样品，并通过离心等方法去除固体颗粒。
将尿液样品转移到一个干净的容器中，并尽快进行分析，以防止有机酸的降解。
2. 提取：将尿液样品中的有机酸提取出来。
可以使用固相萃取柱、液液萃取等方法进行提取。
选择适当的提取方法，以获得高纯度和高回收率的有机酸。
3. 衍生化：有机酸通常需要进行衍生化反应，以增强其在气相色谱中的检测性能。
常用的衍生化反应包括甲酯化、乙酰化等。
选择适当的衍生化试剂和反应条件，以确保有机酸能够成功衍生化。
4. 色谱条件设置：选择适当的气相色谱柱和色谱条件。
常用的气相色谱柱包括聚硅氧烷柱、聚酯柱等。
色谱条件包括进样温度、柱温、载气流速等。
根据有机酸的特性和目标分析的目的，选择合适的色谱条件。
5. 检测方法选择：根据有机酸的特性和目标分析的目的，选择合适的检测方法。
常用的检测方法包括质谱检测、火焰离子化检测器等。
质谱检测可以提供更高的灵敏度和选择性，但相对复杂和昂贵。
6. 校准曲线绘制：根据已知浓度的标准品，制备一系列浓度不同的有机酸标准溶液。
使用这些标准溶液进行色谱分析，绘制校准曲线。
根据校准曲线，可以计算出尿液样品中有机酸的浓度。
7. 样品分析：将提取和衍生化后的尿液样品注入气相色谱仪中进行分析。
根据校准曲线，可以计算出尿液样品中各种有机酸的浓度。
总之，尿有机酸的气相色谱分析需要进行样品准备、提取、衍生化、色谱条件设置、检测方法选择、校准曲线绘制和样品分析等步骤。
这些步骤的具体操作要根据实验室的设备和实验条件进行调整和优化。
气相色谱-质谱联用检测尿液8种有机酸实验室间质量的调查
量评价计划的前期研究工作，现将结果总结如下。 能力评价指南中的要求，用算法 Ａ 计算各组的稳健
平均值、稳健标准差及稳健变异系数［６］。
１ 对象与方法
１．１ 对象 选取全国 １４ 个省（市、自治区）１９ 家开 ２ 结果 展 ＧＣＭＳ 尿液有机酸检测的实验室作为调查对象， ２．１ 新生儿遗传代谢病 ＧＣＭＳ 检测项目的统计结 各实验室均自愿参加此次调查活动，将质控品以冷 果 质控尿液样品中，３－羟基丙酸、甲基丙二酸、戊 链运输的方式快递给各实验室。质控品由深圳爱湾 二酸、琥珀酰丙酮、３－羟基－３－甲基戊二酸、苯丙酮
·４４９·
酸、尿黑酸、４－羟基苯乳酸共 ８ 种有机酸的峰面积 与内标物十七烷酸峰面积的比值，以稳健平均值作 为测定的预期结果，见表 １。结果显示，在这 ２ 个批 号中，除 ４－羟基苯乳酸外，大部分有机酸的稳健变 异系数 高 于 ３０％，其 中 苯 丙 酮 酸 甚 至 达 到 了
。按 ９９．４８％ 照仪器和试剂分组后统计结果显示， Ｓｈｉｍａｄｚｕ ＧＣＭＳＱＰ ２０２０ 的变异系数较低，且非自 配试剂的变异系数相对较好（见表 ２、３）；此次调查 的 １８ 家实验室均选用衍生法进行样品前处理，因此 并未按照方法学分组统计。
基金项目：国家重点研发计划（２０１８ＹＦＣ１００２２００，２０１８ＹＦＣ１００２２０４）。
作者简介：杜雨轩，１９８８ 年生，女，博士研究生，研究方向：临床实验室管理。
：王治国，研究员， ： 。 通信作者
Ｅｍａｉｌ ｚｇｗａｎｇ＠ ｎｃｃｌ．ｏｒｇ．ｃｎ
临床检验杂志 年 月第 卷第 期 ， ， ， ２０１９ ６ ３７ ６ Ｃｈｉｎ Ｊ Ｃｌｉｎ Ｌａｂ Ｓｃｉ Ｊｕｎｅ ２０１９ Ｖｏｌ．３７ Ｎｏ．６
的高灵敏度，准确性高、特异性好、自动化分析过程
SF_Z JD0107007-2010 尿液中Δ9-四氢大麻酸的测定
尿液中Δ9-四氢大麻酸的测定发布中华人民共和国司法部司 法 鉴 定 管 理 局SF/Z JD0107007-2010前言本标准的附录A为资料性附录。
本标准由中华人民共和国司法部司法鉴定科学技术研究所提出。
本标准由中华人民共和国司法部归口。
本标准起草单位：中华人民共和国司法部司法鉴定科学技术研究所。
本标准主要起草人：向平、卓先义、沈保华、刘伟、卜俊、马栋、严慧。
尿液中Δ9-四氢大麻酸的测定1 范围本标准规定了尿液中Δ9-四氢大麻酸的测定方法。
本标准适用于尿液中Δ9-四氢大麻酸的测定。
本标准的方法检出限为50ng/mL。
2 规范性引用文件下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。
凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。
凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。
GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法（GB/T 6682-2008，ISO 3696：1987，MOD）GA/T 122 毒物分析名词术语第一篇免疫筛选法3 原理该法采用高度特异性的抗原-抗体反应的免疫胶体金层析技术，通过单克隆抗体竞争结合Δ9-四氢大麻酸偶联物和尿液中可能含有的Δ9-四氢大麻酸的原理，试剂盒含有被事先固定于膜上测试区（T）的Δ9-四氢大麻酸偶联物和被胶体金标记的抗Δ9-四氢大麻酸单克隆抗体。
4 试剂Δ9-四氢大麻酸尿液胶体金法试剂盒（THC-COOH）。
5 操作方法用吸管吸取尿液尿液，滴入试剂盒的样品孔中5滴（约150～200μL），３～５min后观察结果。
6 结果判定6.1 阳性仅质控区C出现紫红色带，而测试区T无紫红色带，表明尿液中Δ9-四氢大麻酸浓度在50ng/mL以上。
6.2 阴性质控区C及测试区T均出现紫红色带，表明尿液中Δ9-四氢大麻酸浓度在50ng/mL以下。
6.3 无效质控区C未出现紫红色带，结果无效，应重新检验。
甲基丙二酸质谱法
甲基丙二酸质谱法
甲基丙二酸质谱法是一种用于测定尿液或羊水中甲基丙二酸含量的方法。
在尿液中甲基丙二酸含量测定方面，使用超高效液相色谱仪三重四极杆质谱仪联用，通过内标、标准品及质控品对方法的线性、准确度及精密度进行考察，显示该方法线性良好，质控品测定准确度结果与理论值接近。
该方法具有前处理简便、分析速度快、灵敏度高、专属性强等特点，因此可用于尿液中甲基丙二酸含量测定。
在羊水中的甲基丙二酸检测方面，通过串联质谱技术可以检测羊水中的丙酰肉碱和乙酰肉碱水平，同时气相色谱质谱技术可以检测羊水中的甲基丙二酸和甲基枸橼酸水平。
这种检测方法在甲基丙二酸血症（MMA）的产前诊断中具有一定的应用效果。
用于尿液有机酸检测的气相色谱-质谱联用仪年度维护保养后的校准及性能验证
用于尿液有机酸检测的气相色谱-质谱联用仪年度维护保养后的校准及性能验证余晓英;张道杰【摘要】目的建立用于尿液有机酸检测的GCMS-QP 2010 Ultra气相色谱-质谱联用仪年度维护保养后校准及性能验证的方法,以确保检测系统性能持续满足检测需要.方法按照设备制造商要求及《台式气相色谱-质谱联用仪校准规范》对气相色谱质谱联用仪年度维护后进行校准;按照CNAS-CL02-A003《医学实验室质量和能力认可准则在临床化学检验领域的应用说明》对维护保养后的气相色谱-质谱联用仪分析性能进行验证.结果质量范围、质量准确性、分辨力、信噪比、重复性的校准结果均符合要求;室内质控物检测结果在控,留样再测结果一致.结论摸索出了用于尿液有机酸检测的气相色谱-质谱联用仪年度维护保养后的校准及性能验证方法,有利于为临床提供准确可靠的尿液有机酸检测结果.【期刊名称】《临床检验杂志》【年(卷),期】2019(037)003【总页数】4页(P233-236)【关键词】气相色谱-质谱联用仪;校准;性能验证;遗传代谢病【作者】余晓英;张道杰【作者单位】北京圣元惠仁医学检验所生化遗传室,北京101101;北京圣元惠仁医学检验所生化遗传室,北京101101【正文语种】中文【中图分类】R446遗传代谢病病因复杂，种类繁多，临床表现缺乏特异性，需依靠液相串联质谱（tandem mass spectrometry，MS／MS）及气相色谱-质谱联用（gas chromatograph mass spectrometry，GC-MS）分析技术等特殊生化分析技术辅助诊断。
利用GC-MS对尿中有机酸进行定性及定量分析，不仅是遗传代谢病诊断的重要手段，在疾病治疗监测中也起到重要作用［1］。
但用于尿液有机酸检测的GC-MS检测系统在实际应用中还有不少问题［2-3］，如：无国家药品监督管理局的注册仪器和配套试剂盒、无商品化的室内质控品、未见该检测系统的性能验证相关文献、不少实验室不知如何对检测系统进行校准等。
电感耦合等离子体质谱法检测尿酮注意事项
电感耦合等离子体质谱法检测尿酮注意事项
电感耦合等离子体质谱法（ICP-MS）是一种用于检测尿液中酮体的方法。
在使用该方法进行检测时，需要注意以下几点：
1、样品采集和处理：采集尿液时，应使用清洁、干燥的容器，并尽快送往实验室进行检测。
如果需要保存尿液样品，应将其放在4℃的冰箱中，并尽快处理。
在处理尿液样品时，应先将其进行酸化处理，以破坏尿液中的有机物，然后进行离心分离，去除其中的颗粒物和沉淀物。
2、干扰物质：尿液中的一些物质可能会干扰ICP-MS的检测结果，例如钙、磷、硅酸盐等。
因此，在检测前应对尿液样品进行适当的处理，以去除这些干扰物质。
3、仪器校准：在使用ICP-MS进行检测前，应进行仪器校准，以确保检测结果的准确性和可靠性。
校准时应使用标准溶液或已知浓度的尿液样品，以检查仪器的准确性和精密度。
4、操作注意事项：在操作ICP-MS时，应注意避免交叉污染和样品间的干扰。
此外，还应定期清洗仪器和样品管路，以防止样品残留和污染。
5、结果解读：对于ICP-MS的检测结果，应结合临床病史和其他实验室检查结果进行解读。
由于ICP-MS的检测结果可能会受到多种因素的影响，因此需要对结果进行综合分析，以确定患者的酮体水平是否异常。
总之，在使用电感耦合等离子体质谱法检测尿酮时，需要注意样品的采集和处理、干扰物质的影响、仪器校准、操作注意事项以及结果的解读等方面。
只有在遵循这些注意事项的情况下，才能获得准确可靠的检测结果。
串级质谱 氨基酸检测应用方案
串级质谱（MS/MS）是一种用于氨基酸检测的应用方案。
以下是该方案的一般步骤：
1. 样品制备：从待测样品（如血液、尿液等）中提取目标分子。
可以使用有机溶剂（如甲醇、乙腈）或
盐溶液（如磷酸盐缓冲液）进行提取。
2. 样品前处理：根据需要，可以使用化学方法（如酶切、酸解等）对样品进行前处理，以提高目标分子
的浓度或去除干扰物。
3. 质谱仪设置：将质谱仪设置为串级质谱模式（MS/MS）。
调整离子源和质谱仪参数，以达到最佳的信
号强度和分辨率。
4. 氨基酸序列测定：通过测定肽段的质量来推断氨基酸序列。
质谱技术具有高灵敏度、高分辨率、广泛
的质量范围和多样性的分析模式等优势，使其成为生物制药领域中氨基酸序列测定的首选方法。
5. 质量控制：在生物药物的生产过程中，质量控制是至关重要的一环。
质谱技术可以用于验证生产过程
中的每个阶段，确保生物药物的质量和一致性。
通过测定氨基酸序列，质谱技术可以检测和定量可能存在的变异、修饰和杂质，提供了关键的质量控制信息。
(征求意见稿)尿液有机酸气相色谱-质谱联用检测方法通则
（征求意见稿）尿液有机酸气相色谱-质谱联用检测方法通则尿液有机酸气相色谱质谱联用检测方法通则是一种用于检测尿液中有机酸的分析方法。
这种方法结合了气相色谱（GC）和质谱（MS）两种技术，能够提高分析的准确性、精确度和灵敏度。
下面将对尿液有机酸气相色谱质谱联用检测方法通则进行详细介绍。
首先，尿液有机酸气相色谱质谱联用检测方法通则的样品准备步骤包括尿液采样和前处理。
尿液采样的关键是收集新鲜的尿液样品，并尽量避免样品受到污染。
前处理步骤则是将尿液样品中的有机酸提取出来，并进行清洗和浓缩处理，以提高检测的灵敏度。
其次，尿液有机酸气相色谱质谱联用检测方法通则的分析步骤包括气相色谱和质谱的运行。
在气相色谱步骤中，样品提取物被注入到气相色谱仪中进行分离分析。
气相色谱仪通过控制温度和流速，将有机酸分离并送入质谱仪。
质谱仪则通过质量光谱和分子者破碎技术，对分离的有机酸进行定性和定量分析。
最后，尿液有机酸气相色谱质谱联用检测方法通则的质量控制步骤包括仪器校准和质量控制样品的使用。
仪器校准是确保仪器运行正常并能提供准确结果的重要步骤。
质量控制样品的使用是检测方法准确性和重复性的验证，可以用来监控整个检测过程的质量。
从技术角度来看，尿液有机酸气相色谱质谱联用检测方法的灵敏度高、选择性好，并且可以同时检测多种有机酸。
这种联用检测方法不仅能够提高分析的准确性，而且能够分析更低浓度的有机酸。
因此，在临床诊断、毒理学研究和食品安全等领域有着广泛的应用前景。
总之，尿液有机酸气相色谱质谱联用检测方法通则是一种有效的分析方法，能够提供准确、可靠的有机酸分析结果。
这种方法具有较高的灵敏度和选择性，已经在许多领域得到广泛应用。
随着仪器技术的不断进步和方法的不断完善，尿液有机酸气相色谱质谱联用检测方法在未来将有更广阔的应用前景。
(征求意见稿)尿液有机酸气相色谱-质谱联用检测方法通则
（征求意见稿）尿液有机酸气相色谱-质谱联用检测方法通则尿液有机酸气相色谱质谱联用检测方法是一种常用的检测方法，用于分析尿液中有机酸成分的含量和组成。
以下是对该方法通则的解释和意见。
首先，尿液有机酸气相色谱质谱联用检测方法的主要原理是利用气相色谱和质谱的联用技术，对尿液样品进行分离和定量化分析。
相较于传统的方法，这种联用检测方法具有高灵敏度、高选择性和高准确性的优势。
其次，尿液有机酸气相色谱质谱联用检测方法的应用范围十分广泛。
它可以用于临床医学领域，例如在疾病诊断、治疗监测和药物代谢研究中扮演重要的角色。
此外，在生物化学研究中，尿液有机酸气相色谱质谱联用检测方法也可以用于监测人体代谢产物在尿液中的浓度变化，以及分析尿液中有机酸的来源和代谢途径。
然而，尿液有机酸气相色谱质谱联用检测方法也存在一些问题和挑战。
首先，样品前处理的复杂性和耗时性可能导致分析的延迟。
其次，分析结果的准确性和可重复性需要综合考虑仪器性能、操作技巧和标准物质的使用等因素。
因此，为了确保分析结果的可靠性，需要对仪器进行校准和验证，同时也需要注意样品的采集、保存和处理等环节的规范性。
为了提高尿液有机酸气相色谱质谱联用检测方法的应用和发展，我们可以在以下几个方面进行努力。
首先，加强对尿液有机酸代谢机制的研究，以便更好地理解尿液有机酸的产生、代谢和排泄途径。
其次，引入新的技术手段和仪器设备，以提高分析效率和结果的准确性。
例如，可以探索新的色谱柱和质谱电离方式，以增加对有机酸组分的分离和鉴定能力。
此外，推动标准物质的研发和制备，以便进行质量控制和方法验证。
最后，促进方法的标准化和规范化，以提高方法的可比性和可复制性。
综上所述，尿液有机酸气相色谱质谱联用检测方法是一种重要的分析技术，具有广泛的应用前景和深远的意义。
为了推动这一领域的发展，需要加强研究、改进仪器设备和加强标准化工作。
通过持续努力，相信尿液有机酸气相色谱质谱联用检测方法将会为医学和生命科学领域带来更多的突破和进展。
质谱法是有机物结构分析的最重要方法
质量分析器
分子电离碎裂 离子的生成
进样系统
离子 按m/z分离
离子源
离子检测、记录
真空系统
质谱仪器对真空的要求
质谱仪内的气压：10－3～10－5 Pa 要求高真空的原因： 避免离子与其他粒子碰撞而改变运动轨道或能量及动量； 避免发生离子－分子反应； 防止电子轰击离子源中的灯丝烧断。 高真空对进样系统的特殊要求
气相色谱-质谱联用仪 gas chromatograph-mass spectrometer
LC／MS的联用始于70年代，90年代以来，由于大气压电离的成功应用以及质谱本身的发展，液相色谱与质谱的联用，特别是与串联质谱(MS/MS)的联用得到了极大的重视和发展。 LC-MS／MS已成为现代分析手段中必不可少的组成部分。 LC-MS／MS联用的优点非常显著，因为气相色谱只能分离易挥发且不分解的物质，而液相色谱则把分离范围大大拓宽了，生物大分子也能分离，LC与高选择性、高灵敏度的MS／MS结合，可对复杂样品进行实时分析，即使在LC难分离的情况下，只要通过MS1及MS2对目标化合物进行中性碎片扫描，则可发现并突出混和物中的目标化合物，显著提高信噪比。
分子离子的丰度主要取决与它的稳定性。
各类有机物分子离子稳定性顺序如下： 芳香族化合物、共轭烯烃、脂环化合物、硫醚、直链烃、硫醇、酮、胺、酯、醚、羧酸、支链烃和醇。
1
2
丰度与化合物类型匹配
一些典型化合物分子离子峰的相对强度
化合物名称
M+·相对强度 /%
化合物名称
M+·相对强度 /%
萘、喹啉
奇电子离子的判别
1
某化合物中若含偶数个氮原子，其分子离子的质量一定是偶数；若分子中含奇数个氮原子，则其分子量一定是奇数。
有机酸靶向检测方法
有机酸靶向检测方法一、引言有机酸是一类在生物体内广泛存在的代谢产物，具有重要的生理和病理意义。
准确检测有机酸对于了解生物体内代谢过程、疾病诊断和药物研发等方面具有重要意义。
本文将介绍一种有机酸靶向检测方法，主要包括样本采集、预处理、衍生化、富集、分离、检测、数据分析和结果解读等方面。
二、样本采集样本采集是检测有机酸的第一步，采集的样本可以是血液、尿液、组织等。
采集过程中应注意避免污染和变质，保证样本的代表性和真实性。
三、预处理预处理是去除样本中的杂质和干扰物质的过程，包括离心、过滤、蛋白沉淀等步骤。
预处理的目的是使目标有机酸更加纯净，降低干扰，提高检测的准确性。
四、衍生化由于有机酸本身不易挥发或不易电离，需要进行衍生化处理，使其转化为易于检测的化合物。
常用的衍生化方法有硅烷化、烷基化、酰化等，可以根据目标有机酸的性质选择合适的衍生化方法。
五、富集富集是将目标有机酸从样本中浓缩的过程，可以提高检测的灵敏度和准确性。
常用的富集方法有吸附、萃取、蒸馏等。
六、分离分离是有机酸靶向检测中关键的一步，常用的分离方法有气相色谱法、高效液相色谱法等。
选择合适的分离方法，可以有效地将目标有机酸与其他杂质分离，提高检测的准确性。
七、检测检测是确定目标有机酸含量的过程，常用的检测方法有质谱法、色谱法等。
选择合适的检测方法可以有效地测定目标有机酸的含量，为后续的数据分析和结果解读提供准确依据。
八、数据分析数据分析是对检测到的数据进行处理和解析的过程，包括数据清洗、统计分析和模式识别等步骤。
通过数据分析可以对样本中目标有机酸的含量进行定量和定性分析，从而得出有意义的结论。
九、结果解读结果解读是根据数据分析的结果对样本中目标有机酸进行解释和评价的过程。
在结果解读中需要注意排除干扰因素，正确理解检测结果的生物学意义，为疾病诊断和治疗提供科学依据。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
硅烷化
在GC-MS方法分析实际样品时，对羟基、胺基、羧基等官能团进行衍生化往往起着 十分重要的作用。
制备中通过硅烷化引入硅烷基取代分子中的活性氢，有以下作用： 1）活性氢被硅烷基化降低化合物极性，减少氢键的束缚，使其更容易挥发； 2）羟基、羧基等气相色谱特性不好，在一些通用的色谱柱上不出峰或峰拖尾，硅 烷化以后，情况改善。 3）活性氢位点减少后，化合物的稳定性更强； 4）待测物分子量增大，有利于使待测物和基质分离。
肟化反应
肟化反应是指含有羰基的化合物（如醛、酮类）与羟胺作用而生成含 有C=NOH基的化合物的反应。 肟化反应式：R2C=O+NH2OH→R2C=NOH+H2O 目的：改善支链酮酸的回收率。
萃取
萃取是利用物质在两种不互溶(或微溶)溶剂中溶解度或分配比的不同 来达到分离。
乙酸乙酯优势： 1）微溶于水 2）很好的溶解能力 3）挥发性强
尿滤纸片法气相色谱一质谱分析技术在遗传 性代谢病高危筛查诊断中的应用
诊断背景
遗传代谢病就是有代谢功能缺陷的一类遗传病，多为单基因遗传病，包括代谢大分 子类疾病：包括溶酶体贮积症、线粒体病等等，代谢小分子类疾病：氨基酸、有机 酸、脂肪酸等。
对代谢产物进行检测分析是筛查、诊断和鉴别诊断代谢缺陷病的主要方法。GC/MS 是由色谱分析技术和质谱分析技术组成，利用气相色谱仪的分离能力让混合物中的 组分分离，并用质谱仪鉴定分离出来的组分(定性分析)，计算出精确的量(定量分 析)。
去除尿素
尿素与有机酸在一定条件下会反应生成尿素脂，所以制备前要加入脲法是将一定的纯物质作为内标物加到一定量的被分析样品混合物 中，分别测定内标物和待测组分的峰面积（或峰高）及相对校正因子， 按公式即可求出被测组分在样品中的百分含量。 根据尿液的浓度加入计算好的内标工作液（十七烷酸和二十四烷）。
尿液的采集
使用滤纸片收集空腹晨尿10ml，稍晾干后置于干燥袋中，方便运输。 拿到滤纸片后，使用2ml双蒸水分次洗脱，收集洗脱液。
确定尿样浓度
新生儿在无肾病情况下尿肌酐含量相对稳定，通过测定尿液中肌酐的浓度来确 定尿样的浓度。 苦味酸法：苦味酸+肌酐（碱性）→红色物质，在一定的时间内测定该物质的 生成速率，可以计算出肌酐的含量，并避免干扰。